江苏省成功克隆转基因山羊

江苏省农科院畜牧研究所9月1日传出消息,该所动物遗传资源与草食家畜育种项目组转基因克隆山羊研究取得重大进展,目前已陆续诞生多只转人α-乳白蛋白基因的克隆奶山羊。这标志着江苏农科院已建立起完整的转基因克隆山羊技术平台,转基因克隆山羊技术迈入国内先进行列。     

科技

江苏省成功克隆转基因山羊 江苏省农科院畜牧研究所9月1日传出消息,该所动物遗传资源与草食家畜育种项目组转基因克隆山羊研究取得重大进展,目前已陆续诞生多只转人α-乳白蛋白基因的克隆奶山羊。这标志着江苏农科院已建立起完整的转基因克隆山羊技术平台,转基因克隆山羊寸支术迈入国内先进行列。     

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江苏省成功克隆转基因山羊江苏省农科院畜牧研究所9月1日传出消息,该所动物遗传资源与草食家畜育种项目组转基因克隆山羊研究取得重大进展,目前已陆续诞生多只转人α-乳白蛋白基因的克隆奶山羊。这标志着江苏农科院已建立起完整的转基因克隆山羊技术平台,转基因克隆山羊寸支术迈入国内先进行列。     

转基因体细胞克隆奶山羊成功

青岛森淼实业有限公司与中国科学院遗传与发育生物学研究机构经过两年共同开展乳腺生物反应器项目研究。２００２年９月至１０月７日出生４只带有医用蛋白转基因体细胞的克隆奶山羊，目前仍有３只成活。经过DNA检测，证明已获得了预期的转β－干扰素基因和转抗凝血酶素Ⅲ基因克隆羊。这标志着功能基因转基因羊在国内的首次成功，其中该项目采用的基因打靶技术应用在山羊上为国际先例。（）□转基因体细胞克隆奶山羊成功$新华社     

转EGFP基因山羊克隆胚的发育

利用脂质体包裹含EGFP基因的质粒,并将之导入山羊乳腺上皮细胞,经G418筛选获得阳性细胞,以阳性细胞作为核供体,利用核移植技术构建转基因克隆胚。结果表明：用转基因山羊乳腺上皮细胞作为核供体,电融合法更适合构建转基因克隆胚。转基因山羊克隆胚体外培养最佳方案是用SOFaa培养液,在培养72 h后加入10%的正常山羊血清（Normal goat serum,NGS）。荧光显微镜下观察到转基因克隆胚中EGFP的表达,大部分克隆胚发育到8-16细胞以后的时期,绿色荧光蛋白才开始逐渐表达,随着发育时间的延长,绿色荧光蛋白的表达也逐渐增强。说明外源基因在胚胎早期发育阶段可以表达,EGFP可以作为报告基因来实现对外源基因整合及表达的监测。     

转基因山羊研究进展

近年来,动物转基因技术发展日淅完善,在牛、羊、猪等家畜上的应用日益增多.为全面了解山羊转基因技术的研究进展,论文简要回顾了国内外转基因山羊生产的里程碑事件,总结了生产转基因山羊的方法和原理,并对转基因山羊研究状况、应用前景及存在问题进行了较为系统的概括和分析,从而为借助现代生物技术丰富我国山羊育种手段,加快山羊新良种培...     

我国首例“肌肉抑制素前肽”转基因山羊诞生

2007年3月天津市农科院畜牧兽医研究所陆续有4只小山羊降生,体况发育良好。这是我国诞生的首例“肌肉抑制素前肽”转基因山羊,将为改造我国传统畜牧业、提升医学等相关领域行业水平起到重要作用。     

吉林省首批体细胞克隆羊诞生

日前,吉林省首批两只体细胞克隆绵羊在省农科院畜牧分院诞生。这项最新高端动物生物技术成果,填补了我省该研究领域的空白,对于加速家畜改良速度、加强     

转基因鸡的理论与实践

转基因技术，即将目的基因通过显微注射、病毒转染等途径转入生物的受精卵(合子)或胚胎细胞中，使之整合到受体细胞的基因组内，是一门开始于二十世纪70年代的遗传育种高新技术。生物界有数以亿计的基因，大多数存在于细胞核内的染色体上，少数存在于细胞质中，决定生物的遗传特性。由于生物同出于一源，其主要的基础代谢从人到细菌都是共有的，而且所有生物的遗传基因都是由相同的4种碱基构成，由这些碱基组成的遗传密码具有通用性，这就是转基因技术可行性的理论基础。当然，不同生物间的差异越大，它们的脱氧核糖核酸(DNA)序列差异也越大，外来基因的插入就越难，插入基因的表达就更难。     

