德州驴盲肠菌群测序分析

旨在研究健康德州驴盲肠菌群分布及代谢功能。以健康德州驴盲肠内容物为检测样品,提取细菌总DNA,通过Illumina MiSeq高通量测序分析德州驴盲肠中菌群分布特点,结合PICRUSt基因预测方法分析菌群代谢功能。测序分析结果表明,在3份检测样品中共得到176 869条有效序列和39 566个OTU。Alpha多样性指数分析结果表明,3份样品的Shannon指数均大于7,样品中菌群多样性水平较高。菌群分类学组成分析结果表明,在门分类水平上相对丰度排名前10的细菌门为厚壁菌门、拟杆菌门、疣微菌门、螺旋体门、纤维杆菌门、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门、TM7菌门、柔膜菌门、蓝藻菌门。此外,在相对丰度排名前20的菌属中与纤维分解与代谢相关的菌属所占比例达到了35%。菌群代谢功能分析结果表明,盲肠菌群参与机体多种代谢活动,其中参与碳水化合物代谢、氨基酸代谢、能量代谢的菌群丰度相对较高。研究结果为探索德州驴肠道菌群分布与消化特点之间关系提供了理论依据。     

德州驴朊病毒基因克隆与序列分析

根据已报道正常哺乳动物朊蛋白(PrP)基因序列设计引物,采用PCR法扩增了德州驴的PrP基因,将其克隆到T-Vector。序列测定及分析表明所克隆的德州驴PrP基因片段为767 bp,该基因内无内含子,包含了驴PRNP完整编码区序列,编码256个氨基酸的前体蛋白,推测其分子量约34 ku。通过对德州驴朊病毒核苷酸和氨基酸序列与其他7种动物的比较,我们发现有3个区域变异较大,分别与种属屏障和潜伏期有关。经推测驴的PrP基因型是ARQ型,对羊痒病中度敏感,但是至今没有马属动物感染羊痒病的报道。这为TSE种间传播的突破提供了基础数据。     

“德州驴”的保护与开发

德州驴是我国著名的优良畜种．其具有体格高大、结构匀称、外形美观、耐粗饲、抗病力强、出肉率高、役肉兼用的特点。本文通过对德州驴的特点、现状和发展前景的调查分析,提出了德州驴保护与开发的几点建议。     

“德州驴”的保护与开发

德州驴是我国著名的优良畜种,具有体格高大,结构匀称,外形美观,耐粗饲,抗病力强,出肉率高,役肉兼用的特点。本文通过对德州驴的特点、现状、发展前景的调查分析,提出了德州驴保护与开发的几点建议。     

驴肌肉与脂肪组织中脂肪酸与胆固醇含量的分布规律

试验旨在研究德州驴肌肉及脂肪组织中的脂肪酸和胆固醇含量的分布规律。试验选取8头德州驴进行屠宰,采集背最长肌、股二头肌、臂三头肌及臀肌和皮下脂肪、大网膜脂、肠系膜脂及肾脂,分析不同部位的肌肉与脂肪组织中脂肪酸和胆固醇含量的分布规律。结果显示,股二头肌、臂三头肌、臀肌中含有较高的不饱和脂肪酸(UFA)、n-6多不饱和脂肪酸(PUFA)含量及U/S、P/S。皮下脂肪、肠系膜脂中含有较高的UFA含量。皮下脂肪中含有较高的n-3PUFA、n-3LCPUFA含量。驴的肌肉和脂肪组织中C16∶0、C18∶2n6c、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、PUFA、n-6PUFA具有相似的分布范围,分别为21%~26%、19%~21%、31%~39%、33%~44%、21%~29%、19%~22%。脂肪组织的C18∶1n9c、C18∶3n3、n-3PUFA及U/S、P/S均高于肌肉组织,但脂肪组织中C20∶5n3、C22∶6n3和n-6/n-3低于肌肉组织。胆固醇含量在不同的肌肉组织或脂肪组织间无显著性差异(P>0.05)。     

驴乳脂肪酸组成与人乳及牛乳的分析比较

本研究以驴乳为研究对象,采用气相色谱法分析测定了其脂肪酸组成,分析比较了驴乳、人乳和牛乳的脂肪酸成分.驴乳中不饱和脂肪酸达到62.9%,牛乳以饱和脂肪酸为主.约占68.0%.驴乳的脂肪酸组成与人乳比较接近,是一种优质的脂类资源.     

