5种胃肠激素样内分泌细胞在斜带石斑鱼稚鱼期消化道中的定位

5-Hydroxytryptamine， 5-HT）、生长抑素（）、P物质（     

[07]5种胃肠激素样内分泌细胞在斜带石斑鱼稚鱼期消化道中的定位

应用免疫细胞化学SABC方法,用5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、生长抑素(Sonmtostatin,Som)、P物质(substance P,SP)、胃泌素(Gastrin,GAS)和神经肽Y(Neuropeptide,NPY)5种特异性哺乳类胃肠激素抗血清对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)稚鱼期的消化道进行免疫细胞化学定位.结果显示,5-HT-和Som-样免疫活性细胞定位在斜带石斑鱼稚鱼的胃各部,包括胃贲门部、胃体和胃幽门部;SP-、GAS-样免疫活性细胞则在胃和肠均存在,其中SP-样细胞定位在胃体部和胃幽门部以及整个肠道,GAS-样细胞则从胃幽门部至肠道各段均存在;NPY-样免疫活性细胞仅在肠道中被检测到.根据这5种胃肠激素样内分泌细胞的形态、染色强度及其分布,可判断其在稚鱼期已经发育成熟,已像成鱼胃肠激素内分泌细胞一样,调节消化道的运动和消化液的分泌.本研究结果提示,斜带石斑鱼稚鱼死亡的原因可能与其胃肠激素样内分泌细胞的功能没有直接关系.     

细鳞鲑仔鱼开口饵料的研究

选取了6种不同饵料组合对孵化14d上浮开口细鳞鲑仔鱼进行开口饵料试验研究。在相同环境条件下,经10d投喂试验,结果表明:细鳞鲑仔鱼体长增长及成活率依次为轮虫+枝角类幼体组轮虫组颗粒饵料组螺旋藻组酵母及蛋黄组;经饲养10d后最高体长增加0.45cm,仔鱼成活率最高达98%。     

图们江细鳞鲑人工繁殖技术研究

为研究细鳞鲑（Brachymystax lenok）人工繁殖技术,采捕图们江野生细鳞鲑幼鱼,经人工培育至性成熟,连续4年进行人工繁殖。繁殖水温6~13℃,亲鱼4+龄以上;采用2.5 μg LHRH-A2 + 2.5 mg DOM一次性催产,可以达到预期催产效果。催产率、发眼率、孵化率、亲鱼产后成活率分别达到90%、95%、89%、95%。根据80尾卵巢发育至Ⅴ期、平均体质量(1165.11±500.30) g细鳞鲑样本分析,其绝对怀卵量为(3195.61±1430.04)粒,相对怀卵量(2.72±0.17)粒/g,成熟系数(13.54±1.14)%。绝对怀卵量(F)与年龄和体质量(W)密切相关,与体质量呈线性关系,拟合关系式为F=2.843W-120.43,R2=0.9754。减少检查次数、采用药物麻醉、产后药物处理可以避免造成亲鱼受伤及应激反应,提高亲鱼产后成活率。     

陕西省秦岭细鳞鲑资源调查分析

对陕西省适宜秦岭细鳞鲑生存的白云峡河、太白河东和红崖河的秦岭细鳞鲑资源量进行调查分析,结果显示,秦岭细鳞鲑总资源量从多到少依次为白云峡河(4 157尾)、太白河东(1 557尾)和红崖河(963尾).河道单位长度的秦岭细鳞鲑资源量从多到少依次为白云峡河(每100 m 63.37尾)、红崖河(每100 m 8.31尾)和...     

细鳞鲑人工繁殖技术初探

本次秦岭细鳞鲑人工繁殖实验属国内首次获得成功,主要通过野外采捕秦岭细鳞鲑亲本、池塘产前培育、人工采集精卵、室内干法受精、孵化槽流水孵化等措施,获得受精卵2850粒,孵化出仔鱼2451尾,发眼率90.8%,仔鱼孵化率86%。描述了孵化各期所需时间和温度,在7～11℃时,孵化时间约为58天。从受精卵开始孵化,达到发眼所需累积温度220℃.d,达到出膜所需累积温度336.5℃.d,达到仔鱼卵黄囊消失所需累积温度484℃.d。     

