山东省部分地区鸡大肠杆菌的菌株分离与耐药性分析

对来自山东省部分发病区的10株鸡大肠杆菌分离株，按Kirby－Bauer法（纸片扩散法）进行了药敏试验研究。结果表明，丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素、庆大霉素等对鸡大肠杆菌为最佳高敏药。     

不同地区鸡大肠杆菌菌株分离与耐药性试验

对来自不同地区的10株鸡大肠杆菌分离株，用纸片扩散法进行了药敏试验，结果表明，丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素，庆大霉素等对鸡大肠杆菌为最敏感药。     

鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

对鸡大肠杆菌进行分离鉴定,分离出的56株大肠杆菌中,共鉴定出47株菌株的血清型,分属O1、O2、O5、O35、O78、O1116种不同O抗原血清型,占分离菌株的83．9％。其中O1、O2、O78、O111最常见,占已定型菌株83％。同时,进行了药敏试验,为药物防治提供依据。     

鸡大肠杆菌菌株的分离鉴定与药敏试验

2001年、2002年从济南周边县分离了16株鸡致病性大肠杆菌，对它们进行了生化鉴定和药敏试验，并与标准株O1、O2、O78相对照，发现该地区鸡的大肠杆菌对临床上常用的喹诺酮类药物产生了明显的耐药性，但与两年前有了明显的好转。同时还发现引起该地区鸡发病的大肠杆菌对丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素等药物最为敏感。     

鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性检测

以扬州市的65个规模化养殖场为观察对象,分离培养1180个样品,共获得839株鸡大肠杆菌,分离率达70.89%。通过微量肉汤稀释法对9种常用抗菌药物进行耐药性测定,结果表明,各类药物均具有不同程度的耐药性。其中,大观霉素和多粘菌素E的耐药率较低,而复方新诺明、氟苯尼考和土霉素的耐药率则偏高,均超过80%。提示鸡大肠杆菌对于常用的抗菌药物均存在不同程度的耐药性。     

山东省部分地区鸡源大肠杆菌耐药性监测分析

采用药敏纸片扩散法,检测了2008～2012年于山东省不同地区鸡场临床分离鉴定的96株大肠杆菌对23种抗生素的耐药性.结果表明:96株大肠杆菌均出现不同程度的耐药性,其中对哌拉西林、利福平的耐药率最高(均在90％以上),其次对头孢拉定、头孢唑啉和四环素的耐药率也较高(均在84％以上),同时这些菌株对头孢吡肟、头孢他啶、阿米卡星的敏感率较高,其中对头孢西丁的敏感率最高(78.125％).通过所得的药敏试验结果可以在一定程度上指导临床用药.分析不同年份、不同地区菌株的耐药情况,有助于对大肠杆菌耐药性趋势进行预测.     

山东省鸡大肠杆菌部分流行菌株的分离鉴定

鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏杆菌某些血清型菌株所引起的一类疾病的总称，是危害养鸡业的一种重要传染性疾病。为摸清该病在本地区流行情况、血清型和耐药性特点等，我们对具有代表性地区的养鸡场进行了调查，从部分发病肉鸡分离到若干株具有典型特征的大肠杆菌，并做血清学鉴定、药敏试验，并对较少见的菌株进行致病性动物实验，以为更右效防治该病提供依据．     

鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性研究

2008～2010年在辽宁地区共采集990份鸡泄殖腔拭子样品,分离鉴定出380株大肠杆菌,用10种抗菌药物进行药敏试验。结果表明,2008年分离的大肠杆菌耐药性较轻,对氨苄西林和恩诺沙星的耐药率为74.60%和57.14%;2009年和2010年分离的大肠杆菌耐药性非常严重,对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、四环素、磺胺异噁唑、复方新诺明和恩诺沙星的耐药率均大于80%,多重耐药性严重。     

鸡大肠杆菌地方菌株的分离鉴定与耐药性测定

该试验对河南地区分离的17株细菌经培养特性及生化试验,鉴定为大肠杆菌。用临床上常用的12种抗菌素纸片对分离菌株进行药敏试验。结果表明,头孢唑啉、庆大霉素、卡那霉素等对鸡大肠杆菌抑菌效果较好。而对杆菌肽、复方新诺明、四环素及青霉素具有耐药性,特别是对杆菌肽及复方新诺明其耐药率分别达到了100%和94.12%。     

山东省鸡大肠杆菌的分离鉴定

为确定我省流行的鸡大肠杆菌血清型，为研制鸡大肠杆菌灭活疫苗提供相对应的菌株，我们从全省17个地市的56个种鸡场及商品鸡场。分离出210株鸡源大肠杆菌，根据血清型鉴定结果，共有15个血清型，其中O78O、O143、O15、O2、O18、O11最常见，致病力效强，O18、O78、O2分离率最高，分别为15.8%、12.5%、6.8%，其中O18在国内报道较少。药敏试验结果表明，所分离大肠杆菌对丁胺卡那霉素、氧氯沙星、培氟沙星、环丙沙星的抑菌作用最强，高敏菌株达75%-96%；氯霉素、新霉素、庆大霉素、蒽诺沙星敏感性局中，敏感菌株在50%-60%之间；青霉素、痢特灵、强力霉素、磺胺-5-甲氧嘧啶抑菌作用较低，敏感菌株低于20%。     

