银耳菌丝体生长营养条件的初步研究

银耳纯菌丝生长的营养试验表明，香灰菌浸出液对银耳菌丝体稳定生长、延缓其胶质化具有较好作用；添加了香灰菌浸出液的培养基较适于银耳菌丝体的稳定生长，但以香灰菌浸出液加入量为500ml的AL5培养基效果最好；而香灰菌菌龄及不同培养方式对这种促进作用影响不大。     

草菇担孢子萌发条件的研究

草菇担孢子可以作为基因工程技术的受体和进行转基因草菇的后代遗传稳定性分析,其萌发率直接影响着试验的结果。试验对影响草菇担孢子萌发的因素进行了研究。结果表明：氯胺T消毒5min,其萌发率最高,为0．2077％;萌发率最高的是③号培养基;采用孢子印方法收集的草菇担孢子的萌发率高于自然弹射方法收集的萌发率;草菇担孢子的最佳萌发温度为36℃。     

脱皮马勃孢子萌发条件的研究

目的：为了提高脱皮马勃单孢子菌种的分离效果、以及探讨脱皮马勃孢子萌发对自然生境条件的要求,方法：进行了不同温度、不同营养物及浓度和光照等条件对其孢子萌发影响的研究。结果：25℃是脱皮马勃孢子萌发的适宜温度;2％葡萄糖和Bonar液可促进孢子萌发,而氯化钠则对孢子萌发有抑制作用;光照或黑暗对孢子萌发无影响;来源于两个不同年份的孢子萌发率差异显著。     

芸薹根肿菌的休眠孢子萌发条件的研究

以哈尔滨市阿城区白菜根肿菌的休眠孢子为试材,对其进行萌发测定,研究了不同因素对休眠孢子萌发的影响。结果表明:休眠孢子萌发的适宜温度为24℃,适宜pH为6.3;黑暗处理的休眠孢子比光照处理的休眠孢子萌发率高,分别为73.33%和12.16%,腐烂处理根肿的萌发率最高为73.33%。以上结果表明白菜根肿病容易发生在低温和偏酸性条件下。     

菌核侧耳担孢子收集及萌发条件

以东华虎奶-1号(Pleurotus tuber-regium)子实体为材料,采用了弹射、贴壁、菌褶冲洗等方法收集担孢子,结果表明,菌褶冲洗法是菌核侧耳担孢子收集的最佳方法。孢子萌发条件的研究结果表明,菌核侧耳孢子萌发对温度和湿度的要求较高,最适温度为30℃;无机盐离子和光照、黑暗交替处理都能促进孢子的萌发。     

美味黑粉菌冬孢子萌发条件的研究

研究了疏亲水界面、温度、pH值和不同物质对美味黑粉菌冬孢子萌发的影响,以探讨美味黑粉菌冬孢子在自然生境条件萌发的适应性。研究结果表明,疏水界面促进美味黑粉菌冬孢子萌发,在疏水的聚苯乙烯塑料培养皿和茭白茎表皮上,萌发率高;冬孢子萌发的最适温度为27～30℃,温度过高或过低均抑制萌发;酸性条件促进冬孢子萌发,最适pH值为3～4;蔗糖促进冬孢子萌发,且以1%浓度最适,但同样浓度的甘露醇、葡萄糖、海藻糖、D-果糖等抑制冬孢子萌发。     

环境条件对茶薪菇厚垣孢子萌发的影响

以采用研磨加酶解的方法提纯的茶薪菇厚垣孢子为试材,研究了环境条件对厚垣孢子萌发的影响。结果表明:茶薪菇厚垣孢子萌发的最佳温度为25℃,最适pH为7.5;光线对厚垣孢子的萌发有显著抑制作用,培养基成分对孢子的萌发率无明显影响。     

不同培养温度及孢子稀释液对黑牛肝菌孢子萌发的影响

通过调整培养温度、浸泡时间,以及孢子稀释液的pH、添加碳源、氮源等条件,研究各因素对黑牛肝菌(Phlebopus portentosus)担孢子萌发的影响.结果表明,25℃、30℃、35℃下培养时平均萌发菌落数显著高于15℃、20℃下培养,并以30℃为最优;涂布前将孢子以无菌水浸泡24 h,能显著提高萌发菌落数;调节孢...     

