鸭血清IgG的提纯方法比较

本文对鸭血清分别采用了硫酸钠法、辛酸-硫酸铵法、硫酸铵法进行了鸭IgG的提取。提取后的鸭IgG样品用纯度和蛋白含量两个指标来衡量。用辛酸-硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.45mg/ml,纯度能达到用于免疫标记技术的要求,而且操作简单、价格低廉,适于从大批量样品中提纯鸭IgG;用硫酸钠法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.14mg/ml,相对较高,但纯度较低;用硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量、浓度都较低。     

应用辛酸硫酸铵法提取纯化兔IgG

血清中IgG的提取和纯化方法很多,但是各有其优点与不足。单一辛酸法和硫酸铵法操作简单但提取的IgG纯度不高,柱层析可获得高纯的抗体,但成本很高,而且回收率低。本试验应用辛酸硫酸铵法提取和纯化兔抗粪肠球菌血清中的IgG,取得比较理想的结果,现报告如下:1材料与方法1.1材料1.1.1血清:兔抗肠球菌血清(自制)。1.1.2主要药品及仪器:正辛酸(天津市化学试剂一厂),硫酸铵(西安化学试剂厂),凝胶成像系统SYDR2/1779,DYY-6B型稳压稳流电泳仪,透析袋(购自华美公司),UV-754型紫外分光光度计。1.1.3试验动物:健康家兔4只(由石河子大学实验动物中…     

鸡IgG快速分离纯化和纯度鉴定

随着免疫学实验技术的普及和发展,从鸡高免血清中提纯IgG已成为常用的免疫化学技术. 在提纯鸡IgG过程中,不但要保证除去绝大多数杂蛋白和白蛋白,保留大多数免疫球蛋白,包括各种IgG亚类,而且又不影响IgG生物活性.这就需要一种好的提纯方法,既要保证IgG纯度,又要保证其生物活性. IgG的经典提纯法是先用硫酸铵盐析,得到粗制的Ig(Immoun-globulin)然后再经分子筛层析,离子交换层析,亲和层析等方法进一步分离纯化IgG.这些纯化方法需要一定的仪器、设备,操作复杂,工艺流程较长,且试剂昂贵,在一般实验室难以推广使用.而且辛酸-硫酸铵两步法提纯的IgG同样能得到高纯度、高生物活性的IgG.     

血清免疫球蛋6G提取方法的比较研究

我国是猪的生产大国，猪血的产量很大，而对猪血的应用非常有限，主要用作饲料和废物。在猪血中存在大量的活性物质，如免疫球蛋白、转移因子、胎球蛋白等，这些物质对致癌基因转化、生长启动、抵抗疾病有重要作用。猪血中由于基础免疫的作用，每一头猪的血液中都存在着大量的抗体，如果能把这些抗体提取和纯化，能有效地治疗各种传染病，同时也能对猪血加以开发利用。从血液中提取免疫球蛋白，     

高免鸡蛋卵黄囊抗体的提取与纯化

本文用辛酸-硫酸铵盐析法从经过鸡新城疫和鸡传染性法氏囊高免的卵黄中提取二联抗体-IgG,提取液首先用琼脂凝胶沉淀试验检测鸡传染性法氏囊抗体和鸡新城疫抗体,并通过血液凝集试验和血液凝集抑制试验测定鸡新城疫抗体的血凝抑制滴度。结果表明,所提取的二联抗体对鸡新城疫和鸡传染性法氏囊抗原具有明显的特异性。     

卵黄抗体三种提取方法的比较研究

运用硫酸铵法、聚乙二醇(PEG)法、冷乙醇法对卵黄抗体进行提取,并使用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定所得卵黄抗体的特异性,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测其纯度,用Nanodrop2000测其蛋白浓度并计算提取量,比较三种方法所得抗体的特异性、纯度和提取量。结果显示,三种提取方法所得卵黄抗体特异性高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;纯度高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;三种方法的提取量高低依次为PEG法、硫酸铵法、冷乙醇法。经综合分析与评价,硫酸铵法的抗体特异性较好、纯度较高、提取量也较高,且其操作方法相对简便,是比较具有优势的提取方法。     