影响德州驴精液品质的因素分析

为了分析影响德州驴精液品质(冻精与鲜精)的因素(采精员、季节、个体间),选取22头4~8岁德州种公驴,对其2015和2016年采精与冻精生产数据、配种数据进行统计分析。结果显示:不同采精员按照采精常规操作对精液品质无显著影响(P0.05);不同季节对射精量有较大影响,4月份射精量最低;个体间射精量和冻精活力差异较大,精液密度与鲜精活力差异不明显,但精液密度会随射精量发生变化;2015年公驴精液品质个体间差异较大,受孕率也普遍低于2016年。提示:生产中应针对性地改善精液品质,进一步提高人工授精成功率。     

黄花菜茎叶混贮挥发性脂肪酸含量分析

为探讨黄花菜采摘后地上茎叶与玉米秸秆、柠条粉按不同比例混贮后挥发性脂肪酸含量,试验选取采摘后黄花菜地上茎叶分别与玉米秸秆和3年树龄6月份平茬的柠条粉。黄花菜秸秆与玉米秸秆和柠条粉均按9∶1(1组)、7∶3(2组)、6∶4(3组)、5∶5(4组)、4∶6(5组)、3∶7(6组)、2∶8(7组)、1∶9(8组)混合。按2.67 g/kg添加纤维素酶,包膜混贮45 d。结果显示,黄花菜与玉米秸秆混贮,试验2组粗蛋白含量最高,为8.7 g/100 g;试验3组乳酸含量极显著高于其他各组(P<0.01),pH值极显著低于试验8组以外的其他各组(P<0.01),为各组中最优;试验4组氨态氮含量极显著高于其他各组(P<0.01);试验6组乙酸含量显著高于试验5组(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);试验1组丙酸含量极显著高于其他各组(P<0.01);试验2组丁酸含量极显著高于其他各组(P<0.01);试验1组异戊酸含量极显著高于试验3、4、5、6、7组(P<0.01)。黄花菜与柠条混贮,试验7组粗蛋白含量最高,为9.08 g/100 g;试验2组乳酸含量极显著高于试验1组以外的其他各组(P<0.01);试验1、2、5组pH值极显著低于其他各组(P<0.01);试验5组氨态氮含量极显著高于其他各组(P<0.01);试验3组乙酸含量极显著高于其他各组(P<0.01);试验7组丙酸含量极显著高于其他各组(P<0.01);试验4、7组异丁酸含量极显著高于其他各组(P<0.01);试验7组丁酸含量极显著高于试验4组以外的其他各组(P<0.01);试验7组异戊酸含量极显著高于试验3、6组(P<0.01)。研究表明,黄花菜与玉米秸秆混贮中试验2组粗蛋白、挥发性脂肪酸含量较优,黄花菜与柠条混贮中试验7组粗蛋白、挥发性脂肪酸含量较优。生产中黄花菜茎叶与柠条按2∶8混贮,可以提高青贮中粗蛋白、挥发性脂肪酸的含量,同时降低饲料成本。     

德州驴心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的克隆及序列分析

本试验对德州驴心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因进行了克隆测序,并与GenBank中11个物种相应基因编码区核苷酸序列、氨基酸序列进行了比对分析,同时通过最小进化法(ME法)、邻接法(NJ法)和非加权组平均法(UPGMA法)对H-FABP基因编码区核苷酸序列进行了物种间分子系统进化树分析。结果表明,德州驴H-FABP基因由4个外显子和3个内含子组成,外显子1、2、3、4大小分别为73、173、1025、7 bp,内含子1、2、3大小分别为3500、1980、1425 bp。CDS序列全长为405 bp,前体氨基酸数为134个;德州驴与马、野猪、人、牛、山羊、牦牛、大鼠、小鼠、红原鸡、绿头鸭、斑马鱼各物种在H-FABP基因编码区核苷酸序列上有较高的保守性,同源性大小分别为96.79%、91.36%、89.14%、88.89%、88.89%、88.64%、84.07%、83.46%、75.80%、74.81%、67.90%;3种方法构建的物种间分子系统进化树基本一致,并且3种分子进化树结果与动物学分类一致,表明H-FABP基因适合于构建不同物种间的系统进化树。     

