百合远缘杂交的胚囊和胚胎发育及胚拯救

采用石蜡切片和子房切片培养方法,对百合杂交组合‘多安娜’ב西伯利亚’和‘普瑞头’ב雪皇后’授粉前后胚囊(胚胎)发育以及胚拯救效果进行了研究。结果表明:‘多安娜’子房内成熟胚囊高峰期滞后于‘普瑞头’3 d左右,而开花后8、10 d时其保持成熟胚囊的比例高于后者。两杂交组合的双受精作用开始于授粉后10 d左右,较亚洲百合自交亲和组合晚,且均存在不同程度的受精后障碍。子房切片培养和胚珠培养仅使‘多安娜’ב西伯利亚’组合获得幼苗。授粉70 d后,两杂交组合都收获少量成熟种子,并经MS培养基培养30 d后萌发成苗。     

百合杂种胚的离体培养

以剥除胚乳的两个百合杂交组合的杂种胚，进行离体培养，５ｄ后即开始萌发，１５ｄ后，萌发率达８８％。在不同激素含量的培养基比较试验中，发现以ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ激素浓度培养基培养效果最好，其中，７５％的种胚长成完整植株，１２．５％的种胚长出幼芽，培养过程中，无根的幼苗生长至３ｃｍ左右，约５张叶片时，转移至ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上，２￣３周后，有８０％的幼苗长出根。     

毛白合的胚培养

为毛百合杂种胚培养选择适宜培养期及培养基。用亲本毛百合进行了胚培养适宜日期及适宜培养基的筛选试验。试验表明毛百合授粉后３９ｄ剥取的胚在ＭＳ附加０．０００１￣０．０１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培养基上就可诱导成幼苗。形成胚时间越长，诱导成活率也越高。这为以毛百合为亲本的种间杂交提供了获得杂种胚的方法和依据。     

百合胚的组织培养技术

百合杂交中胚败育现象严重,影响新品种培育,可采用胚的组织培养(即胚拯救)技术。以百合杂交胚作为外植体,通过初代、继代及成球培养,完成百合的育种和扩繁,经过炼苗及过渡移栽后,实现大田移栽,最终可有效的解决此问题。     

百合幼胚的离体培养和植株再生

为了探索百合幼胚离体培养的最佳胚性生长条件及植株再生途径,以授粉后３５ｄ的百合幼胚为外植体,进行了幼胚胚性生长,愈伤组织的诱导,愈伤组织不定芽、不定根的分化和再生植的移栽试验,结果表明;在含有１ｍｇ／ＬＩＡＡ〈１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ培养基上培养,蔗糖含量为６－８％时,百合幼胚胚性生长最好,１ｍｇ／ＬＩＡＡ,１ｍｇ／ＬＧＡ３,６００ｍｇ／ＬＣＨ的ＭＳ２基上培养,蔗糖含量为６－８％     

切花百合杂种胚抢救方法

以东方百合杂种系(O)、亚洲百合杂种系(A)、麝香百合杂种系(L)部分品种为试材,采用子房切片培养、带胎座胚珠培养、胚培养3种方法对系间杂种幼胚进行抢救,并对系内杂种胚离体培养的影响因素进行研究。结果表明,采用子房切片培养和带胎座胚珠培养可使OA,LA型部分杂种胚萌发,且带胎座胚珠培养优于子房切片培养,采用胚培养可使OA,LA,LO型部分杂种胚萌发,最终仅1株LO型杂种苗继续生长,其余杂种苗褐化死亡;OO型杂种胚适宜在胚龄50 d培养,AA,LL型杂种胚适宜在胚龄40 d培养,且0.01～0.1 mg/L NAA的添加对胚萌发是必要的,6-BA是否添加在不同杂交组合中存在差异。     

百合幼胚离体培养成株体系的建立

用5个百合常规栽培品种杂交组合的幼胚进行离体培养，探讨了不同的杂交组合、幼胚取材时期、培养基激素配比、4℃的预处理时间等条件对百合幼胚培养再生植株特性的影响，并在此基础上建立了一套可靠、重复性好的百合幼胚离体培养的成株体系。在MS＋KT1.0mg/L NAA 0.5mg/L激素配比培养基上，百合胚龄在50－70天时，采用适当的剥离胚的方法，80％以上的种胚可萌芽；在BA浓度较高的培养基上，剥离胚可诱导出愈伤组织并分化出苗。分化的苗丛在生根培养基MS＋NAA0.1mg/L上均能生成丛生苗；将苗丛从基部切开后，每棵单株均可独立成为完整植株。     

