疯草内生真菌苦马豆素合成相关基因及其研究方法的进展

<正>豆科棘豆属(Oxytropis)和黄芪属(Astragalus)有毒植物统称为疯草。疯草的营养价值丰富,是潜在的优良牧草。但家畜长期或过量采食后,可发生以神经机能紊乱为特征的慢性中毒病,称之为疯草中毒病[1]。中毒家畜表现为共济失调、瘫痪、流产、不孕、出生缺陷和死亡等。疯草导致动物中毒的主要因素是疯草中的吲哚里西啶类生物碱—苦马豆素,它能特异性地抑制参与糖蛋白分解代谢的溶酶体α-甘露糖苷酶、高尔基α-甘露糖苷酶Ⅱ,破坏细胞内膜系统[2-     

黄花棘豆对山羊的毒性研究

本试验从瘤胃瘘管每天给5只山羊投服黄花棘豆粉末(10g/kgB·W),以研究该草对山羊的毒性。试验羊在18～22天开始出现神经症状,表现为精神沉郁,目光呆滞,反应迟纯,喜卧,四肢无力,后肢麻痹,少尿等;在33～65天内死亡。实验室检查发现,肝功明显变化,GOT活性,黄疸指数明显升高,血浆α-甘露糖苷酶活性降低,血液高铁血红蛋白含量及全血谷胱甘肽过氧化物酶活性无明显变化,尿低聚糖含量升高,在浓缩尿中可检出生物碱。主要病理组织学变化为小脑蒲肯野氏细胞,胰腺泡细胞空泡变性;肝细胞,心肌细胞及肾小管上皮细胞颗粒变性。试验结果排除了黄花棘豆中毒是由硒和脂肪族硝基化合物引起的可能性,同时证明了黄花棘豆中毒的毒素是吲哚兹定生物碱,该生物碱对α-甘露糖苷酶的抑制作用是中毒的主要环节。     

黄花棘豆2种生物碱成分的鉴定

为分析我国天然草地主要有毒植物黄花棘豆的生物碱成分,为其毒理学、药理学和资源综合利用提供理论依据,本试验采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20、RP18、半制备HPLC技术和现代波谱技术对黄花棘豆生物碱成分进行研究。结果表明,从黄花棘豆正丁醇萃取部位分离得到2个极性较大的生物碱成分,通过现代波谱技术鉴定为(+)-9α-羟基苦参碱和(-)-9α-羟基槐果碱。2种化合物均为首次从棘豆属植物中分离得到。     

甘肃棘豆中有毒生物碱的研究

对存在于甘肃棘豆中有毒的总生物碱成分，采用薄层层析的方法进行了分析研究，从中分离，鉴定出以黄华碱等为主的几种喹诺里西啶类毒性化合物，证实了甘肃棘豆中含有类同于黄花棘豆和小花棘豆的毒性生物碱成分，进而从药理学，毒理学和毒代动力学等方面对这３种植物的毒性生物碱做了讨论印证。     

苦马豆素的分离及其体外抗肿瘤作用

苦马豆素（swainsonine，SW）主要存在于疯草[豆科棘豆属（Oxytropis spp．）与黄芪属（Astragalu）有毒植物的总称]中，它是一种白色针状结晶，分子式为C8H15NO3，化学系统命名为1，2，8-三羟基八氢吲哚里西啶（trihydroxyoctahydroindoliziditie）。     

茎直黄芪化学成分TLC定性与定量分析

为分析茎直黄芪化学成分和吲哚里西啶类生物碱,5kg茎直黄芪草粉经热回流提取,石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取,对各萃取部位化学成分,及氯仿部位和乙酸乙酯部位吲哚里西啶类生物碱进行薄层色谱法(TLC)定性分析,同时用薄层色谱扫描软件,对各成分进行扫描计算相对含量。结果显示,3个萃取部位分别检出13、15、15个显色斑点,其中SYM-12、SYM-10、SYM-6、LF-7、YSYZ-8、YSYZ-6等6种物质相对含量均在15%以上。吲哚里西啶类生物碱专项分析表明,茎直黄芪氯仿部位、乙酸乙酯部位至少含8种和6种吲哚里西啶类生物碱,其中LFSWJ-5、LFSWJ-6、LFSWJ-7、YSYZSWJ-3、YSYZSWJ-4和YSYZSWJ-5等相对含量均在15%以上,LFSWJ-3和YSYZSWJ-4Rf与苦马豆素标准品一致,相对含量分别为10.02%和15.67%。     

