犬脾转移因子特性的初步鉴定

犬脾转移因子（ＣＳ－ＴＥ）是从犬脾脏中提取的一种特定的淋巴细胞因子，其理化特性与基它转移因子（ＴＦ）的相似。通过巨噬细胞吞噬试验及Ｅ玫瑰花环形成试验证明，ＣＳ－ＴＦ能增强机体的免疫功能。     

异源抗原在建立ELISA检测传染性法氏囊病毒抗体中的应用

本文报告采用ｖｅｒｏ细胞增殖的ＩＢＤＶ抗原建立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），用于定量检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗体。该法快速、敏感性高、特异性强、重复性好。同时，通过３０份血清样品ＥＬＩＳＡ效价（ＥＴ）的对数值（ｌｏｇＥＴ）与血清Ｐ／Ｎ值（待检血清ＯＤ值与阴性血清ＯＤ值之比）的线性回归分析，得直线方程ｙ＝３．０５８９＋０．０７３９ｘ（ｒ＝０．９１７４），从而血清样品的ＥＴ可通过血清单一稀释度的Ｐ／Ｎ值来计算。用不同来源抗原作ＥＬＩＳＡ表明，从ｖｅｒｏ细胞增殖的抗原比从鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞增殖的抗原可提高检测血清ＯＤ值近２０％，表现出异源抗原具有更高的特异性     

青海藏羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对青海省三角城种羊场和达日县的１９６份藏羊血样进行了血清运铁蛋白多态性的研究。结果发现：①在被检藏羊的血清运铁蛋白位点上共发现ＴＦ￣Ｉ，ＴＦ￣Ａ，ＴＦ￣Ｇ，ＴＦ￣Ｂ，ＴＦ￣Ｌ，ＴＦ￣Ｃ，ＴＦ￣Ｄ，ＴＦ￣Ｍ，ＴＦ￣Ｅ，ＴＦ￣Ｑ和ＴＦ￣Ｐ１１个等位基因，其中ＴＦＣ（０．３２４０），ＴＦ￣Ｂ（０．２６７９）和ＴＦ￣Ｄ（０．２１６８）为优势等位基因；②共发现ＴＦＩＥ，ＴＦＡＡ，ＴＦＡＢ，ＴＦＡＣ，ＴＦＡＤ，ＴＦＡＭ，ＴＦＧＢ，ＴＦＧＬ，ＴＦＧＣ，ＴＦＧＤ，ＴＦＢＢ，ＴＦＢＣ，ＴＦＢＤ，ＴＦＢＭ，ＴＦＬＣ，ＴＦＬＤ，ＴＦＬＥ，ＴＦＣＣ，ＴＦＣＤ，ＴＦＣＥ，ＴＦＣＱ，ＴＦＣＰ，ＴＦＤＤ，ＴＦＤＭ，ＴＦＤＥ和ＴＦＤＱ２６种基因型，其中ＴＦＢＣ（２０．４１％）、ＴＦＣＣ（１３．７８％）和ＴＦＢＤ（１１．７４％）为优势基因型。     

SPF雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒后肿瘤坏死因子的动态变化

本试验采用微量细胞病变法和四甲基偶氮唑盐（ Ｍ Ｔ Ｔ）法研究了 １ 日龄 Ｓ Ｐ Ｆ 雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒（ Ｒ Ｅ Ｖ）后，免疫器官脾脏肿瘤坏死因子（ Ｔ Ｎ Ｆ）诱生活性动态变化。结果表明，雏鸡感染 Ｒ Ｅ Ｖ 后脾脏细胞 Ｔ Ｎ Ｆ诱生活性极明显增高（ Ｐ＜ ０．０１）， Ｔ Ｎ Ｆ诱生活性明 显增高与 Ｒ Ｅ Ｖ 在机体各器官内长期大量繁殖紧密相关，并引起各免疫器官严重的变质性变化，以及由于 Ｔ Ｎ Ｆ高含量的免疫损伤作用而降低机体各免疫器官的机能。     

