无菌接种器“三不型”

无菌接种器「三不型」湖北宜昌４０３菌所工程师胡文华，最新发明研制成功一种不用电、不用药物、不用酒精消毒且可开放接种的“三不型”食用菌无菌接种器，已获得国家专利（专利号：９６２０４０６１４）。该接种器由无菌净化装置和操作台嵌锁配组。运作时可随机在操作台...     

可开放接种的新型食用菌无菌接种器

湖北省宜昌市三峡技协食用菌专家组胡文华先生,继"食用菌无菌接种器"得国家专利(专利号:ZL96204061.4)之后,日前又研制成功一种新型的可开放接种的食用菌无菌接种器.     

新型食用菌无菌接种器研制成功

湖北省宜昌市三峡技协食用菌专家组专家胡文华,继"食用菌无菌接种器"获得国家专利(专利号:ZL96204061.4)之后,日前又研制成功一种可开放接种的新型"食用菌无菌接种器".     

松材线虫及携带细菌对黑松复合的侵染

从不同松树上分离松材线虫、拟松材线虫、滑刃线虫和小杆线虫,并从松材线虫和小杆线虫体上分离细菌,将线虫无菌化处理后与从线虫体上分离到的荧光假单胞杆菌、产气肠杆菌混合接种无菌黑松苗和愈伤组织。结果表明,单独接种无菌线虫或细菌不能使黑松致病,无菌松材线虫、无菌拟松材线虫只有与有毒性的荧光假单胞杆菌混合接种时才能使黑松无菌苗和愈伤组织发病,细菌通过线虫携带在树体内传播扩散,使松树致病。研究进一步证明了线虫和细菌在松材线虫病致病过程中起协同作用。     

降低组织培养成本研究——果酱瓶代替烧杯作接种器械冷却支架试验

在组织培养接种过程中，用空的无菌果酱瓶和灼烧灭菌后的烧杯做接种器械冷却支架，进行对比试验。结果表明：空的无菌果酱瓶做接种器械冷却支架，污染率低，操作方便，还可以节省操作时间，比传统的酒精灯灼烧烧杯作冷却支架更节省成本，是降低组织培养成本的一条可行途径。     

棉花无菌苗培养条件的探讨

以棉花(Gossypium hirsutum L.)种子为试验材料,对无菌苗培养前种子消毒和接种的最佳条件进行了研究。结果表明,棉花种子消毒的最佳条件为1.0 g/L升汞消毒5 min或50.0 g/L次氯酸钠消毒15min,无菌水冲洗5～6次,无菌水浸泡24 h,倒掉瓶中的无菌水后换上新的无菌水继续浸泡至种子露白约3～4 mm,手捏种子的子叶端挤掉种皮,胚根端接触培养基的方式接种至MS基本培养基。     

松材线虫携带的一株细菌分离及其致病性

从患松材线虫病致死的黑松和马尾松病树组织及松褐天牛虫体中分离的松材线虫虫体上均分离到同一细菌菌株 .经致病性、革兰氏染色、菌体形态、培养性状和生理生化反应等测定 ,将致病菌株鉴定为洋葱伯克霍尔德氏菌 .ATBExpression自动鉴定仪的鉴定结果与上述结果相同 .在分离过程中该菌出现频率较高 ,说明是松材线虫携带的主要细菌 .人工接种试验结果显示 ,用无菌线虫或洋葱伯克霍尔德氏菌菌株分别接种的黑松无菌苗不发病 ,而用二者混合接种则使无菌苗迅速发生褐变和萎蔫 .林间利用 6年生黑松进行的接种试验结果证明 ,用无菌松材线虫和洋葱伯克霍尔德氏菌菌株混合接种的黑松与使用野生松材线虫接种的黑松都 10 0 %的患病 .单独用无菌松材线虫接种有 4株发病 ,6株没有发病 .其中发病黑松中不仅分离到了松材线虫 ,也分离到了细菌 ,而没有患病的 6株黑松中仅分离到少量松材线虫 .这说明在野外条件下接种的松材线虫可以通过某种途径重新获得细菌 ,导致了接种的黑松患病 .而接种后无菌松材线虫没能获得细菌的那些黑松就没有患病 ,说明单独无菌松材线虫不能使黑松患病 .这些结果说明松材线虫携带的细菌与松材线虫的致病性有关 .因此 ,可以把松材线虫病看作是线虫和细菌共同侵染引起的一种植物复合侵染病害 .在这     

玉米联合固氮工程菌Enterobacter gergoviae E7在田间的接种效应

 在黑龙江省以及吉林省适宜的农田管理条件下 ,连续 3年田间小区接种试验证明 ,接种联合固氮工程菌 E7( Entrobacter gergoviae E7)对玉米的增产、节肥效应都优于接种野生型菌 ,但增产幅度随土质不同有很大差异。在贫瘠的白浆土、砂壤土中 ,在相同施肥水平下 ,接种工程菌 E7比无菌载体平均增产 1 2 .3%,比接种野生型菌平均增产 8.8%;在相同产量水平下 ,接种工程菌比无菌对照节省氮肥 1 5%～ 2 0 %,比接种野生型菌节省氮肥 1 5%。而在草甸黑土中接种效应不明显。     

