黑根霉发酵产木聚糖酶的条件优化

利用本实验室提供的黑根霉CY8降解玉米秸秆产木聚糖酶，观察了接种量、碳源、氮源、金属离子、表面活性剂对产木聚糖酶活和纤维素酶活的影响，确定最佳培养条件为：接种量3ml，碳源m（麦麸）：m（玉米芯）和m（麦麸）：m（玉米秸秆）均为3：7，氮源为尿素，Co2＋、Mg2＋、Na＋、K＋对木聚糖酶有促进作用，Mg2＋的激活作用最大，可使酶活性提高37.4％，其它离子如Ca2＋。‘对酶活的影响较小。Tween80表面活性剂对菌株产木聚糖酶有促进作用。在不同温度下观察了酶的热稳定性，结果表明：该酶热稳定性较差，在50C以下热稳定性较好（木聚糖酶活计），而随着温度的升高，酶活力很快丧失．当温度达到80℃时，酶活在40min内就全部丧失。     

特定电磁波谱（TDP）对康氏木霉和黑曲霉的诱变作用

康氏木霉Ｔ－２０和黑曲霉Ａ－８经特定电磁波辐射器处理，得到变异株Ｔ－７４和Ａ－６５。它们固体培养物的纤维素酶各组分酶活力与出发菌株相比，都得到提高。特别是变异株Ｔ－７４的滤纸糖酶活力为１８．２μ／ｇ，羧甲基纤维素酶活力为８２８．４μ／ｇ，β－葡萄糖苷酶活力为１０．４μ／ｇ，分别提高３１．８％，３６．２％和２７．６％法。     

拟康氏木霉固态发酵产纤维素酶系的研究

以稻草秸秆为主要原料,利用拟康氏木霉3.3002(Trichoderma pseudokoningii 3.3002)固态发酵生产纤维素酶,对培养条件进行了优化,并系统地测定了各种纤维素酶的酶活.结果表明,最优产酶培养基组成为:稻草秸秆和麸皮的混合比例为4:1,最佳氮源为2.5%(NH4)2SO4,最佳发酵时间120 h,培养温度35℃,接种量15%,pH 5.0,培养基含水率50%.在此条件下,该菌株产纤维素酶系中羧甲基纤维素酶(Cx)酶活力达4700 U/mL,葡聚糖外切酶(Cb)酶活力达3440 U/mL,葡萄糖内切酶(C1)酶活力达到1620 U/mL,滤纸酶(FPA)酶活力达到1935 U/mL.     

康氏木霉固态发酵产纤维素酶室温条件的研究

以稻草和麸皮为主要原料,在室温条件下(温度不定)通过单因素筛选出康氏木霉固态发酵产纤维素酶的最佳条件,对氮源、接种量、麸皮添加量、含水量、发酵时间和初始pH值进行研究,结果表明,室温条件下的最佳发酵条件:氮源为尿素,添加量3%,接种量2%,稻草麸皮比7:3,营养液添加量150%,初始pH值3.0,发酵时间72 h,此时,羟甲基纤维素酶和滤纸酶活性最高。     

转透明颤菌血红蛋白基因里氏木霉菌株固体发酵产纤维素酶的能力研究

本试验对转入透明颤菌血红蛋白基因的里氏木霉菌株(Tu6-VHb)与未转入该基因的里氏木霉菌株(Tu6)固体发酵产纤维素酶的能力进行了比较分析,并对Tu6-VHb菌株固体发酵产纤维素酶的培养条件进行了响应面优化研究。结果表明,Tu6-VHb菌株比Tu6菌株具有更强的产纤维素酶能力,其产纤维素酶活力提高了61%。通过响应面优化试验,获得Tu6-VHb菌株固体发酵产酶的最佳培养条件为:碳源配比(即麸皮与稻谷杆的比例)为2.89,营养液氮源配比(即尿素与硫酸铵的比例)为0.90,初始pH值为5.02。在此优化条件下进行固体发酵,每克培养基可以产纤维素酶123.81 U/g,与预测最大响应值129.61 U/g接近,且固体发酵产纤维素酶的活力较未优化前提高了3.08倍。     

