陕西省3个规模化羊场小反刍兽疫疫苗免疫效果评估

为了解生产中规模化养羊场小反刍兽疫疫苗的临床免疫效果,评估现有的免疫程序,试验从3个规模化养羊场随机采集了莎能奶山羊的血清和鼻拭子样品,通过对小反刍兽疫病原及抗体的检测与监测,评估养殖场母源抗体水平、疫苗免疫后30 d效力以及疫苗的免疫持续期。结果表明:小反刍兽疫疫苗安全有效,蓝田场、榆林场羔羊母源抗体阳性率3个月时降至50%以下,3个羊场免疫疫苗后抗体阳性率均在70%以上,但抗体的持续期差异较大(10～19个月),应重点关注羔羊和育肥羊(抗体水平偏低)的免疫。所有样品小反刍兽疫的抗原检测均为阴性,说明3个羊场均无野毒感染。     

规模羊场疫苗联合免疫规程优化研究

目的 对规模羊场常用疫苗,即羊小反刍兽疫疫苗、口蹄疫疫苗和羊痘疫苗联合免疫程序进行优化设计。方法 分别设置口蹄疫疫苗组、小反刍兽疫疫苗组和山羊痘疫苗组、两两免疫组和三种疫苗同时免疫组来分别免疫绵羊,测定各试验组免疫后7 d、14 d、21 d、28 d、60 d、90 d、150 d的实验羊免疫血清抗体产生情况及抗体存续时间。结果：小反刍兽疫疫苗免疫效果最优为单独免疫组,口蹄疫疫苗免疫效果最优为口蹄疫、小反刍兽疫联合免疫组,羊痘疫苗免疫效果最优为羊痘单独免疫组。结论 可采用口蹄疫、小反刍兽疫联合免疫,羊痘单独免疫的免疫模式,既可以减少免疫副反应又能提高免疫效果,同时降低了免疫接种的劳动强度。     

小反刍兽疫和山羊痘活疫苗联合免疫效果评价研究

试验旨在探索小反刍兽疫疫苗和羊痘疫苗相互之间免疫效果的影响,选择90只参试羊采用单独免疫小反刍兽疫疫苗和羊痘疫苗以及两种疫苗联合免疫方式,并于免疫前及免疫后第7、14、21、28、90、210 d采集血液样本,通过阻断ELISA和间接ELISA检测其抗体水平。结果显示,两种疫苗单独免疫的抗体合格率到免疫后210 d时均在75%以上,达到国家规定标准（70%）。两种疫苗联合分点免疫情况下,小反刍兽疫疫苗免疫效果比单独免疫效果好,其抗体阳性率在免疫后第7、14 d时极显著高于单独免疫（P<0.01）,21 d时显著高于单独免疫（P<0.05）;羊痘疫苗免疫效果比单独免疫效果较差,其抗体阳性率在免疫后第7、14、21 d时极显著低于单独免疫（P<0.01）,28 d时显著低于单独免疫（P<0.05）,到免疫后210 d时抗体合格率仅为63.3%,未达到国家标准。研究表明,羊痘疫苗与小反刍兽疫疫苗联合免疫时,羊痘疫苗可以促进小反刍兽疫疫苗的免疫效果,而小反刍兽疫疫苗却抑制了羊痘疫苗的免疫效果。     

小尾寒羊口蹄疫-小反刍兽疫联合免疫效果评价

文章通过口蹄疫(A型、O型二价)灭活苗和小反刍兽疫活疫苗同时接种的方法进行免疫接种,减少免疫接种模式和免疫接种次数,降低接种的劳动投入.试验羊按年龄分为3组,观察其接种疫苗后的临床反应,接种后第28 d采血,检测2种疫苗联合免疫后的抗体水平,评估口蹄疫和小反刍兽疫联合免疫接种的免疫效果.结果显示,口蹄疫和小反刍兽疫联合...     

