关节炎大鼠背根节中α—CGRP和β—CGRP mRNA变化及针刺效应

用原位核酸分子杂交技术观察了佐剂性关节炎大鼠背根节（ＤＲＧ）中α－与β－降钙素基因相关肽（α－ＣＧＲＰ和β－ＣＧＲＰｍＲＮＡ的表达及电针的效应。结果表明，在正常动物ＤＲＧ中有３８．２５％神经元标记α－ＣＧＲＰｍＲＮＡ，３２．８％标记β－ＣＧＲＰｍＲＮＡ，且α－ＣＧＲＰ和β－ＣＧＲＰｍＲＮＡ主要在小细胞（分别为１８．１６％和１９．５６％）和中细胞（１１．３２％和１１．６７％）中表达，在少数在细胞（８     

抗牛IgGFc受体单克隆抗体的生产与鉴定

利用阳性表达细胞和荧光激发流式细胞分类器建立了一个单克隆抗体的制备与快速鉴定系统。用克隆于表达性质粒载体ｐＣＤＭ８的牛ＩｇＧ＿１Ｆｃ受体（ｂｏＦｃγＲⅡ）ｃＤＮＡ转染ＣＯＳ７细胞并用被转染细胞作抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ＮＳＯ浆细胞瘤细胞株融合，筛选克隆出３株分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤，即ＣＣ－Ｇ３６、ＣＣ－Ｇ３７和ＣＣ－Ｇ３９。经使用荧光激发流式细胞分类器检测，３个单克隆抗体均识别经ｂｏＦｃγＲⅡ转染的ＣＯＳ７细胞而不识别未经转染的ＣＯＳ７细胞和经牛ＩｇＧ＿２Ｆｃ受体（ｂｏＦｃγ２Ｒ）转染的ＣＯＳ７细胞。３个单克隆抗体分别为ＩｇＧ＿１（ＣＣ－Ｇ３６）、ＩｇＧ＿２ａ（ＣＣ－Ｇ３７）和ＩｇＧ＿３（ＣＣ－Ｇ３９）。本研究还用同样方法验证了单克隆抗体ＣＣ－Ｇ２４抗ｂｏＦｃγ２Ｒ的特异性。     

三品系西方蜜蜂基因组DNA多态性分析研究（二）

采用９种随机引物（Ｋ,５’－ＣＧＧＣＣＣＣＴＧＴ－３’;５’－ＣＡＧＣＧＧＴＡＣＣ－３’;５’－ＡＣＣＡＧＧＴＴＧＧ－３’,５’－ＧＴＣＧＧＡＡＴＴＣ－３’;５’－ＣＧＧＣＣＣＣＧＧＴ－３’;Ｘ,５’－ＧＴＡＧＴＣＡＣＡＣ－３’;Ｙ,５’－ＣＴＧＣＡＧＧＡＣＡ－３’;Ｚ,５’－ＣＧＧＣＣＣＧＧＴＡ－３’）和ＰＣＲ技术扩增不同产蜜量的三品系西峰（喀尼阿兰、平湖、美意的ＤＮＡ基因组。结果Ｋ引物在高产蜜     

PCR扩增猪ESR基因一个外显子DNA片段的研究

根据文献资料，参考人，鸡，鼠等动物的ＤＮＡ序列，结合本研究的需要，我们设计了一对引物，其上游正向引物中Ｐ１为５′－ＧＡＴＡＣＧＡＡＡＡＧＡＣＣＧＣＣＧＡＧ－３′（对应于鼠ＥＳＲ基因第４外显子１０１０－１０２９）下游反向引物Ｐ２为５′－ＧＣＡＣＴＣＴＣＴＴＴＧＣＣＣＡＧＴＴＧ－３′（对应于鼠ＥＳＲ的基因第４外显子１３２２－１３４１）利用该引物对，按照首轮反应９４℃５分钟，５８℃１分钟，７２℃１分钟，     