百合幼胚的离体培养和植株再生

为了探索百合幼胚离体培养的最佳胚性生长条件及植株再生途径,以授粉后35 d的百合幼胚为外植体,进行了幼胚胚性生长,愈伤组织的诱导,愈伤组织不定芽、不定根的分化和再生植株的移栽试验.结果表明:在含有1 mg/L IAA,1 mg/L GA3,600 mg/L CH的MS培养基上培养,蔗糖含量为6％～8％时,百合幼胚胚性生长最好,培养30 d后可以得到正常胚.在含有0.1 mg/L NAA,1 mg/L BA的MS培养基上可以形成淡绿色的愈伤组织,将这些愈伤组织转移到1/2 MS无激素的培养基上培养可以形成大量的不定芽,不定芽生根移栽后,其成活率可达90％以上.     

新铁炮百合品种沈香一号的幼胚培养研究

以新铁炮百合沈香一号(Lilium formolongi cv.Shenxiang No.1)的幼胚为试材,筛选适宜百合幼胚萌发的诱导培养基,结果表明,适宜的诱导培养基为1/2MS,萌发时间在接种后的22～43d之间。6-BA和NAA的浓度比与新铁炮百合幼胚的发芽率之间呈现出显著的相关性,在一定范围内,6-BA和NAA的浓度比越大,胚的萌发率越低。试验筛选出适宜新铁炮百合胚分化不定芽的诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,继代增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L及MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L。新铁炮百合试管苗易出现玻璃化现象,玻璃化程度与培养基的水势、环境湿度和外源激素的浓度有关。     

百合幼胚离体培养的研究

对百合败育胚离体培养的影响因素进行研究的结果表明：pH值对百合幼胚的萌发及成苗有一定的影响，以pH值5.0为最好；活性炭的浓度对其影响不明显，培养基中加入氨基酸类物质使胚萌发及成苗比率均高于对照，加入维生素类物质对胚的影响不大。     

不同风信子品种杂交亲和性及胚拯救

本研究以21个风信子园艺品种为材料,配置51个杂交组合,以坐果率、平均种子数和有胚率判定不同品种间的杂交亲和性。以‘奥斯塔雷’(‘Ostara’)ב软糖’(‘Fondant’)杂交的杂交种子为试验材料研究胚拯救培养基。结果显示:51个杂交组合中有23个组合杂交亲和性较高,其有胚率大于50%,7个组合未收获种子或杂种胚。对比研究得出,适宜风信子杂种胚拯救的培养基为MS+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.1 mg·L~(-1)+水解酪蛋白150 mg·L~(-1)+谷氨酰胺50 mg·L~(-1)。51个杂交组合中,有23个组合坐果率、有胚率也相当可观,杂交亲和性比较高。其他8个杂交组合有6个杂交组合没有获得杂种胚,说明风信子种子存在胚败育现象。     

胚培养技术应用于月季育种研究进展

胚培养技术是月季育种中一项重要技术,其在克服远缘杂交败育及加速育种周期中发挥着重要作用.本文综述了国内外胚培养的研究现状,影响胚培养的各种因素及应用,并提出了展望,旨在为今后月季育种提供理论基础.     

椰乳和香蕉泥对东方百合杂交幼胚离体培养的影响

探讨椰乳和香蕉泥、胚龄以及杂交组合对百合幼胚离体培养的影响.以东方百合的6个杂交组合、3个胚龄的幼胚为试材进行离体培养试验.试验结果表明:胚龄60～65d的幼胚离体培养成活率最高,其次为80～85d的幼胚,再次为70～75d的幼胚.不同杂交组合的幼胚离体培养的平均成活率从高到低依次为:罗蒂娜×马可波罗,罗蒂娜×法兰西,罗蒂娜×索蚌,提拔×法兰西,提拔×康斯坦萨,提拔×马可波罗.在60～65d胚龄时,在培养基中加入50mg· L-1椰乳使幼胚的成活率提高8％,加入100mg· L-1椰乳可使成活率提高5％,但加入香蕉泥使成活率大幅降低;在70～75d胚龄时,加入香蕉泥效果稍好;在80～85d胚龄时,加入椰乳和香蕉泥的培养基效果都较差.不同胚龄的幼胚离体培养成活率存在极显著差异,刚刚固体化的幼胚成活率最高.杂交组合不同幼胚离体培养成活率不同.培养基中添加适量椰乳能提高刚刚固化的幼胚的成活率,添加适量的香蕉泥能提高固化程度稍高的幼胚的成活率,对发育到胚乳完全硬化程度的百合胚,加入椰乳和香蕉泥均有不利影响.     

