复合酶解脱盐咸蛋清的工艺优化

为了提高脱盐咸蛋清蛋白的酶解效率,采用胰蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶对脱盐咸蛋清蛋白进行复合酶酶解。结果表明:在加酶量(胰蛋白酶∶复合蛋白酶∶风味蛋白酶=1∶2∶2)0.04%,料液比1∶3(g/m L)、pH值7.5、酶解温度50℃条件下酶解4 h,可获得水解液清亮、无苦味、具有较好的鸭蛋蛋清风味特征、感官品质评分88分、水解度为47.2%的蛋清酶解液。     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料,研究蜂蛹蛋白质酶解工艺,并对所得结果进行分析。结果表明,胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为60℃,酶用量为1.5%,酶解时间1.5 h,pH值为8.0,料水比为1∶8,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.526 mg/mL;中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为45℃,酶用量为2.0%,酶解时间为1 h,pH值为7.5,料水比为1∶6,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶;双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为:总酶量为2.0%,酶量比为1∶2,酶解温度50℃,酶解时间为2 h,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.889 mg/mL。双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

用酶法水解酒糟生产新型调味品的研究

以黄酒酿造副产物酒糟为主要原料,以酸性蛋白酶和α-淀粉酶为水解剂,对酒糟的水解条件进行正交试验研究。结果表明,酒糟的最佳水解条件为:酸性蛋白酶与α-淀粉酶的质量比为1∶1,加酶总量为0.07g/100g酒糟,水解温度为45℃,水解液pH值为3.5,水解时间为10h,酒糟和水的固液比为1∶3。在此条件下,经酶解和过滤,浓缩至酒糟相等质量的水解液,其总可溶性固形物和氨基态氮含量分别为9.0%和0.570%。     

花蛤酶解工艺的研究

对花蛤肉酶法水解进行了研究,使用Protamex复合蛋白酶,考察了酶用量、温度、时间、pH值对水解度的影响。结果表明,Protamex复合蛋白酶水解花蛤肉的最佳条件为酶用量0.06 AU/g,pH值6.5,水解时间180 min,水解温度55℃。     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料, 研究蜂蛹蛋白质酶解工艺, 并对所得结果进行分析。 试验结果表明, 胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为： 酶解温度为 60 ℃, 酶用量为 1.5%, 酶解时间 1.5 h, pH 值为 8.0, 料水比为 1∶8, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 1.526 mg/mL; 中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为： 酶解温度为 45 ℃, 酶用量为 2.0%, 酶解时间为 1 h, pH 值为 7.5, 料水比为 1∶6, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶; 双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为： 总酶量为 2.0％, 酶量比为 1∶2, 酶解温度 50 ℃,酶解时间为 2 h, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 1.889 mg/mL。 双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

制备乳清抗氧化肽的水解条件优化

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶3种酶对乳清蛋白进行酶水解试验,研究了不同酶解产物、水解时间、水解温度和pH值下的乳清抗氧化肽的水解度和TBARS值,确定了制备乳清抗氧化肽的最佳水解参数。结果表明,乳清蛋白水解物具有抗氧化活性,最佳复配条件是碱性蛋白酶的水解时间5 h,最佳水解温度为65℃,pH值8.5;胰蛋白酶的水解时间1 h,最佳水解温度为45℃,pH值8.0。当水解度达到32.28%时,乳清肽具有较强的抗氧化能力。     

多肽的酶法制备

以羊脾脏为原料,用菠萝蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解,选择最佳水解条件。结果表明,温度60℃,pH值7.0,加酶量5.0%,时间5.0h为最佳水解条件。     

蚂蚁蛋白提取及氨基酸营养液制备的研究

为研究用碱法提取蚂蚁蛋白及用单酶水解的方法提取蚂蚁蛋白,考察其最佳工艺条件。采用蚂蚁经干燥、脱脂后,用稀碱进行溶解,确定最佳溶解条件为：碱液浓度1.5%,浸泡温度80℃,固液比1∶20,蚂蚁蛋白提取率达18.82%。然后,用中性蛋白酶、胰蛋白酶和胰酶分别进行酶解,确定胰蛋白酶为较适宜酶,最佳水解条件为：pH值8.0,酶量2.0%,反应温度40℃,固液比1∶7.5,反应时间5h,水解率达19.28%。结论为用单酶水解的方法提取蚂蚁蛋白提取率高。     

