鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅴ.有丝分裂原诱导的T调节细胞对EB病毒感染鼻咽癌病人和EB病毒血清学阳性者外周血单个核细胞的影响

本文探讨了鼻咽癌病人、IgA/VCA阳性和阴性健康成人外周血单个核细胞(PBMC)经PHA和ConA诱导后对EB病毒(EBV)感染自身PBMC早期变化的影响.结果显示:PHA诱导细胞对EBV感染自身PBMC后的EBV核抗原(EBNA)阳性细胞数和~3H-TdR掺入量均有抑制作用,但对Ig分泌多数有促进趋势,特别是     

EB病毒体外感染外周血单个核细胞的早期变化和综合检测观察系统的建立

本文用细胞培养、抗补体免疫酶、液体闪烁计数和酶联免疫吸附试验等方法,建立了EB病毒体外感染外周血单个核细胞早期变化的综合检测观察系统.结果表明,本系统可综合观察EB病毒体外感染B细胞早期的激活、增殖和分化的动力学变化过程,从而可反映EB病毒体外感染外周血单个核细胞早期过程中,免疫因素对其影响.本系统的建立,对EB病毒感染与机体细胞免疫功能和有关疾病关系的研究提供了较好的实验基础.     

鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅲ.鼻咽癌病人与不同IgA/VCA抗体滴度者外周血单个核细胞对EB病毒感染的早期免疫反应变化

为探讨鼻咽癌(NPC)病人与不同IgA/VCA抗体滴度者对EB病毒(EBV)的免疫反应功能变化关系,本文用EBV体外感染人外周血单个核细胞(PBMC)早期反应综合检测观察系统,测定了NPC病人,IgA/VCA高滴度者、低滴度者和阴性者的PBMC体外感染EBV时的早期反应变化.结果发现,NPC组的EBV核抗原     

鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅱ.EB病毒体外感染外周血单个核细胞的早期变化和综合检测观察系统的建立

为了较全面了解EB病毒(EBV)感染时B淋巴细胞的早期动力学变化及免疫因素对其影响,我们用细胞培养、抗补体免疫酶、液体闪烁计数和酶联免疫吸附试验等方法,建立了EBV体外感染人外周血单个核细胞(PBMC)早期变化的综合检测观察系统。用本系统综合检测EBV体外感染PBMC及T、B淋巴细胞发现:(1)     

某些中草药和海洋生物对EB病毒早期抗原的诱发和抑制作用

EB病毒(EBV)的激活与鼻咽癌的发生发展有密切关系,环境因素在其中可能有一定作用.作者利用Raji细胞系统和间接免疫酶法测定了广东省常见的50种中草药和33种海洋生物对EB病毒早期抗原(EBV—     

鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅳ.鼻咽癌病人与EB病毒血清学阳性者对有丝分裂原诱导产生T调节细胞亚群的反应

本文探讨了鼻咽癌病人、IgA/VCA阳性和阴性者的外周血单个核细胞(PBMC)对PHA和ConA二种有丝分裂原诱导产生T_4和T_8细胞反应的特点。(1)从时效和量效两个方面较系统地探讨了二种有丝分裂原诱导反应的条件.表明:PHA主要诱导T_4细胞亚群,ConA主要诱导T_8细胞亚群.最适诱导时间两者均为5天.     

CD3抗体对EB病毒特异性T细胞杀伤作用的影响

用CD3抗体(UCH—T1)与EB病毒特异性效应细胞共同孵育,检测靶细胞的~(51)Cr释放率,以观察其阻断EB病毒特异性T细胞及其克隆细胞对EB病毒转化类淋巴母细胞株(LCLs)和NK细胞杀伤敏感细胞株     

EB病毒特异性T细胞克隆的建立及其对不同浓度重组白细胞介素-2的反应

以辐射灭活的EB病毒类淋巴母细胞株作为刺激抗原,培养液中加入10％MLA-144上清液(含IL-2),用限制性稀释法建立EB病毒特异性T细胞克隆.在用含不同浓度的重组IL-2(rIL-2)培养后,检测T细胞克隆特性的改变,结果显示,特异性T细胞克隆的建立依赖于特异性抗原的刺激及少量IL-2的存在.T细胞克隆形成后,其特异性、HLA限制性及T细胞表型等特性是相对稳定的,不受培养液中rIL-2浓度变化的影响.     

