发情羊血清、肝素和BSA对绵羊冷冻-解冻精子体外获能的影响

分析了在受精液SOF中添加发情绵羊血清、肝素和牛血清白蛋白(BSA)对绵羊冷冻-解冻精液体外获能和受精的影响。结果表明:(1)使用含发情羊血清浓度为0、5%、10%和20%的受精液,分裂率分别是0、73.79%、73.25%和77.61%。加发情羊血清的3个试验组分裂率差异不显著。而未加血清的试验组分裂率为0,证明发情羊血清促进了绵羊冷冻-解冻精液的体外受精效果。(2)以含5%发情羊血清受精液为基础液,添加0IU/mL、5IU/mL和10IU/mL的肝素,受精后分裂率分别达86.64%、86.63%和75.53%。不加肝素组和5IU/mL肝素组分裂率差异不显著,而10IU/mL高浓度肝素组同其他两组比较,差异极显著(p<0.01)。说明含10IU/mL肝素的受精液,降低了绵羊体外受精后的分裂率。(3)用含5%发情羊血清受精液为基础液,以添加3mg/mLBSA为试验组,不加BSA为对照组,受精后两组分裂率差异不显著。发情绵羊的血清促进绵羊冷冻-解冻精子的体外受精效果。在受精液中添加发情绵羊血清进行绵羊冷冻解冻精子的体外受精,无需添加肝素和BSA。而且添加10IU/ml肝素,降低了受精后的分裂率。建议受精液中添加发情绵羊血清浓度在2%～10%较合适。     

β-谷甾醇、淫羊藿苷对猪精子体外获能效果的影响

探讨中药单体成分β-谷甾醇(β-sitosterol)、淫羊藿苷(Icariin,Ica)对猪精子体外获能的影响,以期提高体外受精效果.以mTBM+肝素获能液为对照组,分别添加β-谷甾醇、淫羊藿苷的低、中、高3个剂量为试验组,利用金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC)法结合体外受精检验体外获能效果.在mTBM+肝素中添加β-谷甾醇2(中剂量0.08 mg/L)、淫羊藿苷2(中剂量17 mg/L)的B型精子率(获能精子)显著高于对照组和其他剂量组(P＜0.05),F型精子率(未获能精子)显著低于对照组和其他剂量组(P＜0.05),AR型精子率(发生顶体反应精子)与对照组和其他剂量组差异不显著(P0.05),卵裂率和囊胚率均极显著高于对照组和其他剂量组(P＜0.01);表明中药单体成分β-谷甾醇、淫羊藿苷能够显著促进猪精子体外获能效果.     

用台盼兰—姬姆萨染色检测家畜精子顶导反应的研究

本文探讨了用台盼兰—姬姆萨染色检测家畜精子顶体反应的可行性。用肝素或钙离子载体诱发精子顶体反应。根据染色结果将精子分为四类:a)核后帽部不着色或淡青色,顶体不着色或部分紫红色(有顶体反应活精子);b)核后帽部暗青色.顶体部不着色或部分暗红色(有顶体反应死精子);c)核后帽部不着色或淡青色,顶体部紫红色(无顶体反应活精子);d)核后帽部暗青色,顶体部暗紫红色(无顶体反应死精子)。有顶体反应活精子百分率与仓鼠卵穿透率呈强正相关。从而证明台盼兰—姬姆萨染色是检测家畜精子顶体反应的有效手段,并能预测获能处理后精子的受精能力。     

肝素浓度对辽宁绒山羊精子体外获能的影响

在TALP液中添加不同浓度(25、50、100μg/mL)的肝素对辽宁绒山羊精子进行获能处理,在显微镜下检测处理1、2、3、4、5h后的精子活力,用考马斯亮蓝染色法检测获能处理0.5、1、2、4h后的精子获能状况,探讨肝素浓度对绒山羊精子活力、存活时间、获能率的影响。结果发现,在38.5℃、5%CO2、饱和湿度条件下,精子活力随肝素浓度升高而下降,3 h以后25μg/mL肝素组精子活力显著高于其它肝素组(P<0.05)。添加肝素组获能率显著高于对照组(P<0.05),各肝素组精子获能率差异不显著(P>0.05)。对照组精子存活时间最长,25μg/mL肝素组精子存活时间为10.12 h,显著高于其它两组(P<0.05)。表明25μg/mL肝素处理辽宁绒山羊精子体外获能较为适宜。     

