牦牛致病性大肠杆菌多价蜂胶灭活苗的研制

牦牛大肠杆菌病是严重影响牦牛生产的细菌性传染病,该病既是一种条件性疾病,又是其他诸多疾病的致病因素,因而是继主要的病毒性传染病得到控制以后,引起牦牛生产重大经济损失的重要传染病。抗生素对该病的防治效果良好,但其易产生耐药性,且常呈多重耐药,同时对肠道的微生态具有不良影响,因此对牦牛大肠杆菌病疫苗的研制日益受到广泛的重视。     

鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活苗的研制

本研究在经分离鉴定致病性大肠杆菌血清型之后,选择其有重要性的几个不同抗原型的代表菌株进行多价油乳剂疫苗的研究。本苗主要用于１８～２０日龄雏鸡及开产前２～４周母鸡和种鸡,可使鸡获得较好的免疫力。本苗具有安全、稳定,４℃可保存１２个月以上。     

鸡大肠杆菌中草药佐剂多价灭活苗的研究

选用免疫原性良好的鸡致病性大肠埃希氏菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）菌株，以发酵罐深层培养，其菌液可甲醛溶液灭活后，加入药佐剂制成Ｅ．Ｃｏｌｉ中草药佐剂多价灭活疫苗，通过实验室检测和现场应用证明具有良好的物理稳定性和安全性，免疫后１～３个月保护率为１００％，３～６个月为９５％～９８％。     

鸭大肠杆菌油佐剂灭活苗的研制

国外控制鸭大肠杆菌病的一项重要措施就是给易感鸭群注射地区优势致病血清型菌株或从本场分离的致病性大肠杆菌菌株制成的多价灭活苗.国内也进行了鸭大肠杆菌灭活苗的研制和使用.我们从河北定州某发病鸭场分离到大肠杆菌,经血清型鉴定为O2和O93,并研制了自家灭活菌苗,经过实验室攻毒保护试验和在发病场的临床应用表明,该疫苗对鸭大肠杆菌具有良好的预防效果.     

鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活苗的制作

以往防治鸡大肠杆菌病主要采用抗生素,由于大肠埃希氏菌抗药性的产生,药物使用剂量越来越大,造成禽产品中抗生素的残留,危害人类健康,我们从1987年至今,在内蒙古中西部地区分离到鸡源致病性大肠埃希氏菌273株.     

鸡大肠杆菌多价灭活铝佐剂菌苗的研制

选择从新疆石河子地区分离的5个优势血清型078、02、07、0111、015大肠杆菌,经培养、混合、灭活后,与氢氧化铝按一定比列混合,制成鸡大肠杆菌多价灭活疫苗。经安全性检验、稳定性检验、免疫力检验,结果表明：该苗安全有效,性能良好,接种后无不良反应,免疫雏鸡后第7天可检出抗体,第35天抗体达到较高水平,使鸡获得免疫保护,对大肠杆菌的感染率和发病率有明显下降。     

鸡大肠杆菌病中草药佐剂多价灭活苗的研制——Ⅰ、疫苗生产工艺

采用鸡大肠杆菌多发病型菌株以及地方病型菌株作为制苗用菌种，保证了疫苗既具有一定的广谱性，又具有一定的特异性；采用液体通气培养方法，在一定程度上提高了菌数；采用中草药蜂胶作为佐剂不但可有效地提高机体的免疫功能，同时兼具有治疗，保健和促生长作用，另外蜂胶还可以增大抗原表面积，延长抗原在组织的贮存时间，可持久地释放抗原，保证了机体持续产生高效价抗体。     

大肠杆菌油佐剂灭活苗免疫雏鸡抗体消长规律的研究

本试验用鸡源致病性大肠埃希氏菌Ｏ２血清型制成的油佐剂灭活苗对１５日龄雏鸡进行免疫接种，以测定其抗体消长规律；对免疫后不同抗体滴度的雏鸡进行了攻毒试验．结果表明，免疫１周后可监出抗体，２～３周抗体达到高峰，抗体可持续１０周左右．抵抗同型大肠杆菌攻霉的最低抗体滴度为１：１６～１：３．免疫保护期可达２个目以上．     

