香榧茎段离体培养再生植株的研究

对香榧茎段不定芽诱导研究的结果表明,不定芽诱导的最佳培养条件为:培养基为B5+KT0.1mg/L+IBA0.5mg/L+0.08%活性炭+2%葡萄糖,培养温度为20℃,光强不高于400lx,该条件下的不定芽诱导率可达55%。将不定芽培养在1/2B5+IBA0.1mg/L+0.08%活性炭+2%葡萄糖的生根培养基上,生根率最高达到40%。通过器官发生途径国内外首次建立了香榧离体再生体系和快繁体系,并获得了完整的再生植株,为今后开展香榧的遗传转化和品种改良奠定了基础。     

色素万寿菊叶片再生体系的建立及优化

以色素万寿菊叶片为外植体,探讨了不同的植物生长调节剂组合、AgNO3、凝胶剂及不同的继代培养基对叶片器官发生的影响。结果表明：6-BA 3.0 mg · L-1 + IAA 3.0 mg · L-1 + 蔗糖30.0 g · L-1 + 植物凝胶6.0 g · L-1的MS培养基适宜不定芽的分化,不定芽分化率达97.5%,将分化13 d的叶片外植体转接到组织培养瓶中,30 d后56.7%的不定芽可发育成高约5 cm的植株,再生植株在MS培养基上生根率为100%,移栽成活率达100%。     

西瓜高效再生体系的建立

以优质小果型西瓜品种西173和小麒麟为材料,系统研究了以子叶为外植体的西瓜组培高效再生体系。结果表明:2个西瓜品种在不定芽和愈伤组织诱导上存在着较大差异,在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1的分化培养基上,西173不定芽诱导率最高达到92.6%,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1培养基上小麒麟不定芽诱导率最高达到89.7%;诱导出的不定芽丛伸长以MS+KT0.2mg·L-1培养基最佳;2个西瓜品种不定芽在MS+IBA0.2mg·L-1培养基上均获得了较好的生根效果。组培苗移栽后保持高温、高湿是移栽成活的重要条件。西瓜高效再生体系的建立为应用基因工程技术改良西瓜品质和提高其抗逆、抗病性奠定了基础。     

黄瓜高效再生体系的建立

以黄瓜20个栽培品种的子叶、子叶节和下胚轴为试材,进行发芽、分化和诱导分化不定芽试验,建立最适于黄瓜品种的再生体系。结果表明:供试的20个黄瓜品种中,"农家乐"、"神农春四F1"2个品种的发芽情况显著优于其它品种,发芽率分别为66.7%和83.3%;在MS+0.5mg/mL 6-BA培养基中,20个黄瓜品种不同类型外植体的分化效率以子叶节最佳;"农家乐"、"神农春四F1"使用MS+0.5mg/L 6-BA+1.0mg/L AgNO3培养基,芽的增殖系数最高,诱导率分别为50.0%、56.3%。该试验根据不同品种的发芽率以及诱导愈伤组织和芽的分化,建立了黄瓜快速、高频再生体系,为进一步研究黄瓜的遗传转化和基因工程育种提供参考依据。     

火龙果茎段再生体系的建立

对火龙果茎段离体培养与植株再生过程进行了研究,建立了火龙果的再生体系。结果表明:愈伤最适诱导培养基为:MS+TDZ 0.4mg/L+KT 0.5mg/L+蔗糖30mg/L+琼脂8.8mg/L;丛生芽增殖最适培养基为:MS+TDZ 0.4mg/L+KT 1.0mg/L+BA 1.0mg/L蔗糖30mg/L+琼脂8.8mg/L;生根最适培养基为:1/2MS+NAA 0.3mg/L蔗糖30mg/L+琼脂8.8mg/L(pH 5.8)。     

金钻蔓绿绒组培再生体系的建立

以金钻蔓绿绒幼苗茎段为外植体,进行愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖培养的研究。结果表明:金钻蔓绿绒茎段在MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.1mg/L培养基可成功诱导出愈伤组织,继而分化出不定芽;不定芽适宜增殖培养基为MS+6-BA 6.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖倍数可达3.93;不定芽适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 1.0mg/L,生根率可达100%,移栽30d后成活率达95%以上。     