苦马豆生物碱成分的初步分析

为进一步筛选苦马豆的主要毒性成分和生物碱类活性物质,对苦马豆生物碱成分进行初步分析。采用生物碱预试、薄层色谱和气相色谱质谱联用等方法对宁夏采集的苦马豆生物碱成分进行定性分析。经薄层色谱分析,苦马豆生物碱出现了Rf值与苦参碱相近的斑点;气相色谱质谱联用分析确定苦马豆生物碱出现了与苦参碱色谱保留时间相近的峰,且该峰对应的离子碎片质谱图与苦参碱离子碎片质谱图一致。但通过薄层色谱和气相色谱质谱联用分析均未从苦马豆中检出吲哚里西啶生物碱——苦马豆素。结果表明,宁夏采集的苦马豆中含有苦参碱,不含苦马豆素或所含苦马豆素低于检测限。     

不同处理方法对黄花棘豆中苦马豆素的影响

本试验采用15种不同方法处理黄花棘豆,检测了不同处理后各组苦马豆素的含量;用处理后的样品进行小鼠饲喂试验,对部分小鼠进行了血清中α-甘露糖苷酶的测定;发现有4种处理方法对苦马豆素具有明显的降解作用,与之对应的小鼠血清中的α-甘露糖苷酶与其它组之间差异显著(P0.05)。     

小花棘豆生物碱对α—甘露糖苷酶活性的影响

为探讨小花棘豆的中毒机理,采用苦马豆素、黄花碱以及这2种生物碱的混合物分别对小白鼠进行传统灌胃,并于试验开始后第7、14、21、28和35天分别从各组中随机取4只小白鼠,眼球采血,肝素钠抗凝,利用紫外可见分光光度计检测血清中α—甘露糖苷酶的活性。结果表明:低浓度的SW具有提高血清中α—甘露糖苷酶活性的作用,中等浓度和高浓度的SW在短时间内也可以提高血清中α—甘露糖苷酶的活性,但时间过长会严重降低血清中α—甘露糖苷酶的活性;Ts在整个试验过程中不影响血清中α—甘露糖苷酶的活性;混合生物碱组表现出与SW组类似的结果。     

苦马豆素对机体免疫机能的影响

苦马豆素属吲哚里西啶类生物碱,是一种极强的α-甘露糖苷酶竞争性抑制剂。研究表明,它能抑制肿瘤细胞的生长与转移,刺激机体的免疫系统,提高机体的免疫机能,促进免疫细胞的增生,增强杀灭肿瘤细胞的能力。本文就近十几年来有关苦马豆素对于机体NK、LAK、巨噬细胞、淋巴细胞和骨髓细胞质、骨髓细胞及骨髓细胞分化成CFU-G、BFU-E、CFU-GEMM集落能力的影响进行了阐述,并对苦马豆素作用机理的研究做了介绍。     

变异黄芪有毒成分的分离与分析

从变异黄芪(Astragalus variabilis Bunge)中分离出结晶Ⅰ,经紫外、红外光谱及液相色谱分析、α-甘露糖苷酶抑制试验,并与苦马豆素(Swainsonine)标品进行了比较。确证变异黄芪所含主要有毒成分为吲哚兹定生物碱——苦马豆素,经测定其含量为0.029%。     

宽苞棘豆生物碱提取与毒性试验

采用醇类生物碱系统提取法,从宽苞棘豆中分离出A 、B、C、D四种组分,经薄层层析检测,并与苦马豆素标准品对照,结果表明B、C组分含有吲哚里西啶生物碱--苦马豆素,A、D组分不含有苦马豆素.将C组分按1 g/kg和2 g/kg分别家兔灌胃,结果家兔没有表现出明显的临床中毒症状和病理变化.     

苦马豆素与波状芽管蠕孢属内生真菌关系的研究进展

疯草是含有苦马豆素的豆科棘豆属和黄芪属有毒植物的统称,家畜过量采食会发生以神经系统机能紊乱为特征的慢性中毒病。疯草的主要毒性成分为吲哚里西啶生物碱苦马豆素,波状芽管蠕孢属内生真菌在疯草中普遍存在,该属真菌与疯草中苦马豆素产生、含量及疯草毒性关系密切。文章对疯草中的苦马豆素和波状芽管蠕孢属内生真菌之间的关系进行综述,旨在为动物疯草中毒病的防控提供参考。     

羊棘豆草中毒的诊断与防治

棘豆草属于耐干旱的多年生草本植物,该种植物具备很顽强的生命力,繁殖能力也很强,是青海省草场主要有毒有害杂草,主要分布在山地阴坡草地。引起羊中毒的赤豆植物主要有黄花赤豆、甘肃棘豆草、急弯棘豆草和小花棘豆草,前2种毒性最强,危害最严重。赤豆草全株都有毒性,当羊放牧过程中吃了棘豆草后,通过肠道消化吸收产生的生物碱,破坏羊神经系统和消化系统,使得羊血液中Z-甘露糖苷酶的活性明显下降,从而导致羊慢性中毒发生,严重的还会导致羊出现中毒死亡。羊棘豆草中毒已经成为制约羊养殖产业健康发展的重要疾病。笔者就一例羊棘豆草中毒的诊断与防治进行分析。     

