蜜蜂残翅病及其防制技术研究进展

蜜蜂残翅病病毒（DWV）是感染蜜蜂最常见、传播最广泛的病毒之一,通常以隐性感染的形式存在。在蜜蜂的各个发育阶段都能检测到DWV,严重时会导致感染蜜蜂表现出典型的发病症状并且使蜜蜂寿命缩短。DWV在其传播媒介狄斯瓦螨Varroa destructor的作用下传播范围更为广泛,在32个国家的蜂群中DWV的平均感染率至少为55%。DWV的大肆流行是导致蜂群损失的重要原因,给养蜂业造成了巨大损失,严重影响了我国养蜂业的健康发展。本文将从DWV的流行与分布、发病特征及危害、传播途径、遗传多样性以及其防制措施等方面对蜜蜂残翅病病毒近年来的研究进展进行综述。为我国进一步开展蜜蜂病毒学研究提供参考,为开发防治技术方法提供新思路。     

蜜蜂残翼病研究进展

蜜蜂残翼病病毒(DWV)是引起蜜蜂残翼病的病原体,可侵染各发育阶段的蜜蜂,在蛹期危害不明显,但羽化后出现翅膀残缺并迅速死亡;成年蜜蜂发病后翅膀畸形、腹部萎缩和褪色。呈隐性感染的蜜蜂虽然无明显临床症状,但其寿命也会缩短。由于DWV与传播媒介瓦螨密切相关而被大量研究。近年来的研究表明,DWV是引发"蜂群崩溃失调症"(CCD)的主要病毒之一,DWV在全球范围的流行已成为蜜蜂蜂群非正常消失的一个重要原因。论文结合近年来对残翼病的最新研究成果,综述了蜜蜂残翼病的病原学、流行病学、临床症状及检测与防控方面的最新研究进展。     

秋末蜜蜂病毒病混合感染诊断实例

山东莒县部分乡镇蜂群短期内死亡严重,通过对典型发病蜂场临床症状调查和实验室病毒检测,确诊发病蜂场病因主要为蜜蜂以色列急性麻痹病毒、克什米尔病毒、残翅病毒混合感染,究其原因为秋季治螨不彻底、蜂群饲喂不足、饲养管理不善所造成,建议蜂农更新养殖理念,饲养强群,彻底治螨,搞好蜂场环境卫生,在蜜源匮乏季节要及时饲喂,避免盗蜂发生...     

贵州省中华蜜蜂病毒病感染状况调查

为了检测贵州中华蜜蜂病毒病的潜伏情况,为蜂群防治提供依据。根据已建立的高效灵敏的病毒特异性RT-PCR检测方法,对贵州省中华蜜蜂进行了6种病毒病——蜜蜂畸翅病毒(Deformed wing virus,DWV)、蜜蜂黑王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)、蜜蜂囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)、蜜蜂克什米尔病毒(Kashmir bee virus,KBV)、蜜蜂急性麻痹病毒(Acute bee paralysis virus,ABPV)和蜜蜂慢性麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)感染状况调查。调查结果,贵州省的中华蜜蜂中潜伏着BQCV、SBV和DWV,其中以正安县感染的病毒病最少、盘县次之、锦屏最高,蜂病有不同程度的混合感染;各种蜂病以BQCV(20%)感染率最高、DWV(8.9%)次之、SBV(6.7%)最低。     

蜜蜂畸翅病毒SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立蜜蜂畸翅病毒SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,通过构建蜜蜂畸翅病毒(DWV)RDRP基因部分序列的标准质粒作为模板,进行了标准曲线的建立,并对所建立方法进行了特异性和灵敏度测试。结果表明:所建立的荧光定量RT-PCR扩增效率E=100%,R2=0.999,最低检出量为100个拷贝;该方法仅能检出DWV病毒,而不能检测出蜜蜂黑王台病毒、囊状幼虫病毒,具有很好的特异性。表明已成功建立了特异灵敏的DWV实时荧光定量RT-PCR检测方法。采用所建方法对昆明部分蜂场进行了DWV感染状况调查,结果表明昆明地区东方蜜蜂带毒率为54%,提示DWV病毒在昆明地区东方蜜蜂中存在流行。     