细鳞鲑亲鱼驯化及培育技术研究

根据细鳞鲑的生物学及生殖生理特性,在亲鱼的驯化及培育期间,模拟野生状态下的生境,在水环境及饵料结构上完全符合野生状态的环境条件,在不同发育阶段,采用不同的饵料进行强化培育,增强亲鱼体能,促使性腺发育,在进行人工催产时根据性腺发育程度,采取分阶段不同剂量注射混合激素,产后进行护理恢复性强化培育。实验结果亲鱼成熟雌性平均93.50%,雄性成熟平均99.43%;雌雄亲鱼成熟同步率达到100%。产后雄性亲鱼死亡率平均为2.75%,雌性亲鱼死亡率平均为3.01%。     

秦岭细鳞鲑早期发育观察

研究所用性成熟秦岭细鳞鲑(Brachymystax lenok tsinlingensis)亲鱼为野生捕获。对其进行人工繁殖,并观察其胚胎和仔鱼发育。结果表明:在水温9.31～12.80℃,受精卵历经408 h出膜,所需积温为193.35℃.d,初孵仔鱼体长为(9.64±1.03)mm。整个胚胎发育过程可划分为6个阶段(受精卵、卵裂阶段、囊胚阶段、原肠胚阶段、神经胚阶段、器官形成阶段)、26个时期。刚出膜的仔鱼体色透明,肌节明显,无游泳能力,出膜第5天体表出现大量黑色素,12 d后卵黄囊开始消失,46 d的仔鱼各鳍条与幼鱼相似,出现幼鲑斑。通过探讨水温、溶氧和水质等对秦岭细鳞鲑早期发育的影响,建议秦岭细鳞鲑人工繁殖的水温不宜超过14℃,最适宜水温应控制在6～10℃;孵化水体DO应在6.00～8.55 mg/L,如果低于这个水平将会导致发育迟缓、坏死或是出膜幼苗畸形。本研究旨在为秦岭细鳞鲑的人工繁殖和鱼种培育提供科学指导。     

MS-222对细鳞鲑和美洲红点鲑的麻醉效果研究

通过测定不同质量浓度MS-222对细鳞鲑和美洲红点鲑的麻醉效果,检测麻醉时鱼的呼吸频率以及空气暴露时长对鱼体复苏的影响,探究两种鱼类在渔业生产和科研实验中的最适麻醉剂浓度。结果显示：当MS-222质量浓度为80、100 mg/L时,细鳞鲑麻醉所需的时间显著少于40、60 mg/L浓度组,而显著多于其余浓度组(P<0.05)。当MS-222质量浓度为100 mg/L时,细鳞鲑的复苏时长最短(P<0.05)。当MS-222质量浓度为80 mg/L时,美洲红点鲑麻醉所需的时间显著少于40、60 mg/L浓度组,而显著多于其余浓度组(P<0.05)。当MS-222质量浓度为100 mg/L时,美洲红点鲑的复苏时长显著大于40、60和80 mg/L浓度组,而显著小于其余浓度组(P<0.05)。比较MS-222对两种鱼的麻醉效果,美洲红点鲑对MS-222更为敏感。两种鱼的呼吸频率总体上都随着麻醉程度的加深而下降,当空气暴露时长少于5 min时,细鳞鲑的复苏时长先减少后增加,美洲红点鲑的复苏时长则呈逐渐减少趋势。     

水温对细鳞鱼幼鱼消化酶活性的影响

1在水温6℃、14℃、22℃下和180×60×50cm控温水族箱中,饲养初始鱼体质量11.3±0.94g的细鳞鱼Brachymystax lenok幼鱼21d,测定了幼鱼消化器官（胃、幽门盲囊、肝脏和肠）中的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活力。结果表明：水温14℃下胃蛋白酶活性最高,其次为水温6℃时,22℃时消化酶活性最低,显著低于前2个处理组（P〈0.05）。肠中脂肪酶活性最高,显著高于胃和肝中（P〈0.05）,其次为幽门盲囊。各消化器官脂肪酶活力均在14℃时最高,其中肠和幽门盲囊中脂肪酶活力显著高于其他2个处理组。各水温条件下,幽门盲囊中淀粉酶活性最高,其次为肠。6℃时,幽门盲囊中淀粉酶活性显著高于胃和肝脏中（P〈0.05）;14℃和22℃时,幽门盲囊和肠中淀粉酶活性显著高于胃和肝脏中（P〈0.05）,胃和肝脏中差异不显著（P〉0.05）。14℃时各消化器官淀粉酶活力最高,6℃时肝脏和肠中淀粉酶活性显著低于14℃时,其它组织中各处理组间淀粉酶活力差异不显著（P〉0.05）。     

水温对细鳞鱼幼鱼消化酶活性的影响

1在水温6℃、14℃、22℃下和180×60×50cm控温水族箱中,饲养初始鱼体质量11.3±0.94g的细鳞鱼Brachymystax lenok幼鱼21d,测定了幼鱼消化器官（胃、幽门盲囊、肝脏和肠）中的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活力。结果表明：水温14℃下胃蛋白酶活性最高,其次为水温6℃时,22℃时消化酶活性最低,...     