鸡胚发育中免疫器官肝素阳性细胞的观察

本试验通过NBF液固定,阿尔新蓝—藏红O复染(AB/SO)法与吖啶橙染色(Acridine-Orange,AO),对不同日龄鸡免疫器官中肥大细胞(MC)及肝素阳性细胞的形态、分布及数量变化进行观察分析.结果显示,NBF溶液固定,AO染色可以清晰地显示肝素阳性细胞,其呈圆形、椭圆形和不规则形,大小不一;胸腺中肝素阳性细胞主要分布在髓质;法氏囊中肝素阳性细胞多分布于淋巴小结周围;脾脏中肝素阳性细胞分布在实质,血窦、血管周围偶见;肝素阳性细胞与AB/SO染色显示的MC的分布十分相似;18日胚龄前,免疫器官中肝素阳性细胞的数量与胚龄呈正相关,18日胚龄后肝素阳性细胞数量下降是否与肥大细胞脱颗粒有关,尚不清楚.     

不同浓度肝素对塔里木马鹿精子体外获能效果的影响

为了探讨不同浓度肝素对塔里木马鹿精子体外获能的影响,试验随机取塔里木马鹿冻融精子,添加到SP-TALIP获能液中并添加不同浓度(0,10,20,50,100μg/m L)的肝素,在显微镜下检测0,2,4,6,8小时时的精子活力,试验采用金霉素(CTC)染色法检测精子获能率及顶体反应率等指标,探讨不同浓度肝素对塔里木马鹿精子活力、存活时间、获能率、顶体反应率的影响。结果表明:精子活力随肝素浓度升高而呈下降趋势,4 h后10μg/m L和20μg/m L肝素组精子活力显著高于其他组(P0.05),其中20μg/m L肝素组精子存活时间最长,显著高于其他组(P0.05)。随着培养时间的延长,各试验组精子获能率与对照组相比明显提高,2小时、4小时时20μg/m L肝素组精子获能率显著高于其他组(P0.05);各试验组精子顶体反应率与对照组相比有升高趋势。说明获能液中添加20μg/m L肝素可有效诱导塔里木马鹿精子体外获能。     

肝素、咖啡因、丙酮酸钠、BSA对延边黄牛卵母细胞体外受精效果的影响

试验为延边黄牛体外胚胎产业化生产奠定基础,进行了肝素、咖啡因、丙酮酸钠、BSA对延边黄牛体外受精效果的影响研究。结果表明,以改良BO液为基础液,添加20 μg/mL肝素时,精子顶体反应率和受精率分别为82.52%和75.34%,高于添加20 μg/mL咖啡因组(P<0.05)和添加10 μg /mL肝素与10 μg/mL咖啡因协同作用组(P>0.05);结合使用肝素(20 μg/mL),添加0.0020 g/mL丙酮酸钠时,精子顶体反应率和受精率分别为78.13%和71.57%, 高于添加0.0015 g/mL和0.0025 g/mL丙酮酸钠组(P<0.05);结合使用肝素(20 μg/mL),添加0.006 g/mL BSA时,精子顶体反应率和受精率分别为80.78%和71.44%,高于添加0.001 g/mL和0.003 g/mL BSA组(P<0.05)。因此,添加适当浓度的肝素、丙酮酸钠和BSA可显著提高延边黄牛精子体外获能效果及体外受精率。     

不同抗凝剂对犬血细胞分析的影响

血液常规计数是临床上最基础的化验检查之一,指对血液中细胞各成分的检测分析,是诊断各种血液疾病的主要依据,鉴别和诊断动物的健康状态、对疾病的诊断有重要的临床意义.本实验采用血液分析仪在使用肝素、枸橼酸钠、乙二胺四乙酸盐(EDTA-Na2)三种抗凝剂后,通过全血细胞计数法来比较和分析不同抗凝剂对犬红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)和血小板(PLT)参数检测结果的影响.结论:使用肝素、枸橼酸钠、乙二胺四乙酸盐(EDTA-Na2)不同抗凝剂对犬血细胞分析检测后,四种抗凝剂对RBC、WBC、Hb的检测无明显的影响;肝素和枸橼酸钠使PLT计数下降.     