我国东、西方蜜蜂中七种病毒感染状况的调查

旨在了解我国东方蜜蜂及西方蜜蜂中病毒病的流行现状及其发生差异,并分析不同地区、不同饲养环境对蜜蜂感染病毒的影响。2012—2013年从8省市采集东方蜜蜂50群和西方蜜蜂108群,利用RT-PCR技术检测残翅病毒(DWV)、黑色王台病毒(BQCV)、囊状幼虫病毒(SBV)、克什米尔蜜蜂病毒(KBV)、慢性麻痹病病毒(CBPV)、急性麻痹病病毒(ABPV)以及以色列急性麻痹病病毒(IAPV)等7种病毒在蜂群中的感染情况。结果表明,东、西方蜜蜂均被KBV之外的6种病毒感染,其中BQCV最为流行,其次为DWV。SBV对西方蜜蜂的感染率显著高于东方蜜蜂(P0.01),CBPV、ABPV以及IAPV对两蜂种的感染率均较低,无明显差异。在东方蜜蜂的4个取样省份中,IAPV只在辽宁和海南发现,CBPV只在福建和辽宁发现,而ABPV只在广东检测到。在西方蜜蜂的7个取样省市中,DWV、BQCV及SBV均有分布,但SBV在福建的感染率明显低于其他地点(P0.01),在新疆、北京和辽宁检测到5种病毒,在山西、山东、海南和福建则检出4种病毒。3种类型的蜜蜂饲养区中,在西方蜜蜂饲养区检测到6种病毒,东、西方蜜蜂混养区检测到5种病毒,而在东方蜜蜂饲养区只检出3种病毒。两种蜜蜂同时感染多种病毒较为普遍,多数样品被DWV、BQCV两种病毒或DWV、BQCV及SBV三种病毒共同感染。以上结果表明,中国东、西方蜜蜂中流行的病毒以BQCV与DWV为主,感染的6种病毒在不同采样地及不同类型饲养区的分布及感染水平不同,但普遍存在多种病毒的混合感染现象。     

蜜蜂卷翅病的防治措施

蜜蜂卷翅病 ,是一种生理性病害 ,多发生在芝麻花期。卷翅病对蜂群的损失很大 ,既消耗饲料 ,又育不成蜂 ,也采不到芝麻蜜。严重时 ,还会给越冬蜂的培育带来困难 ,影响来年的收入。蜜蜂卷翅病的发生很普遍。为了使更多的蜂友更好地预防蜜蜂卷翅病的发生 ,我谈谈以下几点防治措施。蜜蜂卷翅病通常发生在夏季 ,发病地区在此时大多是没有任何蜜粉源。蜂群群势下降 ,子脾减少或停产。因为天热 ,大都采用脾多蜂少的管理方法。７月份 ,有了新的蜜粉源———芝麻花。芝麻花蜜粉俱佳 ,蜂群经过１个多月的停产后 ,工蜂特别兴奋 ,蜂王产卵上升 ,２０多天…     

蜜蜂残翼病RT-PCR快速检测方法的建立

为了建立蜜蜂残翼病病毒(Deformed wing virus,DWV)RT-PCR快速检测方法,试验采用GenBank公布的蜜蜂残翼病病毒全基因序列设计1对特异性引物,对所提取的RNA进行反转录合成cDNA后,进行聚合酶链式反应,并对这种快速检测方法的特异性和敏感性进行研究。结果表明:在约702 bp处出现目的条带,其他病原无目的条带出现,灵敏性可达1×104的模板稀释度。     

蜜蜂残翼病病毒PCR检测及5′-UTR基因序列分析

从吉林省某蜂场疑似蜜蜂残翼病病料中分离到一株蜜蜂残翼病病毒(DWV),命名为DWVJL1,提取该分离株的总RNA,采用RT-PCR技术扩增其基因组的5′-UTR并测序。测序结果与GenBank公布道的DWV 5′-UTR序列同源性在95%~99%之间。将测序结果与GenBank上公布的9个相关序列进行系统遗传进化树分析,证实其与JX878304同源性最近,而与GU109335、KJ437447同源性最远。     

