抗肿瘤活性青蛤多肽的提取工艺研究

[目的]探究具有抗肿瘤活性的青蛤多肽的最佳提取工艺路线.[方法]选择胰蛋白酶酶解青蛤,以酶解液对PC-3细胞增殖抑制率（IR）为指标,研究料液比、温度、pH、加酶量和酶解时间对多肽提取率的影响,探讨最佳工艺,并采用超滤及G25洗脱分离纯化提取液.[结果]当温度为45℃、pH为7.0、料液比为1∶3、酶解时间为6h、加酶量为300 U/g时,分子量为3～5 kD青蛤提取液的抗肿瘤活性最好;分离纯化后在280 nm波长处得到3个峰,其中峰1和峰2成分抗肿瘤活性显著.[结论]以细胞增殖抑制率为指标可以确定青蛤多肽的提取及优化工艺路线.     

鳕鱼皮复合肽的制备工艺研究

采用木瓜蛋白酶和风味酶构成的复合酶对鳕鱼皮蛋白进行水解,通过单因素和正交试验确定复合酶水解的最佳条件为：木瓜蛋白酶和风味酶复合比为3：1,加酶量为40 000 U/g,水解温度45℃,料液比为1：2,水解pH为6.5,水解时间为4.5 h。最佳条件下鳕鱼皮蛋白水解度可达22.45%。     

杏鲍菇多肽的制备

以杏鲍菇为原料制备多肽,杏鲍菇蛋白质的提取采用碱提酸沉法,通过四因素三水平正交试验,筛选蛋白质的最佳提取条件;多肽的制备采用酶解法,以料液比,酶用量,水解时间为因素,采用三因素三水平正交试验,根据水解度确定最佳水解条件。结果表明:(1)杏鲍菇蛋白质等电点为3.6。(2)杏鲍菇蛋白质最佳提取条件为:提取温度50℃,pH 12,料液比1∶55,提取时间2.5h,提取率达46.21%。(3)碱性蛋白酶酶解制备多肽的最佳酶解条件为:料水比1∶25、温度45℃、pH 10.5、时间12h、用酶量1.0%,水解度达81.19%。     

碱性蛋白酶酶解缢蛏制备多肽工艺

采用碱性蛋白酶酶解缢蛏,以多肽含量为指标,在酶解p H值、料液比、温度、酶添加量、时间的单因素试验基础上,通过正交试验优化缢蛏蛋白酶解工艺。结果表明,利用碱性蛋白酶对蛋白质进行水解,多肽含量高。碱性蛋白酶酶解缢蛏制备多肽最优工艺参数为:p H值9.5、酶添加量1.5%、料液比为1∶3.0、温度45℃、时间2.5 h,在此最优工艺参数条件下每克鲜缢蛏可提取多肽(81.3±0.4)mg。     

翡翠贻贝降血压肽酶解制备工艺研究

[目的]研究翡翠贻贝蛋白酶解的工艺条件,为后期开发保健食品和药品提供基础。[方法]以ACE抑制率为指标,在单因素的基础上通过正交试验研究温度、pH、料液比和酶与底物的质量比确定酶解工艺。最后以ACE抑制率和水解率2个指标研究酶解时间。[结果]最佳酶解工艺为:碱性蛋白酶,酶解温度为50℃,酶解pH为9.5,料液比为1∶4(g∶mL),酶与底物质量比为1%,酶解时间为2 h。[结论]碱性蛋白酶可以酶解翡翠贻贝得到翡翠贻贝降血压肽,此酶解方法简单、可行。     

外源蛋白酶水解白鲢内脏的工艺条件

为充分利用白鲢废弃物,利用碱性蛋白酶水解白鲢内脏,考察了温度、pH值、加酶量、料液比对白鲢内脏水解效果的影响。通过正交试验优化水解条件,结果表明:白鲢内脏水解的最佳条件是,酶解温度50℃,pH9.0,加酶量2000U/g,料液比1:3。在最佳酶解条件下水解7.5h,内脏蛋白质的水解度为41.73%,氮收率为64.76%。     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