FAD3基因编辑小鼠内脏重量、肌肉中脂肪酸组成与含量以及盲肠菌群分布

为了解析外源基因的转入对动物生长特性、组织中脂肪酸含量和肠道菌群分布的影响,该研究以FAD3基因编辑小鼠为试验组,以BDF1小鼠为对照组,在相同条件下饲养至45日龄处死,检测两组小鼠体重、各器官重量、肌肉中不饱和脂肪酸含量,并利用PCR-DGGE方法在16S rDNA的V₃领域检测小鼠盲肠菌群分布。结果显示,FAD3组小鼠肝脏重量显著（P<0.05）低于对照组,其他各内脏器官重量和体重两组均无显著（P>0.05）差异。FAD3组小鼠肌肉中n-6多不饱和脂肪酸（PUFAs）含量低于对照组,但无显著（P>0.05）差异,而n-3 PUFAs含量显著（P<0.05）高于对照组。两组小鼠盲肠菌群分布个体差异大,未观测到明显的组间差异,Anaerotaenia torta为共同的优势菌,而Flavonifractor plautii可能为FAD3组小鼠特有菌。该试验结果提示,外源基因FAD3的引入对小鼠生长性能和盲肠菌群的影响较小,可提升肌肉中n-3多不饱和脂肪酸含量。     

乌头驴与三粉驴骨骼肌中miRNAs的表达鉴定与分析

试验旨在分析microRNAs （miRNAs）在德州驴骨骼肌中的表达情况,探讨小RNA （small RNA）在驴骨骼肌发育中的调控机制。采集德州驴2个品系（乌头驴和三粉驴）的背最长肌组织,构建乌头驴背最长肌（WB）和三粉驴背最长肌（SB）的small RNA测序文库并进行测序,运用生物信息学技术对WB和SB之间差异表达的miRNAs进行分析,预测和解析可能影响驴产肉性状的miRNAs,从中挑选了6个表达量较高的miRNAs,利用实时荧光定量PCR技术来验证测序结果的准确性。结果表明,在WB和SB文库中分别鉴定出保守miRNAs有982和1 149个,新miRNAs有106和143个。在WB与SB比较组中基于条件|log₂（fold_change）|≥2、P≤0.05获得17个差异表达的miRNAs,其中表达量上调的有5个,下调的有12个。通过GO注释,发现差异表达的miRNAs显著富集于调控细胞迁移分化、细胞分裂和骨骼肌细胞收缩等生物学过程（P<0.05）,并且挖掘到与驴骨骼肌发育相关的bta-miR-378d_L+1R-1_1ss22CA、bta-miR-378d_R-2,其靶向NPY1R、GPR152、BEST1、KCNH8、SPAG9等多个基因。KEGG富集结果表明,miRNAs富集于Wnt、MAPK、泛素蛋白水解系统等与骨骼肌发育相关的信号通路中,其中在Wnt信号通路中共涉及到17个差异表达miRNAs的207个靶基因,尤其以PC-5p-84483_31、hsa-miR-186-3p_R-3和cfa-miR-329b_1ss19CT的靶基因最多。实时荧光定量PCR结果与miRNAs测序结果一致,并发现除eca-miR-181b外,其他5个miRNAs在SB中的表达水平均高于WB。本研究首次对驴骨骼肌miRNAs进行转录组学分析,揭示了乌头驴和三粉驴miRNAs的表达差异,研究结果为阐明德州驴骨骼肌生长发育的分子调控机制提供参考。     

小黑麦干草替代羊草对德州生长驴生产性能和血液指标的影响

为研究小黑麦(Triticale Wittmack)干草在德州生长驴上应用的可行性,本试验选取11月龄(150±10)kg的德州公驴25头,随机分为5组,按粗饲料日采食量一致设置小黑麦干草和羊草(Leymus chinensis)饲喂比例(其中小黑麦干草饲喂比例依次为：0%,25%,50%,75%,100%),测定了德州生长驴的生产性能和血液指标,并结合线性回归模型确定小黑麦干草的适宜饲喂量和饲喂比例。结果表明：小黑麦干草替代羊草对德州生长驴生产性能和血液抗氧化指标具有显著影响;75%组平均日增重显著高于0%,25%组(P<0.05),料重比显著低于0%,25%组(P<0.05);0%组超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)活性显著高于75%,100%组(P<0.05);25%,75%,100%组谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GPX)活性显著高于0%组(P<0.05)。综上所述,小黑麦干草可以替代羊草在德州生长驴上应用,以干物质计算,11月龄(150±10)kg的德州生长驴小黑麦干草适宜饲喂量为...     

