白粉菌侵染过程中不同抗性辣椒品种叶片3种酶活性变化

以辣椒4个不同抗性品种为材料,研究成株期感染白粉菌后,叶片组织内苯丙氨酸解氨酶（PAL）、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性变化。结果表明,4个材料接种白粉病病原菌后3种酶活性均有所提高。受白粉菌侵染后,抗病品种的PAL和β-1,3-葡聚糖酶活性明显高于感病品种。几丁质酶的活性变化与辣椒对白粉病的抗性无关。     

豇豆枯萎病抗性与水杨酸互作关系

研究了不同浓度的水杨酸(SA)对豇豆枯萎病病菌孢子萌发、菌丝生长,以及对感病品种浸根处理后再接种(挑战接种)的幼苗发病率和对β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶活性变化的影响。结果表明:与对照相比,浓度大于1.0mmol·L-1的SA处理4h后能显著地抑制豇豆枯萎病病菌孢子萌发;在1.0~10.0mmol·L-1范围内,随浓度的升高SA对菌丝生长的抑制作用增大;在不影响豇豆感病品种幼苗正常生长的情况下,以5.0mmol·L-1的SA减轻幼苗发病率最为有效;豇豆感病品种经SA处理后β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性升高,挑战接种后的酶活性变化比未经SA处理的上升早且快。     

四种叶片防御酶活性与辣椒对疫病抗性的关系

以对辣椒疫霉菌3号生理小种具有不同抗性的辣椒近等基因系为试材,测定了不同抗性品系接菌后β?1,3-葡聚糖酶、几丁质酶、PAL、POD活性的变化情况,研究了上述4种叶片防御酶活性与辣椒对疫病抗性的关系。结果表明:辣椒疫霉菌能诱导辣椒叶片中上述4种防御酶的活性增强,但4种酶在积累速度和幅度上抗病品系和感病品系有显著的差异。接菌后高抗品系β?1,3-葡聚糖酶、几丁质酶、PAL、POD活性达到峰值时酶活变化率分别是164.4%、99.1%、173.7%、107.6%;而感病品系的酶活变化率分别是91.8%、48.1%、93.1%、64.0%,与感病品系相比,高抗品系的4种酶活性不仅升高的速度快、幅度大,且高活性维持时间长,中抗品系的4种酶活性介于二者之间。在抗病品系中,β?1,3-葡聚糖酶的酶活变化率是几丁质酶的1.66倍,PAL的酶活变化率是POD的1.61倍。在离体培养条件下观察了β?1,3-葡聚糖酶和几丁质酶粗酶液对辣椒疫霉菌的菌丝生长和孢子囊形成的抑制作用,与对照相比,β?1,3-葡聚糖酶粗酶液抑制作用明显,而几丁质酶粗酶液抑制作用不明显。     

枇杷根系对木霉P3.9菌株及枇杷根腐病病菌的生理响应北大核心

为了明确枇杷内生木霉菌株P3.9是否诱导枇杷抗病性,对1年苗龄枇杷植株,设置枇杷根腐病菌Pestalotiopsis microspora菌株P3.1、P3.5和P3.6直径5 mm菌丝块分别接种+内生木霉菌株P3.9菌剂10~6个/mL每株20 g拌土,另设单独接种木霉菌株P3.9菌剂,不接菌为对照,用紫外分光光度计微量法检测枇杷根部过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶、纤维素酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶和α-淀粉酶等8种酶活性。结果表明,木霉菌株P3.9与枇杷互作,促使枇杷根部过氧化物酶和纤维素酶活性极显著增加,几丁质酶、内切β-1,4-葡聚糖酶和α-淀粉酶活性极显著降低,苯丙氨酸解氨酶、β-1,3-葡聚糖酶和外切β-1,4-葡聚糖酶活性不受影响。枇杷根系几丁质酶活性降低,有利于内生木霉P3.9成功定殖于枇杷根系;枇杷根系过氧化物酶活性增加,说明内生木霉菌株P3.9对枇杷根系有诱导抗性作用。木霉P3.9菌株与不同病菌菌株互作,相关酶活性变化多样,说明病菌菌株P3.1、P3.5和P3.6致病性存在差异,推断菌株P3.6最强,菌株P3.5最弱,菌株P3.1居中。     

农杆菌介导的几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因转化辣椒研究

以苗龄7～10 d的辣椒组培苗为被侵染的外植体,通过农杆菌介导几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因,研究基因型、外植体类型、抗生素浓度对辣椒遗传转化的影响,以期获得抗真菌病的转基因辣椒植株.结果表明:不同基因型间、外植体类型、抗生素种类和浓度对辣椒的遗传转化影响存在较大差异.以几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对辣椒进行了遗传转化,获得了3株抗性植株.     

