柔嫩艾美尔球虫裂殖子免疫原性的研究

本文评价了柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子的免疫原性。试验采用弗氏完全佐剂乳化的裂殖子抗原及从组织中分离得的活游离殖子，以不同剂量的不同时间接种健康小鸡，随后用同源球虫进行攻击。效果评价指标为：（１）比较各抗原组的鸡只死亡率及盲肠病变记分；（２）各抗原组鸡只的增重差异。结果表明，柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子抗原不能刺激鸡体产生保护性免疫力；具有活力的裂殖子接种于健康鸡盲肠能诱发部分免疫力，但较自然感染者为     

柔嫩艾美耳球虫与鸡体的相互作用

鸡吞食柔嫩艾美耳球虫卵囊后感染,子孢子穿过绒毛上皮和固有层,进入隐窝上皮细胞,经数次无性生殖和有性生殖,形成裂殖子和配子体。大配子被小配子受精后发育成卵囊,并脱落到粪便中,鸡感染球虫后,鸡体免疫系统抑制球虫的发育有三个时期：子孢子寻找穿透位点时;子孢子在绒毛上皮时;子孢子穿过固有层时。据此,我们研究了抗球虫免疫中诱导和效应阶段的决定因素。结果表明,子孢子在固有层中的穿透诱导了免疫;子孢子是免疫有关的最重要的发育阶段;细胞毒性Ｔ细胞对抑制球虫发育是必需的。     

柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子的分离纯化

本文报道了柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子的分离纯化方法。依次通过酶消化、离心洗涤、红细胞裂解、Percoll密度梯度离心等手段对鸡柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子进行了分离纯化,结果表明,该法效果好,回收率高,操作程序较简单,所获得的裂殖子杂质极少,其纯度适用于进行分子生物学方面的研究。     

影响鸡球虫疫苗使用的因素和注意事项

鸡球虫的免疫预防已有近80年的历史，20世纪20年代Tyzzer等发现鸡在自然感染球虫后可获得对再感染的高度抵抗力，表明鸡可对球虫产生免疫力。鸡球虫免疫是体液免疫、细胞免疫、局部免疫积极参与的综合免疫。     

柔嫩艾美耳球虫伴侣蛋白TCP-1亚基α的特性和功能初步分析

柔嫩艾美耳球虫是一种重要的寄生于鸡盲肠细胞内的寄生原虫,可引起危害严重的鸡球虫病。目前,对鸡球虫病的预防和治疗主要依靠抗球虫药,而药物的广泛使用使球虫产生了严重的耐药性。为研究球虫耐药性产生的机制,本实验室前期对诱导的地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株和亲本敏感株进行转录组测序,经分析发现TCP-1亚基α为耐药株和敏感株的差异表达基因且在耐药株上调表达。本文以柔嫩艾美耳球虫敏感株为模板,成功克隆出TCP-1亚基α基因,构建了原核表达重组质粒p ET-Et TCP-1α,并成功诱导表达了重组蛋白r Et TCP-1α,用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔和BALB/C小鼠获得多克隆抗体。用荧光定量PCR和Western blot方法检测柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株和马杜拉霉素耐药株TCP-1亚基α基因的m RNA转录和翻译水平,同时检测了该基因在球虫不同发育阶段的转录水平和翻译水平。结果显示,Et TCP-1α在2个耐药株的m RNA转录和蛋白翻译水平明显高于敏感株,而且该蛋白在第二代裂殖子的表达最高;间接免疫荧光实验显示该蛋白主要位于子孢子和第二代裂殖子表面,当虫体入侵DF-1细胞进行裂殖生殖后,该蛋白分布于整个虫体,且表达量明显升高。因此,推测Et TCP-1α在柔嫩艾美耳球虫细胞内的生长发育和耐药性的产生过程中发挥了一定的作用。     

夏季肉鸡球虫病多发的原因与对策

一夏秋季球虫病多发的原因 1温度、湿度适宜 鸡感染球虫后,球虫在肉鸡消化道内经过一段时间的多次裂殖生殖,所产生的裂殖子进行配子生殖,最后形成卯囊,随粪便排出体外。     

大量制备毒害艾美耳球虫配子体方法的研究

鸡经嗉囊接种毒害艾美耳球虫孢子化卵囊148 h后,从鸡小肠中段分离成熟的第二代裂殖子;经外科手术方法,将第二代裂殖子直接注入鸡盲肠内,使第二代裂殖子同步发育至配子体;手术后30 h剖检鸡,刮取盲肠黏膜,随后依次通过透明质酸酶消化、滤膜过滤、红细胞裂解、Percoll密度梯度离心等步骤,分离、纯化毒害艾美耳球虫配子体。结果显示,通过本方法分离、纯化的配子体纯度高、数量多,可用于基因转录组学、蛋白质组学、免疫学和疫苗等方面的研究。     