双酶法水解罗非鱼下脚料制备降血糖肽的工艺研究

以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标,确定双酶复合水解罗非鱼下脚料的方案,并通过单因素试验和正交试验进行优化,最后得到最适酶解工艺参数为先在碱性蛋白酶在温度50℃,加酶量10000 U/g,pH值9.5,底物质量分数6%条件下水解;再在胰蛋白酶在温度37℃,加酶量10000 U/g,pH值8条件下水解100 min。此工艺条件下罗非鱼下脚料水解度、水解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率分别为48.26%和41.46%。     

复合酶法制备玉米活性肽及其功能特性的研究

采用碱性蛋白酶和胃蛋白酶制备玉米活性肽,以水解度为指标,分别对酶解温度、酶解时间、加酶量及pH值4个因素进行单因素试验及正交试验分析,确定双酶水解的最佳酶解条件。结果表明,碱性蛋白酶水解最佳条件为酶解温度60℃,酶解时间为1.5 h,加酶量为0.128 g,pH值为11,水解度为13.63%;胃蛋白酶水解最佳条件为酶解温度60℃,酶解时间为1.5 h,加酶量为0.008 g,pH值为2.1,水解度为22.12%;双酶水解后水解度可达29.88%;玉米肽对自由基清除率达25.62%。     

文蛤蛋白酶解条件的优化及酶解产物体外抗氧化活性的分析

为了制备抗氧化活性多肽,利用风味蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶复合的方式水解文蛤蛋白,在单因素实验结果的基础上,选取液料比、酶解温度和酶解pH为影响因子,应用Box-Benhnken中心组合设计原理进行三因素三水平实验设计,以文蛤蛋白的水解度(DH%)为响应值,运用响应面(RSM)法对双酶复合水解条件进行优化,并分析了酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明：双酶复合酶解的最优酶解条件为水解时间4 h,酶添加量3%,双酶复合比（风味蛋白酶:木瓜蛋白酶）2:1,液固比3.25:1,温度51℃,pH 6.9,在此条件下文蛤蛋白水解度为36.11%,酶解产物清除DPPH和?OH自由基的IC50值分别为2.61、3.47 mg/mL,表现出较强的体外抗氧化活性,因此,可以利用优化后的酶解条件水解文蛤蛋白制备抗氧化多肽。     

响应面法优化牛乳蛋白的水解工艺研究

为降低牛乳蛋白中的致敏蛋白含量,制备婴儿配方乳。利用蛋白酶水解牛乳蛋白,在筛选出最佳酶解用酶的基础上,以胰蛋白酶浓度、酶解时间、酶解温度为影响因子,在单因素试验结果的基础上,应用Centure-Composite Design中心组合方法进行三因素三水平的实验设计,以牛乳蛋白水解度为响应值,运用响应面法对水解条件进行进一步优化。结果表明：酶浓度、酶解时间对牛乳蛋白水解度影响显著;牛乳蛋白质水解的最佳工艺为：以胰蛋白酶为水解用酶,水解温度为54.65℃,酶添加量为0.79%,酶解时间为47.01 min。回归方程预测牛乳蛋白水解度理论值可达到20.78%,3次验证实验的平均水解度20.74%,与预测值相对误差为0.2%。说明利用响应面实验设计研究出胰蛋白酶水解牛乳蛋白最佳工艺,为婴儿配方乳的生产奠定了基础。     

乳清多肽果汁饮料的研究

以乳清为原料,选用胰蛋白酶对其进行水解,制取乳清多肽果汁饮料。对水解条件及风味的调配方案进行了研究。结果显示,控制好水解条件和进行适当处理,可以得到水解度适中、风味良好的乳清多肽果汁饮料。胰蛋白酶作用的最适pH值为8.0时,水解乳清蛋白的最优组合为:[E/S]为0.05%,水解温度为40℃,水解时间为80min,酸溶性肽得率YASP可达到43.1%;风味调配最佳组合为:酸量为0.08%,糖为8%,果汁为4%,β-CD为0.15%,得到的乳清多肽果汁饮料,不仅充分利用了乳清蛋白,而且使营养成分得到强化,风味得到明显改善。     

牡蛎蛋白酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

以太平洋牡蛎为原料,研究了牡蛎蛋白酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,以期为新型α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发提供基础性研究数据。试验结果表明,胃蛋白酶、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及Alcalase酶6种蛋白酶解液中,菠萝蛋白酶与Alcalase酶酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高,分别为37.53%和35.59%,与其他处理差异达显著水平(p<0.05)。采用正交试验对这2种酶的酶解条件进行优化,结果显示,菠萝蛋白酶在50℃,pH值6.0,料水比1∶4,加酶量2 400 U/g,酶解时间2 h时对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高;Alcalase酶在温度50℃,pH值8.5,料水比1∶4,加酶量1 800 U/g,酶解时间2 h的条件下对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高。     

