猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因在Hela细胞中的表达及表达蛋白的定位

猪圆环病毒（Porcine circovims，PCV）属于环状病毒属，该病毒无囊膜，基因组为单链环状DNA，大小约为1．7kb，编码2个主要的开放阅读框架：ORF1和ORF2，ORF2编码病毒的核衣壳蛋白（Nawagitgul et al，2000），可能在PCV2病毒致病方面具有重要的作用。PCV2可引起断奶仔猪多系统衰竭综合症（PMWS）．给养猪业带来了巨大的经济损失。分别用ORF2基因的亚单位疫苗免疫猪、核酸疫苗免疫小白鼠，均具有良好的效果（Blanchard et al，2003；Kamstrup et al，2004）。关于PCV2疫苗的研究在我国尚未处报道。本实验在异源启动子CMV下实现了ORF2在真核细胞中的表达。     

甘蓝型油菜柱头特异启动子的克隆和序列分析

芸薹属自交不亲和相关基因SLR1只在柱头中特异表达，根据已知的SLR1基因启动子序列设计特异引物，用PCR法从几个甘蓝型油菜品种和品系中分离得到相应的启动子片断，进行序列比较分析后，并构建它们与GFP融合的植物表达载体，转化拟南芥，验证所分离到的启动子的时空特异性。研究表明，来自自交不亲和羽衣甘蓝和来自自交亲和的甘蓝型油菜的SLR1启动子具有相似的序列结构和相同的组织特异表达功能。该结果将为下一步研究S-locus基因在甘蓝型油菜中的表达和相互作用奠定基础。     

基因枪法转化小麦幼胚瞬时表达

自Vasil et al．（1996）利用基因枪将获得小麦对除草剂Basta具有抗性的再生植株以来，基因枪介导的小麦遗传转化研究发展很快（Altpeter et al．，1996）。在小麦基因枪转化中，优化基因枪转化因素，提高转化效率仍然是基因转化的关键问题。本实验研究了不同金粉用量、质粒DNA浓度及轰击枪数对小麦幼胚瞬时表达的影响，通过GUS染色和细胞压片，分析了gus基因的瞬间表达。     

在烟草中表达拟南芥GAI基因获得矮化的烟草植株

赤霉素（GA）能控制植物茎的伸长，从而决定植物的高度（Schomburg et al．，2003）。一些植物的矮化突变体是由于体内GA缺陷、GA不敏感引起的（Ross et al.，1997）。因此，改变植物体内GA的浓度和对GA的敏感性都可能改变植物的高度，获得矮化植株。GAI是一个在拟南芥中发现的GA应答的负调控因子，过量表达引起植株矮化（Peng et al．,1997．Fu et al．，2001）。本研究克隆了拟南芥GAI基因，在烟草中表达获得了矮化的烟草植株。     

酒类酒球菌mle基因座的克隆和测序

酒类酒球菌（Oenococcus oeni）是优良的葡萄酒乳酸菌。苹果酸-乳酸酶（malolactic enzyme，MLE）和苹果酸通透酶（malate permease，MleP）是苹果酸-乳酸发酵（malolactic fermentation，MLF）的关键酶（Labarre et al.，1996）。酒类酒球菌mle基因座上的苹果酸-乳酸酶基因（mleA）和苹果酸通透酶基因（mleP）构成双顺反子的操纵子结构（Labarre et al．,1996）。本研究将我国自行筛选的酒类酒球菌优良菌系作为目的基因供体，进行mle基因座的克隆和其上2个基因的测序，为这2个基因的研究、利用及外源表达提供基本资料。     

Wolbachia的wsp基因在不同蚜虫体内的PCR扩增

Wolbachia是存在于节肢动物体内的一类呈母系遗传的细胞内共生细菌，可以通过卵的细胞质传播并参与调控寄主的多种生殖活动，如诱导孤雌生殖、细胞质不亲和等（Gotoh et al．，2003）。Wolbachia可能是自然界中分布最广、丰度最大的共生细菌类群（Keeling et al．，2003）。wsp基因是一种编码Wolbachia表面蛋白的基因，相对于16S rDNA、flsZ基因等DNA区段，wsp基因进化速度更快，可以更好地揭示Wolbachia与其寄主之间的相互关系（Bourtzis，1998）。     

大白菜低温诱导基因COR30的转录表达

低温诱导某些与失水相关的物质表达，保护大分子物质避免受到过度失水的伤害。在为数众多的低温相关蛋白中，胚胎发育后期富集蛋白（LEA）是一类提高细胞对脱水忍耐性的蛋白。Dure et al．（1989）根据LEA蛋白的结构将其分为3类：第1类是成熟蛋白（Em）；第2类是ABA应答蛋白（RAS）和脱水蛋白；其余为第3类。目前对脱水蛋白的研究较多（Borovskii et al．，2002，Lu et al．，2003）。     

百合品种交配亲和性研究

本文研究了百合的麝香杂种系、亚洲杂种系与东方杂种系品种自交、系内与系间杂交亲和性。各系均有自交亲和和不亲和的品种。同一杂种系内品种间杂交大都为亲和的,同时存在杂交不亲和现象。系间杂交则基本上是不亲和的。野百合自交不亲和并与其他品种杂交也不亲和。本文对交配亲和性的判断指标作了有益的探讨,是本研究的特色之一。有胚率、果实（子房）大小、果实维系时间长短均是有用的判断指标。     

甘蓝自交不亲和系同源四倍体的获得及其亲和性

随着现代生物技术的发展，人工诱变多倍体已不仅局限于创建植物新类型、培育作物新品种，它作为一种桥梁，在遗传渐渗、基因转移和三体系创建(申书兴等，2000)等基础研究方面已起到越来越重要的作用。结球甘蓝为十字花科芸薹属的重要蔬菜，其多倍体研究国内外都十分重视。20世纪50-60年代，通过秋水仙素诱变获得了甘蓝的同源四倍体，70年代培育成了四倍体甘蓝品种并应用于生产。但关于甘蓝自交不亲和系的多倍体诱变研究至今尚未见报道。本实验以甘蓝自交不亲和系8398．A和8398．B为试材进行多倍体的诱导及其遗传特性研究，旨在为甘蓝多倍体水平上的自交不亲和性及杂种优势利用研究提供基本资料。     

克氏杆菌gldA基因亚克隆及其原核表达载体构建

甘油脱水酶(glycerol dehydratase EC 4．2．1．30)是控制甘油分解和产生1，3-丙二醇的关键性限速酶。甘油脱水酶是由α、β和γ3个亚基组成的复合物(α2β2γ2)，分别由gldA、gldB和gldC基因编码。研究(Frank et al.1998;Macis et al.,1998;Markus et al.,1996)认为甘油脱水酶α亚基无论在甘油脱水酶的结构上还是功能上都起到重要的作用。本研究克隆了克氏杆菌的甘油脱水酶α亚基基因(gldA)并构建了该基因的原核表达载体，为甘油脱水酶基因的进一步表达研究及探索其作用机制奠定了基础。