菜豆（油豆角）苗期抗炭疽病防御酶活性及HRGP含量表达分析

以感病菜豆（油豆角）品种老来少和高抗品种大油豆为试材,在菜豆炭疽病菌侵染不同时间（0、3、6、9、12 d）内测定两者叶片中5种防御酶（几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、SOD、POD和LOX）活性及富含羟脯氨酸糖蛋白（HRGP）含量并进行比较。结果表明：接种后抗病品种的防御酶活性和HRGP含量均有不同程度的变化,酶活性提高幅度较大的时期因酶种类而异,但都早于感病品种|感病品种防御酶活性升高较慢且较抗病品种滞后。与感病品种相比,抗病品种POD活性变化幅度最大,而HRGP含量变化幅度最小。β-1,3-葡聚糖酶活性测定结果表明,抗病品种接种前酶活性高于感病品种,接种后感病和抗病品种酶活性变化趋势相同。     

微量元素对生防木霉菌T23生长量及三种酶活性的影响

用常规试验方法研究7种微量元素Mn2 、Ca2 、Mg2 、Cu2 、Zn2 、Fe2 、Mo6 对木霉菌T23生长量以及β-1,3-葡聚糖酶、纤维素酶和几丁质酶的影响.结果表明:Mn2 、Ca2 、Mg2 、Cu2 、Zn2 、Fe2 对木霉菌T23菌丝生长和产孢量均有促进作用;Cu2 、Ca2 、Mn2 、Zn2 、Fe2 、Mo6 对木霉菌T23产生β-1,3-葡聚糖酶有激活作用,但Mg2 对其产生β-1,3-葡聚糖酶有明显的抑制作用;同时还发现Mg2 、Cu2 对木霉菌T23产纤维素酶有促进作用,其他微量元素对木霉菌T23产生纤维素酶有抑制作用;Zn2 对其产生几丁质酶均有明显的促进作用,Mln2 、Ca2 抑制其产生几丁质酶.由此可见,微量元素通过促进木霉菌T23的生长、产孢及提高β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性,从而提高其生防效果.     

芽孢杆菌对番茄抗枯萎病防御性酶活性的诱导效应

采用根部包裹接种法将多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa SR10)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens SR22)接种于番茄幼苗根部,研究其对枯萎病原菌早期侵染条件下番茄防御酶活性的变化。结果表明:接种芽孢杆菌(+Forl)处理25 d后的枯萎病防治效果分别为41.11%和51.11%;早期防御性酶活检测结果显示,与对照相比,接种2株芽孢杆菌后,番茄幼苗的过氧化物酶、多酚氧化酶、超氧化物歧化酶、苯丙氨酸解氨酶、几丁质酶以及β-1,3葡萄糖酶活性均表现出短时间内显著增强随后缓慢降低,酶活高峰时间普遍出现在96~120 h内,酶活增幅达到11%~265%;与单接病原菌处理(Forl)相比,接种芽孢菌SR10(+Forl)和SR22(+.Forl)后PPO酶活性增加了9%和13%,SOD酶活性增加了38%和27%,PLA酶活性增加了23%和27%,β-1,3葡聚糖酶活性增加了15%和26%,几丁质酶活性增加了39%和44%,而POD酶活性变化不明显。表明介导番茄产生诱导系统性抗性来抵御枯萎病菌的侵染是多粘芽孢杆菌SR10和解淀粉芽孢杆菌SR22的重要生防机制之一。     

疫霉菌侵染后辣椒生理生化指标研究

用辣椒疫病菌生理小种ph3人工接种抗疫病的辣椒品系A5、A3和感病品系EC,并用生理小种ph1接种抗病品系A3,接种后分别测定和分析植株体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase)和几丁质酶(Chitinase)活性的变化。结果表明:接种疫霉菌后,抗病品系与感病品系体内4种酶的活性有明显差异,并显示出辣椒品系的抗病性与植株体内的多酚氧化酶活性、苯丙氨酸裂解酶活性、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性呈正相关。     

不同蛹虫草品种对白毛病抗病性的初步评价

以10个蛹虫草品种为试材,进行虫草生齿梗孢菌和蛹虫草菌拮抗作用的测定,并对2种菌丝接触位置菌丝进行显微镜观察,同时测定接种虫草生齿梗孢前后的不同蛹虫草品种抗病相关酶几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性,以期为蛹虫草白毛病抗病育种提供参考依据.结果 表明:野生蛹虫草品种01(4)-4F1、D01-1对白毛病具有较好抗性.     