青海细毛羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对４０１只青海细毛羊的血清运铁蛋白多态性进行了研究。结果表明：①青海细毛羊血清运铁蛋白座位上有ＴＦＡ，ＴＦＧ，ＴＦＢ，ＴＦＣ，ＴＦＤ，ＴＦＭ，ＴＦＥ和ＴＦＱ８个等位基因，其中ＴＦＣ（０．３８７８）和ＴＦＡ（０．２４９４）为优势等位基因；②已发现ＴＦＡＡ，ＴＦＡＧ，ＴＦＡＢ，ＴＦＡＣ，ＴＦＡＤ，ＴＦＡＭ，ＴＦＡＥ，ＴＦＡＱ，ＴＦＧＧ，ＴＦＧＢ，ＴＦＧＣ，ＴＦＧＤ，ＴＦＢＢ，ＴＦＢＣ，ＴＦＢＤ，ＴＦＢＭ，ＴＦＣＣ，ＴＦＣＤ，ＴＦＣＭ，ＴＦＣＱ，ＴＦＤＤ，ＴＦＤＭ，ＴＦＤＥ２３种基因型，以ＴＦＡＣ（２０．９５％）的出现频率最高；③ＴＦ座位的基因杂合度为０．７３８１；④在公羊组和母羊组，ＴＦ基因型与体重、毛长和产毛量之间无显著性联系。     

单一血清稀释度ELISA定量检测鸡新城疫抗体水平的研究

建立了一种以单一血清稀释度定量检测鸡血清中ＮＤＶ抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法，经试验得出回归方程ＬｎＥＴ＝５．８７８＋０．５３７Ｐ／Ｎ．该方法特异性强，能被ＮＤＶ单抗所特异性阻断，比ＨＩ方法敏感。通过对ＳＰＦ鸡等进行的不同疫苗免疫前，后抗体动态测定表明，ＥＴ值与ＨＩ值之间呈一定的相关性，强毒攻击试验表明，ＥＴ值＞４０００时鸡群能得以保护，装配成的商品试剂盒保存期长达６个月。     

pCMV—TNFα的构建及其在动物细胞中的表达

以Ｘｂａ Ｉ和Ｅｃｏ ＲＶ双酶消化ｐＢＴ１获得肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ基因片段，以Ｘｂａ Ｉ和Ｓｍａ Ｉ酶切点定向克隆入质粒载体ｐＣＭＶ４，构建了人ＴＮＦα重组质粒ｐＣＭＶ－ＴＮＦα。采用ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀法转染ＣＯＳ７和ＮＩＨ３Ｔ３细胞，收集转染后不同时间的细胞培养上清，检测ＴＮＦα的表达水平和生物学活性。ＥＬＩＳＡ检测表明，两种细胞转染后，其培养上清中均有ＴＮＦα抗原存在，而载体等     

不同生理时期不同水平大豆抗营养因子对生长蛋鸡器官重的影响

不同生理时期不同水平大豆抗营养因子对生长蛋鸡器官重的影响ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＴＨＥＤＩＥＴＳＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＶＡＲＩＮＧＬＥＶＥＬＳＯＦＲＡＷＳＯＹＢＥＡＮＯＮＯＲＧＡＮＷＥＩＧＨＴＳＯＦＰＵＬＬＥＴＳＤＵＲＩＮＧＤＩＦＦＥＲＥＮＴＧＲＯＷＩＮＧＰ...     

pCMV－TNFα的构建及其在动物细胞中的表达

以ＸｂａⅠ和ＥｃｏＲＶ双酶消化ｐＢＴ１获得肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ基因片段，以ＸｂａⅠ和ＳｍａⅠ酶切点定向克隆入质粒载体ｐＣＭＶ４，构建了人ＴＮＦα重组质粒ｐＣＭＶ－ＴＮＦα。采用ＤＮＡ—磷酸钙共沉淀法转染ＣＯＳ７和ＮＩＨ３Ｔ３细胞，收集转染后不同时间的细胞培养上清，检测ＴＮＦα的表达水平和生物学活性。ＥＬＩＳＡ检测表明，两种细胞转染后，其培养上清中均有ＴＮＦα抗原存在，而载体等对照则测不出ＴＮＦα。以Ｌ９２９细胞检测其细胞毒活性，发现ＣＯＳ７细胞于转染后４８ｈ表达水平最高，活性高达１６Ｕ／ｍＬ以上，但７ｄ时测不出ＴＮＦα活性；ＮＩＨ３Ｔ３细胞于转染后２４ｈ活性最高（８Ｕ／ｍＬ），９ｄ时尚有表达，但不足１Ｕ／ｍＬ。     

