鱼腥草叶片总RNA提取方法研究

[目的]筛选出适合鱼腥草（Houttuynia cordata）叶片RNA提取的方法。[方法]以鱼腥草叶片为材料,比较了经典RNA提取试剂盒、Trizol试剂盒A、Trizol试剂盒B以及富含多糖类材料RNA提取试剂盒提取鱼腥草RNA的效果。[结果]Trizol试剂盒A、Trizol试剂盒B和经典RNA提取试剂盒难以提取出高质量的RNA,而富含多糖类材料RNA提取试剂盒提出的RNA质量高,完整性好,可以满足进一步分子生物学研究的要求。[结论]普通RNA提取试剂盒难以提取出鱼腥草叶片的RNA。     

茴香叶片总RNA提取方法的比较

为促进茴香的分子生物学研究,以宁夏海原的茴香叶片为试验材料,分别采用CTAB法、CTAB改良法、CTAB水饱和酚法、Tris-硼酸法、异硫酸氰胍法、异硫酸氰胍改良法、Trizol法和Trizol改良法共8种方法提取茴香叶片RNA,比较其提取效果.结果表明:CTAB改良法提取的RNA质量最好,浓度为1481.9μg·μL...     

CTAB改进法提取柱花草叶片组织总RNA

鉴于作者对柱花草叶片组织总RNA提取的成功,也为了便于后来者对柱花草分子生物学的深入研究,《热带农业科学》编辑部特补充刊登此方法的详细步骤。作者所提取RNA的质量及进一步分子生物学研究结果见另文——申建斌,田维敏,蒋昌顺.柱花草叶片组织总RNA提取方法.热带农业科学,2007,27(3):13～14。     

盐肤木叶片总RNA提取方法的比较研究

比较了Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB法、SDS法以及改良CTAB法和改良SDS法等方法提取盐肤木叶片总RNA,琼脂糖电泳和紫外检测结果表明:改良SDS法提取的盐肤木总RNA没有降解,28S和18SrRNA条带清晰,D260nm/D280nm和D260nm/D230nm分别为2.05和2.12,虽然其产量只有59.87μg/g,但是综合判断改良SDS法是适宜盐肤木总RNA提取的一种有效方法.     

一种改良的提取草莓属叶片总RNA的方法

探索一种新的适合草莓属（Fragaria spp．）组培苗、大田苗叶片总RNA的快速高效提取方法。试验以草莓叶片为材料,用改进的CTAB法对其RNA进行提取,并对提取的RNA进行了电泳检测、含量测定和RT-PCR检测。结果表明：用该RNA提取方法提取的RNA具有28S rRNA、18S rRNA和5.8S rRNA3条清晰的条带,且无降解。OD260/OD280在1.83至2.14之间,具有较高的纯度,且含量较高。用该RNA提取方法提取的RNA逆转录成cDNA,经PCR扩增出现清晰的条带,说明该RNA提取方法提取的RNA可以满足进一步分子生物学试验的要求。     

大白菜叶片总RNA提取方法的研究

利用不同浓度的水杨酸溶液处理苗龄为7 d的大白菜植株,在处理12 h后提取粗酶液并测定酶活.分别采用Trizol试剂法、改良SDS法、异硫氰酸胍法等方法对酶活力最高试验组的叶片提取RNA进行RT-PCR反应.结果表明,0.6 mmol·L-1水杨酸浓度诱导试验组效果最佳,几丁质酶的活力达到最大值;改良SDS法提取的大白菜叶片总RNA完整性好、纯度高, 提取的RNA可用于RT-PCR及RACE等实验操作.     

