蛋白激酶C在血小板聚集中的作用

本实验以洗涤血小板为材料,在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢情况下,研究血小板不同激动剂对蛋白激酶C的作用.血小板激动剂,在聚集浓度范围内,除肾上腺素外,PAF、ADP、凝血酶、胶原、PMA和A23187对     

血小板激活中PKC与PKA、TPK、MLCK的关系

本实验以洗涤血小板为材料,研究蛋白激酶C蛋白激酶A(PKA)酪氨酸蛋白激酶(TPK)肌球蛋白轻链激酶(MLCK).(1)腺苷环化酶激活剂PGE1不能使50nMPMA诱导的血小板聚集受抑制。(2)腺苷及其类似     

蛋白激酶C激活剂PMA和钙离子通道A23187对血小板聚集、蛋白磷酸化的影响

本实验是以洗涤血小板为材料,研究蛋白激酶C在血小板聚集中的作用,结果显示:(1)PMA诱导血小板聚集发生缓慢,聚集浓度为10～500nM;A23187诱导的血小板聚集浓度为1～25μM,聚集发生迅速,PMA     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、肌动蛋白聚合的影响

本实验分别以阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Apyrase去除ADP,研究蛋白激酶C在血小板聚集、肌动蛋白聚合过程中的作用。研究结果表明:蛋白激酶C在血小板激活过程中起着重要的调节作用,蛋白激酶C     

肌醇脂质和cAMP在血小板活化因子诱导血小板聚集中的作用

目的：探讨肌醇脂质和cAMP两个细胞内第二信使系统在血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集过程中所起到的作用和相互关系。方法：采用PKC激动剂PMA和Ca^2 通道A23187,以及PKA激动剂Sp-cAMPS和抑制剂Rp-cAMPS干预的方法,分析观察这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的作用;采用^3H—Inositol和^14C-Adenine双标记液体闪烁技术测定PAF诱导血小板可逆聚集过程中肌醇-1,4,5-三磷酸酯(IP3)和cAMP的水平变化的方法,分析研究这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的相互关系。结果：(1)PMA和A23187能分别增强PAF的血小板聚集效应,而且两者具有协同作用;(2)Rp-cAMP和Sp-cAMPS两者本身都不能引起血小板聚集,但能分别增强和抑制PAF的聚集效应;(3)IP3和cAMP的水平变化分别与血小板的聚集和解聚过程一致。结论：(1)肌醇脂质信使系统是细胞内转导PAF诱导血小板聚集的主要胞内信使系统。(2)降低血小板内cAMP浓度不能诱导聚集,但能增强肌醇脂质信使系统的聚集效应;升高cAMP水平能拮抗肌醇脂质信使系统的作用,这可能是使可逆相聚集的血小板解聚的一个重要机制。     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、蛋白磷酸化和肌动蛋白聚合的影响

目的：进一步研究蛋白激酶C抑制剂Staurosporine在血小板聚集、蛋白磷酸化、肌动蛋白聚合中的作用。方法：以32P－Na2HPO4标记血小板；以血小板聚集仪测定血小板聚集；以SDS－PAGE分离蛋白质，进行放射自显影；以TritonX－100抽提法沉淀骨架蛋白。结果：（1）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板聚集，大部分抑制20μmol／LA23187诱导的血小板聚集。（2）1μmol／LStaurosporine几乎完全抑制0．5U／ml凝血酶、或10μmol／LPMA、或20μmol／LA23187诱导的血小板40kD和20kD蛋白磷酸化。（3）1μmol／LStaurosporine完全抑制0．5U／ml凝血酶或10μmol／LPMA诱导的血小板肌动蛋白聚合。结论：Staurosporine抑制蛋白激酶C的活性．从而抑制血小板的聚集和肌动蛋白聚合；蛋白激酶C在血小板聚集和肌动蛋白聚合中起着重要调控作用。     

生物制剂用于成人慢性原发免疫性血小板减少症的治疗进展

原发免疫性血小板减少症(ITP)多以糖皮质激素和(或)静脉注射免疫球蛋白等一线治疗为主,但不少慢性ITP患者需二线或更高级药物治疗,如促血小板生成素受体激动剂、利妥昔单抗或联合药物治疗等.现发现新型药物如fostamatinib、新生儿Fc受体(FcRn)抑制剂及新一代促血小板生成素受体激动剂或对成人慢性ITP有较好的...     

