盐碱化草坪土壤耐盐解磷真菌的筛选及解磷能力研究

采集草坪根际盐碱化土壤进行菌种筛选,并研究培养条件对菌株解磷效果的影响。试验结果表明,真菌菌株FL0908发酵液中的有效磷浓度为310.23 mg/L,真菌解磷圈直径与菌落直径比值(D/d)达到1.96。菌株FL0908在所供4种碳源条件下均能生长,不同碳源生长差异显著,最适碳源为葡萄糖,而在乳糖培养基上生长最差;对于所供4种氮源,在酵母浸膏上生长过于迅速,在亚硝酸钠条件下几乎不生长,最适氮源为酵母浸膏,硝酸钾次之;对于所供4种温度,真菌均可生长,最适温度为30℃;在所供的4种pH值条件下可正常生长,最适pH值为6。对于试验中发酵液条件的优化组合,最适解磷条件为:温度35℃,pH值7,碳氮比35∶1,转速130 r/min。     

耐寡营养高效解磷菌株XMT-5的分离鉴定及解磷特性

为获得更加适应寡营养的自然环境条件的解磷菌株,以1/4蒙金娜培养基从土壤中分离筛选高效解磷菌株,并对其进行鉴定,分析其生长条件及解磷机制。结果表明,从土壤中共分离获得解磷菌9株,通过对解磷量的定量测定确定高效解磷菌株XMT-5,其最大解磷量为195.63 mg/L;从菌落特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列分析三方面鉴定菌株XMT-5为根瘤菌(Rhizobium sp.);菌株XMT-5在寡营养条件下可以分泌柠檬酸、酒石酸和乙酸3种有机酸,从而可使培养液pH值下降;菌株XMT-5可在温度4~42℃、pH值4~10、Na Cl质量浓度0~80 g/L以及寡营养条件下生长,环境适应能力较强,具有良好的应用前景。     

一株盐碱地耐盐解磷菌的环境影响因子研究

从黄河三角洲盐碱化草坪根际土壤中筛选了一株解磷真菌WF1612。菌株WF1612的最适生长温度为30℃,当p H值为7时溶液有效磷浓度为88.58 mg/L。当Na Cl浓度为3%~7%时,溶液中有效磷浓度在62.26~81.39 mg/L之间。当溶液中Na Cl浓度为10%时,溶液有效磷仅为24.29 mg/L。接种解磷真菌WF1612处理的玉米,其株高和植株干重明显高于其他处理,该解磷菌作为解磷生物肥料具有良好的应用前景。     

灌东盐场耐盐真菌的分离与初步鉴定

用不同浓度NaCl的马丁氏培养基富集培养,从灌东盐场的结晶池中分离得到2株耐盐霉菌,标记为A、B。经过初步鉴定发现,A菌株菌落形态比较大,直径约8mm,质地疏松,呈绒毛状,成熟菌落呈现蓝绿色,表面粗糙,边缘不整齐,生长的NaCl浓度范围为10～300g/L,最适盐浓度为100g/L,生长的温度范围为22～45℃,最适温度为28℃。B菌株菌落形态比较小,直径约3mm,质地疏松,呈绒毛状,成熟菌落呈现棕色,表面粗糙,边缘不整齐,其生长的NaCl浓度范围为20～30g/L,最适盐浓度为150g/L,B菌株生长的温度范围为22～45℃,最适温度为30℃。A菌株菌体与青霉菌体相似,B菌株菌体是具有分枝的菌丝体,与曲霉体相似。     

一株耐盐乙草胺降解菌的分离、筛选及鉴定

为获得更加适应自然环境的乙草胺降解菌株,以MSM基础盐培养基从常年经受乙草胺污染的农田土壤中分离乙草胺降解菌,筛选高效降解菌株,并对其进行鉴定及生长和降解特性分析。结果表明,共分离得到乙草胺降解细菌12株,通过高效液相色谱法定量检测确定菌株ACD-9的降解效率最高,3 d内对初始浓度为50·mg·L-1的乙草胺降解率可达到56.78%;从菌落特征、生理生化特性以及16S r RNA基因序列3个方面分析,鉴定菌株ACD-9为芽孢杆菌(Bacillus sp.);菌株ACD-9可在温度4～50℃、pH值4.5～10.0、NaCl质量浓度为0～150 g·L-1的条件下生长,其最适条件为46℃,pH值5.0～6.0,NaCl 0～10 g·L-1。综合而言,菌株ACD-9环境耐受力较好,适应能力较强,具有良好的应用前景。     