猪传染性胃肠炎病毒在组织细胞上增殖的研究

从组织细胞制备、不同试验细胞（ｐｋ１５，ＳＴ）及不同维持液组成成份三个方面对ＴＧＥＶ在组织细胞上增殖情况进行了比较。结果表明，用含１５％ＦＢＳ培养液进行ＳＴ或ｐｋ１５细胞传代并制备悬液，操作方便，能形成良好单层，利用ＴＧＥＶＣＰＥ判定；ＳＴ细胞在病毒增殖和检测毒价两方面均较ｐｋ１５细胞分别高２个滴度和１个滴度以上；维护液中提高血清含量（８％ＦＢＳ）或含一定量胰酶对ＴＧＥＶ增殖效果影响不大。     

青海黄牛血清运铁蛋白多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对１００头青海黄牛的血清运铁蛋白多态性进行了研究。结果发现：青海黄牛血清运铁蛋白位点存在ＴＦ￣Ａ，ＴＦ￣Ｂ，ＴＦ￣Ｄ１，ＴＦ￣Ｄ２，ＴＦ￣Ｆ，ＴＦ￣Ｅ６个等位基因，总共构成１３个基因型。与国内１２个品种黄牛的遗传距离和聚类分析表明，青海黄牛与蒙古牛的亲缘关系最近（Ｄｍ＝０．１１７８）。     

内皮素与动物生殖

内皮素（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）是哺乳动物体内新发现的一类具有广泛生物学活性的短链多肽，在人及动物体内许多器官组织中都有ＥＴ及其受体分布。同一体内至少有ＥＴ－１、ＥＴ－２、ＥＴ－３三种ＥＴ异构体形式和ＥＴＡ、ＥＴＢ两种ＥＴ受体亚型。ＥＴ的作用范围涉及机体各主要系统，主要以旁分泌和自分泌方式参与各系统的功能调节。ＥＴ除通过调节生殖激素分泌而影响动物生殖生理功能外，还通过其它途径对动物妊娠、分娩、泌乳、精子生成与成熟、阴茎勃起与松驰及促使精卵结合完成受精等生殖过程发挥重要作用     

接种La Sota疫苗雏鸡外周器官中CD4+T细胞的来源及其作用

切除胸腺的２日龄雏鸡,接种抗鸡Ｔ细胞表面分子ＣＤ４的单克隆抗体,于１２日龄时以ＬａＳｏｔａ疫苗免疫。然后,在不同的日龄分别用ＦＡＣＳ,ＭＴＴ及间接ＥＬＩＳＡ测定脾脏和外周血中ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ淋巴细胞亚类数量,脾Ｔ淋巴细胞转化功能及病毒特异的血清ＩｇＧ抗体的动态变化。     

含绿脓杆菌外毒素A受体结合区重组蛋白的纯化

将表达含绿脓杆菌外毒素（ＰＥＡ）受体结合区基因的质粒ｐＥＴ－ＥＡＢ转化到大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中,经ＩＰＴＧ诱导表达了含ＰＥＡ受体结合区的重组蛋白（称ＰＥ３４）。ＰＥ３４主要以包涵体形式存在于大肠杆菌中,用溶菌酶－脱氧胆酸钠法结合超声波裂解法破碎细菌,离心制备包涵体。用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包涵体后,包涵体纯度可达７５％,在８ｍｏｌ／Ｌ脲存在条件下,ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００凝胶滤过,ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子交换层析纯化,获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ１条带的ＰＥ３４,纯度达９５．８％,得率为２４．５％。     

