PCR检测炭疽杆菌的研究

以无毒炭疽芽孢苗(steme菌株)、Ⅱ号炭疽芽孢苗(pasteurⅡ菌株)、A16R菌苗(steme菌株)为试验茵，建立了检测炭疽芽孢杆菌质粒DNA的PCR方法。该方法特异性强，敏感性可达1131个菌／ml(无毒炭疽芽孢菌菌株)和1720个菌／ml(Ⅱ号炭疽芽孢菌菌株)。同时建立了可区分炭疽杆菌强、弱毒的多重PCR方法。     

人兽共患病—炭疽的综合防控

炭疽是一种古老的、急性、热性、败血性人兽共患传染病,严重危害公共卫生安全,我国将其列为二类动物疫病.炭疽主要临床表现为皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽、脑膜炭疽和炭疽败血症.近年,我国部分省份出现多起炭疽疫情,引起了社会的广泛关注.本文从炭疽的病原学特点、流行病学特点、临床特征、病理变化、诊断方法、预防和治疗措施6个方面进行了总结,希望对行业技术人员有所帮助.     

利用青霉素串珠试验来鉴定炭疽杆菌

<正>青霉素串珠试验,对鉴定炭疽杆菌是一种较好的方法,故常用来鉴定可疑炭疽杆菌。1炭疽杆菌与串珠试验(1)炭疽杆菌在普通肉汤或琼脂培养基上能繁殖成长链的长杆菌,炭疽杆菌的这种固有形态,主要是由于炭疽杆菌细胞最外一层比较厚而坚实的细胞壁所保持住     

炭疽沉淀反应中出现假阳性反应的实践体会

炭疽沉淀反应(Ascoli氏反应,下称炭沉反应),是把死于炭疽动物尸体组织的浸出液,与特异性炭疽沉淀血清重迭,二液接触面可产生灰白色致密线状沉淀环,这是诊断炭疽快速而简便的方法。尽管炭疽杆菌的抗原组成与其他许多有芽胞的杆菌相同,但炭疽杆菌以外的其他有芽胞杆菌,却不能在动物体内繁殖到组织内有大量的细菌抗原,因而炭疽沉淀反应仍是目前诊断炭疽疫病,     

吉尔吉斯坦国进境动物产品携带炭疽杆菌情况调查

采用新的炭疽培养分离方法，对１９９４年１０月１日～１９９５年３月２０日从吉尔吉斯坦国进境动物产品随机抽样６４８３份进行炭疽分离培养，从３份样品中分离出炭疽杆菌，结果表明吉尔吉斯为炭疽疫区，在进境动物产品中携带有炭疽杆菌的危险，须加强其检疫和管理。     

炭疽杆菌双毒力因子荧光PCR检测方法的建立及应用

由炭疽杆菌（Bacillus anthracis）引起的炭疽（anthrax）是严重危害人类和家畜健康的重大传染病。为了提高出入境口岸对不明粉未快件样品的查验效率,防范通过包裹夹带生化武器,本研究使用Taq Man探针技术,建立了针对炭疽杆菌两种毒力质粒pOX1和pOX2的双重荧光PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性和稳定性进行了试验。结果显示：本研究建立的炭疽杆菌双重荧光PCR检测方法具有较强的特异性,只特异性检出炭疽杆菌pOX1和pOX2,而与金黄色葡萄球菌等19种对照病原菌均无交叉反应;灵敏度与单重荧光PCR方法相近,最低检测限可达10 copies/μL;稳定性好,反应体系低温保存2、4、6、8个月后,检测阳性质粒的Ct值和峰值相差不大。应用该方法检测600份猪牛羊组织样本,均未检出炭疽杆菌阳性核酸。本研究建立的双重荧光PCR检测方法为炭疽杆菌的快速检测提供了技术支撑。     

行业动态

七省市被定为炭疽监测点为了解炭疽的疫情动态和流行规律,炭疽杆菌的地区分布、自然消长规律,规范和完善血清学、病原学及分子生物学的检测方法,卫生部2005年8月16日印发《全国炭疽监测方案(试行)》。《方案》提出开展全国常规监测和监测点的监测。根据全国发病形势,初步选择甘肃、内蒙古、辽宁、贵州、四川、重庆和青海七省(自治区、市)开展监测工作。各监测点除完成全国常规监测工作内容外,还需完成对可疑炭疽污染环境、血清学、毒力质粒和基因的PCR、炭疽芽胞杆菌遗传特征等的监测和了解动物间炭疽疫情信息。《方案》还包括炭疽流行病…     