一种快速提纯兔抗鸡EDS—76病毒IgG的方法

本试验采用辛酸加硫酸铵沉淀二步法提纯兔抗ＥＤＳ－６病毒血清中的ＩｇＧ。在０．０６Ｍ醋酸盐缓冲液（ｐＨ４．８）稀释的血清中,每ｍｌ血清滴入３３μｌ辛酸时,非ＩｇＧ类蛋白可被基本除去,利用本法提纯的ＩｇＧ,免疫活性和生物活性不发生改变,该方法简便,快速,节约试剂,所获ＩｇＧ纯度高,活性好,适用于大批量样品中提纯ＩｇＧ。     

小鼠腹水IgG类单克隆抗体纯化方法的研究

分别采用辛酸硫酸铵法(CA AS)、硫酸铵沉淀法(AS)和DEAE离子交换层析法对小鼠IgG腹水进行了纯化效果的比较。结果表明:CA AS法提取IgG的纯度为67.5%,高于AS法(43.2%),低于DEAE法(100%);CA AS法提取IgG的回收率为51.2%,远高于DEAE(8.9%),略低于AS法(63.8%)。将不同纯化方法获得的IgG定容至相同浓度。ELISA试验结果表明:DEAE法的OD值明显降低,表明DEAE纯化方法降低了IgG的免疫学活性。说明CA AS法是一种操作简单、成本低、纯化效果和回收效果较佳的提取小鼠腹水IgG的首选方法。     

两种方法纯化免抗绵羊肺炎支原体IgG的比较

目的:比较两种方法纯化兔抗绵羊肺炎支原体IgG的效果。方法:采用饱和硫酸铵和辛酸-硫酸铵两种方法分离纯化兔抗绵羊肺炎支原体抗体,并用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、分光光度计和琼脂扩散(AGP)试验对纯化产物进行相对分子质量、蛋白质含量及免疫活性进行鉴定。结果:纯化后抗体的蛋白含量基本相同;产物纯度和效价以辛酸-硫酸铵法较高。结论:辛酸硫酸铵法是一种简便、快速、高效的抗体纯化方法。     

不同方法提取卵黄抗体效果的比较

为了优化卵黄抗体提取工艺以及产业化生产提供技术参考,从众多方法中初步筛选了较为适宜的水稀释法、辛酸法、乙酸-乙酸钠法、酚沉淀法和海藻酸钠法,并比较了5种方法的提取工艺、生产成本、卵黄抗体提取量及其效价。试验结果表明,辛酸法的提取液体回收率最高,达到171％;辛酸法提取蛋白的浓度最高,为6．6mg／mL;辛酸法和海藻酸钠法提取卵黄抗体的凝集价最高,为1：128。综合各种因素考虑,辛酸法是提取卵黄抗体较为理想的方法。     

鸡新城疫卵黄抗体提取方法筛选研究

卵黄抗体(IgY)是指禽类(鸡、鸭、鹅)卵黄中存在的抗体,有凝集细菌、中和病毒等功能,均一性好,对热、酸和碱稳定性好,产量高,成本低等利于生产、产生有效免疫反应所需抗原量小、免疫检测时有较高的敏感性、无副作用、性质稳定等优点,因此在动物疾病诊断、防治上具有重要作用。目前文献报道的卵黄抗体提取方法有多种,提取效果各不相同。本文通过对三种方法的比较,发现它们各有公有优缺点。     

鸭IgG的研究进展及Fc段的遗传进化分析

IgG(IgY)是鸭卵黄中的唯一免疫球蛋白。根据GenBank发表的鸭的IgG Fc段的核苷酸序列、氨基酸序列,和多种动物进行遗传进化分析。得出鸭与鸡的核苷酸同源性分别为67.9%,与其他所列哺乳动物的核苷酸同源性集中在40%～52%之间。鸭与鸡的氨基酸同源性57.5%,与其他所列哺乳动物的氨基酸同源性集中在34%～43%之间。进化树结果显示鸭的IgG Fc段基因与鸡此段基因具有较近的亲缘关系。     

两种卵黄抗体不同提取方法的比较试验

卵黄抗体(Ig Y)具有许多其他类型抗体所没有的优点,其分离纯化的方法有有机物抽提法、盐析法、水稀释法等。试验分别用聚乙二醇(PEG)6000和氯仿来提取卵黄抗体,对其收集的抗体量和抗体效价进行比较分析。结果表明:100 g的卵黄用PEG6000法比氯仿法多收集71 m L卵黄抗体溶液,且PEG6000法的成本远远低于氯仿法,有很好的经济效益,而PEG6000法提取的卵黄抗体效价比氯仿法略低一个滴度。     