绿色木霉固态发酵产纤维素酶活力的研究

以麦秆和麸皮为主要原料, 通过正交试验和单因素试验优化绿色木霉Trichderma viride固态发酵产纤维素酶的最佳工艺条件,并研究绿色木霉对小麦秸秆纤维素降解的影响,为绿色木霉降解小麦秸秆纤维素提供最佳条件,进而提高小麦秸秆的利用率。结果表明,不同条件下绿色木霉产纤维素酶活力存在显著差异(P<0.05),最佳培养基为：氮源为(NH4)2SO4,pH值5.5,含水量为200%,麦秆∶麸皮质量比为4∶1;最佳发酵条件为：培养时间为96 h、温度35 ℃、初始pH值 6.0、含氮量0.4%、接种量15%,培养方式为半密闭;发酵后小麦秸秆中中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、纤维素含量和半纤维素含量比发酵前分别下降5.22%、6.88%、4.73%和4.16%,木质素含量无明显变化。     

青海高原产纤维素酶康氏木霉的酶促动力学研究

对分离自青海省东部土壤的产纤维素酶康氏木霉(Trichoderma koningii)0143p株进行产酶条件优化及酶促动力学特性研究。结果表明，T.koningii 0143p菌株在麦麸为碳源、尿素为氮源、起始pH值为7．0、28℃培养6d的条件下产酶量最高。在此产酶优化条件下，0143p菌株的湿固体发酵物滤纸酶活力(FPA)可达32pmol／min，为原产酶条件的1．6倍；酶作用的最适温度为50～55℃，最适pH4．8。T.koningii 0143p菌株可作为纤维素酶解饲料的酶源菌，具有良好的饲用前景。     

秸秆还田土壤真菌的分离和鉴定

为了获得产纤维素酶活性高的土著菌株,试验采用传统的微生物分离培养方法从秸秆还田小麦土壤中分离到1株纤维素酶活力较高的真菌,并进行了分子鉴定。结果表明:该菌株的羧甲基纤维素钠酶活、滤纸酶活均较高,通过18S rDNA序列分析发现与拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)的相似性达到100%,鉴定为拟康氏木霉。     

纤维素酶曲喂兔试验

兽医大学兽医研究所用等量青草粉与麸皮加入绿色木霉EA_(867)菌株或木霉10菌株制成纤维素酶曲,添加到家兔日粮饲喂试验的结果:添加绿色木霉EA_(867)纤曲组的兔体重比对照组增加25.58％;添加木霉10纤曲组比对照组体重增加20.23％。试验与对照组差异显著(P<0.01)。增重原因,可能为纤维素酶促进兔体内纤维素     

不同配比的培养基对纤维素分解菌发酵饲料的影响

利用纤维素分解菌生产发酵饲料是当前饲料业的一个发展方向，它可将纤维素分解为牲畜可利用的糖，同时增加饲料中蛋白质的含量。本试验以康氏木霉和酿酒酵母两株菌混合发酵生产单细胞蛋白饲料，并对加水比、物料比、氮源添加量等因素进行研究，最终通过正交实验对各因素综合分析，确定最佳培养基配方，为玉米秸秆粉与麸皮1：1混合，3．5％（NH4）2SO4，原料：水为1：4，pH5．5，30℃，培养周期5d。发酵终产物粗蛋白含量20．05％，经发酵前提高了60．4％；粗纤维含量为11．01％，降低了61．96％。     

MB22木聚糖酶发酵条件的研究

通过因素轮换试验和正交试验,对MB22菌产木聚糖酶的培养基配方和发酵条件进行了研究。结果显示最佳培养基组成是:以玉米芯粉和麸皮为碳源,麸皮120g/l,玉米芯280g/l,(NH4)2SO44g/l,CaCO31.5g/l,Tween80,2.0g/l,MgSO4·7H2O1.5g/l;最佳发酵条件为:起始pH5.0,摇床培养温度30℃,转速160r/min,振荡培养84h。在最佳发酵条件下,MB22菌的最高产酶活力可达898.23U/ml。虽然与一些高产菌株相比该菌株的产酶能力还有待于进一步提高,但该试验结果为进一步进行微生物生产木聚糖酶的研究提供了理论依据。     

添加纤维素酶与藜麦麸皮及小麦麸皮对台湾红藜青贮的影响

为研究纤维素酶与藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)麸皮及小麦(Triticum aestivum L.)麸皮对台湾红藜(Chenopodium formosanum Koidz.)青贮发酵品质的影响,本试验设对照组(CK)、纤维素酶组(0.5 g·kg-1鲜草,A1)、纤维素酶(0.5 g·kg...     