蜜蜂残翼病毒RT-PCR检测及衣壳蛋白VP1基因的序列分析

为了研究蜜蜂残翼病毒(DWV)的遗传变异特点,试验从吉林某地蜂场疑似蜜蜂残翼病的病蜂中初步分离得到1株DWV毒株,采用RT-PCR技术扩增VP1基因并对其进行检验分析。结果表明:基因测序结果与Gen Bank中的DWV毒株衣壳蛋白VP1基因序列同源性为99%左右;将此分离毒株DWV的VP1基因核苷酸序列与Gen Bank中的10个序列进行系统遗传进化树分析,证实其与AB070959.1、NC_005876.1的同源性最近,而与HM067437.1、KJ437447.1的同源性最低。     

不同保存方法对RT-PCR检测蜜蜂病毒的影响

本研究从已知感染蜜蜂黑王台病毒(Blackqueen cell virus;BQCV)和蜜蜂畸翅病毒(Deformed WingVirus,DWV)的东方蜜蜂蜂群中采集工蜂个体,将其纵向剖成3份,一份存于-79℃,一份加入1.2 mL无水乙醇保存,第三份加入1.2 mL TRIzol保存。对3组样本每隔3 d同时进行RNA提取,并使用RT-PCR方法检测蜜蜂黑王台病毒和蜜蜂畸翅病毒。结果表明在TRIzol中保存的样品和-79℃冰冻保存的样本所提取RNA相对完整,病毒检测结果一致;在无水乙醇中保存的样品RNA质量相对较差,病毒检测阳性率低于前两者。该研究为蜜蜂病毒检测的采样保存方法提供一定的理论依据。     

加拿大有关蜜蜂残翅病毒的研究情况

<正>残翅病毒(Deformed wing virus,DWV))最早是从感染狄氏瓦螨(Varroa destructor,通称"大蜂螨")的西方蜜蜂体内分离到;现已在亚洲、欧洲和非洲发现,最近又在美国和加拿大西部(包括新斯科舍、纽宾士域、爱德华王子岛和纽芬兰与拉布拉多)检     

蜜蜂病害诊断歌

蜜蜂诊断与检疫,细察症状最重要,蜂病症状五类型,各型表现不相同。一是呆滞或激动,两种行为须认清,如若呆滞或麻痹,对外反应不感敏,无神不蜇行动缓,传染病患最常见;相反病蜂很激动,蜇人狂燥夜不回,蜂群燥动特明显,多是中毒非传染。二是形状有改变,不同病患有所异。蜜蜂患上壁虱病,两翅错位呈Ｋ形。甘露中毒腹部膨,防制方法找原因。农药中毒吻伸出,两翅展开不相同。蜂螨残蛹和死蛹,成蜂也是残翅蜂。三是颜色有异样,色别深浅定有因。美洲幼虫腐臭病,颜色变成咖啡色。白垩幼虫发病后,白灰变成黄白黑。感染蜂体暗不黑,可能…     

四川省东方蜜蜂病毒病感染状况调查

为了解四川省东方蜜蜂主要病毒病:蜜蜂黑王台病毒(BQCV)、畸翅病毒(DWV)、囊状幼虫病毒(SBV)、克什米尔蜜蜂病毒(KBV)、急性蜜蜂麻痹病毒(ABPV)和慢性蜜蜂麻痹病毒(CBPV)的感染状况。采用RT-PCR方法对来自四川省9个地区共270份东方蜜蜂样品进行快速病原学检测。调查结果显示:四川省东方蜜蜂群中有5种病毒的感染;其中,BQCV总阳性率为17.8%,KBV总阳性率为3.0%,SBV总阳性率为1.1%,ABPV总阳性率为1.9%,CBPV总阳性率为2.2%。在被调查的9个地区中,有7个地区蜂群存在至少1种以上病毒病感染的现状,表明四川省东方蜜蜂群疾病感染状况较为严重,其对养蜂业可持续发展的潜在危险需要给予充分关注。     

患白垩病蜂群的温湿度研究

以蜜蜂白垩病致病菌蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)感染西方蜜蜂(Apis mellifera).通过记录染病蜂群的温湿度和发病幼虫数,研究了养蜂生产中,温湿度变化对感染该病的西方蜜蜂蜂群(中等群势)的影响.结果显示:当蜂群内的温度降低到某个阈值范围时,不论是试验组还是对照组都会出现不同程度地增加发病幼虫数.     

