干旱胁迫下八棱海棠中丙二醛及质膜透性的变化

以盆栽八棱海棠幼苗为试材,保持45%～50%土壤含水量进行中度干旱处理,研究干旱胁迫过程中丙二醛和质膜透性的动态变化与八棱海棠的抗旱关系。结果表明:八棱海棠在中等干旱胁迫下,叶片的质膜透性和丙二醛含量均随干旱胁迫时间的延长而增大,但质膜透性在前4d增加较慢,第5天开始明显增加;而丙二醛在前5d增加较慢,5d后增加较大。前期还能抵抗一定的干旱胁迫的强度,当超过一定强度时,细胞大量坏死,植物受到严重伤害甚至死亡。     

模拟干旱胁迫对八棱海棠根系生理生化指标的影响

以八棱海棠幼苗为试材,研究了不同浓度的PEG-6000模拟干旱胁迫对八棱海棠根系生理生化指标的影响。结果表明:不同程度干旱胁迫均使八棱海棠根系丙二醛(MDA)和游离脯氨酸(Pro)含量增多,过氧化物酶(POD)活性提高;过氧化氢酶(CAT)活性、可溶性蛋白质含量在干旱胁迫前期比对照均有不同程度的提高,随着胁迫时间的延长,CAT活性、可溶性蛋白质含量大幅度下降,且下降幅度为:20%PEG15%PEG10%PEG5%PEG;5%PEG、10%PEG、15%PEG胁迫CAT活性和可溶性蛋白含量虽下降,但仍高于对照水平;20%PEG胁迫使CAT活性、可溶性蛋白质含量低于对照水平,这说明干旱胁迫使植物体内正常的蛋白质合成受到抑制,根系可能已经失去了对干旱胁迫的适应性与可调控性,细胞内膜系统受到严重损伤;干旱逆境对膜系统的伤害是脂质过氧化作用增强的结果。     

八棱海棠肌动蛋白基因(MrACT)的克隆及分析

以八棱海棠(Malus micromalus Makino)为材料,抽取RNA,反转录成cDNA。采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法,5’-RACE获得长度1121bp的片段、3’-RACE获得883bp的片段,再通过设计引物扩增得到八棱海棠中一种肌动蛋白基因的cDNA的全长序列。该序列全长1134bp,推测其编码377个氨基酸,等电点为5.16,其编码的氨基酸与拟南芥(Arabidopsis thaliana)actin7编码的氨基酸只有2个氨基酸差别。通过对八棱海棠MrACT基因的表达分析,发现在不同组织中,该基因的表达水平没有明显差异,本文为进一步利用RT-PCR技术,以MrACT基因为内标,研究八棱海棠其他基因的丰度打好基础。     

八棱海棠转PuNHA基因的遗传转化研究

以八棱海棠茎尖分生组织为外植体,经农杆菌介导将PuNHA基因导入八棱海棠,在MS+BA 4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+除草剂4 mg/L+羧苄青霉素500 mg/L的培养基中筛选培养,转化率8.7%。结果表明:经PCR、Southern Blot和Northern Blot分析得出,PuNHA基因已经整合到八棱海棠基因组内,并且可以转录为mRNA,获得了转基因植株;同时将转基因植株进行盐胁迫处理,耐盐能力有显著提高,由原来的耐盐量2‰提高到了3‰,其耐盐能力提高了50%。     

盐胁迫对不同耐盐性八棱海棠株系生理特性的影响

[目的]探究耐盐性不同的八棱海棠株系叶片生理指标对盐胁迫的响应模式,以期揭示耐盐性较强的八棱海棠株系的耐盐机制.[方法]采用盆栽过量灌溉盐水的方式,以耐盐性较强的八棱海棠(NY)组培株系为试材,普通八棱海棠(PT)组培株系为对照,以不同质量浓度NaCl(0、2、4、6、8、10 g·L-1)处理40 d,测定各处理植株...     

