小金海棠抑制性消减cDNA文库的构建及文库质量分析

构建小金海棠抑制性消减文库,为进一步大量筛选、克隆苹果铁高效基因、果树转基因工程奠定基础。试验是在提取水培条件下小金海棠缺铁(EDTA-Fe2＋,4μmol/L)和正常供铁(EDTA-Fe2＋,40 μmol/L)的根的总RNA,经过LD-PCR扩增双链cDNA后,利用抑制性消减杂交(SSH)方法,通过两轮杂交和两次抑制性PCR,构建了小金海棠缺铁条件下包含1200个独立克隆的消减cDNA文库。用菌落PCR检测,结果显示插入片段大小范围在300~800bp之间,提取质粒进行PCR和质粒RsaⅠ酶切同样也得到一致性的结果。     

白花曼陀罗叶总碱提取物杀线活性及其作用机理研究

为了解白花曼陀罗的杀线活性物质及其作用机理,对白花曼陀罗叶的总生物碱进行了提取鉴定,并通过测定乙酰胆碱酯酶活性及乙酰胆碱含量研究其作用机理,结果表明：生物碱是白花曼陀罗的重要杀线活性物质,可抑制线虫乙酰胆碱酯酶活性,提高线虫乙酰胆碱含量,直接作用于线虫的神经系统。     

辣椒育性恢复相关基因消减文库的质量分析

本试验对构建的辣椒育性恢复相关基因的消减cDNA文库进行质量分析.通过对文库构建过程中的各个环节,包括总RNA的提取,mRNA的分离纯化,RasⅠ酶切,接头连接,消减效率检测以及菌落PCR等,进行分析和评估,证明利用抑制消减杂交技术(SSH)所构建的消减文库是准确可靠的,富集了大量与辣椒育性恢复相关的基因,为进一步精确筛选、克隆、分析辣椒育性恢复相关基因奠定了基础.     

亚致死氧化胁迫锻炼对橄榄假丝酵母（Candida oleophila）抗氧化基因转录表达、抗逆性及生物防控的增效作用

采用5mmol／L浓度的H202对橄榄假丝酵母（Candida oleophila）预处理30min,结果表明,这种亚致死胁迫处理可增强橄榄假丝酵母对于之后的致死胁迫处理（50mmol／LH202,40℃,pH4）的耐受力。与对照相比,经亚致死胁迫处理的酵母菌对于接种于苹果果实上的扩展青霉菌和灰霉菌具有更好的抑制活性,且在果实伤1：2处接种初期具有较快的生长繁殖速度。采用抑制性消减杂交技术研究了酵母菌在基因表达水平上对于亚致死氧化胁迫的响应,并利用半定量RT—PCR技术明确了其转录水平。结果表明,亚致死氧化处理使酵母菌中的7个抗氧化基因发生了上调,这些基因的高表达与经胁迫处理的酵母菌中活性氧积累的减少及脂质过氧化产物含量的降低有密切联系。说明对具有生物防控能力的酵母菌采用非生物压力胁迫,可提高其中与抗氧化胁迫相关的基因表达,从而提高其生物防控效果。     

落叶松体细胞胚原胚团阶段差异表达基因文库的构建与分析

以日本落叶松×华北落叶松杂种无性系胚性细胞系Y35继代培养阶段胚性愈伤组织的cDNA为实验组,体细胞胚成熟阶段培养物的cDNA为对照组,利用抑制性消减杂交技术(SSH)构建了原胚团阶段差异表达基因文库.随机选取800个阳性克隆进行测序,共获得400个UniESTs,将其分为19类,功能分析结果表明这些UniESTs参与代谢、转录、信号转导、转运、细胞生长分裂、细胞结构、细胞命运、蛋白质合成与降解、核酸及蛋白质加工、发育、防御等诸多生物学过程.这些差异表达ESTs的获得为研究植物体细胞胚胎发生的分子机理奠定了基础.     