川芎嗪对血小板中肌醇磷脂和20K蛋白质磷酸化的抑制作用

在Mg~(2+)存在下,用血小板膜与(γ—~(32)P)ATP保温,以观察川芎嗪对~(32)P掺入磷脂和蛋白质的影响,结果     

精胺对猪血小板膜中磷酸肌醇和47K蛋白质磷酸化的影响

在Mg~(2+)和外源性磷脂酰肌醇—4—磷酸存在下,用猪血小板膜与〔γ—~(32)P〕ATP在30℃下保温3min,测     

滤过速度对混合血小板过滤效果的影响

目的观察不同滤过速度对混合血小板过滤效果的影响。方法取45袋混合血小板,随机分为低速、中速、高速组各15袋,分别以10~20、60~70和150~160 mL/min的流速进行连续性过滤,并用常规方法检测混合血小板过滤前后的白细胞数(WBC)和血小板数(PLT),比较3组WBC去除率和PLT回收率。结果中速组和高速组的PLT回收率均高于低速组(P<0.01),低速组和中速组的WBC去除率均高于高速组(P<0.05)。结论不同滤过速度对混合血小板过滤效果不同,60~70 mL/min是混合血小板较为理想的滤过速度。     

猪血小板中蛋白激酶CK2的天然底物

目的：寻找猪血小板中蛋白激酶ＣＫ２可能的天然底物。方法：以［γ－＾３２Ｐ］ＧＴＰ为磷酸供体,用精胺激活蛋白激酶ＣＫ２和用肝素抑制蛋白激酶ＣＫ２活性,然后用放射自显影的方法检测底物蛋白磷酸化。结果：精胺可增加１７．４ｋＤ蛋白磷酸化;肝素能完全抑制４３ｋＤ和６６ｋＤ底物蛋白磷酸化,肝素还增加３９．４ｋＤ底物磷酸化。结果：猪血小板中１７．４ｋＤ、４３ｋＤ和６６ｋＤ的蛋白质可能是蛋白激酶ＣＫ２的天然底物。     

猪血小板中蛋白激酶CK2的天然底物

目的：寻找猪血小板中蛋白激酶ＣＫ２可能的天然底物。方法：以［γ－３２Ｐ］ＧＴＰ为磷酸供体,用精胺激活蛋白激酶ＣＫ２和用肝素抑制蛋白激酶ＣＫ２活性,然后用放射自显影的方法检测底物蛋白磷酸化。结果：精胺可增加１７．４ｋＤ蛋白磷酸化;肝素能完全抑制４３ｋＤ和６６ｋＤ底物蛋白磷酸化,肝素还增加３９．４ｋＤ底物磷酸化。结论：猪血小板中１７．４ｋＤ、４３ｋＤ和６６ｋＤ的蛋白质可能是蛋白激酶ＣＫ２的天然底物     

PKC、PKA和TPK在血小板激活中的作用

目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）,蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）,酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）在血小板聚集激活中的作用。方法：本实验是在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Ａｐｙｒａｓｅ去除ＡＤＰ情况下,利用３２Ｐ－ＮａＨ２ＰＯ４标记猪血小板,然后以ＰＭＡ、凝血酶、ＰＧＦ１、腺苷等处理。以血小板聚集仪测定血小板聚集;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离血小板蛋白;并进行放射自显影;碱处理电泳凝胶检测酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）底物;ＴＬＣ进行磷酸氨基酸分离。结果：（１）随着ＰＭＡ激活ＰＫＣ,血小板发生聚集;（２）３５μｍｏｌ／ＬＰＧＦ１或１ｍｍｏｌ／Ｌｄｂ－ｃＡＭＰ不能抑制５０ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集,腺苷却能抑制ＰＭＡ诱导的血小板聚集（ＥＣ５０＝０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）．（３）ｄｂ－ｃＡＭＰ、腺苷都不能抑制１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的４０ｋＤ蛋白磷酸化,ＰＫＡ激活不能抑制ＰＭＡ激活的ＰＫＣ。（４）在ＰＭＡ、凝血酶激活的血小板中,ＰＫＣ、ＴＰＫ都发生激活,４０ｋＤ底物既是ＰＫＣ的底物又是ＴＰＫ的底物。结论：ＰＫＣ和ＴＰＫ在血小板聚集中起着重要的调节作用。     

当归对猪血小板膜磷脂酰肌醇磷酸化的抑制作用

观察当归与肌醇脂质信号系统的关系,以探讨活血化瘀药的可能作用机理。其过程与结果如下:猪血小板膜与20μmol/Lγ—~(32)P—ATP及不同含量     

3种方法治疗儿童特发性血小板减少性紫癜的比较

目的 比较儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)不同治疗方案的疗效.方法 78例儿童急性ITP住院患儿随机分成3组,A组:肾上腺皮质激素组(26例),B组:常规剂量丙种球蛋白组(23例),C组:小剂量静脉丙种球蛋白组(29例),观察不同治疗方案的近期疗效及不良反应.结果 (1)B、C组的近期疗效明显优于A组(P＜0.05...     