水杨酸对根际低氧胁迫八棱海棠幼苗活性氧代谢的影响

 采用营养液水培系统,以苹果砧木八棱海棠(Malus robusta Rehd.)为试材,用叶面喷施的方法,研究了外源水杨酸(salicylic acid ,SA)对根际低氧胁迫下八棱海棠叶片活性氧(ROS)代谢的影响。结果表明：低氧胁迫下八棱海棠叶片丙二醛(MDA)、超氧阴离子 (O₂)、过氧化氢(H₂O₂)、谷胱甘肽(GSH)含量和抗氧化酶活性均高于对照,而抗坏血酸(AsA)含量低于对照;外源SA明显抑制MDA和O₂的积累,显著增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性。说明SA作为化学诱抗剂,可抑制低氧胁迫下苹果幼苗体内活ROS的产生,提高抗氧化酶的活性,降低膜脂过氧化水平,从而减轻低氧胁迫对植株的伤害。     

八棱海棠与苹果种子苗的区别

不同的苹果砧木苗,在土壤的适应能力、抗根部病害以及抗旱、耐涝、耐盐碱方面差距很大。用苹果种子作砧木,属于共砧,其根部病害,特别是白绢病发生严重,且结果后树势衰退,寿命缩短。在所有的海棠根系中,以八棱海棠根系在抗旱、抗涝、抗根部病、耐盐碱方面最为理想,因此在生产中应用最多。在购买苗子时,选准八棱海棠根,显得尤为重要。     

八棱海棠常见病害发生规律及防控研究进展

八棱海棠原产于河北省怀来县,是果树优良的砧木,而且其经济、观赏、药用价值也非常高。八棱海棠生长过程中,各种病害的发生对其自身的价值和产业的健康发展造成了巨大的影响。从病害管理的角度出发,总结归纳了八棱海棠病害的主要发生种类及病害的研究进展,分析了目前病害防控过程中存在的问题,提出了综合防治措施,在一定程度上有效控制病害的发生发展,促进八棱海棠田间管理水平的提高。     

超声波辅助农杆菌介导八棱海棠转rolC基因

应用超声波辅助农杆菌介导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,以期提高转化效率并获得转基因植株。利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理时期和农杆菌悬浮液中乙酰丁香酮(As)浓度对rolC基因转化率的影响。结果表明,叶盘在D600nm为0．6且含有75 mg／L As的农杆菌悬浮液中侵染2 min后,用功率为100 W的超声波处理30 s,再浸泡2．5 min,然后放到再生培养基上共培养3 d,能获得最佳的gus基因瞬间表达率。最佳处理条件下转化683枚八棱海棠叶片,共得到138个抗性愈伤组织和15株抗性苗,转化率为2．2％。GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有12个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。     

八棱海棠的播种育苗技术及其在园林绿化中的应用

八棱海棠对于园林绿化工作的利用价值极高,其外形优雅寿命长,可大幅度降低园林绿化系统树木更替的资金投入。优化八棱海棠种植策略,完善其在园林绿化系统中的应用举措,可助推二者共同发展。针对八棱海棠在园林绿化中的应用形式及播种育苗技术进行研究,阐明其现存问题,提出改进措施,详述优化策略,以供借鉴。     

苹果砧木八棱海棠和新疆野苹果耐盐性的比较

新疆南疆盐渍化土壤苹果栽培极需抗盐砧木,作者以八棱海棠(Malus robusta Rehd)和新疆野苹果(Malus sieversii Roem)为试材,在不同盐浓度胁迫下盆栽,研究其若干生理生化指标和叶片的解剖结构。结果表明,在不同胁迫强度下,从叶片细胞质膜透性看,八棱海棠比新疆野苹果耐盐潜力略高;从可溶性蛋白含量看,八棱海棠具有比新疆野苹果更强的抑制细胞脱水能力。叶片解剖观察表明,与新疆野苹果相比,八棱海棠的叶片组织结构在高盐胁迫下表现更稳定。     

