大豆愈伤原生质体的制备和培养方式探究

具有植物细胞全能性的原生质体是探究植物遗传转化和基因功能的理想材料,为了高效率制备大豆原生质体及其稳定培养,以交大05-133大豆未成熟子叶诱导的愈伤组织为材料,采用正交设计,对纤维素酶、果胶酶和离析酶等酶解液成分进行分析,研究原生质体高效制备方法的酶解液配比,同时探讨不同酶解时间对原生质体产量的影响,以确定最佳的原生质体酶解条件;通过对比在低熔点琼脂固体液滴培养与液体培养这两种不同培养方式下细胞的增值速率,以期建立高效的愈伤原生质体再生体系。结果显示,最佳酶解液配比为:2%纤维素酶+0. 1%果胶酶+1%离析酶,在该酶解液配比下酶解5 h,所得到原生质体产量和活力最高,达到(3. 976±0. 86)×10~6个·g~(-1)。用KP8培养基对原生质体进行培养,结果显示固体液滴的培养方式更适合原生质体的分裂,原生质体植板率高于液体培养,并且在25 d内分裂形成致密的细胞团。     

大豆花粉离体培养获得愈伤组织

大豆花穗置低温(7°—8℃)冷处理5、8、10、12天,取花药置培养皿中,用盖玻片压出花粉粒,去掉残渣,加入液体培养基。基本培养基是改良的B_5,参照高国楠原生质体培养基附加糖、椰乳、水解酪蛋白等有机物,0.05—0.2mg/l 2.4—D,0 1～0.5mg/l Zeatin,0.5—1mg/l NAA。20天后见花粉分裂,30天见细胞团,40—50天形成肉眼可见的愈伤组织。分裂的花粉最后达接种时培养皿中花粉的60—70％以上。活体观察花粉分裂大致有多细胞型和游离核型。将直径2mm大小的愈伤组织转至固体培养基继代增殖而获得大量愈伤组织。分化培养获得根,未见芽的分化。     

大豆单细胞培养和原生质体游离的细胞形态观察

本文将形状不同的大豆悬浮培养细胞分成三种类型;园形和椭园形(A类)稍长形(B类)和长形细胞(C类)。A类细胞分生能力强,经多次分裂形成多细胞团;C类细胞多数为老化细胞,能分裂但不能形成细胞团;B类细胞在悬浮细胞中含量很少,大部分能分裂形成细胞团。在用悬浮培养细胞游离原生质体的过程中,A类细胞几乎全能游离出原生质体,B类细胞大部分能游离出原生质体,C类细胞几乎不能游离出原生质体。因此,在游离悬浮培养细胞时,在原生质体中含有少量未去壁的C类细胞和极少数B类细胞可不必用其它的方法分离出去,因为C类细胞不能形成细胞团,那么经培养形成的愈伤组织和分化再生的完整植株可能几乎都是由原生质体产生的。     

棉花愈伤组织原生质体分离技术研究

自1974年Beasley等人首次从陆地棉纤维游离得到原生质体以来,已先后从陆地棉和克劳茨基棉下胚轴形成的愈伤组织,陆地棉和海岛棉子叶和真叶分离出原生质体。本     

影响大豆愈伤组织的诱导因素研究

比较MS、B5、N6三种基本培养基,发现MS适合作为诱导大豆愈伤组织的基本培养基.添加激素6-BA 0.5mg/L,2,4-D 2.0mg/L时愈伤组织诱导的效果最好,过高或过低的浓度激素均不利于愈伤组织的诱导和生长;不同外植体诱导愈伤组织的能力不一样,下胚轴诱导愈伤组织能力强于子叶;在所选择的六种大豆品种中,中黄13诱导愈伤组织的能力最强;光照条件为12h/d时有利于愈伤组织的诱导;培养基pH5.8～6.0时,愈伤组织的诱导率比较高.     