鱿鱼内脏制备功能性短肽的初步研究

为了选取水解鱿鱼内脏效果较优的蛋白酶,并对鱿鱼内脏的水解液进行分析,测定水解液的分子量分布范围,并对洗脱液的DPPH自由基清除能力进行分析。试验选取碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对鱿鱼内脏进行水解,通过测定水解液的总氮含量、氨基态氮含量,比较各水解液的水解度、氮收率以及水解得率。经大孔树脂对胰蛋白酶水解液进行水、20%、60%、80%甲醇-水梯度洗脱,经液相质谱(LC-MS)进行分析。结果发现水解液短肽分子量范围在100~2400,其中以60%梯度洗脱的水解液分子量分布范围较为集中,且以分子量在200左右的化合物为主,对各洗脱梯度水解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力分析可知60%梯度洗脱水解液DPPH清除能力为40.21%。胰蛋白酶为水解鱿鱼内脏较优的蛋白酶,且60%甲醇-水为最优洗脱浓度。     

双酶水解蚕蛹蛋白制备氨基酸饮料的研究

为了充分利用蚕蛹资源,研究双酶水解蚕蛹蛋白的最佳条件,考察影响酶解效果的主要因素。确定了新鲜蚕蛹经漂烫、提脂、酶解、调配等工序制成蛋白饮料的工艺条件,消除了蚕蛹蛋白的褐变和凝沉现象。采用L9(33)正交试验设计方法,分别对酶解蚕蛹蛋白的温度、酶解时间、酶用量进行实验与结果分析,以确定双酶水解蚕蛹蛋白的最适条件。结果表明：最佳酶解条件为胰蛋白酶：pH 7.0,温度为45℃,酶解时间5 h,酶用量为1 g。木瓜蛋白酶：pH 6.0,温度为70℃,酶解时间4 h,酶用量为1 g。结论胰蛋白酶加入到木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白过程中,可使酶解液中氨态氮含量有明显的提高。经检验产品中细菌总数、大肠菌群、致病菌等指标符合相关食品卫生标准。氨基酸饮料中总糖（以蔗糖计）含量为14%,酸度（以柠檬酸计）含量为0.68 g/L,其产品符合饮料的理化检验及卫生指标。     

碱性蛋白酶Alcalase水解杏仁蛋白制备ACE抑制肽

采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度(DH)及水解产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率为指标进行酶解工艺优化。结果表明,较大活性的ACE抑制肽的最佳水解条件为:pH值7.0,温度50℃,酶底比4%,底物质量分数为2%。该条件下经60min水解,其水解度为12.23%,得到ACE抑制肽的IC50值为0.85mg/mL。     

脱钙处理对鱼鳞蛋白酶解效果及其持钙能力的影响

研究了盐酸脱钙对鱼鳞蛋白酶解效果及其酶解产物持钙活性的影响。结果表明,浓度0.4 mol/L的HCl溶液,鱼鳞粉与盐酸的料液比为1∶30,脱钙时间30 min可显著提高鱼鳞蛋白溶出率与胶原蛋白溶出率,脱钙率达87.90%;采用胰蛋白酶、胃蛋白酶与风味蛋白酶分步酶解,酶解产物的持钙能力达13.93 mg(钙)/g(蛋白),是胰蛋白酶酶解产物持钙能力的5.32倍(p<0.01)。当酶解产物蛋白质量浓度为2 mg/mL时,酶解产物与钙离子螯合的最佳条件为:螯合反应温度50℃,pH值6.0,蛋白与CaCl2质量比为6∶1,螯合反应时间40 min。     

鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽酶解条件的优化

采用响应面方法,对鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽的酶解条件进行优化。结果表明,酶与底物蛋白比例伍,）、酶解温度（如）和酶解时间（墨）与酶解产物抗氧化活性（Y,以酶解液还原力评价）之间满足回归方程：Y=-2．77＋0．26X1＋0．0971X2＋0．32X3-0．00127X1X2-0．0153XiX3＋0．000658X2X3-0．0194X11^2-0．0931X22-0．049X,2;该三个因素对酶解产物的还原力均有显著影响（P〈0．05）,其影响力的大小依次为：X1〉X3〉X2;X1与X2和X1与五的交互作用对酶解产物的还原力也有显著影响（P〈0．05）;过度酶解可导致酶解液还原力的降低：鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽的最优酶解条件为：酶与底物蛋白比例为3．84％．50．6℃温度下酶解3h。经6次验证试验．酶解产物的还原力与预测值无显著差异,酶解产物清除DPPH自由基的EC50值为O．32mg／mL。