苦马豆素抗血清治疗山羊甘肃棘豆中毒的血清学和免疫学指标评价

通过检测苦马豆素抗血清治疗山羊甘肃棘豆中毒的血清学和免疫学指标,评价苦马豆素抗血清对山羊疯草中毒的治疗效果。将18只山羊随机分为对照组(A组,6只)、攻毒治疗组(B组,6只)和攻毒组(C组,6只),其中B、C组山羊于第1天拌精料饲喂甘肃棘豆草粉,开始攻毒剂量为10 g/(kg.d);C组山羊(第55天)出现死亡时停止攻毒。攻毒后第21天,B组山羊颈部肌肉注射苦马豆素抗血清,每只山羊每次0.25 mL/(kg.d),连续注射4 d。各组山羊于攻毒前进行第1次采血,以后每隔7 d采血1次,共采血8次。结果显示,攻毒后第7天,B、C组山羊AKP活性和AMA活性分别上升和下降,且均与A组差异极显著(P<0.01);第14天,B、C组山羊血清LDH活性明显高于A组(P<0.05);第21天,B、C组山羊的E-玫瑰花环率明显低于A组(P<0.05)。对B组山羊注射苦马豆素抗血清,治疗后(第28天)首次检测结果显示,B组山羊AKP、AMA和BUN活性较C组均表现为差异极显著(P<0.01);第35天(第2次检测),B组山羊血清中苦马豆素浓度明显低于C组(P<0.01),而E-玫瑰花环率明显高于C组(P<0.05);第42天,B组山羊LDH活性显著低于C组山羊(P<0.05)。研究证实,苦马豆素抗血清能够有效治疗甘肃棘豆对山羊肝脏、心脏和肾脏等组织器官造成的损伤,可用于治疗山羊疯草中毒。     

苦马豆素人工抗原免疫家兔的安全性试验

【目的】试验通过分析苦马豆素人工抗原SW-BSA免疫家兔时对其机体肝功、肾功的影响,进行安全性评价。【方法】将18只家兔随机分为对照组(6只)、免疫Ⅰ组(6只)、免疫Ⅱ组(6只),免疫组依次进行首免和加强免疫,每次免疫前进行采血,分析血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、d-甘露糖苷酶(AMA)、肌酐(CRE)活性的变化,同时检测免疫组尿液和血液中有无苦马豆素,并观察家兔组织器官的形态学变化。【结果】免疫组与对照组的血清GOT、GPT、AKP、LDH、AMA、CRE差异均不显著(P>0.05),尿液和血液中均未检查出苦马豆素,镜检未见到家兔器官出现中毒现象。【结论】合成的人工抗原SW-BSA对家兔具有较好的安全性。     

家兔苦马豆素多克隆抗体的制备及其对小花棘豆中毒的治疗效果

采用合成的苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原免疫接种家兔,获得高效价的SW抗血清,分离纯化得到的家兔SW多克隆抗体,复制家兔小花棘豆中毒模型,用SW多克隆抗体治疗小花棘豆中毒家兔,通过检测血清生化指标和免疫学指标,评价SW多克隆抗体治疗家兔小花棘豆中毒的效果。将18只家兔随机分为对照组(6只)、攻毒组(6只)和攻毒治疗组(6只),攻毒组和攻毒治疗组按照10g/(kg·d)的剂量饲喂小花棘豆,攻毒组试验兔出现死亡时(第70天)停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW多克隆抗体,每只兔每天1mL,连续注射4d。以攻毒试验开始为第0天进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW质量浓度显著高于对照家兔(P0.05);第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔(P0.05),血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔(P0.05);第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU浓度显著高于对照组家兔(P0.05)。攻毒治疗组家兔注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性,BUN、CRE、GLU浓度和SW质量浓度较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E-玫瑰花环率显著上升。说明,SW多克隆抗体可有效治疗家兔小花棘豆中毒。     