水分胁迫下湖北海棠根系线粒体及细胞死亡特性研究

用20% PEG6000处理湖北海棠(Malus hupehensis Rehd. ) 根系, 研究了水分胁迫条件下根系线粒体膜电位(Δψm) 、线粒体H₂O₂含量、细胞程序性死亡关键酶类caspase23 /7活性的变化。结果显示,在20% PEG6000处理前6 d, 根系线粒体Δψm缓慢降低, 第6天后急剧下降。线粒体H₂O₂含量在处理的第1～6天里缓慢升高, 第6天后则快速上升。TUNEL原位检测显示, PEG6000处理能够使根系切片上出现清晰的阳性反应斑点, 且随着处理时间的延长阳性反应斑点增多; 处理第3天和第6天, 根系中类caspase23 /7活性较低, 而处理第9天和第12天时类caspase23 /7活性成倍升高, 这表明20% PEG6000能够诱导湖北海棠根系细胞程序性死亡。     

氮胁迫对平邑甜茶水培苗的生理效应

以当年生平邑甜茶(MalushupehensisRehd.)实生苗为试材,用水培实验方法,研究氮胁迫对其引起的生理效应。通过8周的处理,对平邑甜茶的功能叶和根系进行相关指标的检测,结果如下:用电导仪进行抗逆性测定,伤害率由大到小依次为功能叶、吸收根、生长根和木质根。N胁迫影响了功能叶和根系中的N代谢。与MN(middleN)相比,N胁迫各处理的可溶性蛋白含量均下降。功能叶中游离氨基酸总量表现为HN(highN)>LN(lowN)>MN,而根系中表现为MN>HN>LN。各器官中,以功能叶和吸收根对N胁迫最为敏感。N胁迫还改变了功能叶和吸收根内的ABA、IAA、ZRs、GA3的含量,从而影响了激素平衡。此外,通过电镜观察可知,N胁迫破坏了叶绿体和吸收根根尖细胞的超微结构。     

平邑甜茶MhHSP70的特征及其对镉和渗透胁迫的反应

 以平邑甜茶为试材,通过RT-PCR及RACE技术,获得了一个热激蛋白基因HSP70的全长cDNA序列,命名为MhHSP70,GenBank登录号为HQ876864;该基因全长2 307 bp,序列高度保守,编码650个氨基酸,与苹果、番茄和烟草亲缘关系最近。在根系和叶片中,热激蛋白基因MhHSP70的表达均受镉和渗透胁迫（非热胁迫）诱导,并且随着硫酸镉和氯化钠处理浓度的升高以及聚乙二醇（PEG）处理时间的延长,MhHSP70的表达量逐渐增强。     

Expression of programmed cell death factor 4 in pulmonary fibrosis model

AIM:To detect the expression of programmed cell death protein 4 (PDCD4) in pulmonary fibrosis model and its effect on cell viability and pulmonary fibrosis indicators, and to explore its mechanism. METHODS:The expression level of PDCD4, α-smooth muscle actin (α-SMA) and collagen type I (COL-I) in human embryonic lung fibroblasts cell line HFL-1 group and HFL-1+TGF-β1 group were detected by Western blot and RT-qPCR. The plasmid pEZ-M03-PDCD4 and empty vector pEZ-M03 were transfected into myofibroblasts (MB), and the protein expression level of PDCD4 was detected by Western blot. The protein levels of p-AKT and AKT in blank control group, pEZ-M03-PDCD4 group, pEZ-M03 group and LY294002 group and the expression of cell cycle-related proteins c-Myc and cyclin D1 were determined by Western blot. The effect of PDCD4 on the viability of MB was measured by CCK-8 assay. The hydroxyproline content in the culture supernatant of HFL-1 cells and transfected MB was detected by hydroxyproline digestion method. The expression of PDCD4 in the lung tissues of the mice in model group and control group was detected by Western blot. RESULTS:Compared with HFL-1 group, the expression of α-SMA and COL-I at mRNA and protein levels in HFL-1+TGF-β1 group was significantly increased (P<0.01), the mRNA expression of PDCD4 was not significantly changed, while PDCD4 protein was significantly down-regulated (P<0.01). Compared with blank control group and pEZ-M03 group, the protein expression of PDCD4 in pEZ-M03-PDCD4 group was significantly increased (P<0.05), the protein expression of c-Myc and cyclin D1 was significantly decreased (P<0.05), the cell viability was also significantly inhibited (P<0.01), and the content of hydroxyproline in the culture supernatant was significantly reduced (P<0.05). Compared with blank control group, the protein levels of p-AKT were significantly decreased in pEZ-M03-PDCD4 group and LY294002 group, and no significant difference between blank control group and pEZ-M03 control group was observed. Compared with control group, PDCD4 expression was decreased in model group (P<0.01).CONCLUSION:PDCD4 is low expressed in the process of pulmonary fibrosis. Over-expression of PDCD4 inhibits the viability of MB, decreases the content of hydroxyproline, and inhibits the PI3K/AKT signaling pathway.     

