世界首例玻璃化冷冻保存体细胞克隆牛的胚胎移植犊牛在莱阳农学院诞生

世界首例玻璃化超快速冷冻保存的体细胞克隆牛的超数排卵,胚胎移植犊牛,于2003年10月8日凌晨3点18分在莱阳农学院诞生。该研究是山东省科技厅“三0”工程资助项目和青岛市科技局资助项目的部分内容,是由莱阳农学院动物科技学院教授董雅娟博士     

应用体细胞克隆技术和胚胎移植技术生产克隆水牛

为了解决克隆水牛技术在供核细胞、受体细胞中的选用问题,探索不同条件对移植受孕的影响,完善克隆技术的理论体系。试验以摩拉奶水牛的耳成纤维细胞作为供核细胞,本地水牛卵母细胞为受体胞质进行细胞克隆构建重组胚胎;将发育5～10 d的重组胚胎移植于本地水牛、杂交水牛的子宫内,观察不同发情方式、胚胎类型、胚龄及季节对移植受孕的影响。结果表明:水牛的克隆胚胎妊娠率较低,分别为12.05%、12.04%、13.95%。自然发情和同期发情对克隆胚胎移植受胎率的影响差异不显著;鲜胚胎移植186头,受胎22头,受胎率为11.83%(22/186);冻胚胎移植174头,受胎23头,受胎率为13.22%(23/174)。克隆水牛从出生至12月龄体尺增长明显高于本地水牛;水牛克隆胚胎移植受胎在秋季最好,秋季受胎数占全年的53.33%,显著高于其他季节。     

影响水牛体细胞克隆胚胎移植的因素

从不同发情方式、不同胚胎类型、不同胚龄以及不同季节来探讨影响水牛体细胞克隆胚胎移植的效率。结果显示,自然发情与同期发情方法对水牛体细胞克隆胚胎的移植受胎率有显著影响。鲜胚和冻胚移植后受胎率没有显著差异,其受胎率分别是9.79%、14.5%。在移植中,不论是鲜胚还是冻胚,6日龄胚胎移植受胎率最高。而且不同日龄(5、6、7、8～10d)克隆胚胎移植受胎率差异不显著(鲜胚P=0.260 7,冻胚P=0。065 2)。克隆胚胎在秋季移植时受胎率最高,受胎率是16.06%,比其他季节高,且差异显著(P<00.05).其次是春季,但夏季和冬季克隆胚胎移植后受胎率差异不显著(P>0.05)。结果表明,水牛体细胞克隆胚胎在胚胎移植中是可行的,但效率比较低。     

我国首批克隆牛在中国农业大学再克隆获成功

由中国农业大学李宁教授领导的研究小组经过一年多的技术攻关，我国首批转基因体细胞克隆牛的再克隆体日前在山东梁山基地成功降生。     

家畜超数排卵和胚胎移植的影响因素

家畜的超数排卵和胚胎移值(MOET)是有效提高优良母畜的繁殖潜力、加速品种改良、迅速扩大良种畜群的手段,是家畜繁殖学领域的一项高新生物技术. 家畜胚胎移植的科学试验最先是20世纪30年代在绵羊、山羊方面进行的.1951年出现了牛、猪胚胎移植的报道.1960年以后,科学工作者对胚胎的采集、保存和移植等技术环节做了大量改进,取得很大进展.在国外,70年代末、80年代初,逐步由试验阶段转向畜牧生产.超数排卵为胚胎移值的推广利用提供了可能并开辟了广阔的前景,成为胚胎移植不可缺少的基础.     