松材线虫对其携带的一株致病细菌产毒的影响

该文报道了以黑松细胞为材料的一种改进的细胞荧光染色显微生测法.用该方法测定了接种松材线虫虫体上分离到的荧光假单胞GcM5-1A菌株或该菌株和无菌松材线虫混合物接种后的愈伤组织水提物的毒性.结果表明,单独接种无菌松材线虫或单独接种该菌株后的愈伤组织水提液未表现出毒性;而接种无菌松材线虫与该菌株的混合物后的愈伤组织水提液与接种野生松材线虫后的愈伤组织水提液的毒性以及该菌株的NB培养液的无细胞滤液的毒性均很强,并且它们三者之间没有显著差异.该结果说明松材线虫在寄主组织中能促进细菌的产毒.向该菌株的NB培养液的无细胞滤液中添加松材线虫后测定其毒性,结果表明无菌松材线虫对其毒性并无显著影响.实验结果表明松材线虫本身不产生毒素,在荧光假单胞菌培养液的无细胞滤液中加入无菌松材线虫未能显著改变其毒性.      

食用菌接种室空间消毒方法

在食用菌母种、原种接种前，必须对接种室与接种箱进行空间消毒，创造无菌空间，确保每立方米空间杂菌数不超过5个.     

脱毒马铃薯试管苗无菌安全接种技术

结合多年脱毒马铃薯试管苗繁育实践工作经验,总结出一套无菌安全接种技术规程,包括接种准备、接(转)苗、接种完毕后收尾,不但做到了接种安全有序、试管苗污染率低,而且效率高、操作快速、管理规范。     

毛果杨接种双色蜡蘑培养外生菌根的方法及其对毛果杨生长的影响

以无菌组培毛果杨(Populus trichocarpa)幼苗为宿主植物,以无菌石英砂为基质,接种纯培养双色蜡蘑(Laccaria bicolor),发现毛果杨幼苗与外生菌根真菌双色蜡蘑在无菌环境中形成了明显的外生菌根结构,在毛果杨—双色蜡蘑共聚焦显微镜横切片中观察到典型的哈氏网.此外,相较于不接种双色蜡蘑、添加培养液的毛果杨幼苗,接种了双色蜡蘑的毛果杨幼苗的株高增长,鲜重显著增加.说明外生菌根真菌双色蜡蘑能促进毛果杨幼苗的生长.     

荧光假单孢细菌培养的无细胞滤液导致松萎蔫的病状观察

将松材线虫携带的致病细菌无细胞滤液、无菌松材线虫和致病细菌混合物、致病细菌鞭毛蛋白无细胞滤液、无菌松材线虫、无菌松材线虫和非致病细菌混合物接种黑松导致的松树萎蔫的病状与野生松材线虫导致松树萎蔫的病状进行观察和对比,结果为:(1)经培养的致病荧光假单孢菌GcM5-1A菌株的无细胞滤液、无菌松材线虫和致病细菌GcM5-1A混合物接种导致的黑松的病状变化趋势与松材线虫致死的黑松病状是一致的;无菌松材线虫、无菌松材线虫和非致病细菌AM2C混合物不能使黑松发病;(2)致病细菌GcM5-1A无细胞滤液和野生松材线虫导致的黑松病状和病程天数无显著差异;(3)接种无菌松材线虫和致病细菌GcM5-1A混合物的黑松病程显著长于接种野生松材线虫的黑松.结果可以用松萎蔫病是松材线虫和其携带的细菌的复合侵染病害的假说和松材线虫与其携带的细菌之间的互惠共生关系的论点来解释,说明松材线虫携带的致病细菌无细胞滤液是松萎蔫病致病的真正原因.     

松材线虫携带细菌在疫区和寄主中的分布及致病性研究

作者在江苏、上海、广东、安徽、湖北、浙江等疫区 ,采集了呈现松材线虫病典型症状的黑松、马尾松的病样 ,采用病木组织分离法 ,分离获得松材线虫所携带的细菌菌株 2 4株 ,经鉴定 ,2 4株细菌中 ,假单胞菌属有 11株 ,泛菌属有 6株 ,其余有不解糖消化链球菌、河生肠杆菌、乡间步丘菌和粘质沙雷菌 .由此可知 ,假单胞菌和泛菌分布较广 ,在所有采样疫区感染松材线虫病的马尾松和黑松病死木中都能分离到 ,是普遍存在病木组织中松材线虫携带的主要细菌 .致萎活性测定结果表明 :所有假单胞菌属和泛菌属的菌株对无菌黑松切根苗均有致萎活性 .用假单胞菌和泛菌分别与无菌松材线虫混合接种室内无菌黑松苗和野外多年生黑松 ,结果表明 :用细菌单独接种 ,无菌黑松苗和野外黑松均不发病 ,无菌松材线虫单独接种的无菌黑松苗和野外黑松也不发病或发病轻、慢 ,无菌线虫和致萎细菌二者混合接种能使无菌黑松苗和野外黑松发病快且严重 .由此认为松材线虫携带到寄主组织中的假单胞菌和泛菌属的一些种对松材线虫病有明显的协同作用     