Effects of Composite Deodorant on Growth Performance,Immune Organ Index,Digestive Tract pH,Volatile Fatty Acid and Microflora in Cecum of Broilers

The experiment was conducted to study the effects of composite deodorant with different supplemental levels on growth performance,immune organ index,intestinal tract pH value,contents of volatile fatty acid and microflora in cecum of broilers. A total of 900 14-day-old healthy AA broilers were randomly assigned to 5 groups (groups Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ and Ⅴ) with 6 replicates per group and 30 broilers per replicate. The experimental treatments were divided as follows:The broilers in group Ⅰ(control group) were only fed basal diet.0.5‰,1.0‰,2.0‰,3.0‰ composite deodorant were added in groups Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ and Ⅴ,respectively. The experiment lasted for 28 days. The results showed as follows:The index of immune organ in group Ⅴ were the highest. The index of spleen and bursa increased by 37.74%,18.40% than that of control group on 28 days,respectively. The change of intestinal tract pH in group Ⅱ were the largest. pH value of ileum and cecum were significantly lower by 1.04,0.79 than that of control group (P<0.05),respectively. Compared with the control group,the contents of acetic acid,butyric acid and propionic acid in group Ⅲ were significantly reduced by 41.74%,35.96%,30.56% on 28 days old (P<0.05),respectively. The contents of acetic acid and butyric acid in group Ⅴ were significantly reduced by 38.04% and 44.52% on 42 days old (P<0.05),respectively. The numbers of Lactobacillus from cecum in treatment groups were more than that of control group,while the numbers of E.coli were less than that of control group. In conclusion,treatment groups could reduce the contents of volatile fatty acids obviously,improve the environment of digestive tract,enhance the immune organ index and there was no significant negative effect in improving growth performance. Considering all of the results,it was calculated that the broilers diet with 1‰ composite deodorant was the most appropriate.     

饲粮中添加果寡糖对初产母猪生产性能,血清指标及粪便 pH、微生物菌群数量和挥发性脂肪酸含量的影响

本试验旨在研究果寡糖对初产母猪生产性能,血清指标及粪便pH、微生物菌群数量和挥发性脂肪酸含量的影响。挑选体重相近、健康、妊娠80 d的初产母猪30头,随机分为对照组和果寡糖组,每组5个重复,每个重复3头母猪。对照组母猪饲喂基础饲粮,果寡糖组母猪从妊娠第85天开始,在基础饲粮中添加0.3%的果寡糖,至17 d的泌乳期结束。结果表明：母猪妊娠后期饲粮中添加0.3%果寡糖,1)显著提高了母猪妊娠后期和哺乳期采食量(P<0.05),极显著提高了健仔率、仔猪断奶重和平均日增重(P<0.01),而对产程、总产仔数、活仔数、活仔率和初生重无显著影响( P>0.05)。2)显著提高了母猪血清总蛋白、球蛋白含量及白蛋白/球蛋白( P<0.05),对血清白蛋白、葡萄糖、尿素氮、铁、铜和锌含量无显著影响(P>0.05);显著提高了仔猪血清中铁、铜含量(P<0.05)。3)显著降低了母猪粪便中pH和大肠杆菌数量(P<0.05),显著增加了粪中乙酸、丙酸和丁酸的含量( P<0.05)。由此表明,母猪妊娠后期饲粮中添加0.3%的果寡糖,可提高母猪粪便中挥发性脂肪酸的含量,降低pH,调节肠道微生物菌群,进而提高母猪和仔猪生产性能。     

复合除臭剂对肉鸡生长性能、免疫器官指数、消化道pH、盲肠挥发性脂肪酸和盲肠菌群的影响

试验旨在通过在基础日粮中添加不同水平的复合除臭剂,研究其对肉鸡生长性能、免疫器官指数、消化道pH、盲肠挥发性脂肪酸和盲肠菌群的影响。选用1日龄健康爱拔益加肉雏鸡900只,随机分成5组,每组6个重复,每个重复30只鸡。Ⅰ组为对照组仅饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为试验组,分别在基础日粮中添加0.5‰、1‰、2‰和3‰的复合除臭剂,预试期14 d,试验期28 d。结果显示,Ⅴ组免疫器官指数最高,28日龄的脾脏指数和法氏囊指数分别比对照组提高37.74%、18.40%。Ⅱ组肠道pH降低效果最明显,回肠和盲肠部位pH分别比对照组降低1.04、0.79（P<0.05）。Ⅲ组28日龄的乙酸、丁酸、丙酸含量分别比对照组降低41.74%、35.96%、30.56%（P<0.05）;Ⅴ组42日龄的乙酸、丁酸含量分别降低38.04%、44.52%（P<0.05）。各试验组盲肠乳酸杆菌数量均高于对照组,大肠杆菌数量均低于对照组。综上所述,日粮中添加复合型除臭剂,能明显降低盲肠挥发性脂肪酸的产生,改善消化道内环境,同时对免疫器官指数的提高有一定的促进作用,对生长性能无显著影响。综合考虑,该复合除臭剂在肉鸡基础日粮中的适宜添加比例为1‰。     