奶山羊冰川棘豆中毒的血液生化指标研究

将10只杂种奶山羊随机分为试验组(n=5)和对照组(n=5),分圈饲养,试验组羊按10 g/kg.d剂量饲喂冰川棘豆粉.试验前及试验后的第7、14、21、28、35、42 和4 9天各采血一次,分离血清,测定生化指标.结果表明,试验组羊血清碱性磷酸酶(AKP)活性从试验的第7天起持续升高;从试验的第14天起, 血清谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶( LDH)活性,尿素氮(BUN)含量明显高于对照组;在试验第35～49 d,血清淀粉酶活性持续升高,与对照组比较差异显著(P＜0.05或P＜0.01);从试验的第7天起,血清α-甘露糖苷糖(AMA)活性迅速降低,整个试验期内与对照组比较差异极显著(P＜0.01);而血清谷丙转氨酶(GPT)无明显变化.说明冰川棘豆对心、肝、肾、脑等器官有一定毒害作用, 冰川棘豆中含有吲哚兹啶生物碱.     

SW-BSA偶联率对小鼠免疫原性的影响

【目的】探讨合成苦马豆素人工抗原(SW-BSA)的不同偶联率对小鼠免疫原性的影响,筛选合成SW-BSA的最佳偶联率。【方法】苦马豆素(Swainsonine,SW)和载体牛血清白蛋白(BSA)分别以20∶1,30∶1,40∶1和50∶1的比例化学合成4种SW-BSA(分别为AgA、AgB、AgC和AgD),用紫外分光光度法分别测定SW与BSA的偶联率;分别用AgA、AgB、AgC和AgD免疫小鼠,免疫3次后,间接ELISA试验检测血清效价。【结果】合成的4种SW-BSA的偶联率分别为14.7,20.2,25.3和32.6;AgA、AgB、AgC和AgD各组免疫小鼠的血清抗体效价分别为214,>215,215和213,4种SW-BSA均能刺激小鼠产生高效价抗体,其中AgB组的抗体效价最高,与其他各组相比差异显著(P<0.05),AgA组和AgC组间差异不显著(P>0.05)。【结论】4种不同偶联率的SW-BSA对小鼠均具有较好的免疫原性,其中以偶联率为20.2的SW-BSA(AgB)的免疫原性最高。     

绵羊宽苞棘豆中毒时四项血清生化指标的变化

将宽苞棘豆粉按10g／kgBW／d量从胃疾管给10只绵羊投服,试验羊在第16～18d出现中毒症状,尤以第25～30d出现症状严重。整个试验期间血清AKP、GOT活性及BUN含量比试验的显著升高。LDH指标与试验前相比较无明显变化。     

SW人工抗原的合成与鉴定

【目的】探索高效苦马豆素(SW)人工抗原SW-BSA的合成方法。【方法】设计新的技术路线,合成SW人工抗原制备的关键中间产物SW-对甲基苯甲酸,并进行波谱分析。应用EDC法将SW-对甲基苯甲酸分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)连接,制备免疫抗原SW-BSA和包被抗原SW-OVA,通过小鼠免疫试验检测所合成的SW-BSA的免疫原性。【结果】合成的SW-对甲基苯甲酸的结构与预期目标产物一致;合成的SW-BSA可刺激小鼠产生针对SW的抗体;通过薄层层析技术可对反应进程进行即时检测。【结论】SW-BSA人工抗原合成成功,该人工抗原具有良好的免疫原性。     

甘肃棘豆中产苦马豆素内生真菌的分离与鉴定

【目的】确定甘肃棘豆中是否存在产生苦马豆素(SW)的内生真菌。【方法】对甘肃棘豆的内生真菌进行分离,应用薄层色谱法和气相色谱-甲基化--αD-甘露糖苷内标法分别对菌丝中SW进行检测,筛选可生成SW的疯草内生真菌;通过形态学观察,应用聚合酶链反应对5.8S rDNA-ITS序列进行扩增,并对扩增序列进行分析,构建系统发育树,对其进行种属分类。【结果】筛选出1种可以产生SW的甘肃棘豆内生真菌FEL3,气相色谱内标法测得其菌丝中SW含量为400.52μg/g。根据形态学、5.8S rDNA-ITS序列分析结果和文献报道,确定FEL3为埃里格孢属真菌。【结论】甘肃棘豆中存在生成SW的内生真菌Embellisiasp.FEL3。     