苯丙噻二唑诱导辣椒抗白粉病机制研究

以花溪辣椒、遵义辣椒为试材,辣椒白粉病菌为供试菌,苯丙噻二唑(BTH)为诱导剂,采用喷施接种法,研究了BTH诱导辣椒对白粉病产生抗性的作用机制.结果表明:不同浓度BTH均可以诱导辣椒对白粉病产生抗性,浓度为0.20 mmol·L-1时诱导效果最佳,防治效果为81.82％;BTH-接菌处理的辣椒叶片过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性明显增加;BTH-接菌、BTH-未接菌和CK-接菌处理都能诱导辣椒叶片几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性的升高,但CK-接菌处理增加幅度较小.BTH不影响白粉病菌孢子萌发和附着胞子的产生,却能有效抑制菌丝的生长,表现为菌丝生长缓慢和菌丝的侧枝数减少.通过扫描电镜观察,发现CK-接菌处理在24 h后,辣椒叶片保护层开始被溶解,BTH-接菌处理的辣椒在接菌48 h后才出现该现象,说明BTH能产生阻碍或延迟菌丝破坏的保护层物质.     

β - 氨基丁酸诱导辣椒产生PR蛋白及其酶活性的变化

 经1 000μg·mL ^{- 1}β - 氨基丁酸(β-aminobutyric acid, BABA) 诱导处理后, 3个辣(甜) 椒品种叶片细胞间液的蛋白质电泳分析表明, 寄主植物经BABA处理3 d后病程相关蛋白( PR) 被诱导产生。对叶片中β - 1,3 - 葡聚糖酶、几丁质酶和过氧化物酶活性动态测定表明, 升高幅度辣椒品种高于甜椒品种。     

苯并噻二唑( BTH)诱导黄瓜幼苗对霜霉病抗性的研究

 用0.5 mmol/L BTH (苯并噻二唑) 溶液在接种黄瓜霜霉病菌前4、8、12、24、48、96、168 h (7 d) 和接种后2、4 d处理二叶期的黄瓜幼苗, 结果表明BTH对霜霉病菌无直接的抑制作用, 但能诱导黄瓜幼苗对霜霉病产生局部和系统的抗性, 系统抗性的表达在处理后48 h产生并持续7 d以上。几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性测定结果表明, BTH处理可系统性地增强这两种酶的活性, 且与黄瓜对霜霉病的诱导抗性密切相关。     

木霉菌胞外酶及对番茄灰霉病菌作用的研究

研究了木霉菌T21及其4种长势好抗逆性较强的REMI转化体对番茄灰霉病菌抑菌能力,温室防效以及其发酵液中几丁质酶、-β1,3-葡聚糖酶和纤维素酶的活性。结果表明:5株木霉菌株对番茄灰霉病病菌都有不同程度抑制作用,其中Ttrm68抑制效果最好,培养一定时间后,木霉可以把番茄灰霉病菌完全覆盖;温室防效也是Ttrm68的效果最好。胞外酶活性的测定结果表明:对番茄灰霉菌抑制效果好的木霉菌几丁质酶和-β1,3-葡聚糖酶的活性高,而纤维素酶活性则没有明显的规律。     

白菜β-1,3 - 葡聚糖酶基因cDNA的克隆及序列分析

 以白菜抗霜霉病品种‘雪克青’cDNA 为模板, 采用RT2PCR 技术, 获得了1032 bp 的β- 1,3- 葡聚糖酶基因的cDNA 序列。序列分析表明, 克隆的β- 1,3 - 葡聚糖酶基因cDNA 序列编码343 个氨基酸, 与芜菁bg1 基因具有98 %的同源性, 与拟南芥bg2 基因具有84%的同源性。在GenBank 中登录号为AY395720 。     

地衣芽孢杆菌复配苯噻酮菌株对脐橙溃疡病的作用机理与控病研究

系统研究了地衣芽孢杆菌复配苯噻酮菌株对溃疡病病菌生长的影响,对其拮抗因子几丁质酶及β-1,3葡聚糖酶活性进行分析,进而进行了其离体果控病试验及田间防治试验。结果表明,有益微生物地衣芽孢杆菌复配苯噻酮对脐橙溃疡病有明显的抑菌作用,可造成溃疡病菌菌丝中空、扭曲、破损,地衣芽孢杆菌复配苯噻酮菌株可以分泌几丁质酶及β-1,3葡聚糖酶抑制病菌生长,在发病前或发病初期喷布地衣芽孢杆菌复配苯噻酮对脐橙溃疡病有较好的防治作用。     