Meng麻下胚轴愈伤组织的诱导和培养

我国栽培麻类作物历史悠久，品种繁多，但一些品种纤维品质较差，有待改进。除用常规育种来选育新品种外，近年来，植物学研究的进展，现在已使人们认为有可能通过细胞融合杂交来培育新品种，此外我们还认为从植物细胞生理的角度来研究调节控制纤维细胞壁的构成亦可能达到改良纤维品质的目的。     

Meng麻下胚轴愈伤组织的诱导和培养

我国栽培麻类作物历史悠久，品种繁多，但一些品种纤维品质较差，有待改进。除用常规育种来选育新品种外，近年来，植物学研究的进展，现在已使人们认为有可能通过细胞融合杂交来培育新品种，此外我们还认为从植物细胞生理的角度来研究调节控制纤维细胞壁的构成亦可能达到改良纤维品质的目的。     

马铃薯花粉粒的分离培养和愈伤组织的形成

<正> 1 引言建立单细胞、单花粉培养为完整植株的实验体系,对于研究高等植物的遗传变异与作物改良有着重要的意义。1964年印度人首次通过花药培养获得了单倍体花粉植株。近20年来,很多研究者又相继将60多种植物诱导出完整的花粉植株,此后,单花粉培养的研究更加引起遗传学家和衣学家的关心和重视。因为高等植物的小孢子兼有单倍体、     

培养高粱原初愈伤组织的最适条件

目前,在美国和欧洲种植的甜高粱品种多用于制糖浆、饲料和青贮饲料,而今后高粱可能将朝向由发酵糖和木质纤维物质转化为酒精或直接燃烧的能量生产方向发展。我们对高粱细胞和组织的离体培养,是考察甜高粱生物量潜力(biomass potentials)计划的一部分。高粱细胞已可培养,并观察到了根的形成(Mascarenhas等,1975)。还有人报道过从高粱苗组织的     

花生叶片原生质体游离和培养因子的研究

花生叶片酶解分离原生质体试验表明,植株的苗龄和叶龄对原生质体产量有很大的影响,苗龄１５～２０ｄ的顶部刚平展幼叶是获得高产原生质体的最佳材料。酶浓度和酶解时间是影响原生质体游离和培养的重要因素。通过相关和回归分析,选择较低的酶浓度,较短的酶解时间,并对原生质体产量影响不大的酶处理方法,是原生质体培养成功的关键因子之一。     

大豆愈伤组织继代培养的最佳条件研究

探讨基本培养基、培养条件、植物生长调节剂等因素对大豆继代培养的影响.大豆愈伤组织继代培养的最佳条件:以MS BA0.5 mg/L 2,4-D2.0 mg/L为培养基,pH在5.8～6.0之间,在1 000～1 500 Lx,2 h/d光照条件下,培养21 d后生长较好,愈伤组织生长量和增长倍数可分别达到11.23 g/瓶和10.23.     

花生（Arachis hypogaea L.）游离小孢子培养获得愈伤组织研究

本文通过镜检花粉各发育时期及其与花蕾、花药形态的相关性,探讨了花生基因型、液体培养基及附加激素浓度对愈伤组织诱导率的影响。结果表明,当花蕾纵径长为2.48~2.96mm,小孢子基本处于四分体时期;长度在3.26~4.16mm时,以单核期为主;5.38~9.9mm,为双核期。在小孢子单核靠边期取材诱导率最高,达9.38%。本实验所用的六个花生品种中,四粒红的单蕾产胚数最高,达到0.1个胚/蕾 (MS培养基) 和0.05个胚/蕾(NLN培养基);在附加4mg/L2,4-D,3mg/L6-BA和0.3mg/LNAA改良的MS液体培养基上且当小孢子密度为2.5×105个/mL时,花生品种四粒红的愈伤组织诱导率最高,为12.5%。     

大豆子叶节高频愈伤组织诱导及其植株再生

以萌发7d的大豆子叶节切断及其切片为外植体,研究了萌发培养基、不同激素及其配比对大豆子叶节愈伤组织诱导与分化的影响.结果表明:当不添加BA时,在子叶节切断处几乎无愈伤组织的产生,只有添加BA时,才能产生愈伤组织.外植体切取方式、愈伤组织诱导培养基中BA和TDZ的浓度配比对愈伤组织诱导率产生很大影响.BA浓度为0.05～...