蛋鸡抗IBV HI抗体效价与攻毒后产蛋性能的相关性

【目的】研究抗呼吸型IBV HI抗体水平与蛋鸡产蛋率的对应关系。【方法】将180只SPF鸡分为4组,第1组和第2组首免用鸡传染性支气管炎H120活疫苗免疫,1羽份/只,4周后采血,第2组鸡同时用3批次的鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+HN6株)分别进行加强免疫,试验同时设置攻毒对照第3组和不免疫攻毒对照第4组。灭活疫苗免疫4周后,当产蛋率稳定在80%以上时,对试验鸡采血测定抗体,同时使用M41株病毒进行攻毒,记录攻毒后4周内各组鸡的产蛋性能,分析抗IBV HI抗体水平与攻毒后产蛋性能的相关性。【结果】弱毒活疫苗和灭活疫苗联合免疫组抗IBV HI抗体水平在2-8.2~2-9.3时,免疫鸡能够耐受IBV强毒的攻击,其产蛋性能不受影响。弱毒活疫苗免疫组抗体为2-4.8,产蛋量下降了12.69%。攻毒对照组抗体水平为2-2.0,攻毒后产蛋量下降45.22%。【结论】蛋鸡抗IBV HI抗体效价与产蛋率对鸡传染性支气管炎强毒的攻毒保护之间呈正相关,可以用HI抗体检测来评价鸡传染性支气管炎灭活疫苗对产蛋鸡的免疫效果。     

小花棘豆对和田羊血液生化指标影响

将12只和田羊随机分为3组,即对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组.试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别按10和20g·kg-1·d-1剂量饲喂小花棘豆干粉,饲喂至典型临床症状出现为止.攻毒前及攻毒后每隔7d采血1次,检测和田羊血液生化指标变化.结果表明,与正常对照相比,试验组和田羊血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性极显著上升,α-甘露糖苷酶(AMA)活性极显著下降;血清中尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)含量均高于对照;甘油三酯(TG)和白蛋白(ALB)含量低于对照.结果表明,小花棘豆中毒对和田羊血液生化指标有显著影响,并呈现出一定时间和剂量效应关系,小花棘豆对和田羊心、肝、肾等器官有一定毒害作用.     

和田羊小花棘豆中毒与血液生化指标的相关性研究

为了探讨和田羊血清生化指标与小花棘豆中毒(Oxytropis glabra DC Poisoning,OgP)的关系,为和田羊小花棘豆中毒的诊治提供依据。分别以6只小花棘豆中毒和田羊与8只正常和田羊为研究对象,检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-甘露糖苷酶(AMA)活性以及尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和极低密度脂蛋白(VLDL-C)含量。采用t检验对两组资料进行差异显著性比较后,再采用简单相关分析方法对各指标与小花棘豆中毒的关系进行分析。结果表明：与正常对照相比,小花棘豆中毒家兔血清的AST、ALT、AKP、LDH、BUN、CR、GLU、TC、GLO、LDL-C和VLDL-C值升高,AMA、TG、ALB值下降,部分组间差异显著或极显著(P＜0.05或P＜0.01),TP和HDL-C含量差异不显著(P＞0.05)。与小花棘豆中毒相关的主要因素有AMA、GLU、LDH、AKP、TG、CR,并建立回归方程：OgP=0.681-0.073AMA+0.055GLU+0.036LDH+0.041AKP。血清AMA、GLU、LDH、AKP、TG和CR对和田羊小花棘豆中毒的早期诊断、治疗、疗效观察和转归判断具有重要意义。     

山羊甘肃棘豆中毒临床病理学研究

每天以10g/kg的剂量,经瘤胃瘘管给山羊甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis)粉,20d后受试羊(n=8)陆续出现与自然病例相同的中毒症状,中毒羊血清碱性磷酸酶、谷草转氨酶、精氨酸酶、肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶活性和尿素氮含量明显升高,尿低聚糖及其中甘露糖含量明显升高,血清α-甘露糖苷酶活性和E-玫瑰花环形成率明显下降,脑脊液乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、肌酸磷酸激酶活性明显升高。表明甘肃棘豆对山羊脑、肝、肾、心和其他脏器有不同程度的损害作用,并能降低机体细胞免疫功能,其有毒成分属于吲哚兹定生物碱。     