和牛超数排卵及胚胎移植效果观察

为了研究和牛超数排卵和胚胎移植的效果,试验以和牛作供体,荷斯坦青年母牛作受体,采用PG+FSH方案对7头和牛供体进行超数排卵处理,用非手术法取胚并进行鲜胚移植。结果表明：采用PG+FSH方案头均获得胚胎数为(11.29±4.86)枚,可用胚胎(5.86±3.27)枚(A级和B级);鲜胚移植(A级和B级)妊娠率为51.22%。说明采用该方案对和牛供体进行超数排卵,并进行鲜胚移植的效果较为理想。     

首例体细胞克隆牛"蒙蒙"降生

6月25日11时29分，一头起名为“蒙蒙”的黑白花色体细胞克隆牛在呼和浩特市和林格尔大正美联胚胎移植基地降生。这是内蒙古利用体细胞克隆技术第一次成功完成克隆奶牛。     

杜泊绵羊超数排卵与胚胎移植试验

选纯种杜泊绵羊经产母羊(22只)为供体,通过实施同期发情、超数排卵、重复配种处理,其中20只可利用供体,每只平均采得可用胚胎5.20枚.选小尾寒羊经产母羊(90只)为受体,经同期发情处理,对有黄体发育的母羊(72只)实施胚胎移植手术.结果表明,移植单胚(40只)受体的受胎率为47.50%,移植双胚(32只)受体的受胎率为62.50%;平均受胎率为54.17%,平均每产1只羔羊所需胚胎数为2.60枚,每只供体羊冲胚1次提供的羔羊数为2只.     

皖江长毛兔超数排卵及胚胎移植研究

采用国产激素,以FSH LH、FSH HCG、PMSG LH、PMSG HCG4种不同的处理方法对32只皖江长毛兔进行了超排处理,旨在筛选确定皖江长毛兔最有效的超排方法及胚胎移植的最佳时期。结果表明:4种超排方法处理后的排卵数分别为42.5枚、46.25枚、30.63枚、33.38枚;回收胚胎数分别为27.63枚、31.25枚、22.37枚、20.75枚;有效胚胎数分别为20.50枚、24.13枚、17.63枚、15.25枚。这三项指标均以FSH HCG组最高。将收集到的237枚胚胎移植给24只受体,每只受体移植胚胎10枚左右。结果表明:2、4、8~16细胞期及桑椹胚移植后的妊娠率、产仔率及窝产活仔数分别为50%、16.6%和3.3只,66.7%、20.6%和3只,60%、24.5%和4.3只,71%、40.9%和5.4只。其中以桑椹胚组指标最高。     

超数排卵和胚胎移植技术在奶牛繁育中的应用

超数排卵和胚胎移植技术是一项日益成熟的生物工程技术，本实验采用MOET技术，以黄牛为受体，推广高产奶牛，取得了较好的效果。     

布尔山羊超数排卵及胚胎移植试验

在 1999年 10月 15日～ 2 0日期间 ,使用FSH和LH(宁波产激素 )对布尔山羊的 5只母羊进行了超排处理 ,通过手术法回收胚胎 14 4枚 ,其中可用胚 72枚 ,平均每只采集可用胚 14 5枚 ,分别用手术法移植于 5 2只受体羊 ,第一情期返情 16只 ,不返情率达 6 9%。     

德国肉用美利奴超数排卵和胚胎移植试验

黑龙江省大山种羊场于 2 0 0 1年 8～ 10月间 ,利用国产FSH对 15只德国肉用美利奴母羊进行超数排卵处理 ,通过手术方法回收胚胎 2 17枚 ,其中可用胚 14 6枚 ,平均每只供体母羊获可用胚 9.7枚 ;在运用手术方法对 85只受体母羊进行鲜胚移植 ,受胎 4 4只 ,鲜胚移植受胎率 5 1.76 %。     

皮埃蒙特牛超数排卵及胚胎移植试验

用国产激素ＦＳＨ、氯前列烯醇对皮埃蒙特纯种肉牛进行二批次共４头超数排卵,回收胚胎２０枚,平均每头采卵５枚,平均每头采可用胚３．７５枚,超排有效率７５％,用南阳母牛作受体牛,共移植鲜胚１０枚,鲜胚移植受胎率５０％。     

布尔山羊超数排卵胚胎移植试验

本试验采用置入炔诺酮阴道栓 FSH 氯前列烯醇同期发情、超数排卵处理方法，对8只布尔山羊(供体羊)、90只洪洞奶山羊(受体羊)进行了同期发情和超排数排卵胚胎移植试验。其结果如下：(1)8只供体羊回收胚胎数量、可用胚胎数量、羊均回收胚胎数量、羊均可用胚胎数量、可用胚比率分别为182枚、172枚、22．8枚、21．5枚、94．5％；(2)90只受体羊共有81只羊达到同期发情效果，发情同期率为90．0％；(3)150枚可用胚胎共移植洪洞奶山羊73只，妊娠51只，产羔80只，妊娠率69．9％，胚胎成羔率53．5％。     