肝素调控猪嗜中性粒细胞对精子的趋化和吞噬作用

为降低由人工授精诱导的猪子宫局部免疫反应,从而提高其人工授精效率,在含有10%血清的培养液中添加不同浓度的肝素(0、100、500、1000μg/mL),检测猪嗜中性粒细胞(PMNs)对猪精子的吞噬性和趋化性。结果表明,100~1000μg/mL的肝素可显著抑制猪PMNs对精子的吞噬性(P<0.01)和趋化性(P<0.05)。提示肝素可作为猪精液稀释液的保护成分,降低由人工授精所导致的子宫炎症反应,从而提高猪的人工授精受胎率。     

艾虎育成期外周血皮质醇水平初报

<正> 艾虎(Mustela putorius)是一种小型珍贵毛皮兽,我国于1979年从欧洲引进种兽,现在处于试养阶段。为了提供艾虎有关内分泌方面的一些基础资料,我们用放射免疫法测定了9只艾虎育成期外周血中的皮质醇含量。一、材料与方法实验动物:1982年在河南省孟津县下古大队艾虎饲养场随机选用了9只(7公2母)7月龄艾虎,食欲正常,健康无病。样品采集:剪断前肢掌部取血,用无肝素试管收集,10—15℃自然离析;析出的血清置-5—-10℃保存。采血时间为上午9:00—11:00。     

咖啡因和肝素、钙离子载体对家畜冷冻精子体外获能的协同作用

本文报道了用咖啡因与肝素、钙离子载体(I-A)协同处理诱导马、驴、猪冷冻精子体外获能的研究结果.咖啡因与肝素、I-A均有协同作用.在肝素或I-A处理中添加咖啡因,不仅能提高穿透率,而且能促进卵内雄原核的形成和发育.精子先经洗涤,再用咖啡因与肝素或I-A协同处理,可得到良好的获能效果.     

饲粮中添加α-亚麻酸对产蛋鸡脂质利用及蛋壳质量的影响

采用单因素试验设计,研究在日粮中添加0(对照组)、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%和4.0%的α-亚麻酸(ALA),对海兰褐商品蛋鸡的蛋壳质量和脂质利用的影响。试验期28d。结果表明:添加α-亚麻酸,与对照组相比,各周鸡蛋蛋壳重、蛋壳强度和蛋壳厚度增加;鸡蛋胆固醇下降;4.0%ALA组第1周和第2周血清极低密度脂蛋白(VLDL)、第2周注射肝素后血浆中脂蛋白脂酶(LPL)活性下降极显著(P<0.01)。这说明添加α-亚麻酸可提高蛋壳品质,增加外周组织对脂质的利用。     

山羊卵母细胞体外受精方法的研究

优化山羊体外受精条件,为提高体外成熟卵母细胞的受精质量和数量提供理论基础。对肝素、咖啡因、钙离子载体IA三种获能物比较,发现肝素和钙离子载体组受精率分别为56.0%和67.0%,显著高于咖啡因组21.0%(P<0.05)。卵裂率反而是肝素高于钙离子载体和咖啡因组,分别为51.1%、36.3%和19.0%,差异显著(P<0.05);发育到囊胚后,分别为17.8%、11.7%和0,肝素组与钙离子载体组差异不显著。结果表明肝素效果比较稳定。Percoll法处理精子卵裂率高于上浮法,差异显著(59.1%vs42.9%,P<0.05);但是囊胚的发育率分别为11.8%和7.8%,囊胚的平均细胞数分别为116和113,两者差异不显著。     

发情羊血清、肝素对绵羊卵母细胞体外受精的影响

绵羊卵母细胞体外成熟后 ,在含 5 %、10 %和 2 0 %发情羊血清的受精液中进行体外受精 ,其分裂率分别是 73 79%、73 2 5 %和 77 61%,显著高于不含发情羊血清的受精液 (0 %,P <0 0 1)。用含 5 %发情羊血清的受精液为基础液 ,添加 5u/ml和 10u/ml的肝素 ,受精后的分裂率分别为 86 63 %和 75 5 3 %,5u/ml肝素组的分裂率与不加肝素组 (86 64 %)差异不显著 ,而 10u/ml高浓度肝素组的分裂率则显著低于其他两组 (P <0 0 1)。     