细鳞鲑早期发育过程中的消化系统发生

应用连续切片技术和显微观察法, 对胚胎至幼鱼期的细鳞鲑(Brachymystax lenok)消化系统(口咽腔、胃、幽门盲囊以及肠道等组织)早期发生进行了系统研究。研究表明, 在实验水温为12.0～16.2℃时, 细鳞鲑胚胎期消化系统原基发生与分化的过程为, 在卵受精后125～165 h, 胚胎进入原肠期发育, 随着原肠作用的进行, 脊索开始分化; 卵受精后201 h, 消化系统原基细胞团在脊索下方出现, 为单层的扁平细胞; 卵受精后480 h, 消化系统原基位于脊索和卵黄囊之间, 呈直管状; 卵受精后552 h, 管状消化系统内层细胞大量增殖, 外层由两层细胞构成。细鳞鲑胚后消化系统的发育过程为, 初孵仔鱼即具有富含油球的大卵黄囊, 消化系统呈简单的盲管状, 肛门尚未与外界连通; 2～7 DAH, 仔鱼消化系统分化加快; 7 DAH后, 仔鱼已初步分化出口咽腔、食道、胃、肠以及肝; 10 DAH, 仔鱼消化器官已基本分化完毕, 肛门已向外界连通; 14 DAH, 仔鱼从内源性营养向外源性营养的过渡基本完成, 卵黄囊和油球吸收完毕; 19 DAH, 稚鱼胃固有膜内出现胃腺; 49 DAH, 幼鱼幽门盲囊分化完毕, 肝和胰脏功能完善; 64 DAH, 幼鱼口咽腔和胃的组织结构与成鱼基本相同, 前后肠组织结构相似; 105 DAH, 幼鱼幽门盲囊指状分支已具有28～36个。细鳞鲑仔鱼的最佳人工开口驯化时间应该在10～14 DAH, 可通过不断投喂适口饲料的方式来强化仔鱼的主动摄食行为。本研究旨在为深入了解细鳞鲑仔鱼的消化生理、摄食转变及开口驯化时机提供基础资料。

     

细鳞鱼卵巢滤泡细胞的发育及功能

通过光镜和透射电镜对细鳞鱼（Brachymystax lenok）的卵巢滤泡细胞进行了研究。结果表明,滤泡细胞起源于非生殖细胞,并且其整个发育过程可分为4个时期：零散细胞期、单层扁平细胞期、多层扁平细胞期和颗粒细胞分泌期。滤泡细胞在初级卵母细胞早期并不具备任何功能,到卵母细胞卵黄积累初期,滤泡细胞上皮协同其合成部分卵膜;卵黄积累旺盛时期,滤泡细胞在此过程中起到信号介导、物质转运和储存的作用;在卵巢退化阶段,滤泡细胞与未发育的卵母细胞形成闭锁卵泡,对卵细胞残体和碎片还具有吞噬、消化等作用。     

鱼类消化道内分泌细胞概述及研究方法

消化道内分泌细胞能产生多种具有调节胃肠功能的胃肠激素。该类激素除了能促进胃肠对营养物质的消化与吸收外,还能控制摄食行为、调控消化道运动以及细胞营养作用,甚至能够影响其他一些内分泌腺的活动。了解肠道内分泌细胞的基本概况有助于深入地研究鱼类的消化生理,组织化学、免疫细胞化学和电子显微镜等技术是研究消化道内分泌细胞鉴别、定位以及形态学的重要方法,利用这些技术能够揭示鱼类消化道内分泌细胞的生物功能及作用机理,对研究鱼类摄食、消化和吸收等生理机制有重要意义。因此,本文综述了近年来国内外鱼类消化道内分泌细胞的研究进展及主要研究手段,旨在为鱼类消化生理学、内分泌学和营养学提供参考资料。     

鱼类消化道内分泌细胞概述及研究方法

消化道内分泌细胞能产生多种具有调节胃肠功能的胃肠激素。该类激素除了能促进胃肠对营养物质的消化与吸收外,还能控制摄食行为、调控消化道运动以及细胞营养作用,甚至能够影响其他一些内分泌腺的活动。了解肠道内分泌细胞的基本概况有助于深入地研究鱼类的消化生理,组织化学、免疫细胞化学和电子显微镜等技术是研究消化道内分泌细胞鉴别、定位...     