鼻咽癌病人的EB病毒特异性T细胞免疫反应变化

体外培养的已感染 ER 病毒的正常人和鼻咽癌患者的外周血淋巴细胞经再次用 EB 病毒剌激后,可出现 EB 病毒特异性 T 细胞的杀伤作用,表现为转化细胞团的退变。本文观察 VCA-IgA 阴性和阳性正常人各11例和20例,以及 VCA-IgA阳性鼻咽癌病人11例(分别称为阴性组、阳性组和 NPC 组)的 EB 病毒特异性 T 细胞免疫反应转化,所有受试标本都出现了淋巴细胞转化,出现的平均时间三组分别是5.91、8.10和4.73d,转化孔分别是90.74%、93.4%和97.17%;而出现大部分退变的例数分别为2/11、20/20和4/11,孔数分别为16/95(16.84%)、172/177(97.18%)和44/98(44.90%);出现退变的平均时间三组分别为18.25、18.30和26.67d,大部分退变出现的平均时间阳性组和 NPC 组分别为19.05和28.25d(阴性组2例,分别为25和30d)。NPC 组和各组的差别显著。结果表明鼻咽癌患者这种 EB 病毒特异性 T 细胞细胞免疫功能是下降的。     

EB病毒诱导下鼻咽癌患者外周血淋巴细胞的转化和退变

已感染EB病毒(EBV)者,如再次用EBV刺激,可出现外周血淋巴细胞转化细胞团的退变。本文观察阳性正常人20例、VCA—IgA阳性鼻咽癌(NPC)病人11例外周血淋巴细胞的这种转化和退变,全部阳性组受     

EB病毒诱生的IL-2、TNF和IFN的鼻咽癌病人及IgA/VCA阳性者的变化

本文采用MTT法、ELISA和细胞病变抑制(CPE)等方法,对鼻咽癌(NPC)病人,IgA/VCA阳性者与阴性者,以及新生儿,用EB病毒(EBV)感染其外周血单个核细胞(PBMC),检测所诱生的上清(SN)中的IL-2、TNF和IFN水平的变化.IL-2的水平以NPC病人最低(11.69±8.49与19.83±11.66U/ml),新生儿最高     

鼻咽癌患者与不同IgA/VCA抗体滴度者外周血单个核细胞对EB病毒感染的早期免疫反应

本文用本室建立的EB病毒(EBV)体外感染外周血单个核细胞(PBMC)早期反应综合检测观察系统,测定了鼻咽癌(NPC)患者、IgA/VCA高滴度者、低滴度和阴性者3组人的PBMC体外感染EBV的早期免疫反应。发现在EBV感染PBMC早期,NPC组的EBNA阳性细胞数、~3H-TdR掺入量和免疫球蛋白(IgG、IgG、IgG)分泌量最低,IgA/VCA低滴度和阴性组最高,两组间所有指标差异均有显著或非常显著性,而IgA/VCA高滴度组的多数指标与NPC组接近.结果表明,在EBV体外感染PBMC所引起的早期免疫反应中,NPC患体者和IgA/VCA高滴度者EBV活化的B细胞功能较IgA/VCA低滴度和阴性者降低.这对了解NPC发生发展过程中EBV感染活化B细胞的功能在体内外变化的关系方面具有一定意义.     

鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅰ.从EB病毒与机体细胞免疫反应的关系探讨鼻咽癌病人及其患病风险者免疫学变化的几个问题

本文为对鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系研究的阶段性小结,主要观察分析了鼻咽癌病人、VCA/IgA阳性者与阴性者EB病毒引起的T调节细胞与B细胞的变化.(1)VCA/IgA阴性者、阳性者与NPC病人的EBV相关抗体(EA/IgA、VCA/IgA、VCA/IgG)的阳性率和GMT是由低至高的关系,T调节细胞的数量是:T_4自高向低、T_8自低向高呈交叉发展。(2)体外感染EBV的PBMC的变化。前期     

Epstein—Barr病毒特异性T细胞对重组痘苗病毒表达LMP和EBNA2的靶细胞的识别

本文用EB病毒转化自体淋巴细胞所建立的类淋巴母细胞系(LCL),以及用EB病毒潜伏感染膜蛋白(LMP)基因和核蛋白—2(EBNA_2)基因与痘苗病毒重组的重组病毒(Vac—LMP和Vac—EBNA_2)感染的自身纤维母细胞,同时作为刺激细胞和靶细胞,以~(51)Cr释放法检测5例血清中EB病毒VCA—IgA抗体阳性者     