水稻根际固氮菌分离及最适培养条件研究

本研究从水稻根际土壤中筛选高效固氮菌,通过乙炔还原法选出一株固氮能力较强的菌株G3,其固氮酶活性为1.875μmol·ml-1·h-1。通过革兰氏染色和形态观察发现,G3为革兰氏阴性菌。对G3的最适培养条件进行研究,结果表明:G3生长的最适温度是35℃;最适生长pH是7;1%的NaCl为G3的最佳生长浓度;当铵离子浓度达到1 mmol/L时,能够很好地生长。     

油茶根际高效解磷细菌NC285液体发酵培养条件的优化

磷是植物生长的必需元素之一,土壤中绝大多数的磷都以植物难以吸收的形态存在,导致了植物无法正常生长,而解磷细菌具有溶解难溶性磷的特性,因此,开发高效解磷细菌对提高磷的利用率具有重要的意义。为了探究油茶(Camellia oleifera Abel.)根际解磷细菌的最适生长条件,采用单因素试验分别考察了碳源、氮源、温度、pH、接种量以及溶氧量对该菌株生长的影响,并在单因素的基础上,采用正交试验对其溶磷条件进行优化。结果表明该菌株的最适碳源为葡萄糖,最适氮源为(NH4)2SO4,最佳培养条件分别为温度28℃,初始pH值7.5,接种量1%,溶氧量100 mL。解磷菌在优化后的培养基中的溶磷能力明显提高,培养基有效磷含量高达586.73 mg/L,比优化前提高了45.16%。     

解磷细菌的分离筛选及培养条件优化

通过透明圈法与钼锑抗比色法,从巴彦淖尔市临河区旧气象局试验田植物根际土中分离筛选出3株解磷效果好的菌株,通过单因素试验对菌株培养条件进行了优化。结果表明:不同碳源、氮源、温度、pH值、盐浓度等对其解磷效果存在显著差异。PB1以木糖做碳源、硝酸铵为氮源、NaCl浓度为0.3 g·L~(-1)、pH值为6、温度30～34℃、加液量为100 m L时解磷效果最显著;PB2以果糖做碳源、硝酸铵为氮源、盐浓度为0.7 g·L~(-1)、pH值为6、温度30～34℃、加液量为50 mL时最显著。PB3以葡萄糖或果糖做碳源、硝酸钠为氮源、盐浓度为0.5 g·L~(-1)、pH值为6、温度32℃、加液量为100 mL时解磷效果最显著。根据形态特征及生理生化特性,结合《常见细菌系统鉴定手册》、《伯杰氏细菌鉴定手册》将3种菌株初步鉴定为:PB1为沙门氏菌、PB2为金杆菌属、PB3为芽孢杆菌属。     

UHT乳中产耐高温脂肪酶嗜冷菌的研究

从牛乳中筛选到1株产耐高温脂肪酶的嗜冷菌株DW-A,通过对其形态学及生理生化特性的研究,鉴定该菌株为脆弱假单胞菌(P.fragis).对其生长特性进行了研究,菌株DW-A在发酵液体培养基中振荡培养时,0h～12h为生长延迟期,12h～36h为对数生长期,36h～84h为稳定期,84h后为衰亡期;最适生长温度为20℃;最适作用pH值为7.0;最适培养液NaCl浓度为0%～1%.     

