四氯化碳致小鼠急性肝损伤动物模型建立方法的研究

通过对染毒途径、剂量和时间的研究,建立四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤模型。采取腹腔注射和灌胃两种途径给予小鼠1%CCl4,染毒后24 h检测血清转氨酶含量,并观察肝脏病变。结果显示,灌胃组比腹腔注射组小鼠血清转氨酶变化个体差异小,肝脏病变明显,病灶分布均匀,且与实际中毒途径一致,故采用灌胃方法进行确定染毒剂量及时间试验。分别以0.125%、0.25%、0.35%、0.5%的CCl4给小鼠灌胃,染毒24 h后检测血清转氨酶含量,确定最佳染毒剂量。以该浓度给小鼠灌胃,分别于染毒后2、6、12、16、20、24、28、32、48 h检测小鼠血清转氨酶含量。结果表明,灌胃0.35%CCl4,小鼠血清转氨酶升高与对照组相比差异极显著(P<0.01),此浓度灌胃后,20 h血清转氨酶含量显著升高(P<0.01),24 h达到最高值,与对照组相比差异极显著(P<0.01)。因此,以0.35%四氯化碳,按0.1 mL.10 g-1体重灌胃,染毒24 h,可建立较理想的小鼠急性肝损伤模型。     

大蒜多糖对四氯化碳致小鼠肝炎血清及组织转氨酶影响

通过大蒜多糖(GPA)对四氯化碳(CCl4)致肝炎模型小鼠血清和肝组织中谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的影响,以探讨大蒜多糖对小鼠肝脏组织的保护作用.采用CCl4灌胃建立小鼠化学性肝炎模型,用大蒜多糖对肝炎模型小鼠进行治疗,7 d后眼眶采血,取肝组织,赖氏法测定血清和肝组织匀浆中GPT和GOT的活力.结果表明:大蒜多糖能明显降低肝炎模型小鼠血清和肝组织中的GPT和GOT活力,说明大蒜多糖对急性化学性肝炎具有抗炎保肝作用.     

瘢痕动物模型的建立

病理性瘢痕包括增生性瘢痕（hypertrophic scar,HS）和瘢痕疙瘩（keloid．K）,一直是困扰着医学界的难题。病理性瘢痕是人类皮肤创伤愈合过程中所独有的现象,到目前为止尚无动物皮肤损伤自然愈合遗留病理性瘢痕的报道。因此,在创伤修复的实验研究中“存在的主要问题是缺乏异常瘢痕形成的动物模型”。自20世纪50年代起,国内外学者努力摸索以建立不同类型的动物模型,并利用这些模型对增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理和预防诊疗等进行了一系列的研究。     

海带岩藻聚糖硫酸酯对四氯化碳致肝损伤小鼠的保护作用

对小鼠分别灌胃200、400、800 mg/(kg·d)的海带岩藻聚糖硫酸酯(简称FLJ,利用酶解法制备),于第7天腹腔注射四氯化碳制备小鼠急性肝损伤模型,以200 mg/(kg·d)的联苯双酯做阳性对照.测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,并观察肝组织形态学变化,研究FLJ对CCl_4诱导急性肝损伤小鼠的保护作用.结果表明:FLJ各剂量均能抑制肝损伤小鼠血清ALT、AST活性的升高,且中、高剂量组达到显著水平,并能显著提高肝组织中SOD活力、降低MDA含量,减轻由对肝细胞的病理损伤.FLJ对CCl_4造成的小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用.     