伊氏锥虫微环DNA的PCR扩增

伊氏锥虫是动物伊氏锥虫的病原体，属动基体目原虫，动基体ＤＮＡ（ＫｉｎｅｔｏｐｌａｓｔＤＮＡ简称ｋＤＮＡ）是该目原虫所特有的一种非染色体ＤＮＡ。因此，对ｋＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增可用于鉴定和检测伊氏锥虫。本文以５－ＣＡＡＣＧＣＡＡＡＧＡＧＴＣＡＧＴ－３’，５’－ＡＣＧＴＧＴＴＴＴＧＴＧＴＡＴＧＧＴ－３’为引物，对从伊氏锥虫直接抽提的总ＤＮＡ，ｋＤＮＡ以及ｋＤＮＡ基因重组子，经ＰＣＲ扩增后，在含有０．５μ     

禽白血病／肉瘤病毒群特异性抗原P_（27）~（gag）的分离和纯化

本试验用差束离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒（ＡＭＶ）。并以ＳＤＳ法裂解病毒，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＡＭＶ结构蛋白成分，最后选用（ＬＫＢ）水平板式电泳系统，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ比较大量地分离提纯了Ｐｇａｇ２７。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和琼脂扩散试验检验其抗原活性，并且用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量和纯度。结果表明，提纯的病毒蛋白具有抗原活性，且达到电泳纯。     

转染βG基因HHCC细胞的裸鼠转移模型的复制

将人肝癌细胞株（ＨＨＣＣ）细胞和转染β－葡萄糖苷酸酶（βＧ）基因的ＨＨＣＣ细胞体外培养，观察细胞形态结构，用流式细胞仪测定细胞周期，要用裸鼠脾种植法研究转βＧ基因ＨＨＣＣ细胞的转移特性，接种后６０ｄ收集转移灶，常规制片，ＨＥ染色镜检。结果，转染βＧ基因ＨＨＣＣ细胞内多见颗粒性物质，微绒毛及突起增多，溶酶体增多，内质网及核糖体丰富，糖元颗粒堆积，某些细胞出现变性、坏死。转染βＧ基因ＨＨＣＣ和ＨＨＣＣ     

分泌抗赭曲霉素A单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用赭曲霉素Ａ（ＯＡ）－ＢＳＡ合成抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ｓｐ２／０细胞融合，通过克隆和ＥＬＩＳＡ法筛选，建立三株泌抗ＯＡ单克隆抗体杂交瘤细胞株（３Ｃ１２，１Ｄ１２和２Ｇ７）。用间接ＥＬＩＳＡ法测定，细胞上清液抗体效价为１２８＾×（３Ｃ１２）和６４＾×（１Ｄ１２和２Ｇ７）腹水抗体效价为１０＾－７（３Ｃ１２，１Ｄ１２）和１０＾－６（２Ｇ７）。三株单抗（ＭｃＡｂ）均属ＩｇＧ类，分泌抗体     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和（ＳＮ）试验和单克隆抗体（ＴＧＥｍＡｂ和ＴＧＥ／ＰＲＣＶｍＡｂ）阻断酶联免疫吸附试验（Ｂ－ＥＬＩＳＡ）对８１头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）抗体检测。ＳＮ试验检出７份阳性血清，检出率为８．６４％；Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于ＳＮ试验     

山羊关节炎—脑炎琼扩诊断抗原的研制

通过对不同的毒株，不同细胞及不同抗原制备方法比较，选用国内分离的山羊关节炎－脑炎（ＣＡＥ）毒株ＧＳ－３５接种山羊滑膜细胞（ＧＳＭ）或角膜细胞（ＧＣ）繁殖病毒，ＰＥＧ１００倍浓缩，乙醚处理后制备琼扩（ＡＧＩＤ）抗原。用该抗原对已知不同种类阳性能稳定，特异性好，其结果与国外引进的参考阳抗原一致。     