山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中bla_TEM基因携带率为100%,其中全部为bla_TEM-1基因,bla_CTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为bla_CTX-M-15基因,没有检测到bla_SHV、bla_OXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac（6'）-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。     

山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

试验旨在了解山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的污染状况及耐药情况。选择山东省3个地区的规模化奶牛场共采集227份牛奶样品,采用细菌学方法对大肠杆菌进行分离鉴定,用微量肉汤稀释法检测分离菌对11种常规抗菌药物的敏感性,采用PCR方法对常见的13种耐药基因、8种毒力基因和Ⅰ类整合子基因盒结构进行分析。结果显示,从227份牛奶样品中共分离出71株大肠杆菌;大肠杆菌对1种及1种以上抗菌药耐药的菌株达到77.5%,多重耐药率为15.5%,其中对多黏菌素耐药率为52.2%,对阿莫西林-克拉维酸耐药率为39.4%,而所有菌株均对新霉素表现为敏感。PCR检测耐药基因、毒力基因和Ⅰ类整合子结果显示,β-内酰胺类耐药基因中blaTEM基因携带率为100%,其中全部为blaTEM-1基因,blaCTX-M基因携带率为32.4%,其中主要为blaCTX-M-15基因,没有检测到blaSHV、blaOXA基因;多黏菌素的耐药基因mcr-1携带率为29.6%;喹诺酮类耐药基因中aac(6’)-Ⅰb-cr基因携带率为29.6%,qnrB基因携带率为20.8%,没有检测到qnrA和qnrC耐药基因;对8种毒力基因检测分析结果显示,仅Hly毒力基因没有被检出,Ecs3703、Irp2基因的检出率较高,分别为90.1%和63.4%,71株大肠杆菌中共有11株携带Ⅰ类整合子,检出率为15.5%,11株大肠杆菌携带6种耐药基因盒结构,最主要的耐药基因盒排列为dfr17-aadA5。本研究结果表明,山东地区乳房炎牛奶中大肠杆菌的耐药现象严重,携带毒力基因Ecs3703、Irp2的大肠杆菌可能是引起奶牛乳房炎的致病菌,Ⅰ类整合子的检测在细菌耐药性与基因携带率方面发挥着关键作用,可为临床预防和治疗奶牛乳房炎大肠杆菌病提供理论依据。     

Resistance of E.coli from Fur-bearing Animals to Fluoroquinolones and Compound Chinese Medicine

The aim of this study was to investigate the resistance to fluoroquinolones and compound Chinese medicine, and control colibacillosis in fur-bearing animals.14 E.coli strains isolated from diseased fur-bearing animals were detected by PCR for the fluoroquinolone-resistant gyrA gene,and then the PCR fragment of gyrA gene was cloned,sequenced and analyzed for homology.Afterwards,the fragment was labeled with digoxigenin as DNA probe for dot-blot hybridization detection.The resistance to compound Chinese medicine was detected by Oxford-cup tests.The results demonstrated that the positive rates of PCR and dot-blot hybridization were 57.1% and 50.0%,respectively.Only 28.6% of the E.coli strains were resistant to compound Chinese medicine.The results indicated that the resistance to fluoroquinolones in E.coli strains from fur-bearing animals was severe,however,the isolates were much more sensitive to compound Chinese medicine.The results would provide basis for control of colibacillosis of fur-bearing animals.     

毛皮动物大肠杆菌对氟喹诺酮类药物及中药的耐药性研究

本试验旨在了解毛皮动物源大肠杆菌的耐药性,有效控制毛皮动物细菌病的发生.针对14株分离自毛皮动物的大肠杆菌,采用PCR方法检测氟喹诺酮类耐药基因gyrA的携带情况,并对扩增得到的gyrA基因进行克隆测序和同源性分析;进一步针对gyrA基因制备地高辛标记的核酸探针,使用斑点杂交检测大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药情况;使用牛津杯法检测了大肠杆菌分离株对复方中药的敏感性.结果显示,PCR检出gyrA基因的阳性携带率为57.1%,斑点杂交检出耐氟喹诺酮类大肠杆菌的阳性率为50.0%,对复方中药的耐药率为28.6%.结果表明,毛皮动物对氟喹诺酮类药物的耐药性非常严重,对中药表现较高的敏感性,研究结果将为临床毛皮动物大肠杆菌病的防制提供依据.     

