沙咪珠利对中国仓鼠肺细胞染色体的影响

通过沙咪珠利对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体的影响试验,了解沙咪珠利的致畸变作用。MTT法测定沙咪珠利对CHL细胞的半数抑制浓度(IC_(50)),根据IC_(50)设置不同剂量组,进行染色体畸变试验,分别观察沙咪珠利在不加S_9混合物染毒6 h、24 h及加S_9混合物染毒6 h染色体畸变情况。结果:不加S_9混合物染毒6 h、24 h及加S_9混合物染毒6 h染色体畸变试验结果为阴性。研究表明,在本试验条件下,沙咪珠利不诱发中国仓鼠肺细胞染色体结构畸变。     

复方硝基酚钠诱发小鼠骨髓细胞和睾丸精原细胞染色体畸变的观察

研究了鱼虾促生长药物添加剂复方硝基酚钠对体细胞和雄性生殖细胞的致突变性。骨髓细胞染色体畸变分析以每公斤体重用２５０、８３．３、２５ｍｇ的复方硝基酚钠分别给小鼠经口染毒，每日１次，连续５ｄ，同时设空白对照组和阳性对照组。睾丸精原细胞染色体畸变分析以每公斤体重用２５０、１２５、６２．５ｍｇ的复方硝基酚钠给雄性小鼠经口染毒，每日１次，连续５ｄ，同时设空白对照组和阳性对照组。上述两种致突变试验结果均为阴性。因此认为复方硝基酚钠对哺乳动物体细胞和雄性生殖细胞均未显示致突变作用     

中药诱导肿瘤细胞凋亡机制研究进展

中药及其生物活性成分具有毒副作用小、无残留、药理作用独特等特点,在抗肿瘤研究方面,已经成为抗肿瘤药物或其辅助药物,目前研究的热点是中药治疗肿瘤作用机制的研究。论文从单味中药及其有效成分、中药复方诱导肿瘤细胞凋亡机制等方面对中药诱导细胞凋亡在肿瘤的发生、发展和转归中所起的作用进行了综述。中药可以诱导肿瘤细胞凋亡,其可能的作用机制是通过调控原癌基因和抑癌基因的表达、影响细胞凋亡通路的信号传导及阻滞肿瘤细胞增殖周期等抑制肿瘤细胞的永生化。     

鲁西黄牛体细胞克隆保种技术的研究

以体外培养的鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞作核供体，研究利用体细胞克隆技术保存我国地方黄牛优良品种的技术方法。通过组织块培养法建立的鲁西黄牛（1♂，4♀）成纤维细胞系，作为核移植供体细胞，利用屠宰场母牛卵巢卵母细胞经体外培养成熟后作为核受体进行核移植，试验结果表明：重构胚的融合率为62．5％（242／387），分裂率为63．6％（154／242），体外培养第7天囊胚发育率为42．9％（66／154）。体外培养第7天的囊胚的内细胞团细胞（ICM）与滋养层细胞数平均为37和47，ICM占44．2％。体外发育到7d的囊胚新鲜胚胎的移植妊娠率（新鲜胚胎）移植受体10头，60d妊娠率为20％（2／10）。     

狗舌草提取物诱导L1210细胞的凋亡

以环磷酰胺、槲皮素和单猪屎豆碱为参照，观察狗舌草60％乙醇提取物体外对L1210细胞的凋亡形态变化的影响；利用流式细胞术Annexin V-FITC／PI双参数法，研究狗舌草60％乙醇提取物对L1210细胞早期凋亡的影响，探讨狗舌草60％乙醇提取物致L1210细胞凋亡的机理。结果发现，狗舌草60％乙醇提取物能使L1210细胞发生典型的细胞凋亡，形成凋亡小体；狗舌草60％乙醇提取物引起的Annexin V-FITC^＋／PI^-细胞百分比为86．8％，能诱导L1210细胞发生早期凋亡。     

“实践八号”搭载8个苜蓿品种细胞学效应研究

通过“实践八号”育种卫星搭载8个苜蓿Medicago sativa品种干种子,研究苜蓿根尖细胞学效应。研究结果表明,航天诱变促进了8个苜蓿品种的根尖细胞有丝分裂活动,龙牧803有丝分裂指数的辐射生物损伤增加的幅度最大,草原1号增加的幅度最小。同时,航天诱变诱发了8个苜蓿品种根尖细胞产生染色体断片、染色体粘连、游离染色体、落后染色体等畸变类型,染色体断片是主要畸变类型,Pleven6总畸变率最大,肇东苜蓿总畸变率最小,初步推断8个苜蓿品种中Pleven6对航天诱变的敏感性最高,肇东苜蓿的敏感性最低。     