从患生殖——呼吸道综合征病猪分离出猪呼吸道冠状病毒

采集３／１５头猪生殖－－呼吸道综合征病毒患猪的扁桃体和肺脏，在猪肾细胞（ＣＰＫ）上分离出４株致细胞病变的病毒。分离毒在生化学和形态学上类似于冠状病毒。用于多克隆抗体的中和试验，分离毒与传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）不能鉴别，而用能鉴别ＴＧＥＶ和猪呼吸道冠状病毒（ＰＲＣＶ）的单克隆抗体，则可与ＴＧＥＶ相区别。这表明此分离毒是ＰＲＣＶ。从２个猪场５０日龄猪中各采集３０份血清样品，用血清学方法检测，抗分离     

山羊关节炎－脑炎琼扩诊断抗原的研制

通过对不同的毒株、不同细胞及不同抗原制备方法比较，选用国内分离的山羊关节炎－脑炎（ＣＡＥ）毒株ＧＳ－３５接种山羊滑膜细胞（ＧＳＭ）或角膜细胞（ＧＣ）繁殖病毒，ＰＥＧ１００倍浓缩，乙醚处理后制备琼扩（ＡＧＩＤ）抗原。用该抗原对已知不同种类阳性血清以及人工ＣＡＥ病毒感染羊的检测，证明该抗原性能稳定、特异性好，其结果与国外引进的参考阳性抗原一致。     

大蒜油中大蒜素等含硫化合物的气相色谱-质谱法测定

三硫醚化合物ＣＨ２＝ＣＨ－ＣＨ２－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（二丙烯基三硫醚，俗称大蒜素或大蒜新素）、ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（甲基丙烯基三硫醚）和ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ３（二甲基三硫醚），除了对各种病菌具有很强的杀灭和抑制作用外，还可以提高饲料适口性，增加采食量，提高饲料报酬。本研究利用气相色谱－质谱（ＧＣ－ＭＳ）联用仪对大蒜油中的大蒜素等部分组分进行了测定，方法简便快速、准确可靠。１　方法　１．１　仪器与试剂　ＧＣ－ＭＳ　ＱＰ－５０００气相色谱－质谱联用仪（日本岛津公…     

茶多酚的作用机理及应用

茶多酚类是形成茶叶品质的重要成分之一，是一类存在于茶叶中的多羟基酚性化合物的混合物，简称茶多酚，俗称茶单宁、茶鞣质。一、概述茶多酚主要组分为儿茶素（黄烷醇类）、黄酮、黄酮醇类、花青素类、茶白素类和酚酸及缩酚酸类，它们的结构除酚及缩合酚类外，均具有a－苯基苯骈二氢吡喃（黄烷）为主体的C6－C3－C6基本碳架。所以说“其结构决定了茶多酚的性质及其作用”。茶多酚类为无定形粉末，具有收敛性和涩味，易吸水变成棕色，甚至成褐黑色胶状物。茶多酚有较强的极性，有一定的亲水性。茶多酚中的主要成分是儿茶素类，属黄烷醇类…     

药物诱发豚鼠胆囊炎的病理学及酶组化研究

以酶病理组织化学方法研究了林可霉素、石胆酸、硫氨酸α－萘酶和月桂红霉素酯四种药物豚鼠胆囊炎和胆结石形成过程中，酶、粘多糖及胆汁成份的变化。结果表明：四种药物都能诱发豚鼠胆囊炎，内源性β－ＧＣＤ酶含量显著升同且与胆囊为症程度明显相关；胆汁β－ＧＣＤ酶到ＵＣＢ／ＴＢ幽会显著正相关；β－ＧＣＤ酶和Ｃａ＾２＋的关系与成石时间有关而各组有所差异。胆囊和肝脏ＡＣＰ和Ｇ－６－Ｐ活性也有明显变化。本文进一步证实内     