观察裂盖马鞍菌孢子萌发的三种方法比较试验

本试验用悬滴法、漂浮法、玻片法这3种方法观察裂盖马鞍菌孢子的萌发，结果表明，玻片法由于可在自然状态下观察土壤中物理、化学因素对裂盖马鞍菌孢子的影响，为研究不同因素对裂盖马鞍菌孢子萌发的影响，提供了一种有效、科学的观察裂盖马鞍菌孢子萌发的方法。     

培养基配方和培养条件对大杯蕈孢子萌发的影响

以大杯蕈孢子为试材,采用平板涂布法,对影响其孢子萌发的培养基、温度、酸碱度(pH)、金属离子、三十烷醇浓度及光照条件进行研究,以期筛选出孢子萌发的最适条件,为大杯蕈遗传育种中单孢菌株的获得提供有效方法和参考依据.结果 表明:大杯蕈孢子最适萌发条件为使用20％马铃薯+2％蛋白胨固体培养基、20％马铃薯+2％可溶性淀粉固体培养基或2％蛋白胨固体培养基;最适萌发温度为30℃;最适酸碱度为pH 5～6;最适金属离子为ZnSO4;最适三十烷醇浓度为0.050 mg·(100mL)-1;黑暗条件利于孢子萌发.     

银耳芽孢内源gpd启动子的克隆与功能鉴定

利用反向长距离PCR技术从银耳(Tremellafuciformis)芽孢gpd基因出发克隆上游gpd启动子序列,将预测的gpd启动子片段与多功能纤维素基因(mfc)连接构建表达载体,与潮霉素抗性质粒pBgGl-hph共转化银耳芽孢,对拟共转化子进行酶活发酵试验。结果表明:4轮反向长距离PCR克隆得到了1761bp的上游序列,经预测启动子落在上游1000bp左右区域内,包含两个高分值的起始转录位点,将gpd启动子分成gpd-Tre1(885bp)、gpd-Tre2(708bp)、gpd-Tre3(466bp)3段区域,分别与多功能纤维素基因(mfc)构建表达载体pgTre1-mfc、pgTre2-mfc和pgTre3-mfc。拟共转化子酶活发酵试验结果发现3个表达载体的转化子均能检测到多功能纤维素酶活,转化子T1-2包含gpd-Tre1启动子大片段,整体酶活最高,CMC酶活为14.12U/mL,比出发菌株Tr01提高34.3%,比工程菌株yLes3提高25.7%,木聚糖酶活为34.8U/mL,比Tr01酶活提高26.3%,略低于yLes3。3个启动子片段均具有表达活性,相比之下885bp的大片段gpd启动子表达活性更高。     

银耳多糖的提取及其在饮料中的应用

研究了银耳多糖的提取工艺 ,结果表明 :酶法浸提效果最佳 ,碱浸提法其次 ,两者均优于热水浸提法。酶法提取银耳多糖溶液的最适条件为 :加水量 1∶5 0 ,加入 1%的果胶酶 ,置于 4 5℃水浴锅中恒温酶解 4 5min ,然后迅速升温至 98℃灭酶 ,并保温浸提 6 0min ;利用银耳多糖的浸提液代替羧甲基纤维素等人工合成稳定剂制作调配型奶饮料 ,结果表明 ,银耳多糖溶液添加量为奶饮料总量的 30 %时 ,按原奶饮料的生产工艺 ,可代替羧甲基纤维素等稳定剂的稳定与增稠作用。制品稳定性好 ,并具有银耳的保健功能。     

不同光质处理下银耳子实体农艺性状和营养成分含量及其相关性

银耳(Tremella fuciformis)栽培过程中从现蕾开始采用不同光质(蓝、绿、红、黄、白光)进行处理,测定银耳农艺性状和营养成分含量并对其相关性进行分析,探讨不同光质对银耳子实体农艺性状和营养成分含量的影响以及子实体农艺性状和营养成分含量的相关性。结果表明:蓝光处理的耳片最大,白光处理的最小;黄光、绿光和红光处理的耳片较厚,白光处理的最薄;红光处理的耳基直径最大,蓝光处理的较小;蓝光处理的子实体直径、子实体直径与厚度比最大。绿光、红光和黄光处理的纤维素含量较高,蓝光、白光处理的较低;红光处理的还原糖含量、绿光处理的灰分含量、蓝光处理的蛋白质含量最高,绿光处理的总糖含量、蓝光处理的粗多糖含量较高,白光处理的还原糖、灰分、蛋白质、总糖和粗多糖含量最低;白光处理的水分含量较高,蓝光、红光处理的较低。耳片大小与还原糖、灰分、总糖、粗多糖含量,耳片厚度与还原糖、总糖、粗多糖、蛋白质含量,耳基直径与粗纤维含量呈显著正相关。     

