猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)的制备及免疫效力评价

本研究将猪伪狂犬病毒双基因缺失毒株(JS-2012-△g I/g E株)用0.15%的甲醛灭活后,与赛彼科公司MONTANIDE ISA201VG佐剂进行乳化,制备成猪伪狂犬病灭活疫苗。为了评价灭活疫苗的免疫效力,15头14日龄的健康仔猪(猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒Ⅱ型抗原和抗体均为阴性)随机分成3组,每组5头。第一组猪颈部肌肉接种猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)每头2 m L,接种后28 d,第一组和第二组同样方式同等剂量接种猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株),第三组猪作为对照。第二次免疫后d 28,三组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012第5代强毒,每头105.0TCID50/2 m L。攻毒后0~14 d,每日测量体温并记录临床症状。通过抗体检测和保护效率来评价猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)免疫效力。结果表明,两次免疫(第一组)PRV g B抗体水平明显高于一次免疫(第二组),两次免疫提供了更好的保护效力。     

猪伪狂犬病的诊断及预防

正猪伪狂犬病主要是由伪狂犬病毒所引发的。而最近几年又出现了新型的一种伪狂犬病的病毒变异株。伪狂犬病病毒的存储宿主是猪,但是其他的家畜可以受到感染,感染后的主要症状是仔猪出现顽固性腹泻、公猪繁殖机能低下、母猪繁殖出现配种障碍、妊娠母猪流产、仔猪神经症状、成年猪会出现严重的上呼吸道的感染症状等。猪场一旦发生伪狂犬病,唯一的处理办法就是紧急接种猪伪狂犬病灭活疫苗。猪伪狂犬病原本是属于一种疱疹类的病毒     

猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株)免疫产生期和免疫持续期的研究

为评价猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)的免疫保护效力,本研究对3批疫苗分别进行免疫产生期试验和免疫持续期试验。免疫产生期试验中将3批疫苗以单剂量免疫仔猪,在免疫后2、3、4、5、6 d连同对照组分别攻击伪狂犬病强毒,结果表明猪伪狂犬病活疫苗免后5 d即可产生坚强的免疫保护力。免疫持续期试验中将3批疫苗以单剂量免疫母猪,免疫后12、14个月连同对照猪分别攻击伪狂犬病强毒,结果显示免疫母猪及其所产仔猪均健康存活,表明猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株)的免疫持续期可长达14个月。     

某猪场猪伪狂犬病免疫程序优化对比试验

为了探究保育猪不同伪狂犬病免疫程序的免疫效果,笔者采取4种不同免疫程序进行试验,即4组猪群于35日龄首免和70日龄二免:A组分别免疫接种伪狂犬病弱毒疫苗和灭活疫苗;B组分别接种伪狂犬病灭活疫苗和弱毒疫苗;C组均接种伪狂犬病灭活疫苗;D组分别接种伪狂犬病弱毒疫苗,接种方式和剂量均按照说明书进行。于试验前(25日龄)和试验后(100日龄)应用ELISA法分别检测不同组别的猪群伪狂犬病毒g E和g B抗体水平水平,确定阳性率差异。结果显示:免疫程序A和B可以均能有效控制猪群伪狂犬病野毒的进一步流行,降低猪群的死亡率,但免疫程序B无法使猪群伪狂犬病得到净化,而免疫程序C和D均无法抑制伪狂犬病毒野毒的流行。因此,选择免疫程序A对于防控与净化伪狂犬病毒的发生与流行效果最好。     

实验室检测在规模化猪场伪狂犬病免疫程序调整中的应用

为了对福建宁德某规模化猪场伪狂犬病免疫程序进行调整,应用ELISA法对待配后备母猪、繁殖母猪(怀孕40d母猪、怀孕70d母猪和哺乳母猪)、公猪以及60日龄、90日龄、120日龄和160日龄商品猪血清同时进行猪伪狂犬病gE和gB抗体检测,以掌握不同阶段猪伪狂犬病野毒的感染情况并制定适合本场的猪伪狂犬病免疫程序。免疫程序调整以后的检测结果显示:通过对不同猪群伪狂犬病疫苗程序的调整,商品猪后期和待配后备母猪伪狂犬病野毒感染为阴性,说明目前场内采用实验室检测调整伪狂犬病免疫程序的方法是科学的。     

猪链球菌病灭活疫苗（2型，HA9801株）的研制（Ⅲ）——疫苗安全性研究

本试验采用实验室研制的3批猪链球菌病灭活疫苗(2型,HA9801株),批号200501、200502、200503,分别用猪进行单次超剂量免疫、多次单剂量免疫、对不同日龄猪单剂量免疫、怀孕母猪单剂量单次免疫试验,以及用Bal/c小鼠和兔进行安全性试验,证实该疫苗对猪及Bal/c小鼠、兔是安全的。     

猪五大病毒性疫病免疫预防(二)

