蒲公英黄酮生物活性研究

优化蒲公英黄酮提取工艺,考察不同浓度蒲公英黄酮对羟自由基和DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)的清除能力。试验利用醇沉法超声提取蒲公英黄酮,采用正交试验的方法对超声波提取蒲公英活性成分的工艺进行优化,得到最佳的提取工艺,采用紫外分光光度计法测定黄酮提取物对羟自由基和DPPH自由基的清除效果。结果表明:提取蒲公英黄酮工艺的最佳提取条件为料液比1∶50(g/m L),乙醇质量分数50%,提取温度40℃,提取时间2.0 h,黄酮含量为6.84%。当黄酮质量浓度为1.2 mg/m L时蒲公英黄酮对羟自由基清除率最高,可达到54.35%;当黄酮质量浓度为1.4 mg/m L时蒲公英黄酮对DPPH自由基清除率最高,可达到94.59%。研究优化超声波提取蒲公英黄酮工艺,对蒲公英黄酮清除羟自由基和DPPH自由基效果进行研究。蒲公英黄酮对羟自由基和DPPH自由基清除效果均较好,为开发利用蒲公英资源提供理论依据,也为进一步开展蒲公英黄酮研究奠定理论基础。     

昆仑雪菊黄酮提取物体外抗氧化活性试验

为了研究昆仑雪菊黄酮提取物(KFE)体外抗氧化活性,采用超声法提取昆仑雪菊中黄酮,乙醇浓度95%、温度40℃、时间15 min,提取3次。经过测定1 g昆仑雪菊粉末中含有0.125 g黄酮。分别用普鲁士蓝还原法、水杨酸法、邻苯三酚自氧化法、DPPH法以及硫代巴比妥酸法测定不同浓度下KFE的还原能力,对羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O~(2-))、DPPH自由基的清除能力以及对脂质过氧化的抑制率。结果表明,KFE还原能力随浓度上升而增强,但弱于维生素C;对羟自由基清除能力在110 g/mL最强,清除率为18.72%,高于维生素C;清除超氧阴离子的能力弱;DPPH自由基清除能力在302.5 g/mL最强,清除率为94.47%;脂质体系抗氧化能力在605 g/mL最强,抑制率为54.22%。结果表明,KFE具有一定的抗氧化活性。     

绒毛鹿茸草多糖提取工艺优化及多糖体外抗氧化研究

用正交试验法优选绒毛鹿茸草多糖的提取工艺及多糖体外抗氧化研究。在对温度、时间、料水比进行单因素试验的基础上,通过正交试验确定了提取绒毛鹿茸草多糖的最佳工艺条件;通过清除羟基自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2-.)试验,及模拟胃液条件下清除NO2-试验,研究绒毛鹿茸草多糖体外抗氧化活性。提取最佳工艺条件为:料水比1:20,在100℃下浸提3h,浸提2次;醇沉采用3.5倍体积95%乙醇3h。绒毛鹿茸草多糖浓度在0.4～2.0mg/mL之间时,清除羟基自由基(.OH)呈增长趋势,当浓度达到2.0mg/mL时清除率达45%;多糖浓度在0.1～0.3mg/mL之间时,清除超氧阴离子自由基(O2-.)呈负增长趋势,当浓度达到0.3mg/mL时清除率达-6.39%;多糖浓度在1～5mg/mL之间时清除NO2-呈增长趋势,当浓度达到5mg/mL时清除NO2-能力达到14.3%。对绒毛鹿茸草多糖提取工艺进行研究,可知绒毛鹿茸草多糖清除羟基自由基(.OH)活性较强,有一定清除NO2-能力,能促进超氧阴离子(O2-.)形成。     

黄芩多糖体外抗氧化活性研究

目的:探讨黄芩多糖的体外抗氧化活性。方法:从还原力,清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基4个方面研究黄芩多糖的体外抗氧化活性,并与VC进行比较。结果:黄芩多糖对上述自由基均有不同程度清除作用,其还原力较低;清除DPPH自由基的能力略低于VC;对超氧阴离子清除能力强于VC,EC50为0.261 mg/mL;对羟自由基的清除能力弱于VC,EC50为0.724 mg/mL。结论:黄芩多糖具有一定的体外抗氧化能力。     

