木霉菌对杨树树皮溃疡病菌拮抗作用的研究

应用哈茨木霉（Trichodema harziaunm)T88菌株和深绿木霉（T.atroviride)T95菌株分别与杨树烂皮病菌（Cytospora chrysosperma)和杨树水泡溃疡病菌（Dothiorella gregaria)进行了平皿对峙培养和载片对峙培养；并研究了两种木霉菌产生的挥发性代谢物对病原菌菌落的影响和其非挥发性代谢物对菌丝干重的影响；分别在光学显微镜和扫描电镜下观察了两种木霉菌的重寄生现象。结果表明：对峙培养中木霉菌T88和T95对两种病原菌均有明显的抑制作用。两种木霉菌均能产生挥发性代谢物质并不同程度地抑制病菌菌落的生长，在密闭条件下T95的抑制率最高达到80．30％。两种木霉菌产生的非挥发性代谢物质可以强烈抑制病原菌的生长、明显降低其菌丝干重，并具有热稳定性。在光学显微镜和扫描电镜下，可以观察到木霉菌的菌丝在病原菌的菌丝上平行或波浪式生长，并在其上产生钩状分枝、吸器或附着胞吸附于病原菌的菌丝上，或穿透病原菌的菌丝生长，或使病原菌的菌丝细胞生质浓缩和菌丝断裂。     

杨树腐烂病的研究有性世代在侵染中的作用（初报）

北京地区杨树腐烂病的病原菌为Leucostoma属，有性世代在侵染中有一定作用，子囊孢子从春天开始至7月均有生活能力，并能引起枝条发病。     

杨干象与杨树腐烂病发生关系的调查

在承德县调查表明，北京杨林分中杨树腐烂病的发生与杨干象的危害有直接关系。林分中有２９．１％的林木被杨干象危害。被杨干象危害的林木中有５１％的林木发生腐烂病，这部分林木占林分总株数的１４．９％。被腐烂病危害后死亡树木占６．７％。因而要想控制杨树腐烂病的发生，首先应防治杨干象。     

苹果腐烂病菌拮抗放线菌的分离与鉴定

采用常规方法对广东省中山市采集的土样进行分离,得到放线菌293株。以苹果腐烂病菌为指示菌,通过平板对峙法和管碟法对分离菌株进行筛选。对峙法获得有拮抗效果的放线菌61株,抑菌率在50%以上的有13株,其中Z-6的抑菌率达87.2%;进一步应用管碟法对上述作用明显的菌株进行复筛,抑菌圈直径大于20 mm的菌株6株,其中Z-6菌株产生抑菌圈直径最大,为32.87 mm。抑菌谱测定结果表明,该菌株对小麦全蚀病菌、番茄灰霉病菌和稻瘟病菌抑菌效果最强,抑制率在70%以上。离体枝条测定试验中,该菌株同样表现了一定的防治效果,抑制率达32.9%。最后,本试验还对Z-6的形态特征、培养特征及生理生化特性作了研究,初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces)的金色类群(Aureus)。     

杨树苗期腐烂病的防治

杨树腐烂病,危害各种杨树,以及旱柳、榆等,表现为干腐和枯梢。一、症状干腐型主要发生在主干、大枝及树干分叉处。初期为暗褐色水肿状斑,皮层腐烂变软,后失水干缩下陷,有时龟裂。当病斑绕树干一周时,病斑以上部分死亡。皮层腐烂后,纤维分离易剥离,木质部边材亦变色。病斑上生出     

几种杀菌剂对杨树腐烂病的治疗效果试验

为了筛选治疗杨树腐烂病的杀菌剂,对农业生产上使用的几种杀菌剂新品种进行了田间药效试验。通过试验发现氟硅唑、丙环唑和苯醚甲环唑3种药剂对杨树腐烂病的治疗效果明显,在治疗方法中刮治法优于割治法。     

杨树腐烂病拮抗细菌的筛选及其定殖研究

通过平板对峙培养,从1 013株分离于杨树干部的拮抗细菌中筛选出13株对杨树腐烂病病原菌(Valsa sordida)有较强拮抗作用的菌株;再结合发酵液的生长抑菌率测定,进一步筛选出了抑菌作用最强的JK-SH007和JK-SX001两株拮抗细菌.两拮抗菌株定殖的研究结果表明,JK-SH007、JK-SX001对杨树腐烂病病原菌的生长及孢子萌发具有较好的抑制作用,而对宿主无毒害作用,具有内生性,能在杨树体内较长期定殖,且对宿主具有显著的促生作用.     