活禽产业链中大肠杆菌耐药性及耐药基因调查

为了解家庭农场供货模式下"养殖-销售"活禽产业链中各环节大肠杆菌耐药性及耐药基因流行情况,本研究共采集132份来自自贡市沿滩区某一农贸市场及其活禽供货的33家家庭农场的样品,通过细菌分离纯化、形态学鉴定、特异性引物PCR检测、系统发育群PCR检测、药敏试验及耐药基因鉴定等方法对细菌特性进行分析。研究结果显示,83株分离株在伊红美蓝培养基上形成带有金属光泽的黑色菌落,镜检显示为革兰阴性短杆菌,且特异性引物检测结果均显示阳性,因此,确定83株分离株均为大肠杆菌。系统发育群鉴定结果发现,83株分离株系统发育群集中于A群（53.02%）及B1群（20.48%）;药敏试验结果显示,83株菌株均为多重耐药菌,其中硫酸黏杆菌素、四环素耐药率最高,均为100%,氨苄西林、头孢呋辛、氨曲南、氟苯尼考耐药率均超过90%;耐药基因结果显示,mcr-1、mcr-3、bla_TEM、bla_SHV、bla_{CTX-M-group 1}、bla_{CTX-M-group 9}、qnrS、aac（6'）-Ⅰb-cr、tetA和tetB等耐药基因均有检出,检出率均低于对应抗菌药的耐药率,符合预期结果。此外,统计结果显示,家庭农场细菌耐药率和耐药基因携带率低于农贸市场。本研究结果表明,农贸市场成为活禽产业链中耐药菌及耐药基因的集散地,可为指导禽大肠杆菌临床检测、诊断及合理用药提供试验依据,同时为评估活禽产业链耐药性传播风险提供可靠数据。     

规模化鸡场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性监测

为了对鸡致病性大肠杆菌的流行情况及耐药性调查分析,从山东省部分地区的60个鸡场采集了116份鸡内脏病料,结合培养特性对其进行了细菌的分离和生化鉴定,结果分离到大肠杆菌95株,其中致病性大肠杆菌76株。对这76株致病性大肠杆菌进行了12种抗生素敏感性试验,发现分离的菌株对12种药物均有不同程度的耐药性,青霉素对其完全没有抑制作用;新研制的利福平复合新药抑制作用最强,64.5%为高度敏感(49/76),34.2%中度敏感(26/76),表明该药对鸡大肠杆菌具有显著的效果;其中,丁胺卡那霉素(63.2%)、氟哌酸(55.3%)也有良好的抑菌作用。     

山东省部分地区禽源致病性大肠杆菌的血清流行病学调查与耐药性检测

为调查山东省禽源致病性大肠杆菌流行的血清型及耐药性,从山东部分地区的45家养禽场分离到致病性大肠杆菌96株,应用微量平板凝集试验进行了血清型鉴定,共鉴定出18种血清型,其中优势血清型6种,分别为O78、O2、O15、O18、O143、O88,占定型致病性菌株的64％。抗菌药物敏感性试验发现,96株大肠杆菌对20种药物有不同程度的耐药性。75％以上的菌株对氨苄青霉素、阿莫西林、土霉素等5种抗菌药耐药,50％以上的菌株对卡那霉素、多西环素、环丙沙星等7种抗菌药表现为耐药;所有分离株存在多重耐药现象,75％的受检菌对9种或9种以上的被测药物耐药。结果表明,O78、O2、O15、O18、O143、O886种血清型是山东省部分地区近年来禽源致病性大肠杆菌的优势血清型,且禽源致病性大肠杆菌的耐药现象严重,有必要加强耐药性检测,以指导兽医临床合理使用抗菌药物。     

鸡源大肠杆菌的耐药性监测及生物学特性研究

从山东省诸城地区6个集约化养鸡场采集50只病死鸡病料,从中分离鉴定得到32株大肠杆菌,对其进行了12种常规药敏试验,发现分离的菌株有不同程度的耐药性。对14株优势血清型菌株进行了质粒DNA提取分析,然后用Hind Ⅲ限制性内切酶对质粒进行了酶切。结果表明,质粒的得率为100%,来源相同的菌株具有相同或相似的质粒图谱,也就是说它们有共同的起源;来源不同的菌株的质粒图谱一般不同,即有不同的起源。将血清型和质粒图谱比较,结果发现,同一血清型可以有不同的质粒图谱,不同血清型可以有相似的质粒图谱,血清型与质粒图谱没有直接的联系。     

犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测

为了分析南京地区奶牛场犊牛腹泻的原因,对犊牛腹泻病料进行细菌分离培养,获得了27株细菌。本试验对这些细菌进行了培养特性、染色特性、生化特性、血清型鉴定、药敏试验和TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-9型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因的检测。结果显示27株细菌均为大肠杆菌,只有1株细菌对头孢噻吩、头孢唑啉和头孢呋辛耐药,且此菌株检测出CTX-M-1型超广谱β-内酰胺酶基因。试验结果表明犊牛腹泻是由大肠杆菌引起的,犊牛腹泻大肠杆菌能产生CTX-M-1型超广谱β-内酰胺酶,导致对头孢类抗生素耐药性的发生。