禽流感的诊断和防治

禽流感是由A型禽流感病毒(Avian Influenza virus，AIV)引起各种家禽和野鸟的一种禽类感染综合症．其中由少数H5及H7亚型病毒所引起的高致病力禽流感(HPAI)通常可以导致鸡群的大批死亡。本文着重论述了禽流感的诊断和防治措施。     

抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体研究

禽流感（AI）是由A型禽流感病毒（AIV）引起的一种发生于禽类的病毒性传染病。笔者以杂交瘤技术研制抗AIV共同抗原的特异单克隆抗体,旨在建立一种双抗体夹心ELISA方法快速检测AIV,以便为A型AIV的快速诊断技术的研究提供理论依据。     

禽流感病毒（H5N1）分离株对鸡的致病性研究进展

禽流感病毒（AIV）是重要的禽畜传染病原物之一．H5N1,AIV曾引起人类及哺乳动物的高致病性及死亡率．因此,禽流感病毒受到广泛关注。本文将简单阐述禽流感病毒引起禽类病理变化,并讨论引起这种变化可能的原因。     

禽流感病毒的分子生物学研究进展

禽流感（AI）是由A型禽流感病毒（AIV）引起的禽类烈性传染病。它不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失,而且对人类健康和生命安全构成了严重威胁。因此,禽流感已经成为人们关注的焦点。从病原基因组及其编码的蛋白质、致病力、变异性以及对AIV的分子诊断等角度就AIV的分子生物学研究进行综述．为防治AI提供理论基础。     

禽流感的诊断及综合防控措施

禽流感(Avian influenza,AI),又称真性鸡瘟,是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起禽类的一种急性、高度致死性、烈性、病毒性传染病[1]。该病以急性败血性死亡到无症状带毒等多种病征为特点,主要引起禽类呼吸系统疾病、产蛋下降及急性致死和高死亡率。禽流感不仅发生于禽类,而且还能导致人类的感染和死     

2006年吉林地区野生鸟类禽流感病毒流行病学监测

禽流感（Avian influenza，AI）是由禽流感病毒（AIV）所引起禽类的一种急性和高度接触性传染病，几乎所有的野生和家养禽类都可感染。2003年底从亚洲始发并席卷全球的高致病性禽流感疫情中，泰国等国家从多种死亡野鸟体内分离到了H5N1型禽流感病毒。2005年4月，我国青海湖中的近6000只斑头雁等侯鸟发生急性死亡，经病毒分离和鉴定，证实病原体为H5N1亚型禽流感病毒。因此，许多学者认为野生鸟类在传播禽流感病毒过程中扮演了重要角色。吉林省处于亚太地区候鸟迁徙路线上的重要位置，每年有大量的野生鸟类栖息和停留。为了解吉林地区野生鸟类禽流感病毒抗体的动态，2006年3月至2006年7月份对吉林市花鸟市场上的野生鸟类抽样进行血清学检测，为禽流感防控提供科学依据。     

"呼感特"对NDV和AIV的抑制试验

观察了抗病毒新药“呼感特”对鸡新城疫病毒 (NDV)和禽流感病毒 (AIV)在鸡胚中生长的抑制情况 ,结果发现 :经不同药物浓度感作的NDV和AIV在相应鸡胚中生长时 ,和对照组相比 ,鸡胚的保护率明显升高 ,病毒的增殖效价显著降低。同时 ,药物浓度越高 ,这种影响愈明显 ,且AIV组的变化比相应NDV组的变化更明显。     

禽流感病毒致病机制研究进展

禽流感病毒(AIV)属于正粘病毒科,它的致病性与毒株和宿主均有很大关系,根据毒力强弱将AIV划分为高致病性和低致病性毒株。高致病性AIV由于其传染性极强,可引起家禽全身性感染,造成多个组织器官严重病理损伤,致死率达100%,给世界养禽业造成重大损失。对禽流感病毒的分子结构及其致病机制方面的研究现状进行了综述。     