银耳栽培菌株的线粒体内含子多态性分析

为从线粒体角度了解银耳(Tremella fuciformis)主要栽培菌株的遗传多样性,从37个银耳栽培菌株中选取33、34和37号3个典型菌株进行高通量基因组测序,并进行线粒体基因组组装和分析,结果表明:3个菌株的线粒体基因组序列一致,但就线粒体基因组拷贝数而言,33号显著高于34号、37号.选取37号菌株线粒体基...     

我国银耳研究现状与存在问题

综述了银耳的生物学特性、栽培技术和病虫害防治方面的研究状况,并探讨了银耳育种及菌种保藏等研究领域存在的问题,为银耳的进一步开发研究提供了依据。     

Synthesis of Human Insulin Gene and Transformation into Tremella fuciformis

A human insulin gene was synthesized using PCR-based methodology, cloned into plasmid pUC18, and the sequence of the inserted fragment was confirmed. A Tremella fuciformis expression vector was constructed and used to transform T. fuciformis yeast-like conidia employing Restriction Enzyme-Mediated DNA Integration (REMI). A total of 21 antibiotic resistant colonies were selected at random of which 18 tested positive for β-glucuronidase (GUS) activity. Genomic DNA was extracted from 10 of the 21 positive transformants and PCR performed using genomic DNA as the template and specific primers for amplifying the human insulin gene, the GUS gene and the Tnos sequence. PCR data showed that the expected fragment was amplified from all 10 isolates demonstrating that they were true human insulin gene transformants.     

人胰岛素基因的人工合成及转化银耳的研究

用PCR法合成人胰岛素基因,克隆到pUC18载体上,经测序证实其碱基序列与人胰岛素基因的序列完全一致。本实验还构建了银耳表达载体,由限制性内切酶介导(Restriction enzy me-mediated DNA Integration,REMI)转化银耳芽孢。随机挑取21个抗性菌落,转管繁殖2代后检测其GUS活性,实验结果:18个菌株阳性,3个菌株阴性。从这21个菌株中选取10个菌株,提取染色体DNA,用人胰岛素基因、GUS基因和Tnos序列的特异引物进行PCR,结果表明,这10菌株都能扩增出相应长度的特异片段,证明了它们是人胰岛素基因转化子。     

农药对银耳生长发育的影响及残留情况分析

选用6种杀虫剂和2种杀菌剂,采用拌料处理和子实体喷雾两种方法,测定银耳(Tremella fuciformis)子实体中的农药残留量,观察不同处理对银耳生长发育的影响。结果表明:8种农药不同处理银耳农药残留量差异较大,其中480g/L毒死蜱3种浓度(240,480,960mg/kg)拌料处理农残量最高,分别为0.33、0.42、0.39mg/kg,子实体阶段喷施(480,960,1920 mg/kg)的残留量在0.33~184 mg/kg之间。80%敌敌畏拌料处理或子实体阶段喷施,各处理均未检出其残留量。在4种菊酯类农药拌料处理中,添加50 mg/kg和100mg/kg的10%氯氰菊酯和10%联苯菊酯、12.5 mg/kg和25 mg/kg的25g/L溴氰菊酯的残留量低于0.05mg/kg,其余处理的农药残留量均高于0.05mg/kg。供试的6种杀虫剂,拌料、喷施均对银耳生长发育无显著的不良影响。无论拌料处理还是喷雾处理,供试各浓度50%多菌灵和70%甲基托布津均会导致残留超标,而且导致银耳菌丝生长停滞、不出耳、子实体畸形或腐烂。     

银耳菌分离方法的研究

用单孢分离、基本分离和组织分离获得银耳菌，银耳菌的纯培养与伴生菌长在一起成为银耳母种。在三种方法中，以单孢分离获得的银耳原基、基内菌丝与伴生菌配制的母种质量好，成功率亦高。基内分离纯培养的方法不如单孢分离的方法好，基内分离银耳菌丝和伴生菌的混合物，得到的母种质量不稳定。组织分离的方法不能采用。