小反刍兽疫免疫抗体的检测与分析

小反刍兽疫又称羊瘟。本病是由小反刍兽疫病毒引起的山羊和绵羊的一种急性、接触性病毒传染病。发病率一般高达100%,严重时病死率可达100%,严重威胁着畜牧业的发展。为科学评价疫苗的免疫效果及其免疫抗体持续期,确保全县养羊业健康、稳定、持续发展,在庆城县采集部分免疫羊血清,用阻断ELISA方法检测小反刍兽疫抗体。结果表明:全县小反刍兽疫免疫效果较好,免疫质量高;小反刍兽疫疫苗抗体持续时间至少达13个月以上,小反刍兽疫疫苗具有良好的免疫原性,可产生良好的免疫效果。     

山羊口蹄疫及小反刍兽疫疫苗分点同时免疫效果比较

本试验在广东信宜市大成镇一家规模羊场随机选取60只健康山羊为研究对象,设立山羊口蹄疫疫苗和小反刍兽疫疫苗"分点同时免疫"组、单独注射口蹄疫疫苗组,单独注射小反刍兽疫疫苗组,免疫30 d后采集血清样品,检测抗体。结果表明,山羊口蹄疫疫苗和小反刍兽疫疫苗"分点同时免疫"组与分别单独注射组相比,免疫效果差异不显著。说明对山羊进行口蹄疫和小反刍兽疫免疫工作中可以采用2种疫苗分点同时进行免疫。     

小反刍兽疫-羊痘二联活疫苗田间免疫试验评价

为弄清小反刍兽疫-山羊痘二联活疫苗(Clone9株+AV41株)田间临床免疫效果,2020年11月至2022年1月期间,随机采集免疫小反刍兽疫-羊痘二联疫苗后不同时间段的血清样品进行免疫抗体检测,同时对小反刍兽疫-羊痘二联疫苗的安全性和田间免疫效果进行评价。结果：除个别羊只体温略有升高、采食量略有下降外,其他羊只均未出现免疫应激反应及反应死亡病例报告。在免疫后7 d小反刍兽疫免疫抗体阳性率逐渐上升,14 d到达最高值100%,直到360 d仍维持在80%以上,免疫效果较为理想;而在免疫后7 d羊痘免疫抗体阳性率仍为0,14 d达到最高值37.14%,随后持续下降,直到免疫后360 d抗体阳性率仍然维持在较低水平,免疫效果不理想。     

羊小反刍兽疫抗体比对实验操作及注意事项

小反刍兽疫俗称羊瘟,又名小反刍兽假性羊瘟、肺肠炎、口炎肺肠炎复合症,本病是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性、接触性传染疾病,主要感染小反刍动物(特别是山羊和绵羊易感染),以发病急剧、高热稽留、眼鼻分泌物增加、口炎、腹泻和肺炎为特征.世界动物卫生组织(OIE)将本病定为A类疾病.发病率一般高达100％,严重时病死率可达100％,严重威胁着畜牧业的健康发展.为科学评价疫苗的免疫效果及其免疫抗体持续期,确保全县养羊业健康、稳定、持续发展,在我县采集部分免疫羊血清,用阻断ELISA方法检测小反刍兽疫抗体.结果 表明:全县小反刍兽疫免疫效果较好,免疫质量高;小反刍兽疫疫苗抗体持续时间至少达13个月以上,小反刍兽疫疫苗具有良好的免疫原性,可产生良好的免疫效果.     

黔东南集约化塔石香羊场小反刍兽疫免疫方法的研究

为了提高黔东南塔石香羊小反刍兽疫的免疫效果,科学防控黔东南集约化塔石香羊场该疫病的发生,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法,监测了黔东南集约化塔石香羊场羔羊母源抗体消长规律、羊群疫苗免疫后抗体消长规律,观察了口蹄疫疫苗与小反刍兽疫疫苗免疫效果的相互影响。结果表明,羔羊群的母源抗体阳性率1～28日龄在70%以上,28～35日龄从70%骤降到36.7%;免疫接种后30 d羊群抗体阳性率达100%,180日龄下降到70%;先接种口蹄疫疫苗后接种小反刍兽疫疫苗,羊群小反刍兽疫、口蹄疫O型、A型抗体阳性率分别为86.7%、90.0%、100%,同时接种两种疫苗,其抗体阳性率分别为66.7%、83.3%、90%;先接种小反刍兽疫疫苗后接种口蹄疫疫苗,其抗体阳性率分别为50%、63.3%、96.7%。说明黔东南塔石香羊场小反刍兽疫的免疫适合在28日龄首免,首免后180 d二免。在免疫过程中,要注意其与口蹄疫疫苗的相互影响。     