肝毒蠲汤抗大鼠四氯化碳肝损伤的实验研究

目的 :观察肝毒蠲汤对四氯化碳 (CCl4 )所致大鼠急性肝损伤的防治作用。方法 :48只大鼠随机分为 6组 :正常对照组 ,肝损伤模型组 ,联苯双酯组和肝毒蠲低、中、高剂量组。除正常对照组外 ,其余各组用 CCl4 造成大鼠急性实验性肝损伤 ;模型组给予生理盐水 ,其余 4组分别给予联苯双酯和肝毒蠲低、中、高剂量 ,共治疗 14 d。实验结束后 ,检测各组大鼠的血清丙氨酸转氨酶 (AL T)、天门冬氨酸转氨酶 (AST)含量 ,并取肝脏作病理组织检查。结果 :肝毒蠲高、中、低剂量组血清 ALT、AST水平均较模型组明显降低 (P<0 .0 0 1) ,且肝毒蠲高剂量组降酶作用较低剂量组明显 (P<0 .0 0 1)。经肝毒蠲处理组大鼠肝组织基本结构未发生明显改变 ,肝细胞脂肪变性及炎症细胞浸润均较模型组明显减少。结论 :肝毒蠲能显著降低 CCl4 所致急性肝损伤大鼠血清 ALT、AST水平 ,对 CCl4 所致大鼠的肝损伤具有显著的防治作用。     

鹿茸粉对四氯化碳急性肝损伤小鼠肝脏超微结构的影响

用四氯化碳复制小鼠急性肝损伤模型,60只小鼠被随机分为6组:空白组,模型组,鹿茸粉低剂量组,鹿茸粉中剂量组,鹿茸粉高剂量组,联苯双酯组(阳性对照)。处死小鼠采集样本制备电镜超薄切片,观察各组小鼠肝脏的超微结构。结果表明,各治疗组均能减轻四氯化碳对小鼠肝脏超微结构的损伤,尤其是鹿茸粉高剂量组和联苯双酯组,表现为线粒体及内质网等细胞器的损伤减轻,细胞质内脂滴减少,染色质边集,细胞质膜受损等病理改变明显减轻。可见,鹿茸粉对四氯化碳急性肝损伤小鼠肝脏的超微结构损伤具有一定的保护作用。     

改良溶血性贫血动物模型的建立

[目的]建立一种改良的小鼠急性溶血性贫血模型,为临床药物试验提供依据。[方法]采用连续用药方式对昆明小鼠皮下注射盐酸苯肼来制备动物模型,每日检测网织红细胞的比例、红细胞数量、白细胞数量、血红蛋白含量。[结果]血液检测显示,用药2～3 d后小鼠开始出现贫血现象,第7天左右红细胞数量降低60.0%以上,网织红细胞比值最高达19.5%,同时血红蛋白含量降低约67.0%。[结论]改良的小鼠急性溶血性贫血模型制备方法可行,符合血液学检测标准。     

鸡气囊和猪肺、肾、肝铸型干式标本制作工艺

在动物脏器铸型标本制作前，先要准备好新鲜的动物内脏器官、灌注器械、腐蚀存贮器具、洗涤用具及防护用品，将水浴锅加热调至设定温度为70～80℃，把液体塑料(25％塑料颗粒与75％丙酮溶液混合而成)和油画颜料按一定的比例溶化成有色液体塑料。普蓝液体塑料常用普蓝油画颜料与液体塑料配制灌注鸡气管、猪肺气管、肾静脉及肝门静脉内；铬黄液体兼常用铬黄油画颜料与液体塑料配制灌注肺动脉管腔和肾输尿管内。     

鹌鹑和鸡肝脏的定量组织学比较

鹌鹑和鸡肝脏的定量组织学比较刘辉，王丽琴（新疆农垦科学院畜牧兽医研究所，石河子，８３２０００）近年来，体视学（Ｓｔｅｒｅｏｓｃｏｐｙ）在生物学领域的应用日趋广泛，国内一些学者利用该项技术已对一些家畜和家畜的部分组织进行了研究［１－５］。本文旨在对鹌鹑...     

利用零价铁去除四氯化碳的批实验研究

通过气相色谱的方法,利用廉价铁粉对水中四氯化碳进行还原性脱氯,对影响反应速率的因素(Fe0纯度和pH值)、反应产物以及可能的反应路径进行了研究和探讨.结果表明:(1)在实验范围内,pH值对四氯化碳去除效果影响为pH=6>pH=7>pH=8>pH=10;(2)不同pH值条件下,四氯化碳与Fe0发生作用的主要产物之一为氯仿;(3)四氯化碳的去除与氯仿的产生之间存在着一定的对应关系;(4)Fe0纯度和粒径对四氯化碳去除的影响:即3#(Fe0纯度为92%,40～60目)2#(Fe0纯度为92%,20～40目)>1#(Fe0纯度为84%,20～40目),即Fe0纯度越高,粒径越小,四氯化碳的去除效果越好.研究的结果将为地下水四氯化碳污染的场地修复技术提供理论基础.     

