植物生长调节物质对成熟红松合子胚愈伤组织诱导的影响

诱导成熟红松合子胚愈伤组织的关键,是选择正确的诱导培养基以及适宜浓度及配比的生长调节物质。结合松柏类针叶树种体胚发生文献,从7种基本培养基中筛选出LM培养基为最佳诱导培养基;在植物生长调节物质的筛选中,2,4-D优于NAA;LM+2mg/L 2.4-D+(0~0.5)mg/L 6-BA可以诱导出更多的Ⅱ型有效愈伤组织;LM+2mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA的诱导培养基中加入0.5mg/L KT或0.5mg/L TDZ,可显著提高有效愈伤组织的诱导率(75.7%)。     

红豆杉愈伤组织诱导试验初探

以1年生红豆杉的茎段、芽尖及种子作为外植体,以MS和B5培养基添加2,4-D、NAA、KT进行愈伤组织诱导试验。结果表明:最适宜红豆杉愈伤组织诱导的条件为以茎段为外植体,消毒时间6 min;B5 NAA1.0 mg/L KT0.2 mg/L GA0.75 mg/L培养基;25℃左右培养;接种后外植体暗处理1～2周效果更佳,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。     

香茶藨子愈伤组织诱导途径组织培养研究

香茶藨子(Ribes odoratum Wendl.)属于虎耳草科(saxifragaceae)茶藨子属植物,原产于美国,现东北、华北多有栽培,具有重要的经济、观赏价值。实验得出,最佳愈伤组织诱导外植体为茎尖,最佳愈伤组织诱导的激素组合为KT2.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,最佳愈伤组织增殖激素组合为KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L,愈伤组织增殖时,最佳培养基固化剂为植物凝胶。     

激素对怀槐愈伤组织诱导的影响

在怀槐组织培养中,通过对比不同激素浓度对愈伤组织诱导效果及异黄酮分泌量的影响程度,分析出最佳的激素种类及使用浓度。研究发现:(1)怀槐的最佳愈伤组织诱导激素为:NAA 0.5mg/L、2,4-D 2.5mg/L、6BA 1.5mg/L、KT 0mg/L,激素NAA对愈伤组织诱导的影响程度最大;(2)怀槐愈伤组织中异黄酮分泌的最优质诱导激素为:激素NAA和6BA,当浓度分别为0.5mg/L和1.5mg/L时,能够使愈伤组织的异黄酮分泌量达到最高。     

芽变毛白杨组织培养初步研究

以芽变毛白杨幼嫩枝条为外植体进行愈伤组织和茎段组织培养试验研究。结果表明:芽变毛白杨诱导愈伤组织培养基为:MS 6-BA 2.0~4.0 mg/L 2,4-D 1.5~2.0 mg/L NAA 0.25 mg/L KT 2.0~4.0 mg/L 3%蔗糖,愈伤组织分化芽培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L KT 2.0 mg/L 3%蔗糖时,培养效果好。茎段培养时,适宜无根苗生长的培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L 3%蔗糖,生根诱导适宜的培养基为1/2MS IBA 0.5~1.0 mg/L 1.5%蔗糖。     

不同激素配比对油茶花药愈伤组织形成的影响

为了加快油茶品种改良,提高油茶花药愈伤组织的诱导效率,在低温预处理（4℃）的基础上,以MS为基本培养基,研究了不同浓度的2,4-D、NAA及2,4-D、6-BA配比对普通油茶花药愈伤组织诱导效率的影响。结果表明：2,4-D、NAA诱导普通油茶愈伤组织的较优组合为2,4-D0．6mg／L,NAA0．05或0．5mg／L,愈伤组织诱导率分别达到35．56％和24．65％,在油茶花药愈伤组织诱导过程中。2,4-D有利于愈伤组织的形成,是最重要的因素;2,4-D、6-BA的混合使用更有利于愈伤组织的发生,并且两种激素适当的配比是提高愈伤组织诱导率的重要因素,0．5mg／L的2,4-D与0．2mg／L6-BA组合是实验得出的较优水平,愈伤组织诱导率达到42．74％。     

不同激素对红豆杉愈伤组织诱导及增殖的影响

以南方红豆杉(T.chinensis varmairei)的嫩茎为外植体,探讨了不同激素对愈伤组织诱导及继代增殖的影响。结果表明:以嫩茎为外植体,愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC1g/L+酪蛋白1g/L,但高浓度的2,4-D易使愈伤组织褐化。为了减缓愈伤组织褐化和使细胞持续增殖,继代时选用NAA替代2,4-D,继代培养的最佳培养基为:B,5(去掉Cu2+的B5培养基)+NAA 4.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC0.5g/L+酪蛋白1g/L。     