野生细鳞鱼的生物学特性及繁殖力

本文对采捕的野生细鳞鱼的生物学特性及繁殖力进行了测定,结果表明:细鳞鱼可量比例性状为:全长/体长1.13±0.02,体长/体高4.86±0.30,体长/头长4.41±0.19,体长/尾柄长6.94±0.72,体长/尾柄高12.53±0.59,尾柄长/尾柄高1.82±0.17,头长/吻长3.36±0.31,头长/眼径5.41±0.52,头长/眼间距2.89±0.26;可数性状为:背鳍鳍式:II,11～13,胸鳍鳍式:I,15～19,腹鳍鳍式:I,9～12,臀鳍鳍式:II,10～14,侧线鳞:108～163,侧线上鳞:24～37,侧线下鳞:23～36,第一鳃弓鳃耙数:15～29,脊椎骨:57～61,肋骨:28～31,幽门垂:70～121。绝对繁殖力2823.25±1237.01,相对繁殖力3.20±1.79。     

铜对细鳞鲑幼鱼鳃和肝组织的急性毒性

在水温(16±0.5)℃下,采用静水实验法研究不同浓度的铜离子对体质量(35.8±9.6)g的细鳞鲑Brachymystaxlenok幼鱼鳃和肝脏的急性毒性,铜离子浓度为24h半致死浓度(LC_(50))的1/4倍、1/2倍,及1倍。结果表明:铜胁迫初期细鳞鲑幼鱼的鳃充血而颜色而变暗,后期鳃血管和细胞病变,颜色变浅。鳃丝先弯曲,然后溃烂,最后脱落;肝脏出血、肿大,切片显示肝脏细胞空泡化,后期可以看到坏死的细胞核。铜离子对细鳞鲑幼鱼的鳃和肝脏组织有明显的破坏作用,是铜急性中毒致死的原因之一。     

秦岭细鳞鲑的年龄与生长

 2009—2012年于陕西省陇县秦岭细鳞鲑(Brachymystax lenok tsinlingensis)国家级自然保护区内采集秦岭细鳞鲑样本397尾。以鳞片为年龄鉴定材料, 显微镜下观察发现, 秦岭细鳞鲑鳞片上的年轮特征主要表现为普通切割形; 研究样本的年龄共分为5个年龄组, 其中以1～3龄为主, 约占85.64%; 体长(L, mm)和鳞径(R, mm)具有显著的相关性(L= -5.83R² + 208.06R + 34.99, r²=0.88); Von Bertalanffy生长方程分别为: L_t=729.38[1-e^-0.08(t+0.5)], W_t=        6 288.74·[1-e^-0.08(t+0.5)]^{2.968 1}, 雌雄个体的生长速率无显著差异; 生长系数为0.08, 拐点年龄为13.10 龄, 对应的的体长和体质量分别为483.66 mm和1 857.86 g。结论认为, 秦岭细鳞属生长缓慢型鱼类, 在所调查的保护区中秦岭细鳞鲑显现出个体小型化趋势。在制定资源保护策略时, 应考虑采取人工增殖放流措施来扩大自然种群数量, 增强种群的自然调节能力, 恢复种群数量。本研究旨在了解秦岭细鳞鲑的生长规律, 为秦岭细鳞鲑的资源保护与合理利用提供理论指导。

     

患病细鳞鱼杀鲑气单胞菌的分离与鉴定

从患病细鳞鱼(Brachymystax lenok)的病变组织处分离到1株致病菌,经过分离培养,生化鉴定,16 S rRNA序列分析和人工感染实验确定该病原菌为杀鲑气单胞菌无色亚种(Aeromonas salmonicida subsp.achromogenes)。采用20种药物进行药敏分析,结果显示:分离菌株对阿米卡星、哌拉西林、恩诺沙星等9种抗生素敏感;对环丙沙星、诺氟沙星等4种抗生素中度敏感;对卡那霉素、青霉素、氨苄西林等7种抗生素耐药。