EB病毒基因组结构及其基因体外转染研究现状

EB病毒（EPstein－liarsVirus，EBV）是一种与多种肿瘤有关的l疮疹病毒，与人类两种恶性肿瘤伯基特淋巴瘤（BL）和鼻咽癌（NPC）的关系尤为密切。大量研究表明，人群EBV的感染较普遍，EBV核酸不仅存在于NPC细胞中，且在鼻咽正常上皮中亦可检出，但NPC的发病率却相对较低。在不同细胞中EBV基因产物表达类型也不同【‘·’。。究竟EBV在肿瘤的发生发展中的作用如何，目前仍未清楚、随着分子生物学技术的发展，EBV的基因结构已完全明了，其某些基因被用于大量体外转染细胞实验。现对这些研究作一简要综述。IEBV基因组结构及其…     

EB病毒与鼻咽癌相关的前瞻性观察

1986～1990年我们对广东省鼻咽癌高、中、低发区的四会、中山、广州、湛江、汕头共123087名健康人群进行了包括EB病毒血清学、鼻咽脱落细胞学、间接鼻咽镜及鼻咽光纤镜、鼻咽活检在内的前瞻性观察.在这     

水泡性口炎病毒诱导BHK-21细胞凋亡的初步研究

采用倒置相差显微镜、电子显微镜、琼脂糖凝胶电泳等技术研究水泡性口炎病毒诱导BHK-21细胞凋亡．形态学观察结果显示,水泡性口炎病毒感染BHK-21细胞的形态变化具有较典型的凋亡特征,如细胞膜内陷、核染色质凝集边聚等;琼脂糖凝胶电泳出现180-200bp整倍数的DNA梯形带．上述结果表明水泡性口炎病毒可诱导BHK-21细胞凋亡。     

日本脑炎病毒E基因抗原域Ⅲ的克隆及高效表达

根据GenBank公布的日本脑炎病毒 (Japaneseencephalitisvirus ,JEV)SA14 14 2减毒株的核苷酸序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,应用RT PCR方法扩增出编码JEV囊膜蛋白抗原域Ⅲ的基因 (EⅢ) ,将其连接入pMD18 T载体 ,经测序后克隆入原核表达载体pET 32a (+) ,构建原核表达载体pET EⅢ 。阳性质粒转化感受态大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导 ,JEV EⅢ 基因获得表达 ,经细胞定位分析 ,目的蛋白以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变IPTG的浓度和诱导时间 ,确定了表达EⅢ 蛋白的最佳诱导条件 :IPTG终浓度为 0 1mmol·L-1,诱导时间为 3h。在大肠杆菌中的最高表达量占菌体总蛋白的 5 4 9%。Western blot分析表明表达产物具有良好的免疫学活性。利用纯化的表达产物作抗原包被酶标板 ,可以明显地区分JEV阴、阳性血清 ,并且不与猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒、猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒的阳性血清发生反应。结论 :重组JEVEⅢ 蛋白可以用于检测猪血清中JEV抗体水平。     

非洲猪瘟病毒重组载体疫苗激发/加强免疫策略的初步研究

为了选择合理的非洲猪瘟病毒（ASFV）重组载体的激发/加强免疫策略，构建表达ASFV CD2v-p30-p54融合抗原的重组伪狂犬病毒rPRV-F1，将其与表达相同融合抗原的重组腺病毒rAd-F1分为rAd-F1/rAd-F1、rAd-F1/rPRV-F1、rPRV-F1/rPRV-F1、rPRV-F1/rAd-F1 4个组合进行猪免疫试验，分别于免疫后不同时间采血并分离血清进行ELISA抗体检测，分离的外周血单个核细胞（PBMC）经ASFV抗原刺激后进行IFN-γ检测。免疫荧光与免疫转印试验结果显示，构建的rPRV-F1能在感染细胞中正确表达F1融合蛋白。所有免疫猪均能检测到抗原特异性抗体，加强免疫后的抗体水平显著升高。在测试的4个免疫方案中，尽管rAd-F1/rAd-F1组合初次免疫后的抗原特异性抗体水平和IFN-γ表达水平最高，但加强免疫后的抗体水平和IFN-γ表达水平最低。与此相反，尽管rPRV-F1/rAd-F1组合初次免疫后的抗体水平和IFN-γ表达水平最低，但加强免疫后的抗体水平和IFN-γ表达水平最高。这些研究结果表明rPRV/rAd是较好的ASFV重组载体疫苗的激发/加强免疫策略。     

猪瘟病毒引起免疫抑制的研究

综述了猪瘟病毒引起的机体免疫抑制因素主要包括损伤免疫器官、诱导淋巴细胞凋亡、引起囊膜糖蛋白E2变异、抑制Ⅰ型干扰素产生、诱发白细胞减少和引起树突状细胞无应答.从而干扰抗原的递呈和抑制免疫抗体的产生,引起机体免疫抑制.