西藏当雄牦牛超数排卵及胚胎移植试验

2005年8月初，对西藏当雄10头5~10岁供体母牦牛实施了超数排卵试验，超排选用PGF2α+FSH刺激法和埋置阴道栓Cu-Mate⁺促卵泡素FSH刺激法，FSH的剂量为8.8~9.0 mg/头。根据超排后供体发情表现、黄体数量及获得胚胎数量及质量评定超排效果，将胚胎鲜胚移植给经同期处理的受体母牦牛。结果为：10头供体牛共获得7枚胚胎，PGF2α+FSH连续递减法得到5枚可用胚胎，Cu-Mate+FSH法没有冲到胚胎，５枚胚胎移植给５头受体后妊娠并出生４头牦犊牛。结论为：PGF2α+FSH连续递减法超排效果较好，胚胎移植取得初步成功。     

水牛的卵泡数量与超数排卵技术

繁殖技术业已成为提高家畜生产力的必要手段。自从胚胎移植出现在商业化领域以来的2 5年中 ,它在黄牛遗传改良中发挥了越来越重要的作用。例如在美国 ,1 990年经生产力测试出的前 2 7 5%的好母奶牛和前 44%的好公牛是经胚胎移植生产的。在国家级登记体系还没有完善的大多数发展中国家 ,通过类似开放超数排卵与胚胎移植 (ＭＯＥＴ)核心群的技术方案而获得较快的遗传改良 ,这特别适用于亚洲和地中海周边许多国家的主要家畜品种———水牛。胚胎移植程序中首要考虑的问题是应当获得一种可靠的方法以提供可预测的优质胚胎的供应。获得胚胎的方法…     

陶赛特种羊超数排卵及胚胎移植试验

该试验是2002—2005年宁夏科技厅“8613”十大农业重点科技攻关课题《肉羊杂交改良技术研究》的一部分。将MOET技术(超数排卵和胚胎移植技术)应用在引进的国外良种肉用种羊的繁育工作中,加快纯种后代的繁殖速度。     

牛胚胎移植产业化超数排卵的系统研究

为了提高供体牛的利用率,加速胚胎移植技术的产业化,试验系统地研究了超排方案、青年奶牛的月龄及发情周期不同阶段、重复超排次数、超排间隔时间、卵巢状态、胎次与产后间隔时间对超排效果的影响,共超排供体奶牛1 127头次,回收胚胎共10 900枚,可用胚胎数量为6 942枚,平均每头次获得胚胎数量为6.73枚.结果表明:①应用PSO1、PSO2和 PSO3三种方案进行超排处理,PSO3方案的超排成功率和平均回收可用胚胎数均高于其他两个方案;②利用发情周期9～11 d的自然发情奶牛直接超排效果最好;③对青年奶牛进行超排处理,应限制超排起始时间,15月龄以上的青年奶牛超排效果较好;④供体牛连续重复超排控制在3次以内,连续4次超排处理后极大降低胚胎可用率;⑤超排处理的间隔最短时间应该选择46～60 d;⑥经产牛1～3胎次超排效果较好,7胎次以上较差;⑦产后间隔时间选取80～90 d.     

不同年龄阶段供体和受体绵羊对超数排卵胚胎移植效果的影响

采用同一种FSH用各自的最适剂量对育成羊(10～12月龄)、适龄羊(2～5岁)、老龄羊(6岁以上)进行超数排卵。其结果如下:①育成羊组所获得的平均可用胚胎数(14.15±4.45)和适龄羊组获得的平均可用胚胎数(13.4±3.56)均显著高于老龄羊组所获得的平均可用胚胎数(8.15±4.12)(P<0.05);②育成羊组获得的平均可用胚胎数和适龄羊组获得的平均可用胚胎数无显著差异(P>0.05);③经产受体羊妊娠率为68.71/,显著高于育成受体羊妊娠率(59.3/)。