催乳素对促性腺激素诱导的鸡卵泡膜细胞类固醇激素合成的抑制作用

利用无血清培养的鸡卵泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对卵泡膜细胞类固醇激素合成的作用。用不同剂量的ＰＲＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促卵泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２４ｈ后收集培养液，测定培养液中睾酮（Ｔ）和雌二醇（Ｅ２）含量。结果表明，ＬＨ能明显刺激膜细胞合成Ｔ和Ｅ２，并具有剂量依赖关系；ＰＲＬ单独对膜细胞类固醇合成无明显作用，但可抑制ＬＨ诱导的Ｔ和Ｅ２合成，以及ＦＳＨ刺激的Ｅ２合成。本研究证明ＰＲＬ能作用于鸡卵泡膜细胞，并能抑制促性腺激素ＬＨ和ＦＳＨ诱导的类固醇激素的合成     

催乳素对促性腺激素诱导的鸡卵泡膜细胞类固醇激素合成的抑制…

利用无血清培养的鸡泡（Ｆ３）膜细胞模型研究了催乳素（ＰＲＬ）对泡膜在醇激素合成的作用。用不同剂量的ＲＰＬ、黄体生成素（ＬＨ）及促泡激素（ＦＳＨ）分别或共同处理在无血清培养液中培养了４８ｈ的鸡卵泡膜细胞，２４ｈ后收集培养液，测定培养液中睾酮（Ｔ）和雌醇（Ｅ３）含量。结果表明，ＬＨ能明显刺激膜细胞合成了Ｔ和Ｅ２，并具有剂量依赖关系；ＲＰＬ单独对膜细胞类固醇合成无明显作用，但可抑制ＬＨ诱导的Ｔ和Ｅ合成，     

穴位接种猪TGE苗家兔β—EP与免疫活性细胞动态研究

本试验用酶标组化方法对穴位接种猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）苗家兔外周血，脾，淋巴结的β－内啡肽（β－ＥＰ）进行了动态定量和定位研究，外周血β－ＥＰ在穴位注苗后３０ｍｉｎ有一个峰值，迅速下降后缓慢升高，第５天达第２个峰值，然后缓慢下降；脾和淋巴结仅在注苗后５天出现一个峰值。首次发现活化Ｔ细胞存在β－ＥＰ阳性反应细胞，而Ｂ细胞不存在。     

不同细胞培养基细胞培养动力学比较试验

应用宜兴赛尔生物化工厂产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基与美国Ｓｉｇｍａ公司产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基分别配制细胞培养液，培养ＳＰ２／０和Ｖｅｒｏ细胞系及原代鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），做细胞培养动力学比较试验。比较这两种来源的细胞培养基对细胞生长的形态、分裂速度及鸡马立克氏病毒（Ｍａｒｅｋ＇ｓｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ．ＭＤＶ）疫苗毒株ＨＶＴ－ＦＣ１２６和ＲｉｓｐｅｎｓＣＶＩ９８８在ＣＥＦ单层上增殖量的差异。研究结果表明，四种国产细胞培养基与对应的四种进口培养基对细胞生长及病毒增殖的影响无显著差异     

穴位接种猪TGE苗家兔β－EP与免疫活性细胞动态研究

本试验用酶标组化方法对穴位接种猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）苗家兔外周血、脾、淋巴结的β－内啡肽（β－ＥＰ）进行了动态定量和定位研究，外周血β－ＥＰ在穴位注苗后３０ｍｉｎ有一个峰值，迅速下降后缓慢升高，第５天达第２个峰值，然后缓慢下降；脾和淋巴结仅在注苗后５天出现一个峰值。首次发现活化Ｔ细胞存在β－ＥＰ阳性反应细胞，而Ｂ细胞不存在。     

猪传染性胃肠炎病毒在组织细胞上增殖的研究

从组织细胞制备，不同试验细胞及不同维持液组成成份三个方面对ＴＧＥＶ在组织细胞上增殖情况进行了比较。结果表明，用含１５％ＦＢＳ培养液进行了ＳＴ或ｐｋ１５细胞传代并制备悬液，操作方便，能形成良好单层，利用ＴＧＥＶ ＣＰＥ判定；ＳＴ细胞在病毒增殖和检测毒价两方面均较ｐｋ１５细胞分别高２个滴度和１个滴度以上；维护液中提高血清含量或含一定量胰酶对ＴＧＥＶ增殖效果影响不大。