双酶水解黄粉虫蛋白制备生物活性肽的工艺优化

【目的】对胰蛋白酶与碱性蛋白酶Alcalase双酶组合水解黄粉虫蛋白制备生物活性肽的工艺进行优化,为获得高活性黄粉虫蛋白多肽及有效利用黄粉虫蛋白提供科学依据。【方法】以水解度和酸溶性肽得率为指标,研究了酶解时间、酶活比、料液比、加酶量、pH和酶解温度6种因素对酶解反应的影响。在此基础上设计了3因素(加酶量、pH和酶解温度)3水平的响应面试验。【结果】胰蛋白酶与碱性蛋白酶Alcalase双酶水解黄粉虫蛋白的最佳酶解条件为:酶解时间120 min,酶活比1∶1,料液比1∶3,加酶量23.41 mg/g,pH 8.77,酶解温度53.41℃。【结论】利用优化双酶水解条件制得的低分子多肽的水解度高达21.61%,酸溶性肽得率为92.09%。     

超声波处理对蓝圆鲹鱼蛋白酶解效果的影响

以蓝圆鲹为原料,采用中性蛋白酶对其进行控制酶解,以水解度为指标,研究超声波处理对酶解过程的影响;通过单因素试验,研究超声波处理时间、酶解时间、加酶量、料液比和酶解温度对酶解过程的影响,并采用正交试验对最佳的酶解条件进行优化。结果表明,蓝圆鲹蛋白最佳酶解条件:超声波功率500 W条件下处理20 min、中性蛋白酶的加酶量为8 000 U·g-1、料液比为1∶20(g·m L-1)、温度50℃、酶解时间为4 h;最佳酶解条件下得到水解度为52.08%,所得酶解液对羟基自由基清除率达到46.42%。     

响应面法优化鳕鱼碎肉水解工艺

为探索出鳕鱼碎肉的最佳水解工艺条件,以鳕鱼碎肉多肽得率为评价指标,考察水解温度、水解时间、pH值、加酶量和料液比对多肽得率的影响,在此基础上根据Box-Behnken中心组合试验设计优化水解工艺,建立多肽得率与各响应因子的回归方程。结果表明:各因素对多肽得率的影响强弱顺序为pH值温度加酶量,鳕鱼碎肉水解的最佳工艺条件为水解温度55.6℃,pH值8.2,加酶量3 250 U/g,在此条件下多肽得率可达31.02%。     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明：当时间为150min、酶用量为6％、温度为45℃、pH为7．0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110min、酶用量为3％、温度为65℃、pH为6．0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280nm下的吸收峰值分别相吻合。     

山药多糖的提取工艺及抗氧化活性研究

[目的]研究山药多糖的提取工艺及其抗氧化活性。[方法]选择pH、料液比、提取温度和提取时间进行正交试验,优化山药多糖提取工艺条件,并分析了山药多糖对H2O2、O2-.及.OH的清除效果。[结果]试验得出,山药多糖的最佳提取工艺为pH 9,料液比1∶20g/ml,温度100℃,浸提时间1.5 h;且山药多糖具有较强的抗氧化活性作用。[结论]该研究为山药多糖的进一步开发利用提供了一定的理论依据。     

不同水解程度丝素肽对黑色素生成抑制能力的研究

探讨了脱胶丝素经盐溶解后进行碱水解时 ,不同条件对丝素水解程度及不同水解程度丝素肽对蚕血黑色素生成的抑制能力的影响 .结果发现 ,温度对丝素的水解程度影响最大 ,时间其次 ,浓度的影响最小 ;丝素蛋白液未水解时 ,其对黑色素抑制率很低 ,只有 2 8.34% ,而丝素水解后 ,抑制率迅速提高到 4 8.95 % ,并且随着水解程度的加深不断提高 ,当氨基氮浓度达 0 .4 76 5g·L-1时 ,其对黑色素生成抑制率达最高值 6 7.14 % ;之后 ,随着水解程度的增加 ,其黑色素生成抑制率反而下降 .     