解磷菌株黑曲霉PSFM发酵条件优化研究

【目的】利用液体培养法探究不同碳源、氮源、无机盐和微量元素浓度以及发酵时间、温度、初始pH、转速、接种量等条件对解磷菌解磷特性的影响,获得解磷菌的最佳发酵培养基和培养条件。【方法】采用单因素及正交试验法,对一株分离自土壤的解磷真菌黑曲霉（Aspergillus niger）PSFM菌株的基础发酵培养基和发酵条件（发酵时间0～10 d、温度20～40℃、初始pH值3.0～11.0、接种量1%～11%、转速120～300 rpm）进行优化,测定其发酵液吸光度值,以解磷量的高低作为评价发酵培养基及发酵条件优劣的指标。【结果】分别在无机磷和有机磷液体培养基、简单培养基（SP）、NBRIY、NBRIP、NBRIYP培养基中培养6 d后,以无机磷液体培养基的PSFM菌株解磷能力最高,解磷量为526.42 mg/L。在12种不同碳源培养基中,PSFM均能正常生长,其解磷能力由大到小依次为：木糖＞葡萄糖＞乳糖＞蔗糖＞麦芽糖＞半乳糖＞山梨糖＞甘露糖＞果糖＞可溶性淀粉＞鼠李糖＞甘油。以硝酸钠、尿素、酵母浸膏、氯化铵、硝酸镁、硝酸铵、色氨酸、乙酸铵、牛肉浸膏、胰-蛋白胨、甘氨酸、酪氨酸、丙氨酸和精氨酸为氮源时,硫酸铵为唯一氮源的解磷效果最好,菌株PSFM发酵液中有效磷含量最高（990.31 mg/L）。菌株PSFM的解磷能力均随着最佳培养基中NaCl、KCl、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O和MnSO4·7H2O浓度的增加呈先提高后降低趋势,当其浓度分别为0.03%、0.01%、0.03%、0.001%、0.001%时,菌株PSFM的解磷能力均最强。在不同发酵条件下,以发酵6 d、温度28℃、初始pH 6.0、5%接种量、转速300 rpm的PSFM解磷能力最强,解磷量分别为599.24、528.23、603.69、530.57和731.48 mg/L。【结论】最适合PSFM菌株的基础发酵培养基为无机磷液体培养基,碳源为1.0%木糖,氮源为0.10%硫酸铵,最佳无机盐配方为：NaCl 0.10 g/L、KCl 0.70 g/L、MgSO4·7H2O 0.70 g/L、FeSO4·7H2O 0.01 g/L、MnSO4·7H2O 0.01 g/L;最佳培养条件为：温度28℃,初始pH 6.0,转速180 rpm,接种量5％,发酵时间为6 d。     

解磷菌株黑曲霉PSFM发酵条件优化研究

【目的】利用液体培养法探究不同碳源、氮源、无机盐和微量元素浓度以及发酵时间、温度、初始pH、转速、接种量等条件对解磷菌解磷特性的影响,获得解磷菌的最佳发酵培养基和培养条件。【方法】采用单因素及正交试验法,对一株分离自土壤的解磷真菌黑曲霉（Aspergillus niger）PSFM菌株的基础发酵培养基和发酵条件（发酵时间0～10d、温度20～40℃、初始pH值3.0～11.0、接种量1%～11%、转速120～300rpm）进行优化,测定其发酵液吸光度值,以解磷量的高低作为评价发酵培养基及发酵条件优劣的指标。【结果】分别在无机磷和有机磷液体培养基、简单培养基（SP）、NBRIY、NBRIP、NBRIYP培养基中培养6d后,以无机磷液体培养基的PSFM菌株解磷能力最高,解磷量为526.42mg/L。在12种不同碳源培养基中,PSFM均能正常生长,其解磷能力由大到小依次为：木糖〉葡萄糖〉乳糖〉蔗糖〉麦芽糖〉半乳糖〉山梨糖〉甘露糖〉果糖〉可溶性淀粉〉鼠李糖〉甘油。以硝酸钠、尿素、酵母浸膏、氯化铵、硝酸镁、硝酸铵、色氨酸、乙酸铵、牛肉浸膏、胰-蛋白胨、甘氨酸、酪氨酸、丙氨酸和精氨酸为氮源时,硫酸铵为唯一氮源的解磷效果最好,菌株PSFM发酵液中有效磷含量最高（990.31mg/L）。菌株PSFM的解磷能力均随着最佳培养基中NaCl、KCl、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O和MnSO4·7H2O浓度的增加呈先提高后降低趋势,当其浓度分别为0.03%、0.01%、0.03%、0.001%、0.001%时,菌株PSFM的解磷能力均最强。在不同发酵条件下,以发酵6d、温度28℃、初始pH6.0、5%接种量、转速300rpm的PSFM解磷能力最强,解磷量分别为599.24、528.23、603.69、530.57和731.48mg/L。【结论】最适合PSFM菌株的基础发酵培养基为无机磷液体培养基,碳源为1.0%木糖,氮源为0.10%硫酸铵,最佳无机盐配方为：NaCl0.10g/L、KCl0.70g/L、MgSO·47H2O 0.70g/L、FeSO4·7H2O 0.01g/L、MnSO·47H2O 0.01g/L;最佳培养条件为：温度28℃,初始pH6.0,转速180rpm,接种量5%,发酵时间为6d。     

