利用RAPD标记鉴定豌豆栽培品种(P.sativum)和野生种(P.fulvum)

随机扩增多聚链ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）是基于聚合酶反应链（ＰＣＲ）的扩增反应。笔者应用ＲＡＰＤ技术区别Ｐ．ｓａｔｉｖｕｍ和Ｐ．ｆｕｌ－ｖｕｍ１２个品（种）系,并估测这些品（种）系之间的遗传多样性,用１２个１０－ｍｅｒ核苷酸引物扩增出１６８条染色带。估测遗传类型中遗传相似性是基于扩增产品中成对方法比较,遗传树的构建是利用无重量成组方法的平均数（ＵＰＭＧＡ）进行的。７个Ｐ．ｓａｔｉｖｕｍ栽培品种和５个Ｐ．ｆｕｌｖｕｍ材料群集为截然不同的两大组。ＲＡＰＤ的应用将为育种提供豌豆种间遗传关系资料。ＲＡＰＤ－ＰＣＲ鉴定出的物种特殊的强染色体带可以发展为稳定的物种特殊标记用于基因渗入研究。     

家蚕Y，Nl~1基因和Z染色体的RAPD分子标记研究

利用ＲＡＰＤ技术，对转座黄血（Ｗ~Ｙ）系统Ｙ０１０、Ｘ射线诱发染色体缺失的第１无半月纹Ｎｌ~１系统，伴性赤蚁油蚕（Ｚ~（ｓｃｈｏｄ）Ｚ~（ｓｃｈｏｄ））与７８２（Ｚ~（＋＋）Ｗ）的Ｐ_１、Ｐ_２及Ｆ_１、ＲＦ_２进行了多态性分析。结果表明，通过６０、１２０和２０５个随机引物的扩增，获得了与Ｗ~Ｙ连锁的ＯＰＧ－０３_（６５０）与Ｎｌ~１连锁的ＯＰＡ－０８_（４８０）和与Ｚ￣（＋＋）连锁的３个ＲＡＰＤ标记，初步讨论了ＲＡＰＤ技术在家蚕分子标记寻找研究上的可行性和应用前景。     

福建稻瘟菌群体遗传多样性RAPD分析

以ＯＰＧ、ＯＰＨ、ＯＰＫ等３个系列６０个引物对福建稻瘟菌进行了ＤＮＡ随机扩增多态性（ＲＡＰＤ）分析,６０个引物中有２１１个扩增出多态性条带,表明福建省曙菌群体有丰富的ＲＡＰＤ多态性,可为该菌的遗传分析提供大量的遗传标记,对ＲＡＰＤ条带多样性分析发现龙岩江山病圃稻瘟菌群体遗传多样性较简单,有明显优势种群可能影响其抗瘟评定的代表性较说明多点进行品种抗性理必要的。     

鸡IL-1βcDNA片段的克隆及序列分析

本文以鸡外周血单个核细胞总 Ｒ Ｎ Ａ 为模板,据已报道的８ 种哺乳动物 Ｉ Ｌ—１β核酸序列保守区设计合成１ 对引物,反转录合成ｃ Ｄ Ｎ Ａ 链,经 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增,回收扩增后的 Ｄ Ｎ Ａ 片段,用ｋｌｅｎｏｗ 酶处理,与 Ｐｕ ｃ１ ９ ／ Ｓｍ ａ Ｉ 连接构成重组质粒,转化宿主菌大肠杆菌 Ｊ Ｍ１ ０ ９ ,筛选出含有插入片段的重组质粒,用 Ｐ Ｃ Ｒ 及酶切分析鉴定,结果表明获得了带有鸡 Ｉ Ｌ－ １β片段的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆;再经序列分析测定,得知此片段长为２７０ｂｐ ,与人及小鼠 Ｉ Ｌ—１β基因核苷酸序列同源性分别为４５ ％ 和３０ ％ 。     

家蚕Y,Nl基因和Z染色体的RAPD分子标记研究

利用ＲＡＰＤ技术，对转座黄血（Ｗ＾Ｙ）系统Ｙ０１０，Ｘ射线诱发染色缺失的第１无半月纹Ｍｌ系统，伴性赤蚁油蚕（Ｚ＾ｓｃｈｏｄＺ＾ｓｃｈｏｄ）与７８２（Ｚ＾＋＋Ｗ）的Ｐ１，Ｐ２及Ｆ１，ＲＦ２进行了多态性分析，结果表明，通过６０、１２０和２０５个随引物的扩增，获得了与Ｗ＾Ｙ连锁的ＯＰＧ－０３６５０与Ｎｌ＾ｌ连锁的ＯＰＡ－０８４８０和Ｚ＾＋＋连锁的３个ＲＡＰＤ标记，初步讨论了ＲＡＰＤ技术在家蚕分子标记寻找     