介绍一种快速提取免疫球蛋白G的方法

介绍一种快速提取免疫球蛋白Ｇ的方法吴健敏，袁书智，贺荣莲广西区兽医研究所５３０００１目前，提取免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）常用的方法有饱和硫酸按盐析法、离子交换层析法、凝胶过滤法、亲和层析法等，这些方法往往操作繁琐、费时费力，对ＩｇＧ活性影响较大。现介绍一...     

卵黄抗体的提取方法

自从 18 93年Klemperer首次报道鸡蛋中存在抗体以来 ,科学家们对各种抗原 (细菌、病毒等 )引起的产蛋鸡产生特异性抗体 ,并可被选择性转移到卵黄中进行了许多研究。结果发现蛋黄中抗体以IgG占优势 ,而IgM和IgA的含量很少。现已证明了免疫鸡的蛋是提供特异性IgG抗体的最方便、最廉价的来源。1　卵黄抗体的性质IgY的命名一直是一个有争议的问题。在 2 0世纪 6 0年代 ,Tenenhouse曾认为正常鸡IgG与哺乳动物IgA相似。但随着科学研究发展 ,Leslie等分析了鸡体内免疫球蛋白的成分。鸡卵黄免疫球蛋白G抗体是一种TS球蛋白 ,命名为IgY。目前…     

鸭、鹅卵黄免疫球蛋白提取的比较研究

以氯仿抽提法提纯鸭、鹅卵黄免疫球蛋白,免疫电泳分析纯度,SDS-PAGE分析成分和含量并将二者进行比较,以琼脂扩散测定二者间及其与鸡IgY、猪IgG、牛IgG、鼠IgG间抗原性交叉情况。结果表明:鸭、鹅卵黄免疫球蛋白均由IgY和IgY(△Fc)组成,二者IgY和IgY(△Fc)的含量比分别为3∶1和12∶1;鸭、鹅卵黄免疫球蛋白间较二者与鸡IgY间抗原性交叉低。     

卵黄抗体不同提取方法的比较

卵黄抗体(egg yolk antibodies,IgY)是指鸡、鸭、鹅等蛋禽卵黄中存在的抗体,也称卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulins,IgY)[1].从含高效价抗体的禽蛋黄中提取、制备的IgY在人类和动物疾病的防治中具有特效作用.IgY具有均一性好,对热、酸和碱稳定性好等优点.蛋黄含有丰富的营养物质,是细菌生长的良好培养基,易使蛋黄抗体腐败变质.因此,精制蛋黄抗体的大规模工业化生产必须解决提取纯化这一关键难题.试验比较了4种成本低和提取率高的提取方法,以期得到理想的IgY提取方法,为今后的生产实践提供科学的依据.     

一种快速提纯兔抗鸡EDS-76病毒IgG的方法

本试验采用辛酸加硫酸铵沉淀二步法提纯兔抗ＥＤＳ－７６病毒血清中的ＩｇＧ。在０．０６Ｍ醋酸盐缓冲液（ｐＨ４．８）稀释的血清中,每ｍｌ血清滴入３３μｌ辛酸时,非ＩｇＧ类蛋白可被基本除去。利用本法提纯的ＩｇＧ,免疫活性和生物活性不发生改变。该方法简便、快速、节约试剂,所获ＩｇＧ纯度高、活性好,适用于从大批量样品中提纯ＩｇＧ。     

两种方法纯化猪血清免疫球蛋白IgG的比较

为了从猪血清中纯化免疫球蛋白IgG,得到纯度更高的样品,采用饱和硫酸铵分级沉淀和Protein G柱吸附分离两种方法进行纯化,将获得的IgG经SDS-PAGE凝胶电泳纯度鉴定和HPLC浓度测定,结果表明,利用Protein G柱吸附分离纯化出的样品在纯度和浓度方面都要高于盐析法,Protein G柱吸附分离纯化IgG更适合于实验室小规模的操作,能够获得纯度高的样品。