新疆昌吉州羊口蹄疫与小反刍兽疫单独与联合免疫抗体检测效果评价分析

试验旨在探讨羊口蹄疫与小反刍兽疫疫苗单独与联合免疫对动物保护情况,为缓解动物应激、提高免疫效果提供研究依据。选取2 106只昌吉州辖区7个地区的散养羊,采用液相阻断ELISA方法检测口蹄疫O型、A型抗体效价,ID Screen小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒检测小反刍兽疫抗体效价,分析各地区不同年份羊口蹄疫O型、A型和小反刍兽疫免疫抗体效果,比较单独免疫与联合免疫的免疫结果。结果显示,2018、2019、2020年口蹄疫抗体合格率分别为85.65%、93.86%、92.22%;2018、2019、2020年小反刍兽疫抗体合格率分别为76.99%、86.46%、88.59%。研究表明,2019、2020年口蹄疫和小反刍兽疫联合免疫效果保护性好于2018年,联合免疫效果良好,达到预期的免疫效果。     

2018—2020年河南省长垣市奶山羊小反刍兽疫免疫效果评估与防控措施

为了解河南省长垣市奶山羊小反刍兽疫疫情流行情况和免疫抗体水平,2018—2020年,采用阻断酶联免疫吸附剂测定（ELISA）法和实时荧光聚合酶链式反应（PCR）法,对长垣市32 家奶山羊散养户采集羊血清和鼻拭子样品,进行羊小反刍兽疫免疫抗体及病原学检测。结果表明,2018年、2019年和2020年的血清抗体合格率分别为83.13%、85.64%和86.67%,平均85.17%,高于国家规定的70.00%。病原学监测全部样品为阴性。提示长垣市总体疫苗免疫效果良好,羊群具有抵抗小反刍兽疫侵袭的基本能力。为长垣市制定科学合理的防控措施、逐步消灭小反刍兽疫和退出小反刍兽疫免疫计划提供参考依据。     

辽宁省小反刍兽疫疫苗临床免疫效果跟踪试验及抗体水平动态观察

通过抽检小反刍兽疫疫苗免疫后的部分羊群,分别于免疫后的7、14、21、28 d对免疫羊进行抗体及病毒核酸（包括疫苗毒）跟踪监测,并对监测数据进行整理比对分析,继而掌握小反刍兽疫免疫抗体在机体内的消长规律及影响因素,进一步了解该疫苗辽宁省羊群中的免疫效果及安全性。结果表明,该疫苗在免疫7d后,免疫群体均能够达到免疫合格率高于70%的标准,且未出现疫苗排毒现象,证明该疫苗的免疫效果确实、安全性好。     

小反刍兽疫活疫苗二次免疫效果评价

为研究已免疫小反刍兽疫(PPR)活疫苗的羊群经二次免疫后PPR抗体水平的变化趋势,对初免21 d羊群进行了第二次免疫,同时监测初免21 d及二免后3 d、7 d、14 d、21 d的血清中和抗体。结果显示,一次免疫羊21 d PPR中和抗体滴度平均可达5.18±2.87,阳性率为84%;二次免疫后3 d、7 d、14 d、21 d,PPR抗体呈上升趋势,平均滴度分别为5.65±2.56、6.95±1.82、7.28±1.18、8.12±1.31,阳性率分别为90%、100%、100%、100%。一免试验组21 d~323 d PPR抗体阳性率为83%,二免试验组在二次免疫7 d PPR抗体阳性率达到100%,并且维持到21 d。试验表明,活疫苗二次免疫增强了免疫效果,对已经有PPR抗体的羊进行二次免疫,可明显提升免疫抗体阳性率。     

小反刍兽疫诊断技术的研究进展

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的一种重大烈性传染病,主要发生于山羊和绵羊等小反刍兽。该病无特效治疗方法,主要通过早期诊断和疫苗免疫的方式控制。本文主要就小反刍兽疫诊断技术的研究进展作一综述。     

RT-PCR鉴别小反刍兽疫病毒疫苗株与强毒株方法的建立

根据GenBank中公布的小反刍兽疫病毒的H基因或全基因序列,利用软件Primer Premier5.0设计引物,扩增片段长度为477bp,建立区分小反刍兽疫疫苗毒与基因4系野毒的RT-PCR检测方法,并用于临床检测。结果表明,建立的RT-PCR鉴别诊断方法能特异性区分疫苗株Nigeria75/1与基因4系PPRV,与基因3系、牛瘟病毒、犬瘟热病毒等同属病毒无交叉反应;最低可以检测到浓度为7.7×10-5ng/μL的RNA模板;该方法操作简单,耗时短,可以初步用于临床鉴别诊断。     