棉药黄萎病菌致病类型及其分子指纹分析

对２０个大丽轮枝菌菌株的致病性进行了测定和ＲＡＰＤ指纹扩增,完成了供试菌株致病类群与其ＲＡＰＤ指纹组间的相关性分析。结果表明,根据２０个菌株对５个棉花品种的抗感反应及其平均病情指数分为４种不同的致病类群;用１０个随机引物对２０个菌株进行ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增,产生９２条ＤＮＡ带（其中５１条为多态带）;用计算机进行聚类分析,２０个供试菌株聚类为９个ＲＡＰＤ指纹组。相关性分析表明,致病类群与ＲＡＰＤ指纹     

苦竹类植物RAPD分析及其系统学意义

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术,分析了苦竹类植物中产于日本的大明竹Ｐｌｅｉｏｂｌａｓｔｕｓ ｇｒａｍｉｎｅｕｓ（Ｂｅａｎ）Ｎａｋａｉ、、长苦竹Ｐｌ．ｓｉｍｏｎｉｉ（Ｃａｒｒ．）Ｎａｋａｉ,中国产的苦竹Ｐｌ．ａｍａｒｕ（Ｋｅｎｇ）Ｋｅｎｇｆ．、宜兴苦竹Ｐｌ．ｙｉｘｉｎｇｅｎｉｓ Ｃｈｕ ＆Ｃｈａｏ、斑苦竹Ｐｌ．ｍａｃｕｌａｔｕ（ＭｃＣｌ．）Ｃｈｕ＆Ｃｈａｏ。采用２０个引物（１０ｂｐ）进行扩增出的ＤＮＡ片段,用于种间遗传相似性分析。结果表明：（１）苦竹与宜兴苦竹关系密切;（２）大明竹与其它４种关系较远;（３）形态为分上将中、日产苦竹分成两类没有得到ＲＡＰＤ分析的支持。     

RAPD鉴别稻瘟病菌生理小种的研究

】采用１６种不同的引物对３株典型的稻瘟病菌（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅｇｒｉｓｅａ）菌株ＺＡ１,ＺＧ１和Ｍ１进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明,从杂草马塘与水稻分离的菌株,基因组的差异很大,很容易通过ＲＡＰＤ鉴别这两种不同来源的稻瘟病菌菌株。自水稻分离的菌株,ＲＡＰＤ扩增产物相似性较高,但仍然能够检测出不同生理小种ＤＮＡ带型的差异,证明ＲＡＰＤ可用于稻瘟病菌生理小种的快速鉴别。     

甜瓜种质RAPD体系的优化研究

研究了不同ＤＮＡ提取方法的护增效果。采用Ｌ９（３＾４）正交试验设计,快速、有铲地确定了适合甜瓜的最佳扩增条件（包括ｄＮＴＰ、引物、Ｍｇ＾２＋和ＴａｐＤＮＡ聚合酶等浓度的最佳组合）。并通过试验确定了省时的ＲＡＰＤ－ＰＣＲ反应程序。最终得到了一个重复性好、清晰度高、较理想的甜瓜ＲＡＰＤ技术体系。     

健康鸵鸟(1～6月龄)38项血清生化参数的测定

建立健康鸵鸟（Ｓｔｒｕｔｈｉｏｃａｍｅｌｕｓ）的血清全套生化参数,采用日本岛津ＣＬ ７２００型全自动生化分析仪,对３０只１～６月龄健康鸵鸟３８项血清生化参数进行测定．结果如下：（１）血清蛋白参数／ｇ·Ｌ－１：ＴＰ３１．８２,ＡＬＢ１５．４１,ＧＬＯ１６．１８（ＡＬＢ／ＧＬＯ０．９５）,Ａｐｏ Ａ１０．１２,Ａｐｏ Ｂ０．１４（Ａｐｏ Ａ１／Ａｐｏ Ｂ０．８０）;（２）血清酶参数／ｕ·Ｌ－１：ＡＬＴ１４．３,ＡＳＴ４５６．８（ＡＬＴ／ＡＳＴ０．３８）,ＧＧＴ３．４,ＬＤＨ１６０３．１,ＣＫ３９３６．８,ＣＫ ＭＢ１４３０．８,ＡＭＹ３４１５．１,ＡＫＰ５７１．７,ＨＢＤＨ３７３．３;（３）血清糖、蛋白质、脂类及其代谢产物参数／ｍｍｏｌ·Ｌ－１：ＧＬＵ９．４１,ＴＲＩ１．９７,ＢＵＮ０．９４,ＬＤＬ２．１９,ＨＤＬ１．５４,ＣＨＯ３．５８（ＨＤＬ／ＣＨＯ０．４１）;ＣＲＥ１２．６５μｍｏｌ·Ｌ－１（ＢＵＮ／ＣＲＥ０．０６３）,ＵＡ５０５．２４μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＡ３７．１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＩＬ５．３２μｍｏｌ·Ｌ－１,ＤＢＩＬ３．２１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＩＢＩＬ２．０８μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＴＴ４．１２ｕ;（?     