蒲公英黄酮与多糖对DPPH清除能力比较研究

考察不同质量浓度蒲公英黄酮和多糖对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)的清除能力并进行比较。试验利用醇沉法超声提取蒲公英黄酮,水提法超声提取蒲公英多糖,采用紫外分光光度计法测定此黄酮及多糖提取物对DPPH自由基的清除效果,利用统计学方法分析黄酮及多糖清除DPPH自由基的差异性。结果表明:当黄酮质量浓度为1.6 mg/m L时,DPPH清除效果最佳,清除率达96.11%,IC50(抑制剂的半抑制质量浓度)值为0.38 mg/m L;当多糖质量浓度为1.4 mg/m L时,DPPH清除效果最佳,清除率达89.33%,IC50值为0.51 mg/m L;统计学结果显示蒲公英黄酮及多糖对DPPH自由基清除效果差异显著(P0.05)。研究首次对蒲公英黄酮与多糖清除DPPH自由基效果进行比较,蒲公英黄酮及多糖均对DPPH自由基清除效果较好,但黄酮的清除效果显著高于多糖的清除效果(P0.05)。试验结论为进一步开展蒲公英黄酮研究奠定理论基础,也为开发利用蒲公英资源提供理论依据。     

响应面法优化桑叶黄酮的提取工艺及提取物抗氧化性能的研究

为了给桑叶黄酮作为天然抗氧化剂开发提供参考依据,试验以桑叶为研究对象,通过单因素试验分析了超声波辅助、提取时间、提取温度、料液比以及乙醇浓度对桑叶黄酮提取率的影响,利用响应面法优化了桑叶黄酮提取工艺,并结合1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除试验评估了提取物的抗氧化性能。结果表明:超声波辅助能够显著提高桑叶黄酮提取率(P0.05);响应面模型得到的提取条件为乙醇浓度54.75%、提取时间17.61 min、料液比1:30.24(g/m L)、温度50.27℃,此时桑叶黄酮提取率最高为3.64%;实际测得提取时间17 min、提取温度50℃、料液比1:30(g/m L)、乙醇浓度55%的条件下桑叶黄酮提取率为3.62%,与理论值相对偏差为0.55%,且该条件下提取物DPPH自由基清除活性为99.12%。     

复合酶辅助高压法提取金针菇黄酮的纯化及活性测定

为测定复合酶辅助高压法所提取的金针菇中黄酮类化合物的活性以及X-5型大孔吸附树脂纯化金针菇黄酮的最优条件,本文采用复合酶辅助高压法从金针菇中提取黄酮,并用X-5型大孔树脂对其进行纯化,然后通过体外抗菌活性试验测定金针菇黄酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和沙门氏菌4种常见菌株的抗菌活性;又以维生素C(Vc)为对照,通过测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、羟基自由基(OH·)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)的能力来检测其抗氧化性。结果表明:X-5型大孔树脂纯化金针菇黄酮的最佳条件为:采用浓度为1.4 mg/mL、pH为5的上样液,在上样流速为0.2 m L/min的条件下进行吸附;吸附饱和后用70%的乙醇60 mL以1 m L/min洗脱。在此条件下得到的黄酮纯度是纯化前的1.83倍。金针菇黄酮对四种细菌的生长繁殖有明显的抑制效果,抑菌强度顺序为:大肠杆菌沙门氏菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌;金针菇黄酮对DPPH·、O_2~-·、OH·和ABTS·均具有一定的清除能力,但都弱于Vc。可知复合酶辅助高压法所提取的金针菇黄酮具有抑菌及抗氧化活性,X-5型大孔吸附树脂纯化金针菇黄酮效果较好。     

桑黄黄酮的超声波辅助醇提工艺优化及其体外抗氧化活性测定

黄酮是桑黄的重要活性成分,具有多种药理作用。在对料液比、提取温度、提取时间3个因素进行单因素试验的基础上,应用响应面法对桑黄黄酮的超声波辅助乙醇回流提取工艺进行优化,并测定其还原力及对DPPH自由基、羟基自由基的清除作用。结果显示,桑黄黄酮提取的最优工艺条件为料液比1∶40、提取温度100℃、提取时间5 h,在此最优工艺条件下的桑黄黄酮提取得率为4.41%,达到回归模型预测值的98.44%;3个因素对桑黄黄酮提取得率的影响从大到小依次为提取温度、提取时间、料液比,并且料液比与提取时间之间存在交互作用;提取的桑黄黄酮具有较强还原力以及对DPPH自由基和羟基自由基的强清除作用,表现出明显的体外抗氧化作用。     

不同生长时期小花棘豆总黄酮含量及其抗氧化活性研究

研究不同生长时期小花棘豆总黄酮含量的变化及其与清除自由基能力的关系。试验选用6个生长时期的小花棘豆作为检测样本,利用甲醇超声波提取总黄酮,并采用硝酸铝显色法测定小花棘豆总黄酮含量,然后通过分析黄酮对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除作用,评价其抗氧化能力。结果表明,不同生长时期小花棘豆黄酮含量及自由基清除能力存在着显著差异(P0.05),结荚期小花棘豆总黄酮含量和自由基清除能力均高于其它生长期(P0.05),小花棘豆黄酮含量与DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力均存在极显著的正相关,其相关系数分别为0.950、0.933和0.972。     