巧用煤炉制作菌种

在生产食用菌过程中,必须在无菌条件下进行接种,最简便的方法是采用接种箱。操作程序是将灭过菌的瓶料或袋料装入接种箱后,再用甲酸与高锰酸钾进行薰蒸消毒灭菌40分钟以上才能进行接种。在大生产时候,本人采取用煤炉进行无菌操作接种,既不用药品,又提高了速度。方法是,将灭菌的     

AM真菌对烟苗生长及叶绿素荧光特性的影响

为了探明不同AM真菌对烟苗生长的作用效果,通过在烟草播种期接种7种不同AM真菌研究其对烟苗生长及叶绿素荧光特性的影响。结果表明:1)接种164菌根烟苗的生物量和171菌根烟苗的最大叶面积显著高于无菌根烟苗。2)菌根烟苗的株高和主根长均显著低于无菌根烟苗,根冠比变化不明显;菌根烟苗的叶绿素a/b和类胡萝卜素含量显著提高,而总叶绿素含量、叶绿素a含量和叶绿素b含量只有接种Gm01、Gm02、186的菌根烟苗显著高于无菌根烟苗。3)接种AM真菌对烟苗叶片叶绿素荧光特性的影响较大,菌根烟苗的PSII实际光合效率、光化学淬灭系数、最大相对电子传递速率、半饱和光强均高于无菌根烟苗,调节性能量耗散的量子产额及非调节性能量耗散的量子产额降低,即菌根烟苗对强光的耐受能力更强,能较好地利用红光促进烟苗生长,但不同AM真菌的菌根效应不同。     

虎舌红组织培养中有效无菌材料的获得研究(英文)

该研究以虎舌红为试材,探讨外植体母本的预处理、外植体的采集、灭菌、接种等处理方式对获得有效无菌材料的途径和方法的影响。结果表明:2月将母株移入室内,进行预处理,3月中旬取当年生枝条和萌蘖条上的茎尖,用去污剂(肥皂水或洗衣粉水)浸泡并刷洗后,流水冲洗1~2 h,用75%的酒精表面消毒30 s,无菌水冲洗2~3次后放入0.1%升汞中灭菌,先用升汞消毒4 min,无菌水冲洗3次,再用升汞消毒4 min,无菌水冲洗5~8次后进行有效接种,这种方法能有效降低污染率,提高成活率。     

花魔芋种子无菌试管播种技术的研究

实验以花魔芋种子为材料,研究无菌播种诱导萌发试管苗技术,以获得无菌试管植株,并由此获得外植体,从而解决魔芋组织培养过程中污染率及褐变率高的问题。实验结果表明,播种于MS培养基中的魔芋种子经培养30 d即可获无菌幼苗,将无菌幼苗的叶柄、叶片接种于MS+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA培养基中培养,叶柄...     

番茄灰霉病菌拮抗菌D6和D10发酵条件的优化及其抑菌效果

【目的】优化番茄灰霉病菌拮抗菌的发酵条件,初步探究其抑菌效果,为番茄灰霉病菌的生物防治提供潜在的资源菌。【方法】以前期从大蒜鳞茎中筛选出的拮抗菌D6和D10为研究试材,以接种量、温度、摇床转速和装液量为考察因素,设计四因素三水平正交试验,对D6和D10的发酵条件进行优化,并研究优化条件下D6和D10的无菌滤液对番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制作用。【结果】D6和D10的最佳摇床培养条件分别为,D6:接种量4%,温度22℃,转速180r/min,装液量50mL;D10:接种量4%,温度26℃,转速150r/min,装液量75mL。当D6的无菌滤液质量分数达到15%时,其抑制率最高达到85.33%;当D10的无菌滤液质量分数达到10%时,其抑制率最高达到70.67%。在121℃时,D6无菌滤液的热稳定性较好,而D10的无菌滤液却失去了生物活性。【结论】在优化条件下培养的D6和D10无菌滤液对番茄灰霉病菌有一定的抑制作用,D6的无菌滤液热稳定性较好。     

虎舌红组织培养中有效无菌材料的获得研究

[目的]探索获得虎舌红(Ardisia mamillata Hance)组织培养中有效无菌材料的途径和方法。[方法]以虎舌红为试材,研究了外植体母本的预处理和外植体的采集、灭菌、接种等处理方式对获得有效无菌材料的影响。[结果]2月将母株移入室内,进行预处理,3月中旬取当年生枝条和萌蘖条上的茎尖,用去污剂(肥皂水或洗衣粉水)浸泡并刷洗后,流水冲洗1～2 h,用75%乙醇表面消毒30 s,无菌水冲洗2～3次后放入0.1%升汞中灭菌(先用0.1%升汞消毒4 min,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞消毒4 min,无菌水冲洗5～8次)后进行有效接种,这种方法能有效降低污染率,提高成活率。[结论]该研究可为进一步研究和大规模生产虎舌红提供技术支持。