腺苷及类似物对猪血小板膜磷酯酰肌醇磷酸化的抑制作用

为进一步探讨腺苷的作用机理,本文研究了腺苷对猪血小板膜磷酯酰肌醇磷酸化的影响,其过程及结果如下:猪血小板膜与不同浓度的腺苷或100μmol/L的腺苷类似物及γ—~(32)P—ATP37℃反应5min,被标记的     

腺苷及类似物对猪血小板膜磷脂酰肌醇磷酸化的抑制作用

猪血小板膜与不同浓度的腺苷或100μmol/L的腺苷类似物及γ—~(32)P—ATP37℃反应5min.被标记的磷脂酰肌醇—4—单磷酸通过薄层层析法分离、放射自显影定位、液体闪烁计数定量的结果表明:腺苷可强烈抑制猪血小板膜磷脂酰肌醇磷酸化,半数抑制率为14μmol/L;腺苷类似物cAMP、5′—氯—5′—脱氧腺苷、腺嘌呤、α′—脱氧腺苷、AMP、阿糖腺苷、cGMP在浓度为100μmol/L时对猪血小板膜磷脂酰肌醇磷酸化有不同程度的抑制作用。     

血细胞分析仪测定血小板的影响因素分析

目的：分析血细胞分析仪测定血小板的影响因素．为临床提供可靠的诊治依据。方法：按照BC3000全自动血液分析仪的血小板计数原理及血小板直方图,把干扰的标本分成3组,A组：在血小板直方图上。后蜂翘起始处在25fl以外的标本;B组：后蜂翘起始处在20～25fl之间的标本;C组：后峰翘起始处在20fl之内的标本。每组检测30份标本,分别行血细胞分析仪及显微镜计数血小板．对两法结果作配对t检验。同时对正常与异常血小板直方图的血小板聚集及大血小板的例数、血细胞分析仪及镜检计数血小板的结果作比较。结果：B、C两组血细胞分析仪计数血小板的结果均比显微镜直接计数血小板的结果偏高（P〈0．05～0．01）;异常血小板直方图的血小板聚集以及大血小板的例数均明显高于正常图形者．其血细胞分析仪计数血小板明显则偏低（P〈0．01）。结论：小红细胞数量、血小板凝集及大血小板等均可影响血细胞分析仪对血小板的计数;对血小板计数与直方图不符的标本．应行手工计数或重新采血检测．以使血小板计数结果可靠．为临床诊断治疗提供有参考意义的数据。     

腺苷对猪血小板膜上磷脂酰肌醇激酶和磷脂酰肌醇—4—磷酸激酶的抑制作用

用差速离心法分离猪血小板膜,在适当条件下,用〔γ—~(32)P〕ATP与其保温,观察P掺入磷脂情况。结果表     

营养水平和饲粮组合对育肥羔羊生产及屠宰性能的影响

按同质原则将 28 只试羊(3~3.5 月龄)分为 4 个饲粮处理组,采用 3 因子(2×2×2)设计,研究两个营养水平(A 因子,A1—0.9NRC 和 A2—0.8NRC)下不同饲粮组合(B 因子,B1—添加甜菜渣和 B2—不添加甜菜渣)对不同杂交组合(C 因子,C1—波德代(♂)×蒙古羊(♀),C2—陶塞特(♂)×蒙古羊(♀))的育肥效果。结果表明,A、B、C 三因子对试羊平均日增重均无显著影响(P>0.05),仅正试期头 20 dC2日均增重显著(P<0.05)高于 C1。A1水平羔羊平均日采食量极显著(P<0.01)低于 A2,而饲料转化率及熟肉率极显著(P<0.01)高于 A2。B1正试期后 40 d 日均增重有高于 B2的趋势,而 GR 值有低于 B2的倾向。