毛竹愈伤组织培养研究

以毛竹春笋为培养材料进行愈伤组织诱导,分析了不同的激素组合、温度及光照对愈伤组织诱导的影响。结果表明以MS为基本培养基,在NAA与6-BA的组合中,NAA（0．5—10mg／L）＋6-BA（0．5—5mg／L）都能诱导出愈伤组织;在2,4-D与6-BA的组合中,2,4-D（0．1—5mg／L）＋6-BA（0．5—5mg／L）也都能诱导出愈伤组织;但2,4-D的组合比NAA组合的效果好一些。其中3mg／L2,4-D＋1mg／L6-BA在20℃、3％蔗糖、0．9％琼脂、暗培养条件下愈伤组织诱导率达100％,且状态最好。     

无患子愈伤组织诱导与分化培养技术研究

为解决无患子组织培养中的难题,对愈伤组织诱导最佳外植体与基本培养基类型先进行筛选,再通过正交试验设计,筛选愈伤组织诱导植物生长调节剂、生长及分化培养最佳抗褐化剂和植物生长调节剂种类与浓度水平。结果显示：(1)1 a生嫩茎段是无患子愈伤组织诱导最佳外植体;(2)培养基中添加20.0 mg/L抗坏血酸和10.0 mg/L半胱氨酸能有效抑制愈伤组织褐化现象的发生;(3)以改良MS作为基本培养基,外加6-苄基腺嘌呤(6-BA)0.6 mg/L+糠基腺嘌呤(KT)0.15 mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)3.0 mg/L植物生长调节剂浓度组合,愈伤组织诱导率最高,结构致密;(4)愈伤组织团在改良MS外加6-BA 3.0 mg/L+萘乙酸(NAA)0.4 mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.25 mg/L植物生长调节剂浓度组合下,不定芽诱导率最高,芽苗健壮。     

广藿香愈伤组织的诱导和增殖

以广藿香的幼叶、茎段为外植体,接种于附加不同浓度的2,4-D、NAA、6-BA、KT、TDZ及其组合的MS固体培养基上进行愈伤组织的诱导,结果表明:单独使用5种激素在一定范围内均能诱导出愈伤组织;最佳组合培养基为MS+6-BA 1.0 mg.L-1+2,4-D 0.1 mg.L-1。进一步研究发现,茎段和叶片诱导的愈伤组织的生长曲线都呈“S”型,且生长周期均为18 d。     

巨龙竹种子、小穗外植体愈伤组织的诱导培养

通过对巨龙竹种子和小穗两种外植体愈伤组织初导培养基和增生培养基的筛选及防褐化处理试验,结果表明,巨龙竹种子和小穗初导培养基最优组合为3/4 MS 3 mg/L 2,4-D 0.3 mg/L KT 25 g/L,MS 3 mg/L2,4-D 0.3 mg/L KT 25 g/L;其种子和小穗的增生培养基最优组合分别为MS (3~5 mg/L)2,4-D 0.3mg/L KT、MS 3 mg/L 2,4-D 0.3 mg/L KT;在特定培养条件下,对褐变有一定程度的控制。     

油茶胚组织离体培养实验

采用油茶上胚轴、下胚轴和子叶作外植体进行油茶组织离体培养诱导愈伤组织发生和不定芽分化的实验.实验结果表明,0.2％的HgCl2消毒处理油茶种胚外植体10 min效果较好;油茶上胚轴、下胚轴和子叶组织在MS+2,4-D2mg/L+KT0.5 mg/L的培养基上,愈伤组织诱导率分别为95.0％、66.7％和30.0％;在MS+6- BA2.5 mg/L+ KT0.1 mg/L+ NAA0.5 mg/L培养基上,不定芽诱导率分别是66.7％、33.3％和11.1％;以MS+6- BA 2 mg/L+ NAA 0.2 mg/L继代培养,上胚轴、下胚轴和子叶所形成愈伤组织芽增殖系数40天时为5.8、5.6和5.3.     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。     