长丝鲈5种组织中相关酶的测定

[目的]测定了长丝鲈5种组织中与免疫学和病理学相关酶的活性。[方法]以购自小汤山水产养殖基地的17尾健康长丝鲈为试材,鲈鱼体重194.42-295.74g,体长19.24-21.10cm,检测了长丝鲈脑、肝、肌肉、肠和鳃5种组织中的谷胱甘肽硫转移酶（GST）、过氧化氢酶（CAT）、转氨酶（GOT、GPT）、乳酸脱氢酶（LDH）和磷酸酶（ACP、AKP）的活性以及脂质氧化产物（MDA）的含量。[结果]长丝鲈脑组织中7种酶的活性大小为LDH〉GST〉GPT〉GOT〉CAT〉AKP〉ACP;肝组织LDH〉CAT〉GST〉GPT〉GOT〉AKP〉ACP;肌肉组织LDH〉GST〉GPT〉GOT〉CAT〉AKP〉ACP;肠组织LDH〉GST〉AKP〉ACP〉GPT〉GOT〉CAT;鳃组织LDH〉GST〉AKP〉ACP〉CAT〉GPT〉GOT。长丝鲈5种组织中,丙二醛的含量高低依次为鳃〉脑〉肠〉肌肉〉肝。[结论]该研究为长丝鲈免疫学和病理学等方面的研究提供基础理论数据。     

羊草结构日粮对五龙鹅血浆酶活性的影响

以4种等能量等蛋白的羊草粉结构日粮饲喂18月龄五龙鹅,测定鹅血浆中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、胆碱酯酶(CHE)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并将其与纤维消化率、钙(Ca)和磷(P)的表观消化率、蛋氨酸(Met)和胱氨酸(Cys)的表观消化率进行相关性分析比较。试验结果表明,随着羊草粉比例的增加,AKP活性呈显著性降低(P<0.05)的趋势,并与粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)消化率呈显著负相关(P<0.05),与Ca、Met和Cys的表观消化率呈显著正相关(P<0.05);其它五种酶的活性与CF、NDF、ADF消化率及Ca、P、Met、Cys表观消化率相关不显著(P>0.05)。     

Effect of Different Proportions of Leymus chinensis in Diet on Plasma Enzymes Activities of Wulong Geese

Eight-month-old Wulong geese were fed with the diet with different proportions of Leymus chiesensis at the same energy and protein level. The activities of plasma Alkaline Phosphatase （AKP）, Acid Phosphatase （ACP）, Choline Esterace （CHE）, Lactic Dehydrogenase （LDH）, Glutamicoxalacetic Transaminase （GOT） and Glutamatepyruvate Transaminase （GPT） were determined and then their correlations with fiber digestibility and the apparent digestibility of Ca, R Met and Cys were analyzed. The results showed that the activity of AKP took on a significant downtrend as the increasing of Leymus chinensis proportion （P〈0.05）. There was a negative correlation between the AKP activity and the digestibility of crude fiber （CF）, neutral detergent fiber （NDF） and acid detergent fiber （ADF） （P〈0.05）. However, there was a significant positive correlation between the AKP activity and the apparent digestibility of Ca, Met and Cys （P〈0.05）. Moreover, the activities of the other five enzymes had no significant correlation with the digestibility of CF, NDF, ADF, and the apparent digestibility of Ca, Met and Cys （P〉0.05）.     

苜蓿结构日粮对鹅血浆酶活性的影响

本试验以含8种等能量等蛋白的不同苜蓿粉配比的结构日粮饲喂3月龄鹅。测定鹅血浆中碱性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）、胆碱酯酶（CHE）、肌酸激酶（CK）、脂肪激酶（LPS）、谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GET）和乳酸脱氢酶（LDH）的活性，并将其与纤维消化率、钙（Ca）表观消化率、蛋氨酸（Met）和胱氨酸（Cys）的表观消化率进行相关性分析比较。试验结果表明，随着苜蓿粉比例的增加，鹅血浆中的AKP活性呈显著性升高的趋势（P=0．005），并与粗纤维（CF）、中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）消化率呈显著负相关忙0．02，0．04，0．03），与Ca消化率呈极显著正相关（P=0．007）；其他7种酶的活性与CF，NDF，ADF消化率．Ca，Met，Cys表观消化率呈弱相关。