世界首例转基因手工克隆绵羊成功诞生

手工克隆,顾名思义是指除常规设备外,其操作均为手工。与传统克隆相比较,手工克隆不依赖昂贵仪器和尖端技术人员,成本低、效率高,其核心技术只需一个小小的刀片就可以完成。华大基因研究院杜玉涛博士说,此外,手工克隆以更低的成本和更高的效率促成了克隆动物的快速、批量生产,尤其适用于物种资源丰富但科研经费较少的发展中国家。     

山羊CREM基因的克隆与生物信息学分析

研究旨在克隆山羊睾丸CREM基因cDNA全序列并进行生物信息学分析。通过提取山羊睾丸总RNA,利用qPCR和RACE技术,扩增山羊PHGPx基因cDNA序列。结果表明,山羊睾丸CREM基因cDNA全长序列为1 183bp(登录号:HM 802260),包含有960bp的开放阅读框,编码319个氨基酸;山羊CREM蛋白二级结构功能区域属于bZIP转录因子家族,在319个氨基酸的序列中,73到115之间有一个"pKID"区域,259~316之间含有一个典型的"BRLZ"结构。构建蛋白质氨基酸分子进化树,结果显示山羊与牛亲缘关系最近。该研究结果将为CREM基因表达分子调控研究提供一定的理论依据。     

山羊KIFI基因分子克隆及序列分析

利用Primer 3.0设计出1对特异性引物F和R,以成年山羊基因组DNA为模板,扩增山羊的KIFI基因,将其克隆至pGEM-T载体,转化后挑取阳性菌落进行酶切及测序鉴定。结果表明,克隆所得的472 bp序列(GenBank登录号:GQ988385),包括山羊KIFI基因的Exon 1全长、部分5′UTR和部分Intron 1序列。山羊KIFI基因的Exon 1序列编码116个氨基酸,与绵羊、牛、马、人和家鼠的同源性分别为98%、90%、90%、88%和84%。KIFI基因部分序列的克隆,为进一步研究KIFI基因多态性与绵、山羊绒用性能间的相关性奠定基础。     

转基因克隆动物的发展及其应用

转基因克隆动物是在获得转基因细胞系的基础上进行克隆,生产具有特定性状、特别功能或者一定目的的克隆动物群,是转基因动物技术与克隆动物技术的有机结合。论文针对转基因克隆动物的发展,及其在异种器官移植、抗病育种和乳腺生物反应器方面的应用,存在的问题与安全性评价等方面做了较系统的阐述,并预测了转基因克隆动物应用的发展前景及其给社会带来的深远影响。     

山羊BLG基因侧翼区的克隆及序列分析

克隆奶山羊β-乳球蛋白基因5′、3′调控区并对其进行序列分析。从徐淮奶山羊组织中提取基因组DNA,采用高保真长模板PCR法克隆得到山羊β-乳球蛋白基因4.2 kb的5′调控区和1.8 kb的3′调控区。将纯化后的PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定和序列测定验证克隆的正确性。部分序列分析表明,5′区与GenBank中登录的山羊和绵羊BLG基因5′区同源性分别为100%和95%;3′区同源性则分别为99%和93%。克隆得到的奶山羊BLG调控区与山羊BLG伪基因显著不同,5′区和3′区同源性分别为83%和88%。结果表明,克隆得到的奶山羊BLG调控区可用于构建乳腺特异性表达载体,为指导外源基因在转基因动物乳腺中的高效表达奠定了基础。     

山羊KIFI基因分子克隆及序列分析

利用Primer 3.0设计出1对特异性引物F和R,以成年山羊基因组DNA为模板,扩增山羊的KIFI基因,将其克隆至pGEM-T载体,转化后挑取阳性菌落进行酶切及测序鉴定。结果表明,克隆所得的472 bp序列(GenBank登录号：GQ988385),包括山羊KIFI基因的Exon 1全长、部分5′UTR和部分Intron 1序列。山羊KIFI基因的Exon 1序列编码116个氨基酸,与绵羊、牛、马、人和家鼠的同源性分别为98%、90%、90%、88%和84%。KIFI基因部分序列的克隆,为进一步研究KIFI基因多态性与绵、山羊绒用性能间的相关性奠定基础。     