炭疽杆菌快速串珠试验

炭疽杆菌串珠试验是鉴定炭疽杆菌的重要指标之一。有琼脂平板法和肉汤法。但其操作繁琐,而且需要9个小时以上报告结果。笔者在进行炭疽杆菌鉴定工作中,摸索出一种快速简便的方法,现报道如下。     

动物炭疽实验室诊断技术的研究进展

正炭疽是由炭疽杆菌(Bacillus anthracis)引发的一种急性、热性、败血性的人畜共患传染病,炭疽芽孢杆菌为革兰氏阳性菌。炭疽的研究者多从以下三个方面对炭疽疾病进行研究,即炭疽杆菌的基因组、炭疽杆菌的荚膜及炭疽杆菌的毒素。炭疽杆菌的基因组由染色体及两个大质粒(p XO1和p XO2)组成,这两个大质粒含有炭疽芽孢杆菌的两大毒力因子,即炭疽毒素、抗吞噬荚膜多肽的编码基因,美国基因组研究     

炭疽患畜的药物疗法

炭疽是由炭疽杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｎｔｈｒａｃｉｓ）引起的人畜共患传染病。常常是由炭疽杆菌及其芽孢严重污染土壤而酿成地方性流行。长期以来广泛应用抗生素制剂和抗炭疽血清治疗炭疽患畜 ,但在俄罗斯境内却仍然存在７０ %～８０%的炭疽患畜死亡的态势。经俄学者伊帕坚科等多年研究确认 ,由于抗生素制剂和抗炭疽血清应用设计不当而疗效欠佳。最近又提出新的论证和经验 ,兹予介绍。它对我国医治炭疽患畜具有宝贵的参考价值。１抗生素治疗炭疽的效果研究表明 ,应用抗生素制剂治疗炭疽患畜的效果 ,取决于其血液中含存的毒素和炭疽杆菌…     

几种动物传染病的卫生防控措施

1炭疽炭疽是由炭疽芽孢杆菌引起的人畜共患传染病,炭疽芽孢对环境抵抗力极强,一旦污染,传染性可保持若干年。本病呈地方流行,家畜食入被炭疽芽孢杆菌污染的饲料或水就可发病。防控措施是严禁牲畜到炭疽杆菌芽孢污染的地方放牧。禁止猪、牛、羊在圈外散养。对猪、牛、羊要注射无毒炭疽芽孢苗。炭疽灭活疫苗,每头牛皮下注射1毫升,每只羊皮下注射0.2毫升。     

炭疽芽孢杆菌的研究进展

炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)简称炭疽杆菌,可引起人畜共患传染病炭疽(Anthrax),该菌主要感染牛、羊等家畜,感染人的概率较低。近年来,我国许多地区均有炭疽病的发生,给我国养殖业带来了巨大的经济损失。文章主要就炭疽芽孢杆菌的生物学特性、毒力因子、致病机理、检测方法等进行综述,以期为该病的深入研究提供参考。     

畜间炭疽的流行与防控思考

炭疽是国际上高关注度的一种人畜共患急性传染病,严重危害公共卫生安全。人间炭疽多因接触携带炭疽病原或发病的动物引起,畜间炭疽流行病学资料与人间炭疽的统计报告相比较少,而人间与畜间炭疽具有密切的关联性。文章通过对近年来官方公布的人间、畜间炭疽发生的情况进行统计整理,对其流行形势、流行原因进行分析,同时提出防控建议,以期为畜间炭疽的防控提供参考。     

炭疽芽孢杆菌PCR鉴定方法的建立

根据炭疽芽孢杆菌3种特异性毒力基因的序列,包括保护性抗原基因(pag)、荚膜基因(cap)和S-层蛋白基因(sap),建立多重PCR鉴定方法。该方法检测11株炭疽芽孢杆菌均为阳性,检测29株非炭疽的其他需氧芽孢杆菌属菌株均为阴性。该方法检测模拟血液样品的灵敏度是2×10~6 CFU/mL(每1mL血液样品最低含有2×10~6细菌),而样品增菌后的检测灵敏度是2×10~2 CFU/mL。制备加入炭疽疫苗菌株芽孢的模拟土壤样品,经增菌培养后,PCR检测灵敏度为3×10~4芽孢/g。另外,还设计了炭疽芽孢外壁结构蛋白基因BclA的鉴定引物,利用该引物的PCR扩增片段长度以及测序结果,能够有效区分Ⅱ号炭疽疫苗菌株和临床分离菌株,本研究能够为炭疽临床诊断和环境监测工作提供技术支持。     