低磷胁迫下平邑甜茶根构型与磷吸收特性的变化

为揭示苹果适应低磷胁迫的机制,以平邑甜茶[Malus hupehensis （Pamp）Rehd.]为材料,采用水培方式研究了缺磷和复磷条件下根系磷吸收和根构型参数的变化。结果显示,平邑甜茶幼苗在缺磷营养液中培养120 h期间,根系磷最大吸收速率始终高于对照,并趋向一个较稳定的差值;缺磷处理最初12 h内根系磷吸收米氏常数Km值提高,但72～120 h明显下降。缺磷处理的平邑甜茶幼苗转到完全营养液中培养12～120 h,根系对磷的转运效率影响不大,而与磷的亲和力下降,并逐渐恢复到正常状态。平邑甜茶幼苗在缺磷条件下培养至11 d时,一级侧根总长度低于对照,但在17～26 d时,一级侧根总长度明显提高。结果表明,平邑甜茶在短期内主要通过磷吸收动力学的变化来适应缺磷胁迫,较长时期则通过根构型的变化来适应。     

Short catkin1, a novel mutant of Castanea mollissima, is associated with programmed cell death during chestnut staminate flower differentiation

The fact that male flowers far outnumber female flowers is a factor that limits nut yield in Chinese chestnut. A naturally occurring mutation of male catkins was found on a single branch of a Chinese chestnut tree in the mountains near Beijing, China. The mutation was named short catkin1 (sck1). The catkin length of sck1 was only 1/6 to 1/8 that of the wild-type male catkins on the same tree. The mutation was associated with a greater number of female flowers and increased yield. Observations on the development of male catkins with the sck1 phenotype showed that the distal part of the catkins aborted at the stage of chestnut staminate flower differentiation. Further research using transmission electron microscope analysis showed that the process of cell death in sck1 catkins had the typical characteristics of programmed cell death at the subcellular level, such as condensed chromatin, dissolved nucleolus, degraded karyoplasm, burst karyotheca, and disintegrated chloroplasts or mitochondria. Significantly, DNA laddering was detected in tissues of sck1 catkins. In conclusion, the results showed that sck1 was associated with PCD.     

制干辣椒果实辣椒素对干旱、盐及其双重胁迫的响应

为明确干旱、盐等环境因素对制干椒辣椒素含量的影响,试验以红龙23号板椒为材料,从现蕾期开始设置不同土壤含水量65%(W1)、45%(W2)和NaCl(S1=120 mmol·L^-1)及盐旱复合处理(W1S1、W2S1),利用高效液相色谱法分析转色期果实辣椒素素含量,并送样进行转录组测序。结果表明,W1处理下辣椒素含量较对照增加107.11%,W2处理时辣椒素含量下降73.01%;含盐处理均能提高辣椒素含量,其中W2S1处理的较对照高392%。盐、旱胁迫主要影响苯丙烷生物合成途径,其中HCT、4CL、CAD等基因表达受影响较大;聚类分析表明BCKDHE2、ENRb等基因主要响应干旱胁迫,CCR、GS2主要响应盐胁迫。由上可知,适度干旱和盐胁迫均能提高辣椒素含量;干旱加剧时与盐分的复合效应更显著,对辣椒素积累的促进作用更大。