禽流感病毒H7和N2亚型nano-dPCR检测方法的建立和应用

为建立一种同时检测H7亚型和N2亚型禽流感病毒（AIV）的双重纳米PCR(nano-dPCR)方法，从GenBank中分别下载H7亚型AIV的HA基因序列和N2亚型AIV的NA基因序列，采用Primer 7.0和Oligo 6.0软件设计了2对特异性引物，通过对nano-dPCR反应条件进行优化确定最佳反应体系；利用优化好的反应体系开展nano-dPCR方法的特异性和敏感性试验；采集活禽市场家禽咽喉及泄殖腔拭子样品进行临床样品检测并进行验证。结果表明，成功建立了一种同时检测H7亚型（723 bp）和N2亚型（314 bp）AIV的nano-dPCR方法，该方法特异性良好，其他亚型禽流感病毒及常见禽类呼吸道病毒均未出现特异性的条带，H7亚型AIV和N2亚型AIV的最低核酸检测量分别达到了5×103、5×103拷贝/μL，其敏感性是普通双重PCR检测方法的10倍，其对临床样品检测结果准确率达到100%，可以用于禽流感临床样品鉴别诊断和日常防控监测。     

中草药抗禽流感病毒鸡胚试验研究

为了筛选出高效的抗禽流感病毒(AIV)中草药,采用鸡胚试验,对常用清热解毒中草药的体外抗AIV效果进行了测定。结果表明,矮地茶、半边莲、白花败酱草、侧柏叶、大黄、虎杖、菊花、商陆、夏枯草、地锦草、贯众、诃子、仙鹤草对禽流感病毒在体外具有较好的灭活作用。     

禽流感病毒LAMP快速诊断方法的建立

参考禽流感病毒(AIV)基质蛋白(M)基因设计了两对引物,特异性识别其6个不同位点,建立了基于颜色判定的环介导等温扩增反应(LAMP)方法。试验对不同禽源病毒进行了测试,结果发现该方法仅特异性地检出禽流感病毒(H9和H5亚型)核酸,对AIV病毒的检测极限为10 EID50。人工感染病料检测结果与鸡胚病毒分离法的符合率为967%。数据表明,建立的LAMP方法特异、敏感、简便,在禽流感的诊断中具有很大的临床应用潜力。     

抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体研究

禽流感(AI)是由A型禽流感病毒(AIV)引起的一种发生于禽类的病毒性传染病。笔者以杂交瘤技术研制抗AIV共同抗原的特异单克隆抗体,旨在建立一种双抗体夹心ELISA方法快速检测AIV,以便为A型AIV的快速诊断技术的研究提供理论依据。1材料与方法1.1材料病毒。H9亚型AIV株(AIV-H9)、新     

面对禽流感,养殖场应做些什么

禽流感病是由禽流感病毒引起的一种禽类疾病综合症,当前亚洲流行的禽流感病是高致病性的H5N1病毒株引起的。在抗击“非典”之后的又一场战斗中,位于第一线的禽类养殖场面临严峻的考验。1禽流感H5N1病毒株简介1.1病原学A(H5N1)是1959年首次从苏格兰鸡中发现的一种禽流感病毒,可感染多种禽类,并能引起家禽的瘟疫。1997年3～5月间,在香港的一次3个鸡场的禽流感暴发中,鸡的死亡率达70%～100%。通过对来自7例禽流感患者的A(H5N1)抗原和基因分析显示,该7株病毒均含有禽流感病毒的8个基因片断,将首例禽流感患儿的A(H5N1)与1997年3月从新界死…     

抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体研究

利用禽流感H9亚型病毒(AIV-H9)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经免疫荧光试验(IFA)检测,以研制抗禽流感病毒(AIV)单克隆抗体。结果获得了5株特异性抗AIV核蛋白(NP)的单克隆抗体细胞株,分别命名为AIV-NP-2C3、AIV-NP-6A5、AIV-NP-3H9、AIV-NP-7B4、AIV-NP-2H4。这5株单克隆抗体能与所有试验的AIV-H9病毒反应,Western blotting方法鉴定结果表明,单克隆抗体仅识别60 ku的蛋白抗原,而不与新城疫病毒、禽网状内皮组织增殖症病毒、传染性法氏囊病毒等反应。初步应用结果显示,以这些单克隆抗体建立的间接免疫荧光试验或ELISA方法可迅速检测出禽流感病毒,这些单克隆抗体在禽流感的预防监测中将发挥重要的作用。     

聚焦高致病性禽流感

引起禽流感(M)的病原为禽流感病毒(AIV)，该病毒属正粘病毒科流感病毒属。要根据流感病毒核蛋白(NP)和基质蛋白(M)抗原性的不同，将其分为A、B、C三个血清型；其中A型可见于人、禽和其它一些哺乳动物中。根据其血凝素HA和神经氨酸酶NA抗原性差异，又可将其分为不同的亚型和9种特     