苹果根际解磷菌的分离筛选及解磷能力

为实现果园化肥减施计划,开发高效微生物解磷肥,利用蒙金娜有机磷固体培养基从苹果根际土壤中筛选具有矿化有机磷能力的细菌,经分离、纯化培养后鉴定其矿化植酸钙的效率。同时测定培养液的pH和磷酸酶的活性,运用16SrDNA测序分析进行菌株的分类信息鉴定,最后将其回接入有机磷培养基中,观察其对拟南芥生长的影响。结果表明:从苹果根际土壤中分离纯化得到10株解磷能力存在一定差异的解磷菌,其溶磷量在14.82～104.13mg/mL,磷酸酶活性为12.61～44.24μg/(mL·h)。经鉴定10株解磷菌分别属于Acinetobacter、Enterobacterer和Pseudomonas 3个属,综合生理特性和进化树分析,最终筛选出PsbM4,为较优候选苹果根际解磷菌,其可有效矿化培养基中有机磷,并刺激拟南芥植株泌氢以更好应对低磷胁迫。     

红花根际溶磷菌的筛选与培养条件优化

土壤中的溶磷菌可增加难溶性磷酸盐的溶解性,提高植物对磷的吸收和利用。利用溶磷圈法,从红花根际土壤中,初步筛选出具有较高溶磷能力的菌株RC01,并对其培养条件进行优化。单因素试验结果表明,当葡萄糖为碳源、(NH_4)_2SO_4为氮源,在30℃、0.3 g/L NaCl条件下,该菌的溶磷效果较好;正交试验结果表明,10 g/L葡萄糖、0.5 g/L (NH_4)_2SO_4、30℃、0.35 g/L NaCl时,溶磷量最大。RC01经过16S rRNA测序鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas),其良好的溶磷菌特性,可为促进红花生长的相关微生物研究奠定基础。     

一株马铃薯黑痣病拮抗菌的筛选鉴定及其生长条件研究

【目的】为了获得对马铃薯黑痣病有拮抗效果的优良生防菌株.【方法】采用稀释平板法.【结果】从马铃薯根际土壤中筛选得到了一株对于马铃薯黑痣病病原菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)有良好的拮抗效果的菌株C15;抑菌率达到51.0%;通过生理生化和16SrDAN分子生物学鉴定,菌株C15为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus);通过对其生长条件的研究,菌株C15的生长速度较快,在接种16h以后就进入稳定期;生长的最适温度是37℃;最适pH是6~7;最适盐质量浓度是10g/L;最适氮源是酵母浸粉;最适碳源是蔗糖.【结论】菌株C15具有作为优良生防菌株的潜力.     

九站地区根际土壤高效解磷菌的筛选及分类鉴定

采用无机磷固体培养基从九站地区实验田玉米根际土壤中分离筛选出一株高效解磷菌jl-3,在无机磷固体培养基中,初始p H值为7.0,温度30℃培养3天,通过对其进行形态学观察、生理生化试验及分子生物学鉴定,鉴定其为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。无机磷液体培养基培养利用磷钼蓝比色法测得在第6天时可溶性磷含量最多。     

杨木变色生防细菌B37最佳生长条件的研究

从江苏省泗阳县杨树林土壤中分离到1株能抑制杨木变色菌Hz91生长的细菌B37(Bacillus subtilis).通过测定其生长所需的最佳碳源、氮源、pH值、NaCl含量装液量,利用5因素3水平L18(35)的正交试验,确定其最适生长条件为:葡萄糖0.5 g/L,酵母浸出液0.5 g/L,NaCl 1～5g/L,装液量30 mL/150 mL,pH值7.0,培养温度35℃,180 r/min摇床培养.     