黏类小麦细胞质雄性不育系mtDNA消减文库的构建

本研究利用抑制性消减杂交技术,构建了黏类小麦细胞质雄性不育线粒体DNA的消减文库。分别提取相同细胞质背景下的不育和可育等基因系线粒体基因组DNA(mtDNA),用RsaⅠ酶切成大小不等的片段,并各自与不同的接头连接,连续经过两次消减杂交和两次PCR扩增,将PCR产物与克隆载体连接,转化为大肠杆菌感受态细胞DH5α,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建差异DNA消减文库。在构建的不育mtDNA文库中,将SSH文库的全部扩增产物与SSH文库中的单条扩增条带分别进行胶回收和克隆转化,分别挑取54个和6个阳性克隆进行测序分析和相关功能初步比对。结果表明,不育mtDNA的SSH文库差减杂交效率较高,质量较好;回收单条扩增条带分别进行克隆测序的结果准确率较高;对测序序列进行BLASTx比对及功能注释分析发现,约90%的序列来源于线粒体基因nad1和nad5的非编码区。     

小麦抗白粉病SSH-cDNA文库中差异基因的表达模式

为了解白粉菌诱导下抗白粉病小麦的抗病机制,构建了白粉菌接种初期的抑制性消减杂交cDNA(SSH-cDNA)文库。从中随机挑取140个阳性克隆进行测序,去除冗余序列和重复序列后,得到94条EST,利用NCBI的BLAST在线序列比对工具对GenBank的蛋白质数据库进行同源性比对及功能分类。结果表明,49个EST与已知功能蛋白同源性较高,主要涉及初级代谢(2%)、能量代谢(24%)、细胞结构(2%)、转录(2%)、蛋白质合成加工与储藏(16%)、转运(4%)、信号转导(4%)和抗病与防御(30%)。经文库比较,筛选出与病程相关蛋白基因同源的EST(Z25-1)和与谷胱甘肽硫转移酶同源的EST(Z440-1),GenBank登录号为EX567369和EX567360。以其EST序列为依据设计引物,通过RT-PCR分析它们在白粉菌诱导下的表达模式,结果该2基因表达存在明显差异。其中,Z25-1在未接种白粉菌时具有一定的表达量,白粉菌侵染后表达量开始上升,侵染72 h时表达量最高,然后下降;Z440-1在未接种时也具有一定的表达量,但在接种初期表达微弱,甚至不表达,24 h后表达开始上升,到72 h时达最高,然后下降。本研究表明,病程相关蛋白和谷胱甘肽硫转移酶属于诱导型表达基因,且参与白粉病抗病反应,在白粉菌诱导72 h时表达量最高。     

亚油酸甲酯对朱砂叶螨的生物活性研究

研究亚油酸甲酯对朱砂叶螨的生物活性。采用玻片浸渍法和叶片残毒法测定生物活性。亚油酸甲酯具有较强的触杀、产卵抑制和驱避作用,浓度为5 mg/ml时,对朱砂叶螨的雌成螨和卵24h后的校正死亡率分别达到82.82%和78.54%,LC50分别为1.4434mg/ml和2.0283mg/ml;对雌成螨24h后的产卵抑制率和驱避率分别达到78.46%和95.61%。本试验为亚油酸甲酯作为杀螨活性物质的作用机理的探索提供了一定的理论基础。     

菊花的人工杂交育种（续第三讲）

四、亲本品种的栽培养护亲本栽培措施的适宜与否,是杂交能否成功地得到种子的关键,主要措施为: 1.利用“三早”以达到获得种子的要求:在秋菊的杂交选育中,为了得到质优量多的杂交种子,需采用能使亲本开花早、杂交早、种子成熟早的技术措施。方法是:将入选的亲本用分株繁殖法于3—4月     

Analysis on Cause of the Eutrophication of Water Body

Based on mechanism of eutrophication, the cause of eutrophic formation in water is analyzed in this paper. The analysis is made from the level of nutrients (nitrogen and phosphorus), content of iron and silicon, illumination intensity, temperature, water dynamics (stream of water and wind power) and period of renewal. The purpose of the analysis is to provide a reference to keep a balance of ecology in water, control the water pollution and prevent eutrophication of water.     