无籽沙糖桔高效离体再生体系的建立

以无籽沙糖桔异交种子(无籽沙糖桔×有籽沙糖桔)的实生苗上胚轴为材料,以MT为基本培养基,研究了不同种类的植物生长调节剂及其组合对无籽沙糖桔离体再生的影响,建立了高效的无籽沙糖桔离体再生体系。结果表明:ZT和TDZ不利于无籽沙糖桔不定芽的诱导;单一附加6-BA时,6-BA浓度为0.250mg/L的不定芽诱导率和平均每个外植体不定芽数最高,分别为88.5%和2.7个/外植体;同时附加6-BA与IBA时,以6-BA 0.250mg/L+IBA 0.25mg/L的效果最好,不定芽诱导率达95.2%,平均每个外植体萌芽数为3.6个。再生不定芽生根较难,在附加NAA的培养基中不能生根,在附加IBA的培养基中可生根,再生植株;在附加IBA 1.00mg/L的培养基上生根效果最好,生根率为10%。     

灰枣高效再生体系的建立

以新郑红枣“灰枣”（Ziziphus jujuba cv．Huizao）的茎段为外植体，分别进行了启动诱导、快速繁殖和壮苗生根研究，并且获得了完整的再生植株。结果表明：5～7月份是外植体取材的最佳季节。外植体启动诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋IAA0．1mg／L＋AC0．1g／L，启动率可达72．7％。将诱导出的芽苗转入MS＋6-BA1．5mg／L＋IAA0．1mg／L＋GA3 2mg／L培养基中，pH为6．5时，其增殖系数达7．8。以1／2MS＋IBA 1．5me,／L＋IAA0．3mg／L培养基诱导生根，生根率90．3％。生根苗大田移栽成活率达80％以上。     

甜瓜再生体系的建立

以葫芦科的甜瓜为试验对象,探讨不同基因型、不同激素浓度配比及抗生素胁迫对其不定芽萌发的影响,以期建立甜瓜再生培养体系,为甜瓜遗传转化奠定基础.结果表明,甜瓜在初代培养时,不定芽发生的培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA,甜瓜再生率最高,达到92.5％;甜瓜在继代培养中,0.3 mg·L-16-BA的处理最适宜不定...     

扶芳藤再生体系的建立

对扶芳藤的再生进行了研究。预培养时间较短的下胚轴对植物生长调节剂浓度反应敏感,以较老的下胚轴在MS 6-BA 1.3-1.7 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1或IBA 0.1 mg·L-1培养基上分化效果最好。无芽茎段在MS 6-BA 1.5 mg·L-1 IBA 0.1 mg·L-1和MS 6-BA 1.3 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1培养基上分化效果好,不定芽生长旺盛。     

余甘子下胚轴离体再生体系的优化

 以余甘子( Phyllanthus emblica L. ) 下胚轴为外植体, 通过器官发生途径诱导形成不定芽, 探讨影响下胚轴器官发生和植株再生的因素, 建立了下胚轴高效再生体系。结果表明: 附加AgNO₃ 1 mg·L^-1和蔗糖40 g·L^-1的1 /2MS培养基最适合不定芽的分化; 下胚轴不同部位不定芽再生能力由强到弱表现为:形态学上部>中部>下部; 前期暗培养有利于下胚轴不定芽的形成, 暗处理14 d效果最好。通过以上优化措施可以使不定芽再生率达100% , 平均每外植体不定芽数11.7 个。不定芽较适生根培养基为胺鲜酯(DA26) 3 mg·L^-1 +复硝酚钠(CSN) 3 mg·L^-1 , 生根率达到62.8%。     

‘丰香’草莓叶片高效再生体系的建立

 以草莓主栽品种丰香( Fragaria ×ananassa Duch ‘Toyonoka’) 叶片为外植体, 研究了影响组织培养的多个因素, 建立了高效再生体系。结果表明: MS + TDZ 1.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.4 mg·L ^{- 1}培养基最适于不定芽分化。不同滤光膜(绿膜、红膜、蓝膜、黄膜) 对草莓不定芽的分化具显著效应, 绿膜和红膜对芽的分化有明显促进作用, 不定芽再生率达95%以上, 平均每个外植体再生芽数在25个以上; 而蓝膜和黄膜则不利于芽的分化。不同滤光膜光谱差异主要集中在300～700 nm, 红、绿膜在该波段光强较弱,而黄、蓝膜和荧光灯较强。暗处理4周比1、2、3周更有利于提高叶片的不定芽再生率, 此后转到光下培养, 获得的不定芽再生率可达100%。     