硫酸新霉素可溶性粉引发SD大鼠肝肾损伤模型的建立

为建立硫酸新霉素引发SD大鼠肝肾损伤模型,将SpF级SD大鼠随机分为D30、D20、D10、L10、L5、L2、空白组7组,对D30、D20和D10组一次性灌胃不同剂量的硫酸新霉素溶液,对L10、L5、L2组连续7 d灌胃不同剂量的硫酸新霉素溶液;于试验第5、7、14天进行采血、采尿,检测血清中丙氨酸转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、血肌酐、尿酸的含量和尿液中尿液总蛋白的含量,在第14天测大鼠的肝肾脏器指数。结果显示,与对照组相比,一次性用药组检测结果肝肾损伤不如连续用药组,连续用药组用药5 d后L5组出现明显肝肾损伤(P<0.05),第14天L2和L5组仍有肝肾损伤(P<0.05),L5组较为严重。因此,用硫酸新霉素建立SD大鼠肝肾损伤模型以连续7 d用药5倍剂量为佳。     

中国龙虾食物变态反应BALB_c鼠模型的建立

通过腹腔注射的致敏方式建立中国龙虾食物变态反应Balb/c小鼠模型,探讨中国龙虾食物变态反应体外鉴定与评价方法.将40只雄性Balb/c小鼠分为卵清蛋白(OVA)阳性对照组、Coca's液阴性对照组、空白对照组和模型组,以OVA、中国龙虾粗提蛋白,加氢氧化铝佐剂腹腔注射免疫Balb/c小鼠,建立食物变态反应小鼠模型.ELISA法测定第二次致敏激发后血清中IgE与组胺水平并进行被动皮肤过敏试验(PCA)确定特异性IgE抗体滴度,同时观察脾指数、小肠组织学变化及激发后的食物变态反应症状.末次激发后1h采血,中国龙虾粗提蛋白组血清IgE含量为236.75(±73.39) μg/L,与阳性对照OVA组无区别,与阴性对照Coca's液组和正常对照组相比显著升高(P＜0.01);中国龙虾粗提蛋白组的组胺含量406.55(±232.79) μg/L与正常对照组相比显著升高(P＜0.01); PCA反应中国龙虾粗提蛋白组血清特异性IgE抗体滴度达到1/16;中国龙虾粗提蛋白组和OVA致敏组小鼠脾指数明显大于Coca's液或正常对照组(P＜0.01)且前两组小肠粘膜固有层皆出现淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等炎性细胞浸润.建立了一种中国龙虾食物变态反应小鼠模型,通过ELISA测定血清IgE和组胺以及PCA确定特异性IgE抗体滴度可作为一种鉴定与评价中国龙虾食物变态反应的方法.     

联苯双酯抗大鼠四氯化碳肝损伤的实验研究

目的:通过观察联苯双酯(DDB)对四氯化碳(CC l4)所致大鼠急性肝损伤的防治作用,结合文献复习,对DDB的临床应用价值进行再评价。方法:24只大鼠随机分为3组:正常对照组、肝损伤模型组(简称模型组)、DDB治疗组(简称DDB组),每组8只。模型组和DDB组分别用CC l4造成大鼠急性实验性肝损伤,DDB组加用DDB滴丸(5 m g.kg-1)灌胃,每天1次,共14 d,正常对照组和模型组大鼠每天用生理盐水(20 mL.k-g 1)灌胃。实验结束后,检测各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(A ST)的含量,并取肝脏做病理组织检查。结果:DDB组血清ALT、A ST水平较模型组明显降低(P<0.01)。DDB组大鼠肝组织切片中肝细胞脂肪变性、炎细胞浸润均较模型组明显减轻,且肝组织中无明显纤维增生。结论:DDB能显著降低CC l4所致急性肝损伤大鼠血清ALT、A ST水平,对CC l4所致大鼠的肝损伤具有显著的防治作用。     