羊棘豆草中毒的诊断与防治

<正>棘豆草属于耐干旱的多年生草本植物,它的生命力和繁殖力都很强,在青海省境内就有21种之多,主要分布在山地阴坡草地。危害羊中毒的棘豆植物主要有黄花棘豆、甘肃棘豆、急弯棘豆和小花棘豆4种,其中前两种危害最为严重。棘豆全草都有毒性,该草在羊胃肠道中通过消化吸收,产生的生物碱能破坏羊神经系统和消化机能,并使血浆中的z-甘露糖甙酶的活性明显下降,引起羊慢性中毒而死亡。对畜牧业发展造成了巨大的经济损失。近     

羊棘豆草中毒的诊断与防治

棘豆草属耐干旱的多年生草本植物,它的生命力和繁殖力都很强,在我省境内就有21种之多,主要分布在山地阴坡草地。引起羊中毒的棘豆植物主要有黄花棘豆、甘肃棘豆、急弯棘豆和小花棘豆四种,其中前两种危害最为严重。棘豆全草都有毒性,该棘豆草在羊胃肠道中通过消化吸收,产生的生物碱能使破坏羊神经系统和消化机能,并使血浆中的Z—甘露糖甙酶的活性明显下降,引起羊慢性中毒而死亡。对畜牧业发展带来了巨大的经济损失。近年来笔者经常遇到棘     

毛序棘豆生物碱成分分析

为了明确毛序棘豆所含生物碱成分种类,本试验对采自甘肃通渭县的毛序棘豆地上部分,采用生物碱系统提取、薄层色谱分析和气相色谱-质谱(GC-MS)检测技术,对毛序棘豆全草生物碱成分进行提取分离和检测。结果显示:毛序棘豆碱性氯仿萃取部分和碱性正丁醇萃取部分在薄层板上分别有4个和2个生物碱显色斑点;经GC-MS分析鉴定出22种化合物,其中有5种生物碱,分别为鹰爪豆碱、臭豆碱、二苯胍、腺嘌呤和2-(1-吡咯烷基)-2-环戊烯-1-酮,其中以臭豆碱含量最高,相对含量为4.49%。表明毛序棘豆含有多种生物碱。     

疯草的生态学研究概况

疯草是豆科棘豆属和黄芪属有毒植物的统称,含有吲哚里西啶生物碱--苦马豆素(SW),是世界范围内危害草原畜牧业生产可持续发展最严重的毒草.论文在深入调查及试验研究的基础上,结合已报道的最新文献资料,综述了世界疯草的种类与生态学分布,SW与生态因子的关系,以及疯草的生态学控制研究概况,为我国草地生态学研究及疯草的合理开发利...     

苦马豆素研究进展

1　苦马豆素研究简史苦马豆素 (swainsonine)因最初分离于灰苦马豆 (Swain-sona canesces)而得名〔1〕。其发现历经一个世纪。自从 Marsh(190 5～ 190 7)〔2〕证实疯草病与采食某些棘豆属和黄芪属植物有关以后 ,许多学者进行了毒素的分离研究。 Cauch(192 9)〔3〕从兰伯氏棘豆中分离出一种疯草毒素 ,可以引起猫的疯草病 ,他描述这种毒素是一种稳定的带有多羟基的含氮化合物 ,易溶于水 ,不溶于氯仿、乙醚和烃类溶剂 ,但由于当时条件所限未能进行结构鉴定。Frap(1936 )〔4〕从密柔毛黄芪中分离出一种毒性成分 ,呈碱性 ,吸水性强 ,取名为洛克…     

冰川棘豆对山羊的毒性试验

10只杂种奶山羊随机等分为试验组和对照组，试验组羊按每日10g／kg的剂量饲喂冰川棘豆干粉，定期采血，测定血液常规指标和生化指标，进行病理学检验。结果表明，RBC、Hb、PCV、MCH、MCV、MCHC显著低于对照组（P〈0．01），淋巴细胞出现空泡变性。试验组羊血清碱性磷酸酶（AKP）活性，从试验的第7天起持续升高；从试验的第14天起，血清谷草转氨酶（GOT）、乳酸脱氢酶（LDH）活性，尿素氮（BUN）含量明显高于对照组；在试验的35～49d，血清淀粉酶活性持续升高，与对照组比较差异显著（P〈0．05或P〈0．01）；从试验的第7天起，血清α-甘露糖苷糖（AMA）活性显著低于对照组（P〈0．01），说明冰川棘豆对心、肝、肾、脑等器官有一定的毒害作用，冰川棘豆中含有吲哚兹啶生物碱。病理组织学检查中发现，心、肝、脾、肺、肾、脑、卵巢等组织普遍发生空泡变性。