不同方法提取狗脊蕨叶片总RNA的比较分析

[目的]为构建狗脊蕨叶cDNA文库,保存珍贵基因资源,克隆和研究与有效成分合成相关的基因等提供技术参考。[方法]以狗脊蕨叶片为材料,采用CTAB法、一步法、酚-SDS法和RNA试剂盒提取分离法提取总RNA,通过比较分析确定最优方法。[结果]这4种方法都能提取出182、8 S的RNA,但CTAB法和试剂盒提取分离法的总RNA质量较高,CTAB法还提取出清晰的5S RNA。一步法和SDS法带型模糊,有降解现象。CTAB法提取的狗脊蕨叶片总RNA质量较好,28S1、8S和5S条带清晰,且无明显降解。CTAB提取法OD260/OD280的值在1.93~2.06,试验中其OD260/OD280值为2.012,接近2.0,纯度较高。一步法和SDS法OD260/OD280>2.0,试剂盒法OD260/OD280<2.0。[结论]CTAB法适合提取的狗脊蕨叶片总RNA,质量较好,可用于cDNA合成、文库构建等后续分子生物学试验。     

辣椒叶片总RNA快速提取

采用改良的Trizol法对辣椒(Capsicum annuum)叶片的总RNA进行了提取,利用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、RT-PCR进行RNA纯度、完整性检测.结果表明,Trizol法提取可获得较高质量的辣椒叶片总RNA,能满足后续的研究需要.     

银杏种仁总RNA提取方法

采用异硫氰酸胍法、TRIzol法、CTAB法和SDS法从成熟银杏种仁中提取总RNA,结果表明:CTAB法提取的总RNA纯度高,污染少,完整性好,其A260/A230为1.6～1.8,A260/A280为1.9～2.0;CTAB法提取的总RNA降解少,得率高;CTAB法更适于富含多糖和多酚物质的植物总RNA的提取。     

珠美海棠叶片总RNA提取方法的比较

珠美海棠(Malus zumi)为多年生木本植物,组织中含有大量的多酚、多糖和蛋白质等物质,给总RNA的提取带来困难。本试验使用RNeasy Plant Mini Kit试剂盒、Trizol法、SDS法和改良CTAB法提取珠美海棠叶片总RNA,并用凝胶电泳和RT-PCR技术比较了4种不同方法提取的总RNA样品的质量,认为提取珠美海棠叶片总RNA的最佳方法为改良CTAB法。     

泡桐叶片RNA提取方法的研究

以豫杂1号泡桐为试验材料,采用Trlzol,改良Trizol Ⅰ,改良Trizol Ⅱ,CTAB和Plant RNAtrip等方法提取其叶片总RNA,并用A260/A280值和琼脂糖凝胶电泳检测RNA的得率、纯度和完整程度.结果表明,不同方法提取的RNA在得率、纯度和完整度方面存在一定的差异.改良Trizol Ⅱ法提取RNA的A260/A280值为1.989,得率为171.0μg·g-1,电泳琼脂糖凝胶上有28,18,5 S rRNA 3条清晰的谱带,是泡桐叶片RNA提取的最佳方法.     

辣椒叶片RNA提取方法研究

以经过紫外线诱导处理的辣椒叶片为材料,分别用Trizol试剂快速提取法、尿素提取法和酚 SDS提取法提取其总RNA,比较各RNA产率、纯度及电泳图谱等,结果表明,尿素法提取的RNA28S和18S条带较为清晰,还可得到23S和16S带,较少有降解;而另2种方法所获得的RNA纯度较低,降解严重,琼脂糖电泳图谱通常只出现1条带.     

微波辅助提取芒果叶总黄酮的工艺研究

[目的]优化芒果叶黄酮类物质的提取工艺,为深入开展芒果叶黄酮研究、拓宽芒果叶综合利用途径提供依据.[方法]采用微波辅助法提取芒果叶总黄酮,并通过单因素试验和正交试验对其提取工艺进行优化.[结果]影响微波辅助提取芒果叶总黄酮的因素次序为:乙醇体积分数>微波功率>提取时间>料液比;而最佳工艺条件为:在料液比1∶40的条件下用40%乙醇于微波功率320 W中浸提2 min,其芒果叶总黄酮提取率达4.02%.[结论]以微波辅助提取芒果叶总黄酮具有工艺简单易行、快速、高效、经济的特点,是芒果叶资源化利用的有效途径.     

