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苹果组织总RNA提取方法的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验以苹果品种富士(Fuji)为材料,采用Trizol法、改良的SDS法和改良的CTAB法提取其茎尖总RNA,并用OD260/OD280值和1.2%琼脂糖凝胶电泳检测RNA的产量、纯度和完整程度。结果表明:通过改变CTAB法的提取缓冲液组成,缩短LiCl和乙醇沉淀的时间,可在2~3h内得到质量好、产量高、反转录和RT-PCR效果好的总RNA,该法是一种快速有效的适宜苹果组织总RNA提取的方法。 相似文献
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一种改良的提取草莓属叶片总RNA的方法 总被引:11,自引:2,他引:11
探索一种新的适合草莓属(Fragaria spp.)组培苗、大田苗叶片总RNA的快速高效提取方法。试验以草莓叶片为材料,用改进的CTAB法对其RNA进行提取,并对提取的RNA进行了电泳检测、含量测定和RT-PCR检测。结果表明:用该RNA提取方法提取的RNA具有28S rRNA、18S rRNA和5.8S rRNA3条清晰的条带,且无降解。OD260/OD280在1.83至2.14之间,具有较高的纯度,且含量较高。用该RNA提取方法提取的RNA逆转录成cDNA,经PCR扩增出现清晰的条带,说明该RNA提取方法提取的RNA可以满足进一步分子生物学试验的要求。 相似文献
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一种改良的橡胶树胶乳总RNA提取方法 总被引:9,自引:0,他引:9
橡胶树胶乳总RNA提取过程中,常常遇到胶乳收集需要时间长、需去除橡胶粒子才能提取RNA等困难;利用常规方法提取的胶乳总RNA通常产量较低,易降低,体外翻译困难等,本介绍一种改进的LiCl沉淀法,不需预先去除橡胶粒子,得到的总RNA样品经紫外分光光度计检测和1.2%甲醛变性凝胶电泳分析证明,具有较高的纯度和完整性,且产量较高,可满足多数分子生物学实验的需要。 相似文献
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为了在蓝莓果实中提取出高质量RNA,比较了改良CTAB法、TRIzol法、试剂盒法和SDS法4种方法.结果表明:改良CTAB大量法能有效地去除果实中的多糖和酚类物质,获得的总RNA质量较好,纯度较高.28s∶18s的亮度约为2∶1,OD260/OD280在1.8~2.0,OD260/OD230的比值都大于2.0,且得率也较高,幼果期为23.978 μg·g-1,完熟期为30.817 μg·g-1.完全能适用于RT-PCR、转录组测序等分子生物学实验. 相似文献
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本文以中国卤虫各个时期的虫体为实验材料,通过对经典的RNA提取方法的改进与筛选,获得中国卤虫各个时期的总RNA。利用该方法提取的中国卤虫各个时期总RNA质量较高,完全能满足后续的分子生物学研究。研究为以卤虫或与卤虫生物学特征相似的实验材料的研究提供了技术参考。 相似文献
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为从植物中提取纯度高、完整性好的RNA ,采用改良过的CTAB法提取油用向日葵改 HA89开花后12 d成熟叶片的总RNA ,并对其进行了紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳分析。结果表明:得到的RNA完整性好,纯度和浓度均较高,可用于后续的RT-PCR、Northern杂交和cDNA文库的构建等分子生物学实验研究。 相似文献
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改良CTAB法提取核桃总RNA试验 总被引:7,自引:3,他引:7
从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB法。此方法提取的核桃嫩叶总RNA的电泳结果可见清晰完整的条带,表明改良CTAB法能有效去除多糖和多酚以及色素等次生代谢物的污染,提取RNA纯度较高、完整性好,易于进行RT-PCR和cDNA文库的构建。此方法简单易行而且所用试剂成本较低。 相似文献
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一种改良的棉花总DNA提取方法 总被引:6,自引:0,他引:6
为了获取高质量的棉花基因组DNA,进行了后续分子实验,通过对已有的几种DNA提取方法进行综合比较,寻找一套优化的适于棉花高质量DNA的提取方法。结果表明,优化的棉花基因组DNA提取方法所提取的DNA纯度高,无降解现象,适用于进行常规PCR扩增以及进行高精度要求的SSR扩增。 相似文献
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油菜种子高质量总RNA提取的一种有效方法 总被引:2,自引:0,他引:2
设计了1种从油菜种子中分离高质量总RNA的方法,有效的排除了种子中富含的多酚、多糖和蛋白质等杂质的污染。分离的总RNA经甲醛变性凝胶电泳和紫外光检测,可见28S和18S rRNA的2条清晰的带型,完整无降解,其A260/A280在1.8~2.0之间。研究结果证明,利用本方法提取的油菜种子总RNA具有很高的质量和纯度,且得率高,完全能满足后续的RT-PCR、全长基因的克隆和Northern blotting分析等分子生物学研究。 相似文献
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介绍了一种适合于根瘤菌及其它革兰氏阴性细菌的RNA提取方法。它具有简便、快速等特点,且所提取的RNA样品质量较高,可直接用于RT-PCR合成、Northern杂交等分子生物学操作。该方法具有实用性强、重复性好的特点。提取的RNA无DNA等污染物,并且其产量、纯度完全能满足分子克隆和基因表达研究的需要。该方法简单、快速、纯度高、完整性强,方便有效。 相似文献
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为了选出一种适合水稻纹枯病菌RNA的提取方法.比较了改良的盐酸胍法同热酚法、Trizol法提取水稻纹枯病菌RNA的效果.结果表明:3种方法中,改良的盐酸胍法和Trizol法可以提取到高质量的RNA,热酚法的提取效果不理想.改良的盐酸胍法提取的RNA进行mRNA差异显示的结果表明,没有多糖对后继反应的干扰,是一种经济有效的水稻纹枯病菌RNA的提取方法.用该法提取RNA,可以满足分子克隆与基因表达分析等分子生物学后继试验. 相似文献