高产蛋白酶菌株的分离、筛选及鉴定

为了降解豆粕中的大分子蛋白为大豆肽,利用酪蛋白平板法作为筛选模型,从土壤中分离和筛选高产 蛋白酶的菌株,选取水解圈直径与菌落直径比值较大的菌株液体发酵后进行蛋白酶活力和大豆肽转化率的测定,结 果得到1 株蛋白酶活力和大豆肽转化率较高的菌株B1,其酶活力达到111.8 U/mL,大豆肽转化率达到37.2%。对该 菌株进行形态观察和生理生化特征分析,初步将其鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.）。     

毛发水解液用作动物饲料蛋白源的研究

把毛发用6M的HCl水解2h后,用0.4%的胃蛋白酶水解4h、8h、16h,用凯氏微量定氮法测定水解毛发中粗蛋白的含量以及水解滤液中氨基氮的含量,结果显示毛发经过6M的盐酸水解2h后完全可以用作动物饲料蛋白的来源.     

响应面优化酶法提取蛹虫草培养基多糖的研究(英文)

[目的]通过响应面法优化酶提取蛹虫草培养基中虫草多糖的条件。[方法]测定蛹虫草培养基成分,并用酶法提取培养基中虫草多糖,对其提取条件进行单因素试验,筛选出最佳水解酶。在单因素试验的基础上,以响应面法优化温度、pH、酶加量和料液比等4个因素,并对试验结果进行数学模拟和预测,优化各因素水平,探讨因素间的交互作用。[结果]提取培养基中虫草多糖的最佳水解酶确定为酸性蛋白酶,其提取虫草多糖的最优条件为:温度39.89℃,pH3.12,酶加量2.39%,料液比1∶75.78,水解时间4h,在该条件下预测的多糖得率为10.11%。按该最佳条件进行验证试验,提取的多糖平均得率为9.96%,表明所得最佳提取条件比较可靠。[结论]该试验优化了蛹虫草培养基多糖的提取条件,对蛹虫草培养基的利用及虫草多糖的生产具有一定的理论指导价值。     

响应面法优化玉米秸秆酶水解条件的研究

针对玉米秸秆制取燃料乙醇过程中玉米秸秆酶水解效率低的问题,利用响应面法对玉米秸秆酶水解条件进行优化。首先通过两水平Plackett-Burman试验中8个因素,筛选出3个对还原糖产率影响最大的因素(酶浓度、温度和固液比),再通过最陡爬坡试验确定其最优区域,然后通过Box-Behnken设计和响应面法进一步确定因素间相互关系和以还原糖最大产率为目标的最优条件。结果表明:酶浓度和固液比、温度和固液比间的交互作用对酶水解的影响显著,还原糖最大产率(42.97%)的最优条件为酶浓度55.45U.g-1,酶比例2∶1,温度44.39℃,pH值5.0,固液比1∶10.3,转速140r.min-1,酶解时间72h,Mg2+浓度0.01%。     

活性口袋关键色氨酸对几丁质酶Chi304催化性质的研究

几丁质酶中存在结合口袋及水解活性位点，关键氨基酸与底物几丁质的结合可调控酶的水解活性。以嗜热几丁质酶Chi304为研究材料，采用同源建模分析其高级结构，发现在其底物结合口袋附近存在2个色氨酸（W140与W272），将其定点突变为丙氨酸后，采用高效液相色谱检测酶的水解产物，并进一步分析水解产物三乙酰壳三糖（DP₃）与二乙酰壳二糖（DP₂）的比例（DP₃/DP₂），用于评估突变体的效果。结果表明，突变体W140A、W272A与W140/272A水解胶体几丁质产物DP₃/DP₂分别较野生型提升23.3%、45.7%与80.0%。由此表明，W140与W272是影响酶与底物结合的关键氨基酸，将其突变为丙氨酸可提升Chi304的内切活力，降低外切活力。     

硫酸水解蚕丝蛋白制备丝素肽的研究

[目的]获得制备丝素肽的简便高效的方法.[方法]以废蚕丝为原料,用0.5％碳酸钠水溶液进行脱胶,硫酸进行水解,氧化钙水溶液中和沉淀,活性炭脱色制备丝素肽;采用正交试验L9（34）优化硫酸水解工艺条件.[结果]试验表明,蚕丝蛋白在固液比1∶40 g/ml,硫酸浓度30％,水解温度80℃,水解时间9h的条件下进行水解时,丝素肽的得率最高.[结论]研究可为丝素肽的进一步工业化生产提供可靠的理论依据.