脂肪间充质干细胞对CCl4致犬急性肝损伤的临床疗效

为了研究脂肪间充质干细胞（adipose mesenchymal stem cells, ADMSCs）对四氯化碳（CCl4）致犬急性肝损伤的治疗效果,探索治疗犬肝脏损伤性疾病的新药物。选取20只健康犬平均分成A、B、C、D共4组,用50 %的CCl₄花生油溶液,按照0、0.5、1.0和1.5 mL·kg^-1的剂量连续7 d腹腔给药,观察临床症状,并检测生化指标,于第3天和第7 天每组随机选择2只犬解剖取肝脏组织检测病理变化。用最佳造模剂量造模15只犬,分成E、F和G 3组,每组5只。E组不治疗,F组经尾静脉移植犬脂肪间充斥干细胞（adipose mesenchymal stem cells, ADMSCs）治疗,G组普通治疗,均连续治疗10 d,监测各组临床症状、生化指标并在治疗第5和第10 天肝脏组织病理学对比治疗效果。结果显示：（1）造模期间：A组各项指标无明显变化;B组各项指标改变后又恢复正常;C组临床症状恶化,在1 ~ 6 d谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）的活性显著上升,肝脏组织有明显病变,无犬只死亡;D组临床症状恶化,ALT和AST活性一直显著上升,肝脏组织有明显病变,并死亡2只。（2）治疗期间：E组各项指标不断恶化,死亡4只;F组5只犬各项指标均好转,无死亡;G组临床症状、生化指标改善,组织病理学未见好转,无死亡。试验表明,连续7 d腹腔注射1 mL·kg^-1 50 % CCl₄花生油溶液可以建立稳定可靠的犬急性肝损伤模型,尾静脉途径移植的ADMSCs对CCl₄所致犬急性肝损伤有治疗效果,且比普通对症治疗效果更佳。     

猪苓多糖对四氯化碳诱导建鲤肝损伤的保护作用

[目的]研究猪苓多糖对四氯化碳（CCl4）诱导建鲤急性肝损伤的保护作用,为鱼类肝胆综合征治疗药物的筛选提供理论依据.[方法]在基础饵料中添加不同比例（0.1％、0.5％和1.0％）的猪苓多糖连续饲喂建鲤8周后,采用CCl4进行急性肝损伤造模,72 h后采集血液分离血清,检测血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总抗氧化能力（T-AOC）及丙氨酸转氨酶（GPT）、天冬氨酸转氨酶（GOT）活性;采集肝脏组织匀浆上清液,检测匀浆上清液中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量;同时采集肝脏组织制备组织切片,显微镜下观察组织结构变化.[结果]经CCl4诱导处理能引起建鲤血清肝功能指标、抗氧化指标显著变化,肝脏组织结构明显受损,肝细胞核仁大部分消失,呈核空泡化.但在基础饵料中添加1.0％猪苓多糖能极显著降低血清GOT、GPT活性（P＜0.01）,显著升高血清TP、ALB、T-AOC值（P＜0.05,下同）;显著升高肝脏组织匀浆上清液中SOD、GSH、GSH-Px活性,显著降低MDA含量;明显抑制CCl4对肝脏组织结构造成的损伤,肝脏组织结构基本恢复正常.[结论]在建鲤基础饵中添加1．0％猪苓多糖对CCl4所引起的肝脏损伤有明显的保护作用,可有效清除机体内自由基和抑制脂质过氧化。     