杨树壳梭孢溃疡病菌的室内毒力测定

在室内培养条件下,采用生长速率法测定了6种常用杀菌剂对杨树壳梭孢溃疡病菌Fusicco-cum fesculi的抑制效果,结果表明:80%代森锰锌WP和50%异菌脲WP对F.fesculi抑制效果最好,EC50值分别是38.175,41.947 mg/L;70%甲基硫菌灵WP2,5%三唑酮WP和75%百菌清WP抑菌效果次之,EC50值分别是137.43,149.90,205.98 mg/L;60%多菌灵WP抑菌效果最差,EC50值是419.91 mg/L。     

溃疡病菌在杨树树皮组织中的扩展和对寄主细胞超微结构的影响

病理解剖和超微结构研究发现,溃疡病菌是在胞间隙和被分解了的细胞壁中穿行的;其对寄主组织最直接的危害是分解并利用细胞壁,破坏寄主组织细胞结构;抗病的毛白杨在被病菌侵害后,细胞内形成高电子密度的羽形结晶状沉积物,细胞壁膨胀而不疏散,而感病的北京杨和中抗的陕林４号杨在被病菌侵害后,细胞内并不形成类似毛白杨的沉积物,它们的细胞壁因侵染而变得膨胀且松散,毛白杨与北京杨、陕林４号杨在细胞壁结构上的不同,可能是毛白杨产生抗病性的原因之一。     

杨树腐烂病的发生特点及防治

杨树腐烂病Valsa sordida又称烂皮病、臭皮病、出疹子,危害杨树干枝,引起皮层腐烂,导致枝枯树死,在暴风雨的作用下常倒伏在人行道或交通途中,严重影响行人的安全及车辆运行。为了控制杨树腐烂病的危害     

7种杀菌剂对杨树烂皮病、溃疡病病菌的室内毒力测定

室内测定了7种杀菌剂对杨树烂皮病病原菌金黄壳囊孢菌Cytospora chrysosperma (Pers.)Fr.、溃疡病病原菌Dothiorella gregaria Sacc.的毒力.72 h含药平板对抑制金黄壳囊孢菌的菌丝生长毒力最强的有10％苯醚甲环唑水分散剂、250 g/L嘧菌酯悬浮剂,EC50值依次为0.0006,0.020 2μg/mL;其次为70％甲基托布津可湿性粉剂,EC50为0.195 8μg/mL;最弱的是树乐粉剂,EC50为319.658 0μg/mL.48 h对杨树溃疡病病原菌的毒力最强的有250 g/L嘧菌酯悬浮剂、10％苯醚甲环唑水分散剂,EC50依次为0.072 2,0.090 4μg/mL;其次为70％甲基托布津和50％多菌灵可湿性粉剂,EC50依次为2.5603,19.0454 μg/mL;树乐最弱,EC50为366.415 7μg/mL.同一药剂对杨树烂皮病菌的毒力强于溃疡病菌.     

一株荧光假单胞菌的溶磷特性及其对杨树的促生效果

从杨树根际筛选出一株荧光假单胞菌JW-JS1菌株,通过液体发酵试验研究其溶磷特性,并利用温室盆栽试验探究其对杨树苗木的促生效果.结果表明:该菌株分别以葡萄糖为碳源,硫酸铵为氮源和碳氮比为100∶1时溶磷能力最强,溶磷量分别达到580.72,708.34和608.97 mg·L-1;该菌株分别在温度为30℃,初始pH 7.0,装液量为1/5和NaCl质量浓度为0时溶磷能力最强,溶磷量分别为562.89,594.58,638.62 mg·L-1和527.82 mg·L-1.接种该菌株可显著促进NL-895杨和美洲黑杨苗期的生长和营养元素含量的提高,其中,NL-895杨和美洲黑杨的苗高、地径、鲜质量和干质量分别比CK增长21.96％,5.04％,57.33％,54.36％和51.66％,1.98％,150.18％,168.49％,植株体内P,K,Ca和Mg含量分别比CK增长25.16％,19.75％,17.12％,10.10％和27.55％,125.53％,55.47％,102.94％.     