麦麸水溶性膳食纤维对酸乳品质的影响

以小麦麸皮为原料,采用复合酶法水解制得水溶性膳食纤维（SDF）,并选择不同质量的SDF添加到原料乳和其他辅料中进行乳酸菌发酵。结果表明：在酸乳中添加麦麸SDF能显著提高酸乳中钙和必需氨基酸的含量。从酸乳感官品质和营养角度考虑,确定SDF酸乳最佳质量配方比例为：优质鲜牛乳80.0%、全脂乳粉3.0%、SDF 1.0%、蔗糖3.0%、水10.0%、发酵剂（嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌质量比1：1）2.5%、稳定剂0.5%。     

绿汁发酵液和纤维素酶对香蕉茎+小麦麸混合青贮品质的影响

本试验旨在研究绿汁发酵液和纤维素酶对香蕉茎+小麦麸混合青贮发酵品质的影响。调制1个香蕉茎单贮(BSS)组和8个香蕉茎小麦麸混合青贮组,分别为1个对照(CON)组,添加2 mL/kg绿汁发酵液(FGJ)组,添加0.05、0.15和0.25 g/kg纤维素酶(CEL1、CEL2和CEL3)3个水平组,添加FGJ+CEL1(MIX1)、FGJ+CEL2(MIX2)和FGJ+CEL3(MIX3)3个混合组,每组均设3个重复。常温发酵60 d,测定青贮的发酵品质和化学成分。结果表明,与BSS组相比,CON组的气体损失率(GLR)和pH显著降低(P<0.05)。与CON组相比,各添加剂组的干物质(DM)、干物质回收率(DMR)和可溶性碳水化合物(WSC)含量有不同程度的增高,中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)及氨态氮(AN)含量有不同程度的降低;与FGJ组相比,CEL和MIX组的DMR极显著升高(P<0.01)。在CEL组中,随CEL水平的增加,青贮效果愈好;与MIX1组相比,MIX3组的NDF含量显著减少(P<0.05),DMR显著升高(P<0.05);与CEL组相比,对应的MIX组有不同程度的改善。综上所述,在香蕉茎青贮中添加小麦麸有利于改善青贮品质,添加纤维素的效果优于添加绿汁发酵液的效果,二者混合效果更好,且混合后的青贮效果随着纤维素酶的增加而更好。     

发酵油菜籽壳产纤维素酶的初步研究

为了开发利用油菜籽壳这一油脂工业副产品,从60株保藏菌种中筛选得到一株能发酵油菜籽壳高产纤维素酶的菌株木霉T5。通过实验初步研究其适宜产酶的工艺条件。结果表明,木霉T5在m(油菜籽壳):m(啤酒糟):m(麸皮)=5:2:3、NH4NO32%、CaCl20.1%、Tween800.1%的基质上,加水量为120%,接种量为10%,置30℃下培养60h,产酶量可达80.116IU/g,具有较好的应用前景。     

单载体吸附微生物的研究

微生物菌剂的保存一直是个难题,直接影响到微生物菌剂的应用。由于液态菌剂保藏效果不理想且使用较为不便,因此,找到一种吸菌量大,并能增加细胞密度和保持菌种存活力的载体显得尤为迫切。为研究出适合吸附微生物的单载体,进行了单载体吸附微生物培养并定期测定其纤维素酶酶活和过氧化氢酶酶活。通过数据分析,选出几种表现较好的载体,也为复合载体试验提供了筛选依据。研究表明,在过氧化氢酶酶活的测定中,麦麸及干牛粪的表现均比较优秀且3 种菌都在第6~8天的时候出现峰值。在纤维素酶酶活的测定中,亦是麦麸与干牛粪的表现较为突出,而在后期接到麦麸上的3 种菌的纤维素酶酶活都大幅度提高。麦麸、硅藻土、干牛粪及锯末这4 种载体适合ZX5、ZZ9、ZH9三种微生物的吸附。     