白花败酱草醇提物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

【目的】研究白花败酱草醇提物对四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用,为白花败酱草醇提物的药用及作为保健野菜的开发利用提供参考。【方法】以40只洁净级昆明小鼠为研究对象,设空白对照组、模型组、白花败酱草醇提物低剂量组、中剂量组、高剂量组5个处理,用CCl_4腹腔注射诱导建立小鼠急性肝损伤模型,采用苏木精-伊红(HE)染色法对肝脏组织进行病理检测;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测小鼠肝细胞凋亡情况;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测小鼠肝组织细胞凋亡相关蛋白的表达水平。【结果】白花败酱草醇提物能显著改善肝组织病变情况,显著降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性及肝匀浆中丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性,显著提高小鼠肝匀浆中超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽(GSH)含量。TUNEL染色结果显示,白花败酱草醇提物能显著抑制CCl_4诱导的肝细胞凋亡。与模型组相比,白花败酱草醇提物使CCl_4刺激的小鼠肝组织Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2/Bax升高。【结论】白花败酱草醇提物通过抗氧化及抑制肝细胞凋亡而改善CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤。     

雌性食蟹猴去卵巢(OVX)诱导骨质疏松动物模型建立及评价

为了探索建立食蟹猴骨质疏松模型的可行性并评价阿仑膦酸钠(ALN)的治疗效果,将12只成年雌性食蟹猴随机分为卵巢切除(OVX)模型组、OVX阳性组、假手术(Sham)组。造模1个月后,OVX模型组和Sham组口服生理盐水(10 mL/周),OVX阳性组口服ALN(5 mg/周)。结果表明:OVX术后1个月,血清雌二醇(E2)水平较术前下降。OVX模型组血清骨代谢物骨特异性碱性磷酸酶(sALP)、I型胶原羧基末端肽(CTx-I)明显高于OVX阳性组和Sham组(P0.01)。OVX模型组骨密度(BMD)明显低于OVX阳性组和Sham组(P0.01)。骨组织形态计量学分析显示OVX模型组骨体积分数、骨小梁厚度及骨小梁数量均减少,骨小梁分离度增大,与OVX阳性组和Sham组相比差异有统计学意义(P0.05)。OVX阳性组的松质骨骨强度参数明显低于OVX模型组(P0.05)。以上结果表明,雌性食蟹猴去卵巢后因雌激素降低导致的骨质疏松,与人类临床上绝经后女性骨质疏松的各项指标相符。本研究成功建立了雌性食蟹猴去卵巢(OVX)后诱导建立骨质疏松动物模型,并通过经阿仑膦酸钠治疗效果的评价验证。此模型为研究绝经后骨质疏松发病机理、评价药物疗效等提供重要的基础。     

PRRSV诱导猪体内肺泡巨噬细胞炎症模型的建立

[目的]建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)诱导体内猪肺泡巨噬细胞(PAM)炎症模型,评价PRRSV感染对仔猪免疫系统的影响,为猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床诊断及科学防控提供参考依据.[方法]以PRRSV-GXNN1396株人工感染30日龄健康断奶仔猪,复制出PRRS病症,剖杀后采集病料,通过组织病理学和RT-PCR检测观察各免疫器官组织的病理变化及其病毒分布情况,并检测PAM细胞内的COX-1、COX-2等酶活性变化及IL-6、IL-8、IL-10、IL-1β、IFN-γ、MCP-1和TNF-α等炎性细胞因子水平变化.[结果]断奶仔猪接种PRRSV-GXNN1396株后第3d开始表现出典型的PRRS病症,PRRSV主要集中在肺脏、颌下淋巴结、血液和扁桃体等样品组织中,攻毒仔猪各主要器官的实质细胞及有关淋巴细胞均出现不同程度坏死和炎症细胞浸入现象,尤其以肺脏、肾脏、脾脏等器官受损严重,出现巨噬细胞和淋巴细胞浸润.PRRSV感染早期(第3d)仔猪PAM细胞中的ROS水平及COX-2、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α等因子水平均呈升高趋势,且COX-2、IL-6、IL-8和TNF-α因子水平极显著升高(P<0.01);随着感染天数的增加,PAM细胞内的COX-2、IL-6和IL-8因子水平呈下降趋势,TNF-α因子水平呈上升趋势.[结论]成功建立了PRRSV诱导仔猪体内PAM细胞炎症模型,进一步佐证PRRSV主要侵害猪的免疫器官组织,以达到免疫抑制的效果,并推断感染第3d是病猪炎症反应的高峰期.