动物产品中多不饱和脂肪酸和其他脂肪酸含量变化及其影响因素

肉、蛋、奶等动物产品和肉、奶制品是单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)的重要来源.因此,提高肉及肉制品、蛋、奶及奶制品中不饱和脂肪酸(UFA)含量有助于提高全民健康水平和生活质量.本文主要对目前富含PUFA的动物产品质量及影响动物产品中PUFA成分和含量的饲粮、动物性别和年龄及基因类型等因素做一简要综述,以期为在生产实践中开发相关技术和产品提供理论参考依据.     

噬菌体对断奶仔猪生长性能、肠道内容物pH、挥发性脂肪酸含量和二糖酶活性的影响

本研究旨在探讨噬菌体对断奶仔猪生长性能、肠道内容物pH、挥发性脂肪酸含量和二糖酶活性的影响。试验采用单因素试验设计,选用120头遗传背景相似、健康状况良好、胎次接近、初始体重为(7.35±0.03)kg的25日龄断奶仔猪,随机分为4个组,每组5个重复,每个重复6头仔猪。4组仔猪分别饲喂对照饲粮[添加50 mg/kg奎烯酮(有效含量25 mg/kg)和75 mg/kg金霉素(有效含量11.25 mg/kg)]及添加200、400和600 mg/kg噬菌体的饲粮。试验21 d后,屠宰取样,测定肠道内容物pH、挥发性脂肪酸含量及二糖酶活性。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加400、600 mg/kg噬菌体可显著提高仔猪全期增重(P<0.05),随着饲粮中噬菌体添加量的提高,仔猪全期增重呈显著线性和二次曲线变化(P=0.001和P=0.003)。而且400、600 mg/kg噬菌体组仔猪腹泻指数也显著低于对照组与200 mg/kg噬菌体组(P<0.05),随着饲粮中噬菌体添加量的提高,仔猪腹泻指数呈显著线性和二次曲线变化(P=0.024和P=0.015)。2)与对照组相比,饲粮中添加400 mg/kg噬菌体能够显著降低仔猪回肠pH(P<0.05)。3)与对照组相比,饲粮中添加400和600 mg/kg噬菌体显著提高了盲肠中乙酸、丁酸和总酸的含量(P<0.05),且随着饲粮中噬菌体添加量的提高,盲肠乙酸、丁酸和总酸含量呈显著线性和二次曲线变化(P<0.01和P<0.01,P=0.017和P=0.014,P<0.01和P<0.01);600 mg/kg噬菌体组盲肠中戊酸含量显著高于对照组和200、400 mg/kg噬菌体组(P<0.05),且丙酸含量显著高于200 mg/kg噬菌体组(P<0.05)。相比较于对照组,饲粮中添加400和600 mg/kg噬菌体显著提高了仔猪结肠中乙酸和总酸含量(P<0.05),随着饲粮中噬菌体添加量的提高,结肠乙酸含量呈显著先升高后降低的二次曲线变化(P=0.008)。而400 mg/kg噬菌体组仔猪结肠丁酸含量显著高于200和600 mg/kg噬菌体组(P<0.05)。4)与对照组相比,400 mg/kg噬菌体组仔猪十二指肠黏膜蔗糖酶和乳糖酶活性显著增加(P<0.05),十二指肠黏膜乳糖酶活性呈显著先升高后降低的二次曲线变化(P=0.029),空肠黏膜麦芽糖酶活性显著升高(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加噬菌体可提高仔猪的生长性能,降低腹泻指数,同时降低仔猪肠道内容物pH,提高肠道挥发性脂肪酸含量和二糖酶活性,改善仔猪肠道的消化吸收功能。     

动物产品中多不饱和脂肪酸和其他脂肪酸含量变化及其影响因素

肉、蛋、奶等动物产品和肉、奶制品是单不饱和脂肪酸（MUFA）和多不饱和脂肪酸（PUFA）的重要来源。因此,提高肉及肉制品、蛋、奶及奶制品中不饱和脂肪酸含量有助于提高全民健康水平和生活质量。主要对目前富含不饱和脂肪酸的动物产品质量及影响动物产品中不饱和脂肪酸成分和含量的饲粮、动物性别和年龄以及基因类型等因素作一简要综述,以期为在生产实践中开发相关技术和产品提供理论参考依据。