HB-EGF与哺乳动物妊娠调控

1 HB-EGF的结构及性质 肝素结合性EGF样生长因子(HB-EGF)是表皮生长因子家族成员,包括与细胞膜结合的跨膜HB-EGF(tm-HB-EGF)和可溶性的HB-EGF(sol-HB-EGF)两大类.HB-EGF基因定位于人的5号染色体和小鼠的18号染色体,包括6个外显子和5个增强子,初始产物为tm-HB-EGF,包括信号肽、前肽、sol-HB-EGF、近膜区、跨膜区和胞质区.细胞外区在基质金属蛋白酶等作用下可裂解,生成分子量12～20 kD的sol-HB-EGF.HB-EGF的受体ErbB1(EGFR)和ErbB4是EGF受体家族(ErbBs)成员.HB-EGF还能以肝素结合区与细胞表面数量众多的硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)以低亲合性结合,使局部HB-EGF浓度增加,从而促进HB-EGF与ErbB受体高亲合性的结合.     

PEG胁迫对偏关苜蓿脯氨酸代谢途径关键酶的影响

以山西地方品种偏关苜蓿(Medicago sativa cv.Pianguan)为试验材料,采用20%聚乙二醇(PEG-6000)分别处理不同时间(0,8,16,24,32,48和72h),研究偏关苜蓿地上部及地下部的脯氨酸(proline,Pro)含量、鸟氨酸δ-氨基转移酶(ornithine-oxo-acidtransaminase,δ-OAT)、吡咯啉-5-羧酸合成酶(pyrroline-5-carboxylate synthetase,P5CS)、脯氨酸脱氢酶(proline dehydragenase,ProDH)活性的动态变化。结果表明:PEG胁迫下,地上部Pro含量显著高于地下部,PEG处理40h时,地上部Pro含量最高(3230.4μg·g^-1 FW)。地上部和地下部P5CS活性呈"升-降-升-降"的变化趋势。δ-OAT活性则在胁迫8h时升高,之后下降。ProDH活性受PEG胁迫显著降低,呈时间依赖性。PEG胁迫前期,偏关苜蓿的Pro积累以鸟氨酸-脯氨酸途径为主,随胁迫时间的延长,逐渐转为以谷氨酸-脯氨酸途径为主。     

家兔卵子体外受精研究

从供体母兔输卵管冲取成熟的卵母细胞,与体外获能的附睾精子或射出精子体外受精。三种获能方法分别是 His-DM 法、肝素法和附睾精子 DM 预培养法,获能精子与卵母细胞体外受精后的2-细胞胚胎发育率分别是36.37%(24/66)、12.57%(13/102)和35.33%(53/150)。体外受精后体外发育到2-至4-细胞期胚胎经移植给7只同期发情受体母兔,结果有2头怀孕并产仔9只,胚移产仔率为28.57%(2/7),移入胚胎成仔率为11.39%(9/79)。     

肠衣-肝素加工废水资源化利用初步探讨

<正>我国肠衣制品产量较大,且加工过程中产生的肠粘膜废弃物继续生产肝素的产量也很大,在其整个生产链中废水排放量极大,而废水中氨基酸含量丰富,化学耗氧量(COD值)也较高,不宜直接排放。如能有效利用肠衣-肝素加工废水制备微量元素氨基酸螯合物,既能提高产业附加值,又可减轻环境污染。     

CTC法结合体外受精比较不同方法对绵羊精子体外获能的影响

为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果，新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA，A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精，并利用金霉素荧光染色（chlortetracycline，CTC）法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组, 说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。     

禽类血细胞的改良染色法

Robereson G.W和Maxwell在British Poultry Sci-ence 1990年介绍了家禽血细胞新的染色法,现介绍于后:一、改进嗜异细胞和嗜碱细胞的分辨: 1.血样不加抗凝剂: 从鸡肱(臂)静脉采血.置塑料管中.不加抗凝剂或加EDTA二钾盐,但不可用肝素锂(Lithiumheparin)。前两种染色和分化都好,而后者(肝素锂)使细胞集块,嗜异细胞发生空泡。同时