甜瓜再生芽高效诱导方法的研究

以甜瓜品种伊利沙白为材料,将子叶外植体直接接种在Ｂｏｒｄａｓ等诱导体细胞胚性愈伤组织的培养基上,诱导芽的频率高达９０％,成芽外植体平均分化出１５个芽。     

尾穗苋子叶节离体再生体系的建立

以尾穗苋为试验材料,取其无菌苗子叶节为外植体,对苗龄为3d、5d、7d的不同子叶节苗态、切割方式以及激素配比等分化再生因素进行优化筛选。结果表明:不同子叶节苗态及切割方式对不定茅分化影响不大,其中子叶刚平展开的子叶节,采用子叶全留的切割方式有利于不定茅的生长;培养基激素配比对不定茅的诱导影响显著,单独使用6-BA能诱导子叶节产生不定芽,但芽生长较慢且弱小,NAA和6-BA配合使用能促进不定芽的生长和伸长,生长健壮,其中1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA组合对不定芽的诱导与生长效果最佳。MS培养基中添加0.2mg/L IBA诱导生根的效果最好,生根率可达97.8%。     

翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

苦瓜子叶离体再生体系的建立

以“圣香”苦瓜、“玉华”苦瓜的子叶为外植体进行离体培养植株再生研究.结果表明:2个苦瓜品种的子叶在不同的培养基上都较易形成愈伤组织,愈伤组织诱导率都达到80％以上.培养基MS+TDZ 0.05 mg/L+-NAA 0.02 mg/L适合“圣香”苦瓜子叶不定芽分化,分化率为68.4％;培养基MS+-TDZ 0.03 mg/L+-NAA 0.02 mg/L适合“玉华”苦瓜子叶不定芽分化,分化率为67.8％.“圣香”苦瓜在培养基上MS+ZT 0.3 mg/L+NAA 0.01 mg/L上丛生芽诱导效果好,增殖率达6.5;“玉华”苦瓜丛生芽诱导的最佳培养基为MS+TDZ 0.02 mg/L+NAA0.01 mg/L,增殖率达6.6.生根诱导以1/2MS+NAA 0.05 mg/L培养基诱导率最高,“圣香”苦瓜生根率为90.7％,“玉华”苦瓜生根率达91.9％.     

超量表达PhWRIL1基因抑制矮牵牛叶片外植体再生不定芽

许多研究发现AP2/ERF家族euANT支基因超量表达可以促进植物生长和离体再生。但尚未有关于与euANT支亲缘关系很近的AP2/ERF基因basalANT进化支基因超量表达对离体培养中不定芽再生影响的研究。本研究中从矮牵牛中克隆了一个basalANT基因,命名为PhWRIL1。Real-time PCR结果显示,PhWRIL1的mRNA在矮牵牛各种组织中均有表达,表达量处于中等水平,在成熟组织中比幼嫩组织中更高。超量表达PhWRIL1的矮牵牛植株严重矮化,但开花时间没有显著变化。测定再生能力的结果表明：PhWRIL1超量表达的转基因植株叶片外植体的愈伤组织和芽的诱导与生长明显减少。这些结果表明PhWRIL1在矮牵牛中超量表达抑制了离体培养过程中不定芽的再生能力,在植物发育过程中basalANT和euANT基因可能发挥相反的作用。     

悬铃木下胚轴及叶片再生不定芽的影响因素分析

 以悬铃木的下胚轴和离体叶片为材料, 研究了基因型、植物生长调节剂、光照条件、外植体部位等因素对其不定芽分化的影响。结果表明: 1) 6-BA与IBA的浓度比对下胚轴不定芽的分化影响较大,以6-BA ∶IBA小于20 ∶1较为合适; 而叶片的不定芽再生受基因型的影响显著, 在4种供试材料中, PH2的再生能力最强, 但0.1～1.0 mg·L^-1 TDZ不利于其不定芽再生。2) 黑暗培养对下胚轴的不定芽分化有一定的促进作用, 但不利于叶片的不定芽再生, 50～100 lx的弱光有利于叶片的不定芽分化。3) 不同部位的下胚轴切段及叶片的再生能力差异显著, 其中靠近子叶的下胚轴切段和试管苗顶端的2枚叶片再生能力较强。此外, 刻伤叶片的再生效果明显优于叶片切块, 说明悬铃木的叶片与下胚轴的离体培养存在明显的生物全息现象。