复方磺胺氯吡嗪钠混悬剂的研制及其质量控制

<正>磺胺氯吡嗪钠是抗球虫专用的磺胺药,具有较强的抗菌作用,最适合于球虫病爆发时应用,其抗球虫的活性峰期是球虫第二代裂殖体,对第一代裂殖体也有一定作用[1],但该类药物已使用多年,不少球虫对其产生耐药性或交叉耐药性。二硝托胺为硝基苯酰胺化合物,是一种既有预防又有治疗效果的抗球虫药,主要作用于第一代裂殖体,同时对卵囊的子孢子形成也有抑杀作用,被广泛应用于兽医临床[2],但长期高浓度使用会造成药物残留,对人体健康造成潜在     

巨型艾美耳球虫感染鸡免疫反应与卵囊排出量的关系

鸡球虫病，由几种艾美耳球虫引起，是一种经济上非常重要的家禽寄生虫病，每年可导致全球养鸡业约两亿美元的损失。兔疫预防是防止球虫感染的一种手段，它依赖于对自然感染期间保护性免疫力发展机制。巨型艾美耳球虫是鸡体内致病性球虫中免疫原性最强的球虫之一，该种球虫无性生殖阶段的抗原比有性阶段抗原具有更强的免疫原性。虽然含种特异性兔疫诱导物的巨型艾美耳球虫抗原已得到鉴定，但球虫种内仍存在抗原差异，因此由巨型艾美耳球虫一个株诱发产生的免疫力对于同种球虫另一不同株系的攻击不能提供完全的保护。抗球虫免疫包括体液兔疫和…     

鸡球虫病的防治

鸡球虫病为球虫感染鸡肠道所引起,临床危害较大,常见的为柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫感染,整个发育过程需要经过裂殖生殖和配子生殖两个阶段;感染鸡主要表现血便、体重减轻、营养不良和贫血的症状;防治本病需要加强管理,定期通过疫苗免疫来阻挡强毒株的感染,经常发生本病的鸡场建议进行程序性药物预防。     

巨型艾美球虫在免疫鸡体内发育的组织学观察

巨型艾美球虫在非免疫鸡体内有３代裂殖生殖、在其第１代和第２代裂殖生殖阶段,虫体寄主的空肠组织发生粘液变性,在裂殖生殖后期和配子生殖阶段,空肠绒毛组织变化明显,包括粘膜上皮细胞大量脱落,固有层淋巴细胞浸润等,有时出现大量上皮间淋巴细胞。试验鸡经巨型艾美球虫攻击后,在其子孢子侵入,移行阶段就受到抑制。随着时间推移,第１代,第２代和第３代殖生殖受到日益加重的抑制,最终使虫体没有进入到有性生殖阶段。     

鸡球虫病保护性免疫机制的研究进展

为了进一步研究和探索鸡球虫保护性免疫机制,开发理想的球虫疫苗,提供具有较强功能的保护性抗原以及寻找可靠的球虫病免疫检测手段,本文从以下五个方面对鸡球虫保护性免疫机制作了概述:体液免疫;细胞免疫;局部免疫;母源免疫;免疫的调控。     

球虫免疫鸡群饲料添加剂的选用

球虫感染属于自限性感染，感染后机体就会产生对同种球虫的免疫力。球虫免疫就是根据这一原理采用少量疫苗活卵囊通过口服途径感染鸡只，而使鸡只获得对同种球虫的保护力，小剂量感染不会引起临床疾病，而且对肠道显微结构的破坏也不大。具体讲，疫苗活卵囊进入鸡消化道经2次脱囊释放出孢子，孢子侵入肠上皮细胞经过孢子生殖、裂殖生殖和配子生殖3个发育阶段形成大量未孢子化的卵囊随粪便排出。在适宜的外界环境中，这些卵囊发育成具感染力的孢子化卵囊，鸡只再从垫料中摄入这些卵囊，从而开始新一轮的增殖发育，这样感染强度与免疫力相长，…     

鸡毒害艾美耳球虫表面抗原基因(EnSAG)的克隆表达及其免疫保护力

为了研究鸡毒害艾美耳球虫表面抗原基因(EnSAG)的功能,以毒害艾美耳球虫(扬州株)第二代裂殖子的总RNA为模板,RT-PCR扩增其EnSAG,连接至pGEM-T-Easy载体,鉴定后构建pET28a(+)-EnSAG表达载体,转化至大肠杆菌BL21,鉴定后进行诱导表达和纯化。用纯化重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗EnSAG蛋白的多克隆抗体。利用多克隆抗体,用Western blot技术检测子孢子和第二代裂殖子中的天然EnSAG蛋白。用重组蛋白按高剂量(200μg/羽)、中剂量(100μg/羽)和低剂量(50μg/羽)免疫雏鸡,同时设置未免疫攻虫组和未免疫未攻虫组为对照,以成活率、平均增重、相对增重率、卵囊减少率、病变记分和抗球虫指数(ACI)为指标,评价重组蛋白的免疫保护力。结果显示：该基因全长768 bp,编码255个氨基酸,分子质量24.63 ku;重组蛋白大小约为30 ku,以包涵体形式为多,能被组氨酸单抗和鸡抗毒害艾美耳球虫阳性血清特异性识别;在第二代裂殖子中检测到天然EnSAG蛋白,其分子质量大约为27 ku。各试验组的成活率均为100%;免疫组的平均增重增加,病变记分...     

