机械损伤和昆虫取食诱导杨树叶片内过氧化氨的代谢与相关酶活性的变化

为了说明H2O2是否可以作为第二信使参与系统防御反应,对经机械损伤和昆虫取食的合作杨（Populus simonii xp．pyra．midalis‘Opera8277’）叶片中过氧化氢代谢及相关酶活性进行研究,发现机械损伤和昆虫取食处理可以引起损伤叶片及同株未损伤叶片中过氧化氢（H2O2）含量的积累,相应的抗氧化酶（SOD、CAT、APX）活性提高。但经DPI（NADPH氧化酶抑制剂）预处理的机械损伤叶片中H2O2含量降低,并导致SOD、CAT、APX括性下降。上述结果表明,昆虫取食和机械损伤可以诱导叶片中H2O2的系统进发,且其代谢受到SOD、APX和CAT活性变化的共同影响。通过提高抗氧化酶活性可以减轻膜脂过氧化程度,有效的诱导防御反应的产生。图1表3参16。     

4-己基间苯二酚和曲酸对舞毒蛾酚氧化酶的抑制作用

以舞毒蛾为材料,分离提取酚氧化酶,研究4-己基间苯二酚(4HR)和曲酸对舞毒蛾酚氧化酶活力的影响.结果表明:4HR对该虫的单酚酶和二酚酶活性均表现很强的抑制作用,其IC_(50)分别为0.000 41和0.000 35mmol·L~(-1).其中,4HR对单酚酶活力表达的迟滞时间有明显的延长效应,浓度为0.000 2 mmol·L~(-1)时可使单酚酶活力表达迟滞时间从181 s延长到253 s;而当浓度为0.000 5 mmol·L~(-1)时,其迟滞时间则延长至372 s.以邻苯二酚为底物时,4HR对二酚酶的抑制作用表现为典型的竞争型抑制类型,抑制常数K_1为0.000 15 mmol·L~(-1).曲酸对舞毒蛾的单酚酶和二酚酶活性均表现较强的抑制作用,其IC_(50)分别为0.06和0.92 mmol·L~(-1).曲酸对单酚酶活力表达的迟滞时间也有明显的延长效应,浓度为0.1 mmol·L~(-1)时可使单酚酶活力表达迟滞时间从306 s延长到732 s;而当浓度为0.15 mmol·L~(-1)时,其迟滞时间则延长至900 s.以邻苯二酚为底物时,曲酸对二酚酶的抑制作用表现为典型的竞争型抑制类型,抑制常数K_i为0.51 mmol·L~(-1).     

多穗柯4-香豆酸辅酶A连接酶基因的克隆和表达分析

为了克隆多穗柯4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate-CoAligase,4CL)基因,了解其表达情况,从而为深入研究4CL基因分子功能及黄酮类化合物生物合成奠定基础,依据多穗柯转录组测序结果,设计特异性引物,PCR扩增得到4CL基因cDNA全长序列,利用相关软件进行生物信息学分析;采用qRT-PCR法检测4CL基因在不同器官中的表达情况,使用SPSS18.0软件分析其表达量与根皮苷含量间的关系。结果表明:多穗柯4CL基因cDNA全长1704bp,包含长1629bp的开放阅读框,编码含542个氨基酸的蛋白质。该蛋白定位于细胞质中,属亲水性蛋白。多穗柯4CL基因在除根以外的各个器官中均有表达,且表达量与根皮苷含量间呈极显著的正相关关系(P<0.01)。