西伯利亚与黄天霸正反交实验及杂种胚离体培养

以西伯利亚和黄天霸为亲本进行百合杂交育种实验,探讨了亲本的花粉活力,进行正反交实验,比较了正反交的结实率,通过胚挽救技术在克服受精后障碍的应用,比较了不同培养基、培养条件对杂交胚生长效果的影响.结果表明:杂交后约60 d的蒴果消毒后预培养一段时间再剥出胚乳并进行前期光照培养有利于胚的萌发,缩短萌发时间,提高萌发整齐度;GA3有利于胚前期迅速萌发,但后期长势细弱,不利于成球.     

早熟桃的胚培养技术

以果实发育天数为65 d的普通桃82-18-73及75 d的油桃Sunsp lash为试材,探讨早熟桃两步法胚培养和移栽技术。结果表明:第一步培养以SH 6-BA(1 mg/L) IBA(1 mg/L)结合光照培养为最好,有利于胚的发育,长度>5 mm的胚比率达到93.8%以上;第二步培养以WPM培养基显著优于1/2 MS 6-BA(2 mg/L) IAA(0.5 mg/L),胚培试管苗生长健壮。试管苗移栽以草炭土∶珍珠岩=1∶3(体积比)混合基质为佳,移栽后7 d内用塑料薄膜覆盖保湿,7 d后逐渐揭膜透气,以提高移栽成活率。     

百合脱毒及病毒检测技术研究进展

百合是重要的观赏花卉，百合的繁殖主要通过无性繁殖方式进行，由于病害的侵染，常常造成植株体内的病毒积累。导致植株发生病毒病，最终严重降低百合植株的经济价值和观赏价值。因此，防止百合感染病毒病的应对策略是采用脱毒培养技术获得脱毒苗，并在各个生产环节进行严格的病毒检测。作系统地介绍了常用的脱毒技术——茎尖培养、珠芽培养、化学处理和热处理，以及主要病毒检测方法一指示植物法、电镜技术、酶联免疫法和分子生物学技术。     

百合杂交亲和试验

以东方百合(O)品种卡瓦娜(Corvara)、索邦(Sorbonne)、星球战士(Starfighter)作为父本材料,以OT百合品种(东方百合与喇叭型百合杂交后代)黄精灵(Yelloween)、罗宾娜(Robina)作为母本材料进行杂交试验,分别统计授粉后的子房膨大率与胚培养的萌发率来判断杂交组合的亲和情况。结果显示：东方百合内部杂交亲和性好,杂交容易得到后代;东方百合与OT百合的罗宾娜杂交亲和性较好,子房膨大率为100%,胚培养萌发率为3.3%;东方百合难以与OT百合的黄精灵得到杂交后代。     

绣球属种间杂交胚拯救时期研究

以绣球属种间杂交膨大蒴果为材料,采用显微镜观察和组培的方法,研究了绣球属种间杂交胚拯救的时期。结果表明：胚和种子呈卵形,黄褐色或褐色,表面具有网状纹理结构;60 d胚龄的胚透明度明显降低,90 d时种脐区域颜色加深。种间杂交的胚个数随着胚龄的增长呈下降趋势。组合21-6的萌发数在胚龄为62～93 d时相对较高;组合21-7和21-9的萌发数在62～80 d左右时较高。组合21-6的萌发率随着胚龄的增长呈先上升后下降的趋势;组合21-7的萌发率在60～80 d时较高;组合21-9的萌发率在62～93 d时相对较高。综上,在62～80 d胚龄时,进行绣球属种间杂交胚拯救效果较好。     

离体胚培救技术在百合育种中的应用

 离体胚培救技术在植物育种中发挥着极为重要的作用。在百合的育种工作中,胚培救技术的应用是获得远缘杂交后代的关键因素。就国内外关于百合胚培救技术的应用,着重分析了不同杂交组合基因型、不同胚龄败育胚的培养方法、不同培养条件等因素对胚培救效果的影响。