不动杆菌JL-1降解磷的性能研究

以不动杆菌(Acinetobacter indicus)JL-1为菌种,使用无机磷液体培养基测定其解磷性能。采用单因素试验与正交试验确定最佳解磷条件:碳源为10.0 g/L蔗糖,2.0 g/L复合氮源(硫酸铵与酵母粉质量浓度比为1∶1),pH值为7.5,温度为37℃,装液量为50 mL/250 mL。在此最优条件下,解磷量在48 h时最高,为61.02μg/mL,菌落数为2.69×10~(11) CFU/mL,发酵过程中pH值呈先下降后略上升的趋势。通过对其解磷机制进行初步研究,确定此菌株以酸解为主、酶解为辅的方式来解磷。     

盐碱化土壤中1株耐盐解磷放线菌的生物学特性

采用平板法进行菌种初筛和生物学特性研究,经筛选纯化得到1株高效解磷菌F1312,对该菌株的生物学特性在碳源、氮源、温度、p H值等方面进行了初步研究,并采用L9(34)正交试验设计对发酵条件进行了初步探讨。结果表明:经筛选所得的菌株F1312初步判断为放线菌;对F1312进行生物学测定,该菌株在所供4种碳源、氮源、p H值、温度条件下均能生长,其最适碳源为麦芽糖,最适氮源为酵母浸膏粉,最适p H值为7,最适温度为30℃;在发酵条件的优化组合试验中,F1312的最适解磷条件为:p H值=7,温度30℃,碳氮比20∶1,转速150 r/min。     

油松菌根根际一株高效磷细菌培养条件的研究

[目的]为获取能与菌根真菌褐环乳牛肝菌配伍制作复合生物菌剂的高效解磷细菌。[方法]从4年生(2+2)油松菌根根际土壤中分离纯化并采用溶磷圈法筛选出16株具有解磷能力的细菌P1~P16。利用试剂盒法选出一株解磷能力最强的菌株(P15),采用液体培养对其培养条件和营养特性进行研究。[结果]筛选出的优良解磷细菌可使培养基中可溶性磷增量达591.82 mg/L;其生长曲线符合Logistic方程;其培养条件:装液量35 m l培养基/100 m l三角瓶中;转速210 r/m in;初始pH值7.5~8.0;培养温度30℃。营养特性:最佳碳源为葡萄糖;最佳氮源为(NH4)2SO4;Mg2+、Ca2+、Fe3+对细菌生长无影响,Na+、Fe2+、K+促进细菌生长,而Mn2+对细菌生长有抑制作用。[结论]油松菌根根际土壤中有丰富的解磷细菌群,菌根真菌通过与根际解磷微生物的互作来改善宿主植物的生长状况。     

一株沿海滩涂细菌的降油及生长特性研究

采用以原油为唯一碳源的基础培养基,从原油污染的沿海滩涂土壤中分离筛选具有降油性能的细菌;采用柴油培养基测定分离菌株对柴油的原始降解率;通过在柴油培养基中添加不同浓度的葡萄糖(0、1、2、4、8、16 g/L),及不同浓度的酵母膏、蛋白胨、尿素、硫酸铵(以氮计,浓度为0.5、1、2 g/L)和磷酸二氢钠(0、4、8、12 g/L)后,测定分离菌株的降油性能;鉴定分离菌株并研究其生长特性.结果表明:共分离到5株能以原油为唯一碳源生长的细菌,其中1株原始降油率最高(19.0％),编号为Y-3;在添加1 g/L以上葡萄糖时,Y-3菌株降油率升高,添加4 g/L葡萄糖时达最高(79.9％);酵母膏和蛋白胨可提高Y-3菌株的降油率,尿素、硫酸铵和磷酸盐对降油率影响不明显;根据形态学、生理生化鉴定以及16S rDNA序列分析,确定Y-3菌株为恶臭假单胞菌Pseudomonas putida,Y-3菌株的最适生长温度为30℃,最适生长pH为8,适宜生长NaCl浓度为0～30 g/L.