甘肃棘豆黄酮抗氧化活性及免疫活性的研究

为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2(IL-2)和免疫球蛋白G(IgG)抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E(28.55%),低于维生素C(97.05%);对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E(69.70%),低于维生素C(98.69%);对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C(98.98%)、略低于维生素E(32.57%)。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组(P0.01),50和100μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异(P0.05);各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组(P0.01),其中,50μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P0.01),100μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P0.01)。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。     

微波辅助提取黄芩黄酮的研究

目的：利用微波辅助浸提技术从黄芩中浸提黄酮。方法：采用单因素试验考察了浸提剂、液固比、浸提温度、颗粒粒度、微波功率和浸提时间对黄芩黄酮浸提率的影响。结果：微波辅助提取黄苓黄酮的最佳工艺50％乙醇为浸提剂、液固比为20mL／g、浸提温度为90．0℃、浸提时间为8．0min,颗粒粒度为40目,微波功率为600W,此条件下黄酮的浸提率为99．42％;高于常规回流4h。结论：微波辅助提取技术应用于黄芩黄酮的提取具有省时、高效、节能等优点。     

黄芩黄酮对肉仔鸡营养物质消化率和生长性能影响

探讨黄芩黄酮对肉用仔鸡主要营养物质代谢率以及生长性能的影响。选择1日龄AA肉仔鸡500只,随机分为5个处理,每个处理5个重复,每个重复20只,分别在基础饲料中添加0、5、10、15和20 mg/kg黄芩提取物黄芩黄酮,试验期为49 d。测定各组营养物质代谢率和生长性能指标。结果表明,在0-3周龄,黄芩黄酮可提高肉仔鸡干物质和表观代谢率,3-7周龄,肉仔鸡干物质和表观代谢率降低;在3-7周龄,粗蛋白和粗脂肪代谢率最高的是20 mg/kg黄芩黄酮添加组,分别比对照组提高4.47%和2.12%,差异不显著(P>0.05);在0-3周龄,黄芩黄酮对钙的代谢影响显著(P<0.05),效果最好的是10 mg/kg黄芩黄酮添加组,比对照组提高17.32%,对磷的代谢影响不显著。10 mg/kg黄芩黄酮添加组可明显提高肉仔鸡49日龄平均体重、平均日增重、并降低料肉比(P>0.05)。由此可知,饲料中添加适量的黄芩黄酮在一定程度上可以提高肉鸡对营养物质的代谢,增加对钙的吸收,降低料肉比,提高生长性能,其中10 mg/kg添加量效果较好。     

黄芩抗鸡大肠杆菌作用的研究

通过体外试验和体内试验两种方法研究了黄芩抗鸡大肠杆菌的作用。结果表明，黄芩水煎液对鸡大肠杆菌的最小体外抑菌浓度为2．5g／mL；当药物浓度为5g／mL时可使7日龄雏鸡获得90％以上的攻毒保护；药物浓度为10g／mL时可使100％雏鸡获得攻毒保护，说明黄芩可以对抗鸡大肠杆菌，用于防治鸡的大肠杆菌病。     

当归总黄酮提取工艺及体外抗氧化性研究

目的：探讨当归中总黄酮的提取工艺及抗氧化性。方法：在单因素实验的基础上,采用L9（34）正交试验,通过亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法测定当归总黄酮的含量,并对提取液采用Feton体系、邻苯三酚自氧化体系、普鲁士兰法进行体外抗氧化活性研究。结果：当归中总黄酮的最佳提取工艺：提取温度为80℃,乙醇浓度为75%,提取时间为3.5 h,料液比为1∶30。在最佳提取工艺条件下,当归中总黄酮提取量为9.4642 mg/g。所得提取液总黄酮浓度为0.068 mg/mL时,对羟基自由基清除率可达到74.02%;浓度为0.034 mg/mL时,对超氧阴离子抑制率可达51.79%。结论：采用该方法提取当归总黄酮,回收率高,精密度好,加标回收率99.51%,相对标准偏差RSD 4.04%（n=5）。所得提取液对羟基自由基、超氧阴离子均有较强的清除效果,且清除效果与提取液总黄酮浓度呈明显量效关系。     