致病性鸡大肠杆菌血清型鉴定及多价灭活苗的研制

从新乡市不同鸡场采集大肠杆菌的病料88株,经过分离鉴定,确定出56株为致病性鸡大肠杆菌,血清型分别是O1,O2,O5,O35,O78,O111,其中O1,O2,O78,O111为主要的血清型。将所分离的6种血清型大肠杆菌制成多价灭活苗,接种雏鸡,使实验鸡获得了免疫保护。     

鸡大肠杆菌多价灭活苗的研制及应用

用分离的鸡大肠杆菌地方致病菌株与大肠杆菌标准菌株制备细菌悬液,细菌含量大于1.8×1010 个/mL,用 4 mL/L 浓度的甲醛溶液作用12 h,灭活后加入佐剂,制备鸡大肠杆菌多价灭活苗,免疫接种 10 日龄健康雏鸡,15 d后进行攻毒试验。结果表明,鸡大肠杆菌多价灭活苗的保护率可达98%。田间应用,鸡群产蛋期月死淘率由 1.5%~3%下降到0.5%~0.8%。     

鸡大肠杆菌多价灭活油乳疫苗的研制

选择从河北省不同地区分离的6个优势血清型O78、O2、O111、O36、O35大肠杆菌菌株，经培养、混合、灭活后，用白油、吐温、司本－80按一定比例混合，制成鸡大肠杆菌多价油乳灭活疫苗。经安全性检验、稳定性检验、免疫力检验，结果表明，该苗安全有效，性能良好，接种后无不良反应，免疫肉鸡雏鸡后第7d可检测出抗体，在第56d抗体达到最高水平(7.3log2)，使鸡获得免疫保护，对大肠杆菌的感染率、发病率有明显下降，     

鸡大肠杆菌多价灭活油乳疫苗的研制与应用

选择从山东不同地区分离的6个具有优势血清型的大肠杆菌菌株，经培养、混合、灭活后，用白油、吐温、司本，按一定比例混合，制备鸡大肠杆菌多价灭活油乳疫苗，安全性检验、效力检验、稳定性试验结果表明，该疫苗安全有效，接种后无不良反应，保护率达95%以上，4-8℃保存1年，20-25℃保存半年不失效。田间免疫试验和扩大区域试验结果表明，该疫苗性能良好、安全，对蛋鸡、肉鸡、雏鸡的生产性能无明显不良影响，经免疫后，因大肠杆菌的死亡率由对照组的7.5%、9.8%、4.6%降至2.1%、2.8%、1.8%。     

鹅大肠杆菌油佐剂灭活疫苗的研制

从湛江地区疑似大肠杆菌病的病死鹅组织中分离鉴定2株致病性大肠杆菌O₈₆K₆₁和O₄₄K₇₄,以此制备油佐剂灭活疫苗。用上述疫苗接种20日龄雏鹅,35日龄加强免疫一次,分别于27、35、42、50日龄检测免疫鹅血清抗体水平,并进行攻毒保护试验。结果表明,制备的大肠杆菌油佐剂灭活疫苗安全可靠,免疫后15、30 d后,免疫鹅血清抗体水平分别达到1∶32和1∶128;且免疫鹅能抵抗10¹⁰/mL的致病性大肠杆菌攻击,对照组鹅全部发病,有明显临床症状,从发病鹅组织中分离到致病性大肠杆菌。     

鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗的研究

为了更有效地控制鸭疫里氏杆菌病的流行,选择鸭疫里氏杆菌3个不同血清型流行菌株GXRA01、GXRA07和RAGX09制备油乳剂三价灭活疫苗。对疫苗进行免疫接种剂量试验、安全性检验、免疫效力检测以及保存期试验。结果表明,疫苗安全有效,每只雏鸭颈部皮下注射0.5 mL,能抵抗鸭疫里氏杆菌的攻击,免疫保护期为50 d,4℃~8℃疫苗保存期为6个月。研制的鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性。     

西藏地区牦牛致病性大肠杆菌的分离鉴定

从西藏地区牦牛自然病例中分离出5株大肠杆菌，通过形态观察、生化试验、血清学鉴定及动物致病性试验，表明5株分离菌是培养特性和生化特性基本一致、具有很强致病力、血清型不同的致病性大肠杆菌。     

肉鸡大肠杆菌多价灭活蜂胶苗的研制

从分离鉴定的49株大肠杆菌中筛选出5株致病力强、免疫原性好、具有优势血清型的大肠杆菌作为制苗菌株，经培养灭活后，以蜂胶为佐剂，研制出的肉鸡大肠杆菌多价灭活蜂胶疫苗，使用安全，免疫效果好。用该苗免疫后150d的保护率为100％，无不良反应。该苗4C下保存1年不失效。田间试验结果表明，该苗性能好，免疫后对肉仔鸡、肉种鸡的生产性能无不良影响，鸡群大肠杆菌病的死亡率明显下降。     

禽流感油乳佐剂疫苗质量快速检测方法的建立

通过对低温冻融法、研磨法、稀释高速捣碎法、95%乙醇法及三氯甲烷法破乳效果比较,确定三氯甲烷为油乳剂疫苗的破乳剂.将不同抗原含量的H9和H5亚型灭活与非灭活疫苗破乳后分离上层水相,采用红细胞凝集(HA)试验,测定其HA价,结果发现脱乳后上层水相与未做成油乳疫苗并做相应稀释的原液的HA价下降1～3个滴度,且将不同稀释度制备H5亚型疫苗经脱乳处理后上层水相的HA价与荧光定量PCR结果基本一致.所建立的禽流感油乳剂疫苗质量的检测方法具有快速、经济、简便,尤其适合于对大批量及基层应用.     

牦牛ETEC灭活疫苗的研制及免疫效力试验

制备了耗牛ETEC铝胶灭活苗、油佐剂苗和蜂胶灭活苗。分别使用3种佐剂灭活苗进行对比试验。经抗体监测表明在免疫后7天，蜂胶苗产生的抗体效价最高（2^7），随着时间的推移，油苗抗体儿价最高（2^9-10)，于免疫后29日，使用ETEC进行攻毒，免疫兔全部保护，对照兔全部死亡。证明牦牛ETEC3种佐剂灭活疫苗均能有效保护家兔免受ETEC攻击。     

鸡传染性鼻炎灭活油乳剂苗的研制

采用抗原性较好的Ａ型和Ｃ型菌株,以矿物油为佐剂制备成Ａ、Ｃ型二价油乳剂灭活菌苗,肌内接种健康鸡,玻片凝集试验表明,免疫后第七天产生凝集抗体,效价达到１：４以上,第十六天效价可达１;８,第二十四天效价高达１：１６,攻毒试验的结果表明,抗体效价达到１：１６时可以抵抗强毒的攻击,田间试验的结果表明,该苗的免疫原性好,安全。     

兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗的研究

从分离鉴定的15株致病性大肠杆菌中，筛选出2株流行广泛，致病力强，免疫原性好，具有血清型（0103、085）代表性的大肠杆菌作为制苗菌株，以蜂胶为佐剂，研制出的兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗，使用安全，免疫效果好，保护率达87％以下。该苗在4℃保存其为8个月以上。在黑龙江、辽宁两省免疫2万只家兔，1～2年的观察表明，用苗后兔群未出现不良反应，且用苗后仔兔成活率由50％左右提高到85％以上，疫苗使用不影响敏殖母兔的妊娠过程。