紫穗槐茎段愈伤组织诱导及再生体系的建立

以紫穗槐茎段为研究对象,确定了影响其愈伤组织诱导的关键因子、不定芽分化及生根培养的最佳条件,建立了紫穗槐稳定高频再生体系。试验结果表明：紫穗槐茎段愈伤组织的最适诱导培养基为MS＋6-BA4.0mg/L＋NAA2.0mg/L＋2,4-D0.5mg/L,诱导率为100%,经愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.1mg/L＋KT2mg/L,分化率为96.2%,增殖倍数为7.3;不定芽最佳生根培养基为1/2MS＋酵母提取物0.5mg/L;再生植株移植在选用田园土、蛭石（5∶1）混合的基质上,光强3000lx,光照时间14h/d下生长,3周后成活率达85.67%。     

邓恩桉种子组织培养的研究

以邓恩桉种子为外植体,探讨用最少种子快速繁殖最多幼苗的方法,结果表明:MS培养基是较适合邓恩桉种子萌芽和生长的基本培养基;诱导种子直接脱分化成愈伤组织的较佳培养基配方为MS KT1.0 mg/L 2,4-D2.0 mg/L 半胱氨酸30 mg/L;以邓恩桉实生苗的芽来繁芽的较理想培养基配方为H BA2.0 mg/L IAA0.2 mg/L;邓恩桉实生苗的根诱导愈伤组织的较佳培养基配方为MS 6-BA2.0 mg/L NAA0.2 mg/L;诱导邓恩桉下胚轴分化芽较佳培养基配方为B5 6-BA2.0 mg/L 2,4-D0.2 mg/L;诱导邓恩桉下胚轴脱分化为胚性愈伤组织的较佳培养基配方为B5 Ad2.0 mg/L IAA0.2 mg/L.     

香蕉薄切片愈伤组织再生体系的建立研究

以巴西香蕉品种的薄切片为外植体高频地诱导出愈伤组织,并诱导出了不定芽,获得了再生植株。在实验过程中,利用正交实验中筛选出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 4.0 mg.L-1+KT 1.0 mg.L-1+NAA 1.0 mg.L-1+活性炭200 mg.L-1,诱导率可达100%,愈伤组织增殖的最佳培养基是MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1+活性炭100 mg.L-1,继代3-4次的愈伤组织在6-BA浓度为5.0 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽,继代10次之后愈伤组织在继代培养基上开始出现褐化现象,愈伤组织增殖明显受到抑制,褐化的愈伤组织逐渐死亡。     

阔叶十大功劳叶柄愈伤组织诱导及试管苗培养的研究

以大连市引种的阔叶十大功劳嫩叶柄为外植体,采用组织培养方法研究其快繁技术,结果表明:愈伤组织诱导的初代和继代理想培养基是MS+KT 0.6 mg·L-1+2,4-D 2.5 mg·L-1;不定芽分化的理想培养基是1/4MS+ZT0.4 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1;不定芽生根的理想培养基是1/3MS+IAA0.5mg·L-1;试管苗生根继代培养形成的试管苗生长旺盛,生根率为94.6%,生根数为7.2条,每代的繁殖系数为2.8。试管苗移栽平均成活率为89.8%,生长旺盛,在大连地区可正常越冬,翌年即可开花。     

重瓣大花萱草组织培养快速繁殖的研究

试验以重瓣大花萱草带生长点的茎段为试材 ,以MS与 1/ 2MS为基本培养基 ,分别添加不同浓度的 2 ,4 -D ,6 -BA ,NAA。试验结果表明 :MS 6 -BA1mg/l NAA0 1mg/l的固体培养基 ,有很好的诱导外植体产生不定芽苗的效果 ;而MS 2 ,4 -D2mg/l 6 -BA0 1mg/l的培养基能很快诱导外植体产生愈伤组织 ;愈伤组织在MS 6 -BA1mg/l的培养基上培养后 ,形成结构致密的球状体愈伤组织 ,并分化出苗 ,经继代培养后 ,形成丛状苗 ;试管苗的生根是以 1/ 2MS NAA0 5mg/l的固体培养基最为合适。     

优系欧李茎叶愈伤组织诱导与植株再生

以欧李春季萌发的幼茎、叶片为外植体诱导愈伤组织的产生,结果表明:叶片愈伤组织培养以改良MS为基本培养基,附加NAA 1.0 mg/L IBA 0.5 mg/L BA 0.2 mg/L效果较好;茎段愈伤组织培养以改良MS附加2,4-D0.5 mg/L NAA 0.3 mg/L BA 0.15 mg/L诱导愈伤组织效果好;愈伤组织再诱导不定芽以1/3 MS附加BA2.0 mg/L IBA 0.01 mg/L培养基效果佳。