杨树内生菌球毛壳抗生物质的培养基优化、检测和动力学

以杨树内生真菌球毛壳ND35为供试菌株,采用L<,16>(4<'5>)正交试验法对液体培养基进行优化;利用pH纸色谱、捷克八溶剂系统纸色谱方法及紫外-可见光谱扫描法对该内生菌的抗生物质进行理化性质初步分析;用薄层层析、高效液相色谱及平板抑菌法检测分析该菌粗提液的活性成分及对杨树腐烂病菌的抑菌效果;对抗生物质液体培养的主要动力学指标进行分析.结果表明:优化后培养基配方为:1%葡萄糖,1%蔗糖,0.5%牛肉膏,0.02%硫酸亚铁,0.01%维生素B<,1>,pH值为7.球毛壳ND35菌株的抑菌作用分为活菌体的抑菌作用和代谢活性物质的抑菌作用,液体培养后的菌丝胞内和胞外均产生抗生物质,并具有较好的热稳定性.该抗生物质pH值为7,易溶于有机溶剂,难溶于水.球毛壳ND35抗生物质在221 nm处有最大的吸收峰,该抗生物质有4个组分,均对杨树腐烂病菌有抑菌活性.生长动力学表明,在液体发酵培养过程中,球毛壳ND35抗生物质的产量、吸光值、pH及其抑菌率是连续变化的.     

荧光假单胞菌的溶磷机制及其在杨树菌根际的定殖动态

【目的】探究荧光假单胞菌菌株JW-JS1的溶磷能力及其在杨树根际和菌根际的定殖动态,揭示菌株的溶磷机制并进一步阐明溶磷细菌与外生菌根真菌的互作机制,为杨树专用复合菌剂的开发与应用提供理论依据。【方法】通过液体培养试验分析荧光假单胞菌菌株JW-JS1培养液可溶性磷含量、p H和可滴定酸含量的变化,采用高效液相色谱(HPLC)法测定有机酸种类和含量,利用抗利福平标记法筛选稳定的标记菌株,运用灌根法研究其在杨树根际和菌根际的定殖动态。【结果】1) JW-JS1菌株培养液可溶性磷含量随接种时间延长逐渐增加,培养液pH与可溶性磷含量呈极显著负相关(r=-0.889~(**)),可滴定酸含量与可溶性磷含量呈极显著正相关(r=0.958~(**));2) JW-JS1菌株分泌的总有机酸量(434.39 mg·L~(-1))明显高于CK (25.94 mg·L~(-1))(P0.05),共检测出草酸、酒石酸、柠檬酸、顺丁烯二酸和反丁烯二酸5种有机酸,其中,草酸含量(273.69 mg·L~(-1))明显高于其他种类有机酸,约占总有机酸量的63.01%;3)筛选出含有300μg·mL~(-1)利福平抗性的标记菌株JW-JS1~(Rif),与原始菌株相比,其菌落形态和溶磷能力均未发生明显变化(P0.05);4)标记菌株在杨树根际和菌根际均能长期稳定存活并保持一定的定殖数量,随接种时间延长定殖数量呈下降趋势,定殖动态基本一致,其中,接种50天后定殖数量分别为5.2×10~4和4.5×10~4cfu·g~(-1)。【结论】荧光假单胞菌菌株JW-JS1的溶磷能力与培养液pH、可滴定酸含量和有机酸密切相关,特别是菌株分泌的草酸可能在溶磷过程中发挥重要作用。荧光假单胞菌菌株JW-JS1在杨树根际和菌根际均能长期稳定存活并保持一定的定殖数量。荧光假单胞菌菌株JW-JS1与红绒盖牛肝菌Xc是构建杨树专用功能复合微生物肥料的理想材料。