奶牛微生物发酵饲料组方及其配套翻料工艺的研究

本试验旨在研究8个不同奶牛微生物发酵饲料组方及翻料工艺对物料中酵母菌活菌数及3种营养活性物质含量的影响,确定优化配方的组成及其配套翻料工艺。试验以麸皮、米糠、棉粕、玉米粉等9种当地农副产品为发酵原料,以DPS软件混料试验方案设计8种不同组方,将酿酒酵母BC、XR4,枯草芽孢杆菌A15按2：2：1混合,分别接种于8个组方中进行固态发酵。通过测定物料中酵母菌活菌数及甘露聚糖、β-葡聚糖、多肽3种营养活性物质含量来筛选优化组方,在此基础上进行翻料工艺的研究,其中对照组不翻料,试验1组翻1次料,试验2组翻2次料,通过测定发酵料料温、酵母菌活菌数及3种营养活性物质含量确定最优工艺。结果显示：①组方8为优化配方,其组成为麸皮8.62%、醋糟5.85%、米糠20.89%、棉粕12.55%、玉米粉11.35%、玉米皮7.31%、玉米渣1.10%、糖渣25.36%、玉米胚芽粕5.35%、硫酸铵1.02%、磷酸二氢钾0.50%、硫酸镁0.10%。②组方8最佳翻料工艺为：料温达到35℃左右时进行第1次翻料,待料温达到42℃时进行第2次翻料。此工艺下物料的技术指标为：活菌数4×10⁵ CFU/g、甘露聚糖41.28 mg/100 mg、β-葡聚糖87.06 mg/100 mg、多肽10.32 μg/100 mg,其含量较对照组分别提高了100.00%、3.90%、4.89%、1.67%;较试验1组分别提高了33.33%、3.07%、3.31%、0.88%。     

Study on the Microbial Fermentation Feed Formula and Its Turning Process of Dairy Cows

This experiment was conducted to study the effects of eight microbial fermentation feed formulas and the different turning processes on the yeast viable bacterial number and three kinds of nutritional active substance contents to determine the optimal formula and its turning process.Nine kinds of local agricultural products,such as wheat bran,rice bran,cottonseed meal and corn flour,were used as fermentation materials and eight different formulas were designed by mixture design of DPS.Saccharomyces cerevisiae BC,XR4 and Bacillus subtilis A15 were mixed by 2:2:1 and inoculated in the eight formulas to conduct solid state fermentation.The yeast viable bacterial number and the content of mannan,β-glucan and polypeptide were measured to screen the optimal formula.Basing on the optimal formula,the turning process experiment was conducted.There were three groups:Control group,experimental group 1 and 2.The control group was without turning process,while the feed in the experimental group 1 was turned once and the feed in the experimental group 2 was turned twice.The material temperature,yeast viable bacterial number and three kinds of nutritional active substance contents were measured to determine the optimal turning process.The results showed that:① Formula 8 was the optimized formula which consisted of 8.62% wheat bran,5.85% vinegar residue,20.89% rice bran,12.55% cottonseed meal,11.35% corn flour,7.31% corn bran,1.10% corn residue,25.36% sugar residue,5.35% corn germ meal,1.02% (NH₄)₂SO₄,0.50% KH₂PO₄ and 0.10% MgSO₄.② The best turning process of formula 8 was turning twice during the solid state fermentation.When the material temperature reached 35℃,the first turning was conducted and then when the temperature reached 42℃,the material would be turned again.After that the material continued fermenting until the end.Its optimal indexes were viable bacterial number was 4×10⁵ CFU/g,and the content of mannan,β-glucan and polypeptides were 41.28 mg/100 mg,87.06 mg/100 mg and 10.32 μg/100 mg,respectively.Its improved by 100.00%,3.90%,4.89% and 1.67% separately than the control group and improved by 33.33%,3.07%,3.31% and 0.88% comparing with the experimental group 1.