<正>(接上期)3猪伪狂犬病发病症状为妊娠母猪流产、产死胎或弱仔,新生仔猪出现神经症状且死亡率高,生长育肥猪出现呼吸道症状。对猪伪狂犬病以免疫为本。3.1伪狂犬疫苗伪狂犬疫苗分灭活疫苗和活疫苗,活疫苗又分自然基因缺失活疫苗和人工基因缺失活疫苗。猪伪狂犬病灭活疫苗(鄂A株)灭活前效价指标为107.5TCID50/mL;伪狂犬活疫苗     

猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗（LA-A株）的最小免疫剂量和制品保存期的研究

本研究将伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株(PRV AH02LA株)的gE基因缺失株(LA-A株)接种BHK-21细胞,经纯悬浮培养制备抗原,甲醛灭活后制备油乳剂灭活疫苗,并确定该灭活疫苗的最小免疫剂量和效力检验方法,以及在2~8℃保存期。结果显示:猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗(LA-A株)的效力检验方法为以2.0 mL(抗原含量108.20TCID50)接种4~5周龄PRV阴性健康仔猪,颈部肌肉注射,间隔28 d以相同剂量和方法加强免疫,加强免疫后第21 d,免疫猪血清PRV抗体中和指数应不低于10000,攻毒保护率应不低于80%;最小免疫剂量为1.0 mL(抗原含量107.90 TCID50);制品保存期:在2~8℃保存期为18个月。该研究结果为新型疫苗的研制提供了重要的试验依据。     

山东省某规模猪场猪伪狂犬病毒变异毒株的分离与鉴定

2015年山东省烟台市某免疫伪狂犬病疫苗Bartha-K61猪场暴发疑似伪狂犬病疫情,临床表现为妊娠母猪繁殖障碍,仔猪神经症状。脑组织病料样品接种BHK21细胞,分离获得1株伪狂犬病病毒(PRV),命名为PRV-YT株。该病毒株gE基因与JS-2012、HN1201和ZJ01株序列同源性为99.4%～99.8%,且位于同一遗传进化分支。选择70日龄PRV阴性健康猪接种PRV-YT株,发病率和死亡率均达100%(5/5),均表现严重脑组织、肝脏与肺脏损伤,表明PRV-YT株为猪伪狂犬病病毒变异强毒株。本研究为制定猪伪狂犬病防控方案提供了重要基础。     

伪狂犬净化技术及其难点解析

生猪患有伪狂犬病后,会导致繁殖障碍,怀孕母猪则会导致流产、死胎,给养殖场户造成巨大的损失。在这种情况下,认真做好猪伪狂犬病净化工作显得尤为重要。基于此,本文着重对猪伪狂犬病的净化技术及工作难点进行了探讨分析。     

伪狂犬病基因缺失疫苗株(SA215)生物学特性研究

测定了伪狂犬病gE^-／gI^-／TK^-／LacZ^ 基因缺失疫苗株(SA215)的致细胞病变效应、安全性、免疫原性和接种动物抗体消长规律等生物学特性。试验结果显示，该疫苗株能在Vero细胞上适应生长，并形成典型的蚀斑。其对1日龄仔猪、妊娠母猪、牛、羊以及家兔安全，无不良接种反应，接种动物不向外散毒。SA215疫苗接种猪能抵御高剂量(10’PFU)Fa株强毒感染，攻毒后试验猪的发热期、增重受阻天数、散毒滴度略低于Bartha株疫苗接种猪，低于对照组猪。SA215接种猪能维持长时间的高水平中和抗体滴度。试验结果表明，SA215株是一株安全、免疫原性好的疫苗株。     

猪伪狂犬病病毒NP株的分离鉴定

2013年下半年,福建某免疫接种过猪伪狂犬病疫苗(Bartha)的规模化猪场大批妊娠母猪发生流产、新生仔猪发生共济失调的神经症状,疑似为猪伪狂犬病病毒感染发病症状,为确定发病原因,从该猪场疑似伪狂犬病病毒感染的仔猪脑、肝脏和肺脏中分离到一株未知病毒,PCR检测及测序比对鉴定为猪伪狂犬病病毒,并将分离的病毒命名为NP株。用Reed-Muench法测定分离株病毒的组织细胞半数感染量(TCID50)为10-9.13/0.1mL,动物攻毒试验出现猪伪狂犬病病毒感染的典型症状。试验结果表明,成功分离到一株猪伪狂犬病病毒毒株,为研究福建省猪群伪狂犬病病毒分子流行病学奠定基础。     

规模猪场猪伪狂犬病的净化研究

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的多种动物共患传染病．可引起仔猪大量发病死亡，母猪流产、死胎等繁殖障碍，育肥猪生长发育缓慢，经济损失惨重。为净化规模猪场的猪伪狂犬病，试验采用综合性的净化措施，除淘汰病猪及抗体检测阳性猪、加强饲养管理等技术措施外，采用猪伪狂犬病弱毒疫苗免疫试验，结果母猪一次免疫合格率为90．74％，仔猪二免后的免疫合格率为94．44％。     

猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)最小免疫剂量测定

为了确定猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)的最小免疫剂量,本研究将25头14日龄仔猪(猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型病原抗体均为阴性)随机分成5组,每组5头。第1~4组分别接种猪伪狂犬病灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)0.5、1、2、3 m L/头,免疫28 d后各组参照第1次免疫的剂量分别加强免疫1次,第5组实验猪不做处理作为阴性对照。免疫后,每周采集各组猪血清检测抗体水平。待第2次免疫28 d后,5组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012株第5代强毒2 m L,含病毒105.0TCID50/头。结果表明:第1次免疫后14 d,第2~4组猪PRV g B抗体全部转为阳性,而第1组猪在第1次免疫后21 d全部转阳。攻毒后,第1组有1头猪发病,表现精神沉郁、厌食和轻微神经症状,其余4头猪有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为80%;第2~4组,实验猪只有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为100%;第5组猪在攻毒后48 h,体温迅速上升到41℃以上,并表现为明显的精神沉郁、厌食和神经症状,发病率为100%,死亡率为40%。由此确定猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)最小免疫剂量为1 m L/头。     

两种猪伪狂犬病毒基因缺失疫苗产前免疫母猪对仔猪抗体水平的影响

试验选择广东某规模化猪场怀孕母猪30头及其所产仔猪30头用进口猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(B苗)和国产猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(A苗)进行免疫试验.结果表明:各组母猪产前10 天免疫接种后20～30 d的母猪抗体水平接近或达到峰值,其所产仔猪10～60 d获得的母体抗体恰巧达到最佳.根据母猪产仔时抗体水平及其后代母源抗体维持时间的关系,建议母猪产前20～30 d为猪伪狂犬病病毒加强免疫接种的适宜时间,仔猪60日龄为适宜的首免时间;使用B苗和A苗免疫对母猪产前免疫是必要的,有利于控制带毒母猪猪伪狂犬病病毒野毒的排放,降低感染其他猪只的机会,提高仔猪保护率.     

猪伪狂犬病的危害性及其净化措施

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的一种常见传染病。在临床上,该病可导致母猪繁殖障碍（怀孕母猪流产、早产等）;哺乳仔猪出现顽固性腹泻和脑神经症状;保育猪出现脑神经症状和死亡;中大猪出现呼吸道症状等,对我国养猪业影响很大。近年来,随着猪伪狂犬病基因缺失苗的推广应用,该病得到有效控制,但仍然是猪场的常见病和多发病,不易在猪场中净化。为此,笔者参考有关文献并结合在副食品基地猪场长期进行该病净化工作的实践,     

猪伪狂犬病的科学预防与治疗

猪伪狂犬病(Porcine Pseudorabies, PRV)是一种引发神经系统功能障碍的病毒性传染病,主要危害妊娠期母猪和哺乳期仔猪,母猪感染后表现繁殖障碍,仔猪则以神经症状为主要表现,病死率高;预防本病需对易感猪群科学接种疫苗,加强全场综合消毒工作,提升猪场生物安全管理水平;目前猪伪狂犬病尚无特效化学药物能够治疗,病猪可通过对症用药来降低病死率。     

检测猪伪狂犬病毒和猪Ⅱ型圆环病毒复合PCR方法的建立及其应用

猪伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudo rabies Virus,PRV)引起的猪的一种以发 热及脑脊髓炎为主要症状的急性传染病.猪Ⅱ型圆环病毒( PCV-2)是由Allan等[1] 首次从病料中分离获得,该病毒可引发猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS) [2] 、 猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、新生仔猪先天性脑震颤(CT)、增生性坏死性肺炎(PNP)以及怀孕母猪的繁殖障碍等.     

猪伪狂犬病的防治

猪伪狂犬病是伪狂犬病病毒(ADV)引起的猪的一种病毒性传染病.猪的感染因年龄不同症状有所区别,小猪以中枢神经症状为特征,呈现非化脓性脑炎;断奶猪及育肥猪以呼吸系统症状为主;怀孕母猪表现流产、死胎、木乃伊胎.     

对一起母猪流产诊治的体会

近期,我场发生了一起母猪流产的疫情,一个星期内有25头母猪流产,经诊断为猪伪狂犬病和猪弓形体病混合感染,经过及时治疗,制止了疫情的扩大。1　发病情况流产母猪以怀孕60～90天龄的居多,经产和初产母猪均有发生,流产前没有表现明显的临床症状。母猪群的免疫情况是猪伪狂犬病疫苗仅在产前25天接种1头份,其余的疫苗均按常规注射。2　诊断采集流产母猪血送广东省农科院兽医研究所,做了如下检查:(1)用ＩＤＥＸＸ公司的试剂盒对母猪血清进行猪伪狂犬病野毒抗体的测定,结果25头中有20头为阳性,阳性率达80%。(2)把流产母猪血涂片,甲醇固定后用姬姆…