小反刍兽疫病毒M基因截短表达及鉴定

目的将小反刍兽疫病毒M蛋白基因截短表达后用于特异性单抗制备及临床抗体水平检测。方法:用在线分析软件BepiPred分析小反刍兽疫病毒M蛋白潜在的B细胞线性表位,以本实验室构建的pCR2.1T-PPRV M质粒为模板,扩增三段截短的M基因,纯化后的PCR产物分别与克隆载体pCR2.1T连接,筛选出的阳性重组质粒经双酶切后,分别与表达载体pET-32a(+)及pGEX-6p-1连接,再将鉴定为阳性的重组质粒转化入E.coli BL21(DE3)菌株诱导表达,并用SDS-PAGE及Western blot验证。结果 PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段。对连接克隆载体及表达载体的重组质粒双酶切后,均出现与预期一致的片段,DNA测序表明,插入片段序列与小反刍兽疫Nigeria75/1株M蛋白基因完全一致。重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,证明所构建的重组蛋白均获得高效表达,并均具有良好的反应原性。结论成功表达了小反刍兽疫截短M基因的蛋白,为制备特异性单抗及小反刍兽疫抗体检测奠定了一定基础。     

Expression and Identification of F Protein of Peste Des Petits Ruminants Virus Strain Tibet 07 in Insect Cells

In order to obtain purified peste des petits ruminants virus F protein, the F gene of peste des petits ruminants virus strain Tibet 07 was cloned into transfer vector pFastBac/CT-TOPO, plasmid pFastBacCT-PPRV-F was then transformed into DH10Bac complement cells. The recombinant bacmid DNA was isolated and transfected into sf9 insect cells to express F protein. The expressed F protein was identified by using SDS-PAGE, Western blotting and indirect immunofluorescence assay. The recombinant F protein was successfully expressed in insect cells with a relative molecular of 59 ku.The sf9 cells infected by Bacmid-PPRV-F can reacted with positive serum of peste des petits ruminants.Using the Bac-to-Bac baculovirus expression system expressed the F protein of peste des petits ruminants virus strain Tibet 07.This work provides basis for development of rapid test for detection of peste des petits ruminants antibody.     

小反刍兽疫病毒N蛋白抗体与H蛋白抗体在羊体内代谢消长规律的研究

为研究小反刍兽疫病毒N蛋白抗体与H蛋白抗体在羊体内的代谢消长规律,试验通过建立小反刍兽疫N蛋白双抗原夹心ELISA抗体检测方法、H蛋白阻断ELISA抗体检测方法与血清中和抗体试验方法,分别检测了羊免疫疫苗后体内N蛋白抗体与H蛋白抗体在每个免疫阶段的代谢消长变化。结果表明:羊免疫小反刍兽疫疫苗后,血清内的N蛋白抗体与H蛋白抗体在6~8周时血清抗体效价较高,对应的羊体内中和抗体效价为1∶512,且效价至少可以持续到10周以上,2种抗体具有一定消长代谢规律的相关性。该研究结果也为以N抗原与H抗原为基础建立相应的抗原捕获ELISA方法、竞争ELISA检测方法、间接ELISA检测方法以及双抗原夹心ELISA检测方法奠定了一定的理论依据。     

小反刍兽疫诊断及其免疫防制的研究进展

小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科麻疹病毒属小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种急性、烈性、接触性传染病,目前已给中国养羊业造成巨大损失与威胁。作者对PPR的流行病学、诊断方法及疫苗研制进展等方面作一简要综述,以期为该病的防控提供有效的参考。     

Experimental studies on immunosuppressive effects of peste des petits ruminants (PPR) virus in goats

Effect of virulent and attenuated peste des petits ruminants (PPR) virus on the immune response to nonspecific antigen (ovalbumin) was investigated. Clinical and serological responses were monitored in goats administered with ovalbumin concurrently with either PPR vaccine or virulent virus. Study showed that PPR virulent virus causes marked immunosuppression as evidenced by leukopenia, lymphopenia, and reduced early antibody response to both specific and nonspecific antigen. These observations were predominant particularly during acute phase of disease (4-10 days post-infection). On the other hand, the vaccine virus induced only a transient lymphopenia without significantly affecting the immune response to nonspecific antigen or to itself during this period. Further, the antibody levels to ovalbumin in the group administered with virulent PPRV increased significantly between days 28 and 35 post-infection in comparison to the titers in other two groups given with either ovalbumin alone or in combination with vaccine.