抗病与感病苹果叶片应答轮纹病菌侵染的蛋白质表达差异分析

从‘鸡冠’与‘富士’苹果的杂交后代中选择对轮纹病抗病的材料1-1-24和感病材料1-2-34的叶片为试材,在叶片正面主脉两侧各针刺一处,分别接种长有轮纹病菌（Botryosphaeria berengeriana f. sp. piricola）菌丝和蘸有无菌蒸馏水的PDA培养基饼。通过对接菌前和接菌后24 h的叶片总蛋白进行2-DE分离筛选和质谱检测鉴定,共获得27个差异蛋白,其中9个为胁迫应答蛋白,1个与防御反应相关,17个参与叶绿体光合作用、细胞代谢、核糖体、羧酸等相关合成或未知反应。对β–1,3–葡聚糖酶、酸性内切几丁质酶和AP15基因进行实时定量PCR分析,结果表明：β–1,3–葡聚糖酶和酸性内切几丁质酶是苹果叶片应答轮纹病胁迫的关键蛋白,抗病和感病的苹果叶片在接菌前关键蛋白含量的显著差异可能是导致抗病性不同的原因之一。     

南方根结线虫侵染对茄子砧木幼苗根系活性氧代谢及相关酶活性的影响

以对南方根结线虫抗性水平显著不同的两个茄子砧木为试材,研究了接种南方根结线虫对幼苗根系活性氧代谢及相关酶活性的影响。结果表明,抗病品种托鲁巴姆幼苗根系超氧阴离子（O2-·）生成速率、过氧化氢(H2O2)含量及超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、几丁质酶（CHT）和β-1,3-葡聚糖酶（GLU）活性显著高于易感品种赤茄,而过氧化物酶（POD）活性则低于赤茄。南方根结线虫初次侵染前期,两个砧木幼苗根系O2-·生成速率、H2O2含量及CHT和GLU活性均迅速升高,托鲁巴姆升幅显著高于赤茄,初次侵染后期均降低;二次侵染前期又升高,但升幅较初次减小。幼苗根系SOD、CAT活性在南方根结线虫侵染前期较未接种的对照显著降低,且托鲁巴姆降幅显著大于赤茄,侵染后期则均有所增强;而POD活性变化则相反。南方根结线虫侵染还导致根系丙二醛（MDA）含量持续增加,但以赤茄较高,表明南方根结线虫侵染加剧了根系特别是易感品种根系的膜脂过氧化程度。     

菜豆（油豆角）苗期抗炭疽病防御相关基因 表达机制的初步研究

以感病品种（老来少）和抗病品种（大油豆）为试材,在菜豆炭疽病菌侵染后的不同时间
（0、3、6、9、12 d）取样,采用实时荧光定量RT-PCR 技术,对两者叶片中5 种防御酶基因（几丁质酶、
β-1,3-葡聚糖酶、SOD、POD 和LOX 基因）和HRGP 蛋白基因相对表达量进行研究。结果表明,除β-1,3-
葡聚糖酶基因、SOD 基因外,其他4 种防御基因在接种前的原始表达量均是抗病品种高于感病品种。接种
后,感病品种中的几丁质酶基因、LOX 基因表达量呈现先降低再升高的趋势,而抗病品种在感病品种表达
量降到最低值（3 d）时达到峰值,在整个阶段（0～12 d）抗病品种的相对表达量高于感病品种;抗、感
病品种的β-1,3-葡聚糖酶基因、POD 基因和SOD 基因的相对表达量在整个阶段呈相同的变化趋势,但
抗病品种的相对表达量高于感病品种。     

茄链格孢菌侵染马铃薯叶片过程的细胞学观察

采用光学显微镜和电镜技术系统研究了茄链格孢菌对马铃薯叶片的侵染过程及超微结构特征。结果表明：接种2 h后,分生孢子开始萌发,分生孢子各个位置都可萌发产生芽管|接种6 h后,菌丝顶端出现附着孢|接种8 h后,菌丝从细胞间凹陷处直接侵入感病品种东农303叶片表皮细胞内|接种24 h后,受侵染寄主细胞中的菌丝向相邻细胞扩展蔓延,感病品种细胞内含物及各类细胞器基本完全消解。在抗病品种克新1号上,茄链格孢菌的侵染情况与感病品种基本一致,但发生时间明显较感病品种推迟,寄主细胞内的菌丝数量明显少于感病品种|并且在接种24 h后出现细胞壁加厚的防卫反应,在感病品种上没有观察到防卫反应现象。说明抗病品种对茄链格孢菌具有一定的抗侵入和抗扩展能力。