环境因素对藻类生长竞争的影响

为了研究环境因素对藻类生长竞争的影响,综述了国内外近几年的相关研究,发现大多为单因素对藻类生长的影响,而多因素对藻类生长的交互作用以及不同藻种间的竞争研究还存在不足。笔者简要介绍了藻类的分类及其在生态系统中的作用,详述了温度、光照、氮磷、pH对藻类生长竞争的影响,并在此基础上提出尚需重点研究的关键问题,以期深入了解环境因素对藻类生长竞争的影响,并为开展通过调控重要环境因素来改善藻类群落结构和水体生态环境、提高水体初级生产力等方面的研究提供可资借鉴的资料。     

苦参种子发芽特性研究

对苦参种子硬实的最佳破除方法、最适发芽的温度、光照条件及盐浓度对种子萌发的影响进行了研究.结果表明:98%浓硫酸处理、烫种和砂纸磋磨处理均可提高苦参种子的发芽率,其中以98%浓硫酸处理40min为最佳处理方法;25℃为苦参种子发芽的最适温度,光照条件非苦参种子萌发的必备条件;适量的NaCl(＜5 g/L)有利于提高苦参种子的发芽势和发芽率,高浓度的NaCl(＞7 g/L)则明显抑制种子萌发.     

驯食强度对鳡幼鱼驯食效果及生长的影响

研究了驯食强度对鳡（Elopichthys bambusa）驯食成功率(WSR)、残食率(CR)、死亡率(MR)及生长的影响。实验分6组,于1.0×1.0×1.0 m³网箱中进行,每日驯食2次,驯食强度分别为每次驯食1.0 h（S1组）、1.5 h（S2组）、2.0 h（S3组）、2.5 h（S4组）、3.0 h（S5组）和4.0 h（S6组）。结果显示：WSR随着驯食强度的增强显著升高后降低(P<0.05);总CR随着驯食强度的增加而显著降低(P<0.05);总MR随着驯食强度的增加先降低后略有升高。实验终期,体重特定生长率(SGR_BW),全长特定生长率(SGR_TL)和肥满度(CF)随驯食强度的增强显著增大(P<0.05);体重变异系数(CV_BW)随驯食强度增加显著减小(P<0.05)。综上所述,在实验条件下,鳡最佳驯食强度为每次驯食3 h。     

宁夏杏、李子花期幼果期霜冻指标试验研究

霜冻是制约宁夏经济林果生产的主要农业气象灾害之一,探究不同果树霜冻指标可为果树霜冻预报、监测预警及果树霜冻灾害风险评估和灾害防御提供参考。本研究采用人工霜冻模拟箱模拟霜冻试验,对杏树、李子树开花期及幼果期遭受霜冻的临界温度及持续时间开展研究,结果表明：2个杏品种‘金太阳’和‘李梅杏’花期遭受霜冻的温度指标差异不大,-2℃为轻度受冻,-2~-3℃之间为中度受冻,＜-3℃持续时间大于1 h则为重度受冻。4个李子品种花期‘尤萨’的耐冻性较强,在-3℃下持续4 h仅轻微受冻,其他品种在-3℃下就会严重受冻,‘龙园秋李’的耐冻性最差,-3℃持续1 h受冻率就会达到50%。杏幼果在-2.5℃持续1~2 h为轻度受冻,3~4 h为中度受冻,小于或等于-3℃持续1 h及以上为重度受冻,2个品种差异不大。李子幼果的耐冻性差于杏幼果,‘尤萨’在-1℃持续3~4 h和-2.5℃持续1 h就会轻度受冻,-2℃和-2.5℃时持续时间大于等于2 h或者遇-3℃低温就会重度受冻。‘兰蜜李’-2℃和-2.5℃大于或等于3 h或者温度小于等于-3℃为重度受冻。     