野生桃幼叶DNA提取方法的改良研究

以野生桃幼叶为材料,为适应AFLP分析要求,对常规SDS法、CTAB法、SDS-CTAB结合法以及改良CTAB法等4种基因组总DNA的提取方法的效果进行了比较研究。结果表明,常规SDS法难以去除桃幼叶组织中的蛋白质、多糖和酚类等杂质,使所提取的DNA呈黏稠状的浅褐色沉淀,难以溶解;CTAB法和SDS-CTAB结合法提取的桃基因组DNA,虽然蛋白质和酚类等杂质去除较干净,但对多糖类物质的去除能力仍然有限,且提取效果在品种间重复性较差;而改良CTAB法提取DNA完整性较好,杂质少,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求。     

利用CTAB法从刺梨中提取核酸的效果分析

高质量DNA和RNA的获得是进行分子标记、基因克隆、分子杂交等分子生物学实验的基础.从植物组织中提取核酸的方法较多,针对不同植物主要有SDS法、CTAB法、异硫氰酸胍法等[1].刺梨作为原产于我国的一种新兴果树,近年来对其种质遗传多样性及特殊、珍稀性状的分子生物学研究逐渐受到重视.     

番茄叶片总RNA提取方法的比较

番茄叶片富含酚类、多糖、蛋白质等次生代谢物质,用普通方法提取番茄叶片总RNA时很难将其去除,试验比较研究了RNA plant Reagent、UNIQ-10柱总RNA抽提试剂盒和改进Trizol三种方法的提取效果。结果表明,改进的Trizol法能从番茄叶片中提取纯度较高的RNA,凝胶电泳显示条带清晰完整,分光光度计检测A260/A280比值为1.88。用该方法提取的番茄叶片总RNA可以用于逆转录、RT-PCR、Northern blot等分子生物学研究。     

一种简便的同步提取烟草叶片DNA和总RNA的方法

以野生型和转几丁质酶烟草株系叶片为材料,采用改进的CTAB法对其DNA和总RNA进行同步提取和DNA中RNA的消化以及总RNA中DNA的消化,并分别进行了电泳检测、含量测定和相应的PCR和RT-PCR检测.结果表明:用该法提取的DNA条带清晰、无降解,所提取的DNA浓度在109.20～245.46 μg/mL,OD26...     

黄花蒿叶中抑菌成分提取方法的研究

深入研究了黄花蒿叶中抑菌成分的不同提取方法,以及不同方法提取液的抑菌活性,并对不同的情况作了全面的分析,通过比较探索出了抑制各种菌的不同提取方法。     

桑叶黄酮的提取分离纯化研究

采用醇提法、超声提取法探讨了从桑叶中提取总黄酮类物质的最佳工艺.试验结果表明:通过单因素试验和正交试验,超声法提取效果优于醇提法.其最佳条件是:用乙醇浓度为70%、料液比1∶15浸泡3h,再用超声提取45min,其桑叶中总黄酮类物质的提出率可达2.18%.采用聚酰胺树脂为层析柱填充料,对桑叶黄酮的提取液进行了纯化.同时通过样品与FeCl3、浓H2SO4等试剂的特征反应对所得提取物进行了定性分析,确定了所得提取物为黄酮类物质.     

超声波提取桑叶中总黄酮的工艺研究

采用醇提法、超声提取法探讨了从桑叶中提取总黄酮类物质的最佳工艺。试验结果表明:通过单因素试验和正交试验,超声提取效果最好。其最佳条件是:用浓度为70%、按料液比1:15的比例的乙醇浸泡3h,再用超声提取45min,其桑叶中总黄酮类物质的提出率可达2.18%采用聚酰胺树脂为层析柱填充料,对桑叶黄酮的提取液进行了纯化。还通过样品的总黄酮与FeCl3、浓H2SO4等试剂的特征反应对所得提取物进行了定性分析,确定了所得提取物为黄酮类物质。