鸡球虫病保护性免疫机制的研究进展

为了进一步研究和探索鸡球虫保护性免疫机制，开发理想的球虫疫苗，提供具有较强功能的保护性抗原以及寻找可靠的球虫病免疫检测手段，本文从以下五个方面对鸡球虫保护性免疫机制作了概述：体液免疫；细胞免疫；局部免疫；母源免疫；免疫的调控。     

表达黄色荧光蛋白和乙胺嘧啶抗性基因的转基因柔嫩艾美耳球虫的发育和致病性分析

为了研究外源基因表达对转基因柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)生物学特性的影响,对转基因球虫(TE1)和BJ株(野生强毒)的发育和致病性进行比较分析.结果显示,相对于BJ株,转基因球虫TE1株繁殖力下降约4倍,低剂量感染时致病性下降明显,但是高剂量感染时依然保持较强的致病性.另外,在荧光显微镜下发现,TE1有滋养体、第一代裂殖体/裂殖子、第二代裂殖体/裂殖子和大小配子体等内生发育虫体.孢子化卵囊内4个孢子囊并非全部表达黄色荧光蛋白.这些结果说明黄色荧光蛋白和乙胺嘧啶抗性基因的表达在一定程度上降低了转基因柔嫩艾美耳球虫致病性和繁殖力.在柔嫩艾美耳球虫合子减数分裂过程中,存在同源或异源染色体重组现象.     

体液免疫在鸡球虫感染中的作用

球虫感染后可诱发宿主产生保护性免疫反应 ,其中体液免疫在抗球虫免疫中发挥着不可忽视的作用。球虫感染鸡后可很快检测到循环抗体。初次感染IgM出现最快 ,2次感染可产生高水平的IgG ,且持续时间也较长 ,提示IgG在球虫 2次感染中起着主导作用。黏膜免疫是体液免疫的重要组成部分 ,即产生分泌型IgA。研究发现高浓度IgA与小肠中子孢子复活率降低相关。母源抗体可抑制球虫感染雏鸡 ,雏鸡体内母源抗体水平与其抗球虫感染的变化具有高度一致性。作者对体液循环抗体、分泌型抗体以及母源抗体在球虫保护性免疫中的作用进行全面系统的综述 ,旨在为防制球虫病提供重要的科学依据     

一种纯化柔嫩艾美耳球虫裂殖子的新方法

本文报道了一种快速而简单的纯化柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子的新方法。这种方法是利用含0.25％胰酶和5％胆盐的消化液,消化被感染的鸡胚或盲肠而释放出裂殖子。利用这一消化程序子孢子液过滤后每胚或每条盲肠可获得1.4×10~7和8.33×10~7的裂殖子。与老方法相比。此法比从鸡胚收获到裂     

鸡球虫病的细胞免疫机理

宿主(鸡)感染球虫后,产生非特异性免疫应答和特异性免疫应答———体液免疫应答和细胞免疫应答。非特异性免疫因素主要是遗传因素或体内外理化因素对球虫的杀灭作用。体液免疫主要通过依赖腔上囊B淋巴细胞实现,细胞免疫主要通过依赖胸腺的T淋巴细胞实现。实验分别摘除胸腺和腔上囊,发现鸡球虫病的免疫力可由于摘除胸腺而受到抑制,而摘除腔上囊则无影响,结果表明抗体作用居于次要地位,而细胞免疫居于主要地位。1T淋巴细胞在鸡球虫保护性免疫中的作用用抑制细胞介导免疫力的药物环孢菌素A(CsA)处理鸡后,研究T淋巴细胞在鸡球虫中的保护作用…     

介绍家禽适用的抗寄生虫药(二)

二、抗球虫药(一)抗球虫药的种类1.呋喃类呋喃类药物是较早应用于防治球虫病的药物,但毒性较大,特别是雏鸡较敏感,用时要特别注意。本类药物因价格低廉,除对球虫有效外,对细菌也有作用。故目前在临诊上还继续使用。本类药对鸡的艾美耳球虫有效,主要对球虫生长过程中的第二代裂殖体有抑制作