一步法复合RT-PCR鉴别ND强毒与AI病毒的研究

根据新城疫病毒(NDV)融合蛋白和禽流感病毒(AIV)核蛋白的核酸序列设计2对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156 bp和219 bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT-PCR.试验中未能检出弱毒力NDV,IBV,IBDV,REV,REOV及SPF鸡肌肉组织的RNA,从不同年代分离的16个NDV强毒株全为阳性而NDV弱毒株全为阴性.经验证,复合引物与单一引物的扩增效率一致,能够检出NDV和H5亚型AIV的最低病毒量分别为103.7EID50和103.9EID50.试验结果表明,此次建立的一步法复合RT-PCR特异、敏感,适用于强毒力NDV和AIV感染的快速鉴别.     

AIV、NDV和安卡拉病毒多重PCR检测方法的建立及应用

【目的】建立鉴别禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)和安卡拉病毒(FAV-4)的多重PCR检测方法。【方法】根据GenBank已登录的AIV的M基因、NDV的F基因和FAV-4的Hexon基因序列,设计合成了3对特异性引物。提取3种病毒DNA/RNA,通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。应用建立的多重PCR方法对67份临床病料进行检测,并将其结果与已建立的单重PCR检测结果进行比较。【结果】成功建立了能快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,该方法特异性良好,对传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡痘病毒(FPV)、鸡马立克病病毒(MDV)的扩增结果均为阴性;敏感性较强,能检测出的NDV、FAV-4和AIV最低核酸质量浓度分别为24.3,30.4和28.0pg/μL。多重PCR方法临床病料的检测结果与单重PCR检测结果一致。【结论】建立的AIV、NDV和FAV-4多重PCR检测方法方法可以用于临床上3种病原的鉴别诊断。     

禽流感病毒H5,H7,H9亚型多重RT-PCR检测方法的建立

依据GenBank中亚洲流行株禽流感病毒(AIV)H5,H7,H9亚型血凝素基因及M基因序列保守区域设计特异性引物,利用多重反转录聚合酶链式反应技术建立了AIV及H5,H7,H9亚型的检测方法.该方法能一次性检测出AIV保守区域M基因的同时,直接区分H5,H7,H9亚型.对新城疲病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒等特异性检测均为阴性.样品经100倍稀释后仍能检出.     

表达禽流感病毒血凝素基因的重组禽痘病毒的构建

 为构建表达禽流感病毒 ( AIV)血凝素 ( HA)基因的重组禽痘病毒 ,将禽痘病毒启动子LP2 EP2驱动的 H7亚型 AIV HA基因 c DNA和大肠杆菌 Lac Z基因插入禽痘病毒疫苗株 F- 0 1 7的复制非必需区。经蓝斑筛选后 ,对重组病毒又进行了 3次蚀斑克隆。以不同代次重组禽痘病毒核酸为模板 ,利用 H7亚型 AIV HA基因特异的引物进行聚合酶链式反应 ,均扩增出 1条特异的1 .7kb DNA条带。收集不同代次的重组禽痘病毒细胞培养物进行免疫斑点试验 ,均检测到 HA蛋白 ,表明 H7AIV HA在重组禽痘病毒中获得了成功表达。该重组禽痘病毒的构建为 AIV病毒活载体疫苗的研制奠定了基础     

一步法多重RT-PCR禽流感病毒分型诊断法的建立与应用

根据禽流感病毒(AIV)的M基因序列设计合成了1对AIVM基因的通用诊断引物AMDI／AMD2,针对H5N1、H9N2两种亚型的HA基因分型设计合成了2对分型诊断引物H15D1／H5D2,H9D1／H9D2。采用一步法多重RT-PcR技术建立了一种禽流感病毒快速分型诊断方法,并对其特异性和灵敏度进行验证。结果表明,该诊断方法速度快,一般只需要28～30 h即可鉴定出结果,比病毒分离鉴定(5～7 d)至少缩短4～6 d;特异性强,试验组53株AIV全部扩增出与预期同样长度的目的条带,与病毒分离及血清学鉴定方法的检测结果完全一致。对照组中新城疫病毒(NDV)、减蛋综合征病毒(EDS76V)、传染性支气管炎病毒(IBV)均未扩增出特异性基因条带,;灵敏度高,试验组将AIV接种SPF鸡胚,培养后的鸡胚尿囊液(AAF)进行10-2稀释后,仍可以检测到其中的AIV。