浅谈蜜蜂生理性卷翅病的成因与预防

江汉平原芝麻、棉花花期,由于气温高、天气炎热,如不采取相应的技术措施,就会发生蜜蜂生理性卷翅病,使蜂群群势严重削弱,产量减少30 %～50 %。在芝麻、棉花花期以前采取有效措施,从基础蜂群抓起,提前1代培育强群,保证饲料充足,选好靠近水源的场地,给蜂群遮荫,防暑降温 ,通风,创造适宜蜂群生活的小气候;适时适当限量产卵,减轻哺育负担,适当加大蜂路,增加子脾护脾蜂,有利于蜂群振翅扇风调节温湿度。进入7～8月高温低湿的芝麻、棉花花期,不仅产量高,而且能有效地调节幼虫发育所需的营养物质和温湿度,蜜蜂能正常地哺育后代,使器官发育健壮齐全,防止蜜蜂生理性卷翅病发生     

七种蜜蜂病毒病的流行病学调查

对东、西方蜜蜂实验蜂群以及蜂场周围的部分有花植物进行七种蜜蜂病毒病的流行病学调查。该研究采用特异性引物对，对七种蜜蜂病毒病的流行病学情况进行RT-PCR检测，发现该研究中东、西方蜜蜂样品中均发现BQCV、DWV和SBV三种病毒，除此以外，西方蜜蜂样品中还发现了IAPV。几种病毒中的DWV检出率都最高，其次是BQCV。另一方面，蜂场附近的部分有花植物中仅存在DWV和BQCV两种病毒；其中，DWV的检出率最高；相比较而言，植物的花组织最容易检出DWV，茎组织最难检出DWV。从结果来看，实验蜂场内的DWV感染率相对较高，因此，提高对DWV的认识，加强监测和防控迫在眉睫。该研究在有花植物的花、茎和叶组织检出DWV，也为蜜蜂病毒病的蜜源植物至蜜蜂寄主传播途径研究提供了基础数据。     

蜜蜂卷翅病之谜

我地处江汉平原、长江中下游。蜂群一般是七月强,八月弱。每年八月份,蜂群都会不同程度地发生卷翅病。产卵率越高的蜂群,卷翅病越是严重。经卷翅病危害的蜂群,工蜂数量下降,幼蜂卷翅,严重的全群覆灭。该病害严重地威胁着我地蜂群的发展。本人通过多年的实践观察发现,发生此     

浙江金华地区越冬意蜂群大量死亡原因调查与分析

2014年冬,浙江多地意蜂群出现大量死亡。为了探究这一突发事件的原因,我们实地察看了现场、发放了调查问卷,并取样进行了病毒和微孢子虫的检测分析。结果表明,本次突发事件的主要原因可以排除急性农药中毒和急性污染物中毒的可能性。在病毒感染率上,患病蜂群DWV的感染率显著高于健康蜂群,但健康蜂群BQCV的感染率却显著高于患病蜂群。在病毒多重感染水平和病毒滴度上,患病蜂群显著高于健康蜂群;同时,患病蜂群N.ceranae的感染率和感染水平都要显著高于健康蜂群。本研究提示多重病毒感染、DWV和IAPV的高病毒滴度及N.ceranae的感染和这次蜜蜂死亡事件密切相关。鉴于狄斯瓦螨在促进病毒病方面的作用,蜂螨也有可能是蜂群死亡的间接原因之一。此外,本研究同时表明,几乎所有的表面健康蜂群同时感染多种病原,健康情况堪忧。为避免类似死亡事件的发生,一方面需力求降低病原体的感染水平,另一方面可以调整饲养管理方式促进蜜蜂的健康水平,同时减少外界不良因素的刺激。     

蜜蜂微孢子虫对蜜蜂越冬的影响

蜜蜂微孢子虫病(microsporidian disease)病原为蜜蜂微孢子虫(Nosema p.),是一种分布广泛的成年蜂病,为重要的检疫性病害。对感染蜜蜂微孢子虫病的越冬蜂进行研究发现,蜜蜂微孢子虫感染率与蜜蜂越冬安全关系密切,各组合实验蜂群蜜蜂越冬死亡率均为差异极显著(U检验,P0.01),即感染蜜蜂微孢子虫的蜂群,蜜蜂死亡率和饲料消耗量都明显高于对照组,且不同程度发生下痢症状。为蜜蜂微孢子虫的侵染机制研究提供理论数据,为进一步筛选功能基因奠定基础,从而推动我国特色蜜蜂产业健康快速发展。