镉对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响研究

为探讨镉对雌性生殖机能的影响,幼鼠皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG),48 h后腹腔注射不同剂量的氯化镉,用琼脂糖凝胶电泳及TUNEL法对卵巢颗粒细胞进行凋亡检测;免疫组织化学法检测颗粒细胞的bax表达。结果显示注射氯化镉后48 h的高、中、低剂量组卵巢颗粒细胞(GC)凋亡率分别为(13.887 1±1.329 9)%、(10.757 3±1.229 3)%(、10.020 8±0.983 7)%,均显著高于对照组(0.637 8±0.387 2)%(P<0.01);96 h对照组GC凋亡率显著升高,高剂量组与其它组间差异明显,中、低剂量组与对照组差异不明显。凝胶电泳仅96 h高剂量组呈现梯状带。48 h、96 h各剂量组bax表达明显高于对照组(P<0.01)。可见镉对卵巢颗粒细胞的凋亡有促进作用,并有一定的剂量相关性;TUNEL法检测细胞凋亡优于电泳法,当细胞凋亡率较低时(<20%),电泳检测不到DNA梯状带;卵巢颗粒细胞凋亡和bax的表达有一定的相关性,随凋亡率的升高bax表达呈上升趋势。     

电穿孔导入绿色荧光蛋白基因于绵羊胎儿成纤维细胞研究

本文应用质粒pEGFP Cl带有水母绿色荧光蛋白 (GFP)基因和新霉素抗性基因 (Neor)两种报告基因转染胎儿成纤维细胞 ,进行转染条件优化。首先 ,通过成活率确定转染脉冲时程和场强 ,发现有三种组合是最适的组合 ,它们分别为 :时程 5ms,场强 1.2 5～ 1.5kV/cm ;时程 15ms时 ,场强 1.0～ 1.2 5kV/cm ;时程 2 5ms时 ,场强 0 .75～ 1.0kV/cm。接着采用场强 1.2 5kV/cm ,时程 15ms ,研究转染的温度、电导介质、细胞状态、DNA用量和细胞密度对转染效率的影响 ,结果表明电导介质为Dhanks,DNA用量为 4 μg/mL ,对数期细胞密度为 1× 10 6～ 1× 10 7个 /mL ,电击前后在 4℃下各静置 10min时 ,能获得最佳转染效率。     

咪唑诱导的人子宫内膜癌细胞HEC-1B空泡化现象研究

咪唑作为一种弱碱性物质,处理动物子宫内膜细胞后,可诱导其产生空泡化现象,进而影响其生殖生理功能。本研究使用人子宫内膜癌细胞HEC-1B作为模型,使用咪唑处理导致细胞空泡化后探讨空泡化产生的生理机制。通过基因芯片分析、荧光定量PCR检测、激光共聚焦显微镜观察等方法进行研究。结果表明:咪唑处理人子宫内膜癌细胞HEC-1B后,空泡型质子泵(V-ATPase)亚基V0D2基因表达量上调。使用荧光定量PCR验证芯片结果,V-ATPase亚基V0D2 mRNA表达量有所上调。对V-ATPase另外一个亚基V1E1基因进行荧光定量PCR,其mRNA表达量也有所上调。使用V-ATPase抑制剂巴弗洛霉素A1和咪唑共同处理人子宫内膜癌细胞HEC-1B后,通过吖啶橙染色,激光共聚焦显微镜观察,咪唑诱导的空泡被显著抑制。上述结果证明了V-ATPase在咪唑诱导的细胞空泡化中的重要作用。     

自然感染兔脑炎原虫獭兔肾上皮细胞凋亡的研究

运用透射电镜术、原位末端标记技术(TUNEL)和流式细胞术对11只自然感染兔脑炎原虫獭兔的肾脏进行了细胞凋亡研究，5只健康长耳白兔用作对照。结果表明．凋亡细胞多见于远曲小管和集合管的上皮细胞。用透射电镜观察，初期的凋亡细胞，其细胞核的染色质高度凝集，边缘化，粗面内质网增多、扩张呈泡状；后期的凋亡细胞，其细胞质浓缩．细胞膜起泡，细胞核分裂成块状，最后形成膜包裹的凋亡小体。TUNEL法检测，病变轻微的细胞，胞核微缩，胞膜增厚；病变严重的细胞，其胞核体积明显缩小，胞膜皱缩，最后形成膜包裹的凋亡小体。流式细胞术检测，病兔可呈现明显的亚“G1”峰，凋亡细胞百分比与对照兔相比差异极显著(P=0．01)，且病兔。肾细胞的周期也有所改变。结果表明，3种方法检测的病兔肾上皮细胞凋亡数均高于对照免。     

用清洗纯化法清除传代细胞系中支原体污染的方法探索

为了解决引进细胞系的支原体污染和细胞传代生长不稳定问题,尝试对细胞培养条件和细胞群进行优选,并建立了清洗离心结合敏感抗生素法,达到了清除支原体和稳定细胞活力的目的.