红果小檗种子萌发特性研究

以红果小檗种子为对象,研究了不同光照、温度、盐胁迫和PEG模拟干旱胁迫条件下,红果小檗种子的萌发特性.结果表明:1)全光照、全黑暗及12h光照/12h黑暗3种不同的光照条件下,红果小檗种子的萌发规律无显著差异,说明红果小檗种子在萌发期对光没有特殊要求,属于中光性种子;2)不同温度条件下,其萌发率、发芽指数和发芽势均呈现出随温度升高而先上升后下降的趋势,且以25℃时最高,说明25℃是红果小檗种子萌发的最佳温度,且在萌发期较耐受低温,但不耐高温;3)在不同浓度的盐胁迫下,其萌发率、发芽指数和发芽势均呈现出随盐浓度升高而逐渐下降的趋势,但低盐胁迫下与对照并无显著差异,说明红果小檗种子在萌发期对低盐有较强的耐受性,0.2 mol/L为红果小檗种子的半致死盐浓度;4)在不同干旱胁迫条件下,其萌发率、发芽指数和发芽势均呈现出随着干旱程度的增加而逐渐下降的趋势,PEG浓度达到10％时,仍有60％以上的萌发率,说明红果小檗种子在发芽期对干旱胁迫具有较强的耐受性,是一种较为耐旱的植物.     

河田鸡体重、体尺及屠宰性状测定及其相关性分析

为了探讨河田鸡体重、体尺与屠宰性状的相关关系,为河田鸡的选育提供依据。本研究对120日龄河田鸡的体重、体尺和屠宰性状进行测定,并对各指标进行了相关性分析。结果表明：体重、体斜长、龙骨长、胸深、胸宽、胫长和胫围在公母之间存在极显著差异(P＜0.01);体重与体斜长、龙骨长、胸深、胸宽、胫长、胫围均有显著或极显著正相关(P＜0.01),其余各指标间亦有不同程度的相关;宰前体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、腿肌重、腹脂重、皮脂重、腿肌率和腹脂率在公母之间存极显著差异(P＜0.01);宰前体重与屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重、皮脂重、屠宰率、半净膛率、全净膛率呈显著(P＜0.05)或极显著正相关(P＜0.01),其余各指标间亦有不同程度的相关。     

棉花和瓜类上棉蚜相互转换后取食行为的EPG研究

实验采用 EPG技术测定了棉花和 3种瓜类上棉蚜转换后的取食行为 ,结果表明 ,西瓜、黄瓜和南瓜上的棉蚜转接到棉花叶片上取食 ,均可出现 A、B、C、E、F和 G6种取食波 ,其中寻食刺探的次数和时间均较少 ,且每次达到韧皮部吸取营养的时间长于 1 0 min。而棉花上的棉蚜转到黄瓜叶片后 ,寻食和刺探的时间占整个处理时间的95 %以上 ,口针到达韧皮部的次数少、持续时间很短。黄瓜叶片不利用于棉花上棉蚜的取食     

抽穗至成熟期气温对弱春性小麦千粒重和不孕小穗率的影响

弱春性小麦品种的千粒重和不孕小穗率呈极显著的负相关.抽穗至成熟期间的适温范围是21～26℃.千粒重与抽穗至成熟天数呈极显著的正相关.在抽穗至成熟期间,千粒重与平均日均温呈负相关,与平均日最高温度呈极显著的负相关,而与平均昼夜温差呈极显著的正相关.     

LED光照对气调保鲜菜心叶绿素合成代谢的影响

为探究LED光源在菜心贮藏保鲜期间对叶绿素合成代谢的影响,采用自发气调包装菜心,在室温(20±1.0)℃、相对湿度60％±5％条件下贮藏,以每天12 h光照强度(105±5)lx的LED蓝红光(465±5)nm照射包装菜心作为LED光照处理组,并以避光贮藏作为暗处理组,观察贮藏期间气调包装菜心叶绿素含量及其降解相关酶活性的变化.结果 表明:贮藏期间,与暗处理组相比,LED光照处理能够有效减少菜心的失重,抑制菜心的呼吸强度和叶绿素降解相关酶(叶绿素酶(Chlase)、脱镁叶绿素酶(PPH)、叶绿素降解过氧化物酶(Chl-POX))活性,延缓了菜心叶绿素的降解,菜心的色泽品质在室温贮藏4d后仍能保持新鲜.