杜大长猪IGF-I基因的克隆及其序列分析

采用ＴＲＩzol法从杜大长杂交猪的肝脏中提出总ＲＮＡ,将其纯化后作为ＰＣＲ扩增模板 ,以设计的Ｐ１（５′－ＣＴＡＣＡＴＴＣＴＧＴＡＧＴＴＣＴＴＧＴＴＴＣＣ－３′）为引物合成ＩＧＦ－Ｉ基因cＤＮＡ的第１链,再以Ｐ１和Ｐ２（５′－ＡＴＧＧＣＣＣＴＧＴＧＣＴＴＧＣＴＣＴＣＣＴＴ－３′）为引物扩增到大小约为３６０bp的产和,并将其达隆至pＧＥＭ－Ｔ载体上。经筛选、酶切、我分析,表明该片段为ＩＧＦ－Ｉ基因的cＤＮＡ     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和试验和单克隆抗体阻断酶联免疫吸附试验对８１头美国进口猪轿清作猪传染性胃肠炎抗体检测。ＳＮ试验同７份阳性血清，检出率为８．６４％，Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于Ｓ     

白细胞介素-1α对仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的影响

用体外培养的仔猪睾丸间质细胞，研究了白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）对间质细胞睾酮分泌的影响。结果，ＩＬ－１α能抑制ｈＣＧ诱导的间质细胞分泌睾酮，其睾酮产生量随ＩＬ－１α剂量的增加及作用时间的延长而下降；用２０Ｕ／ｍＬ和５０Ｕ／ｍＬ的ＩＬ－１α作用４８ｈ，可分别抑制６０％及６５％的睾酮分泌量；但无ｈＣＧ诱导时，５０Ｕ／ｍＬ的ＩＬ－１α可使间质细胞基础睾酮的生成量增加１倍。提示睾丸内ＩＬ－１α可能通过多种途径调节间质细胞睾酮的产生。     

重组日本血吸虫中国大陆株28kuGST免疫刺激复合物对小白鼠的免疫试验

将体外重组的日本血吸虫中国大陆株２８ｋｕ谷胱甘肽－Ｓ－转移酶与免疫,刺激复合物（ＩＳＣＯＭ）结合制备了ｒＳｊ２８ＧＳＴ－ＩＳＣＯＭ。用含８５μｇ ｒＳｊ２８ ＧＳＴ的ｒＳｊ２８ＧＳＴ－ＩＳＣＯＭ及１００μｇ ｒＳｊ２８ＧＳＴ分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小白鼠,用常规ＥＬＩＳＡ检测体液免疫水平,以日本血吸虫大陆株尾蚴攻击后的减虫率表示免疫保护力。     

脊髓CGRP在大鼠实验性关节炎形成和发展中的作用

采用鞘内注射降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）受体拮抗剂人ＣＧＲＰ片段８－３７（ｈＣＧＲＰ８－３７），探讨了佐剂性关节炎大鼠初级感觉系统中ＣＧＲＰ增多的意义。结果：佐剂前注射ｈＣＧＲＰ８－３７的动物，在注射佐剂后１～２０ｄ，患肢及健肢皮温均高于对照组（Ｐ＜０．０５）；患肢足容积明显大于对照组（Ｐ＜０．０５），并且在形成变态反应性佐剂性关节炎时（佐剂后１３～２０ｄ），健肢足容积也明显增加（Ｐ＜０．０５）；但双后肢的痛阈变化与对照组相比没有明显差异（Ｐ＞０．０５）。上述结果表明，佐剂前鞘内注射ｈＣＧＲＰ８－３７，使急性关节炎和多发性关节炎均有所加重。佐剂后１２ｄ注射ｈＣ－ＧＲＰ８－３７的动物，双后肢的肿胀积分均明显高于对照组（佐剂后１８～５０ｄ，Ｐ＜０．０５或０．０１），痛级别也明显高于对照组（佐剂后１４～５０ｄ，Ｐ＜０．０１），但痛阈的变化不明显（Ｐ＞０．０５）。因此佐剂后１２ｄ鞘内注射ＣＧＲＰ的拮抗剂也可加重关节炎的炎症反应。这进一步证明了脊髓ＣＧＲＰ可能具有抗炎和抑制免疫反应的作用。