小粉瘤菌遗传多样性的研究

用30个随机引物对来自不同地区的2份小粉瘤菌（Lycogala exiguum）样品进行RAPD扩增。结果表明：所研究的小粉瘤菌的2个样品存在广泛的遗传多样性。     

含笑属RAPD反应条件优化及遗传多态性分析

[目的]确立含笑属植物RAPD反应的最优条件,确定7种含笑属植物的亲缘关系。[方法]采用改进的CTAB法提取木兰科含笑属7种植物叶总DNA,进行RAPD分析,分别研究了模板DNA、引物、dNTP、Mg;^2＋和Taq DNA聚合酶用量对RAPD反应的影响。[结果]RAPD最优反应体系为：反应体积20μl,内含125ng模板DNA,0．3μmol／L引物,0．5U Taq聚合酶,1．5mmol／L MgCl2,0．1mmol／L dNTP,2μl 10x buffer。应用Nei距离法计算各种间的相似系数,采用UPGMA法进行聚类分析,7种含笑种可分为3大类,[结论]筛选的最佳RAPD反应条件可为含笑属植物的分类和遗传多样性分析提供理论依据。     

韩国果园菌根真菌的遗传特性

运用现代分子技术对分离于韩国果园中的共生真菌进行了鉴定,经显微观察及PCR-RAPD分析可将收集菌株分为不同组群。不同植物、不同真菌的共生反应类型不同,所有采集的真菌分离株均能刺激果树根的生长,有时甚至能刺激兰属温带果树茎干的生长。5种真菌的18s rDNA序列经BLAST软件分析,证明它们分属于3个组,其中有2个种;葡萄丝粒菌及内生丝核菌可以确定,基于18 s rDNA树状分枝图与植物反应类型的不同相一致,但与PCR-RAPD多态性分析结果不同,韩国当地春兰分离株与严重的土传病害丝核菌及镰刀菌不同,这种不同可通过不同引物的PCR-RAPD技术进行鉴别。     

新疆刺山柑居群的RAPD多态性研究

用CTAB法提取了新疆3个不同居群刺山柑（Capparis spinosa L．）总DNA,使用RAPD技术对其进行多态性的研究。从93种随机引物中筛选出3种扩增较稳定的引物,来扩增3个不同居群刺山柑总DNA,共扩增出25条带,每种引物扩增出6～10条带;多态性条带共13条,多态性比例为52％。利用DPS软件所做的统计分析和聚类分析结果表明,3个群居间相似系数在0．69～0．86之间,平均相似系数为0．76;可聚成2类：阿克陶和乌鲁木齐居群刺山柑可聚为A类;吐鲁番居群刺山柑可聚为B类,他们彼此间的遗传变异较小。     

Analysis of Genetic Diversity in Cultivated and Wild Tomato Varieties in Chinese Market by RAPD and SSR

RAPD and SSR were applied to assess genetic diversity in 61 tomato varieties from different species （Solanum lycopersicum L., hirsutum. Humb L., pimpinellifolium Miller L., chilense Dun. L., chmielenskii L., peruvianum Miller L., parvuflorum Miller L.）. 2 062 and 869 clear fragments were amplified by RAPD and SSR, respectively. On the other hand, more polymorphic products were found by SSR as compared to RAPD, i.e., 100 and 43.84%, respectively. In addition, a higher value of the average similarity coefficient and lower PIC value were reflected in RAPD （0.79, 0.407） compared to SSR （0.56, 0.687）. It can be inferred that SSR was a higher effective marker than RAPD to assess genetic diversity in tomato accessions. Similarly, the genetic base of tomato varieties in Chinese market was narrow. It is suggested that wild tomato varieties should be used to enrich the genetic base of the cultivated tomato varieties.     