基于中草药提取方法差异对鸡源变形杆菌的体外抑菌作用比较

为探究中草药提取液对临床分离鸡源变形杆菌抑菌效果,本试验对野菊花、穿心莲等9种中草药,采取水提法和醇提法提取中草药的有效成分,并采用试管二倍稀释法测定中草药提取液对鸡源变形杆菌的最小抑菌浓度(MIC),采用微量肉汤稀释棋盘法对抑菌效果较佳的黄芩等5种水提液与虎杖等3种醇提液分别进行体外联合药敏试验,测定其FIC指数。结果表明:水提液中,黄芩抑菌效果最佳,MIC为62.5 mg/mL,穿心莲、虎杖、黄连、香薷次之,MIC均为125 mg/mL;醇提液中,虎杖、穿心莲、香薷抑菌效果较好,MIC均为125 mg/mL;体外联合药敏试验中,本试验各组合均无协同作用;说明黄芩水提液对鸡源变形杆菌抑菌效果最佳,其余药物水提液抑菌效果一般或较差;醇提取液抑菌效果为一般或较差;本试验各联合用药的效果不佳。     

黄芩抗鸡大肠杆菌作用的研究

通过体外和体内两种方法研究黄芩抗鸡大肠杆菌作用.通过体外抑菌作用测定黄芩水煎液对鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）为2.5g/ml;体内抑菌作用通过对7日龄雏鸡的攻毒与治疗试验来研究,体内治疗药物浓度5g/ml可使90%以上雏鸡获得保护,10g/ml可使100%雏鸡获得保护.以上说明黄芩可以对抗鸡大肠杆菌,可以防治鸡的大肠杆菌病.     

黄芩黄酮对肉仔鸡生长性能和肠道菌群的影响

试验旨在探讨不同添加水平黄芩黄酮对肉仔鸡生长性能和肠道菌群的影响。选择500只1日龄AA肉仔鸡,采用单因子设计随机分为5个处理,每个处理5个重复,每个重复20只鸡,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础饲料基础上分别添加5、10、15、20 mg/kg黄芩黄酮,进行为期49 d的饲养试验。分别于第21、35、49天时称重,计算平均体重、日增重、料重比,于实验结束时采集肠道内容物,测定肠道微生物菌群数量。结果表明,各处理组平均体重较空白对照组均有所增加,其中10 mg/kg添加组最高(P>0.05),5 mg/kg添加组显著提高日采食量(P<0.05),对F/G和ADG影响不显著(P>0.05)。49日龄时,各试验组与对照组相比,大肠杆菌和沙门氏菌数量显著降低(P<0.05);乳酸杆菌(需氧)和双歧杆菌数量均高于对照组(P>0.05)。由此可知,日粮中添加适量黄芩黄酮在一定程度上可以促进肉仔鸡生长,改善肠道微生物菌群,其中添加10 mg/kg黄芩黄酮效果较好。     

葛根、枳椇子解酒组合物体外抗氧化活性的研究

为研究葛根、枳椇子解酒组合物抗氧化活性,以葛根素及总黄酮含量计,设定葛根、枳椇子11组不同配比组合物,以乙醇脱氢酶(ADH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性为指标确定葛根、枳椇子最优配比解酒组合物,以维生素C为对照,研究最优配比组合物对DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和总还原力的影响。结果表明,葛根提取物中葛根素含量为72.24mg/g;枳椇子提取物中总黄酮含量为101.15mg/g;11组不同配比组合物对ADH和SOD活性均具有促进作用,当葛根和枳椇子配比为8∶2时,ADH和SOD活性最高;葛根、枳椇子组合物能增强DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力及总还原力,前两者IC50分别为0.038mg/mL、0.697mg/mL,总还原力最高为1.171。说明以葛根素及总黄酮含量计,葛根、枳椇子解酒组合物最佳配比为8∶2,最优配比组合物具有明确的体外抗氧化活性,研究结果为葛根、枳椇子组合用于解酒及抗氧化提供科学依据。     

岩陀黄酮与黄芩多糖复合物安全性评价

为探讨中药岩陀黄酮与黄芩多糖复合物的药用安全性,为其开发利用提供科学依据,开展大鼠经口急性毒性试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、小鼠精子畸形试验和骨髓细胞微核试验,对岩陀黄酮&黄芩多糖提取物进行安全性评价。结果显示岩陀黄酮与黄芩多糖复合物对大鼠的经口染毒LD50>5g/kg·BW,为无毒级别,大鼠无临床症状,未发现明显可见的病理变化;两次鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验表明无致突变性;小鼠精子畸变率为1.99%-2.06%,高中低三个剂量组的精子畸形率与阴性对照组比较差异不显著（p＞0.05）;骨髓细胞微核率高、中、低三个剂量组与阴性对照组比较差异不显著（p＞0.05）。结论：岩陀黄酮与黄芩多糖复合物作为中兽药安全性较好。