转基因技术在畜牧生产中的应用

80年代早期 ,产生了将外源基因显微注射到受精卵 ,产生携带外源基因的动物品系新技术 ,这种携带有外源基因的动物称为“转基因动物”。随着现代分子生物学技术的发展 ,相继出现了 DNA体外重组、某些重要生产性状基因的分离、基因融合、胚胎体外操作等转基因相关技术 ,并在畜牧生产中得到了广泛的应用。目前已报道的转基因动物有线虫、果蝇、海胆、两栖动物、鱼类、小鼠、猪、牛、羊、鸡、兔等。本文就目前转基因的方法及该技术在提高畜禽生产性能、抗病育种、疾病治疗等方面的应用作一论述。1　外源基因转移方法1 .1　显微注射法　 Jaenis…     

山羊催乳素受体基因部分片段的克隆与序列分析

采用PCR技术扩增出济宁青山羊催乳素受体基因长892 bp的片段，该片段含有97 bp的部分外显子8序列（外显子8全长为100 bp）、683 bp的内含子8、70 bp的外显子9及42 bp的部分内含子9。将该片段克隆到pGEM-T Easy质粒中，重组质粒用PCR进行阳性克隆鉴定，然后测定核苷酸序列，并推导其氨基酸序列。该序列与绵羊、母牛、人、大鼠、小鼠的催乳素受体基因mRNA的对应序列的核苷酸同源性分别为99.4 %、97.01%、89.22%、89.22%、88.02%，氨基酸同源性分别为100%、94.55%、81.88%、81.82%、83.64%。     

山羊c-Myc原癌基因原核表达和多克隆抗体的制备

c-Myc原癌基因与胚胎干细胞(ES细胞)和诱导的多能性干细胞(iPS细胞)生物学特性密切相关,因此制备其相应的多克隆抗体尤为必要。本研究以pMD18T-Myc质粒为模版,PCR扩增c-Myc片段,然后将其亚克隆到pSE380表达载体上,获得pSE380-Myc重组质粒。该质粒转化工程菌BL21(DE3),IPTG诱导表达His-Myc融合蛋白,随后用SDS-PAGE电泳及Western blot加以验证。在变性条件下用Ni-NTA argrose介质分离纯化His-Myc融合蛋白,并以此为抗原免疫新西兰大白兔。经过4次免疫,采集血液、分离血清,用Western blot检测抗体特异性。结果表明:(1)pSE380-Myc重组质粒在工程菌BL21(DE3)得到了高效表达;(2)得到了高纯度高含量的His-Myc融合蛋白;(3)经Wstern blot检测发现,c-Myc多克隆抗体与His-Myc融合蛋白能够特异性结合。本研究获得的特异性山羊c-Myc多克隆抗体,为进一步研究山羊ES细胞和iPS细胞的自我更新机制奠定了基础。     

转基因育种现状和前景

中国是世界第一养猪生产和猪肉消费大国,但由于各种原因,我国商用种猪市场一直无法摆脱长期依赖国外种源的尴尬局面。我国每年需要花费数十亿人民币从国外引种来维持、更新种质资源,不但造成大量外汇流失,而且引种时引入的传染性疾病,如传染性胸膜肺炎、繁殖与呼吸综合症等给养猪业带     

贵州山羊品种RERG基因的克隆及不同组织表达

选择与羊同源性较高的牛ras相关的雌激素调节的生长抑制因子(ras-related estrogen-regulated growth inhibitor,RERG)基因组序列设计特异性引物,通过RT-PCR技术对RERG基因进行克隆测序及生物信息学分析.结果显示,克隆了羊RERG基因cDNA序列629 bp,完整的开放阅读框(ORF)为20～620 bp,其编码199个氨基酸.GenBank登录号分别为JN672576、JQ917222和JN580309.通过实时荧光定量RT-PCR技术分析RERG基因在贵州三大地方品种同一年龄段不同组织中的表达情况.结果表明,成年羊肺脏和脾脏表达量是最高,胸腺表达量最低,肌肉表达量为相对中度表达.为进一步研究地方品种羊生长性状的改善提供科学依据.