RAPD Analysis of Germplasm Resources of Kudingcha Species in Oleaceae

The random amplified polymorphic DNA marker （RAPD） was applied to detect the genetic relationships and diversity among 21 germplasm materials of Kudingcha species in Oleaceae, which involved 8 species, i.e., Ligustrum robustum （Roxb.） Blume, L. henryi Hemsl., L. japonicum Thunb, L. japonicum Thunb. var. pubscens Koidz, L. lucidum Ait., L. pedunculare Rehd, Osmanthus masumuranus Hayata, and L. delavayanm Hariot. 20 RAPD primers selected were applied for the amplification on the 21 germplasm materials mentioned above. 427 bands were obtained, and the percentage of polymorphic bands （PPB） was 97.7%. The genetic similarity coefficients （GS） ranged from 0.1522 to 0.8322 with an average of 0.5466. There was a significant genetic difference among germplasm materials of Kudingcha species in Oleaceae, and UPGMA cluster based on the GS of RAPD could distinguish all test germplasm materials clearly and indicated the relationship of the 8 species mentioned above, all of which indicated that RAPD markers could be used for the studies of genetic diversity and relationship and classification of germplasm resources of Kudingcha species in Oleaceae. Analysis results of RAPD showed that L. japonicum Thunb. var. pubscens Koidz has closer genetic relationship with L. pedunculare Rehd and further genetic relationship with L. japonicum Thunb. among all tested species. The authors suggest that further research is needed to study whether L. japonicum Thunb. var. pubscens Koidz should be classified into a variata of L. japonicum Thunb, or should be considered as an independent species. The analysis results supported that L. pururascens Y. C. Yang should be combined into L. robustum （Roxb.） Blume.     

3种黄鳝遗传多样性分析

为更好地保护和开发利用黄鳝资源,从40个随机引物中选取30个重复性好、扩增稳定的随机引物,应用RAPD技术对黄鳝属中产自缅甸的山黄鳝、印度尼西亚的穴黄鳝、中国黄鳝的DNA进行遗传多样性分析。共检测到315个位点,3种黄鳝种群间的多态位点比例为85．08％,遗传多样性指数为0．1575．DPS2003种群遗传分析软件包分析显示,3种黄鳝种群间的遗传距离为0．7103,相似度系数为0．2897,表明3种黄鳝都具有较高的遗传变异．     

基于磁性微球的基因组核酸提取及其在中药材真伪鉴别和亲缘关系分析中的应用

为从分子水平上对中药材质量进行控制,基于磁性微球对中药材核酸进行纯化及后续生物鉴定,采用磁分离技术提取高纯度的核酸模板,以高磁响应性、粒径均一的超顺磁性四氧化三铁微球为固相载体,在聚乙二醇和氯化钠等的协同作用下,对根、茎、叶、花、果实、种子类中药材基因组核酸进行提取;分别提取丹参和柴胡的基因组核酸,并对其进行聚合酶链式反应扩增(PCR)和随机扩增多态性分析(RAPD),用于对丹参的真伪鉴别和对柴胡进行亲缘关系分析.结果表明:经提取,获得了纯度较高(OD260 nm/OD280 nm介于1.6~2.0)的中药材核酸模板;通过扩增叶绿素rpl16基因片段,可有效鉴别丹参及其伪品牛蒡;采用3个有效随机引物,可从基因水平上分析4个柴胡品种的亲缘关系远近     

葡萄属植物种质资源遗传多样性的RAPD分析

以起源于中国的野葡萄12个种23个株系、欧美杂种6个品种、河岸葡萄3份、15个欧洲葡萄品种共47份材料为试材,采用RAPD技术对葡萄属植物种质资源遗传多样性进行研究。从520个随机引物中获得16个多态性好的引物用于RAPD分析,共获得DNA条带258个,其中多态性条带186个,DNA条带大小介于100~3 500 bp之间。应用STATISTICA获得了47份葡萄材料树谱图,供试材料可分为6类。欧洲葡萄、欧美葡萄杂种、河岸葡萄与中国野葡萄亲缘关系较远。在中国野葡萄中,山葡萄与其他种亲缘关系较远,刺葡萄次之。     

国产菱属植物亲缘关系的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对国产菱属(Trapa L.)植物10个种16个样品的遗传变异进行了研究.从50个10碱基随机引物中筛选出18个多态性引物用于正式扩增,共扩增出205条DNA带,其中多态性带为165条,占79.5%.根据DNA扩增结果计算了菱属各种间的Nei's遗传一致度和遗传距离,并采用UPGMA构建了聚类树状图.根据RAPD分析的聚类结果,结合野外观察和形态学性状的聚类分析我们建议:(1)将国产菱属植物划分为3个种,即欧菱(T.natans L.)、野菱(T. incisa Sieb. et Zucc.)和细果野菱(T. maximowiczii Korsh.);(2)除细果野菱外,其余2个种中果实角的数目均有从四角转变为二角的,所以把角刺数目作为菱属种间划分的主要依据这一点值得商榷;(3)欧菱、丘角菱可能是栽培菱的野生种或近缘种;(4)细果野菱为现存菱属中最原始的种.