应用活菌直接免疫扩散法鉴定炭疽杆菌的试验

在毛类(鬃尾)运输及工前检查中,炭疽杆菌的检查,是必做项目。目前鉴定炭疽杆菌的程序复杂,需时较长。近年来,由于免疫扩散方法已应用于多种疾病的诊断中,我们试用炭疽活菌检查,结果满意,现报告如下:     

贵州省一起皮肤炭疽疫情的病原学分析

为了对贵州省一起疑似皮肤炭疽疫情进行病原学检测和分析,以期为疫情的处置和防控提供科学依据,对患者皮肤渗出液、病死马肌肉及其刨剐地土壤样本进行炭疽芽孢杆菌分离培养,对疑似菌落采用革兰染色镜检、噬菌体裂解试验和青霉素抑制试验进行鉴定,进一步采用普通PCR和实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测炭疽芽孢杆菌疑似菌株PagA、Cap及rpoB基因。结果共检出7株炭疽芽孢杆菌疑似菌株,其中从患者皮肤渗出液分离出1株菌,从土壤标本分离出6株菌。传统方法将7株疑似菌株鉴定为炭疽芽孢杆菌,普通PCR和Real-time PCR检测结果均显示7株菌株rpoB、PagA和Cap基因阳性。说明从患者皮肤渗出液和土壤标本均检出具有致病基因的炭疽芽孢杆菌,提示该起疫情为一起由炭疽芽孢杆菌所致的皮肤炭疽疫情。     

百色市炭疽环境污染的监测及防制对策

炭疽是由炭疽杆菌引起的人畜共患的急性、热性、败血性烈性传染病。炭疽杆菌在有氧条件下很快形成炭疽芽胞。炭疽芽胞有极强的抵抗力,在干燥土壤中能存活几十年,成为永久的疫源地。我市地处广西西部、云贵高原的边缘,北与贵州接壤、西与云南毗邻,南与越南交界,是个村落分散,交通不便,文化经济较落后。由于历史、社会．经济等原因,长期是炭疽疫区。据历史资料记载,1943年就发生过炭疽疫情。自1997年以来,我市每年都有人、畜因感染炭疽死亡。为了摸清我市各县区自然环境被炭疽污染的状况及其分布,对今后炭疽疫情作出初步预测,制定相应的防制措施。我站于2002年从各县区共抽取106份样本进行炭疽环境监测,成功分离出三株炭疽杆菌。现将情况报告如下：     

炭疽、布病、结核病三重PCR检测方法的建立与应用

针对炭疽pX01、布氏菌BM21以及结核菌插入片段IS6110,设计并合成三对特异性引物,并优化三条特异性引物的最适扩增条件,建立了布病、炭疽、结核病三重PCR方法。特异性试验显示,对布氏菌、炭疽以及结核均能扩增出相应预期的特异性片段。敏感性试验表明,该方法对炭疽、布氏菌以及结核杆菌的敏感性分别在345fg/μL、313fg/μL以及322fg/μL以下。该三重PCR方法的研究对临床混合病菌的快速诊断提供了技术支撑。     

家畜炭疽病皮消毒处理研究初步报告

一、試驗目的在皮张出口炭疽血清反应检驗中,經常会检驗出阳性病皮,有的竟达1％。为了杜絕病菌的传播和戚染,原料的利用和节約,因此,炭疽疫皮的消毒工作是很重要的。目前炭疽疫皮消毒工作是采用盐酸消毒的方法     

辽宁省牛炭疽疫情诊断报告

炭疽(Anthrax)是由炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)引起的一种人畜共患传染病。易感动物主要是牛、羊、马、驴等草食动物,人类主要是通过接触患畜、进食感染炭疽的牲畜肉类、吸入含有病菌的气溶胶或尘埃以及接触污染病菌的皮毛而感染本病。临床病型有皮肤炭疽、肠炭疽、肺炭疽及炭疽性脑膜炎等,本病传染性强,危害严重。