银杏叶聚戊烯醇及其衍生物的抑菌活性研究

以银杏叶聚戊烯醇为原料,通过酯化反应合成了聚戊烯基季铵盐、聚戊烯基磷酸钠以及聚戊烯基乙酸酯,并对其结构进行了表征。采用滤纸片法测定了银杏叶聚戊烯醇及其衍生物对于金黄色葡萄球菌(S.aureus)和大肠杆菌(E.coli)的抑菌圈直径,以等倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)值,并对其进行抗菌谱测试。结果表明,银杏叶聚戊烯醇衍生物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC值范围0.062 5～1 g/L,低于银杏叶聚戊烯醇的MIC值范围2～4 g/L,4种样品对于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有较好的抑制作用,银杏叶聚戊烯醇的抑菌活性较其衍生物略低,4种样品对于枯草芽孢菌和沙门氏菌亦有抑制作用,对于啤酒酵母菌和黑曲霉菌无明显抑菌作用。     

银杏叶聚戊烯醇的分离纯化及其亲水衍生物的合成

首先对银杏叶聚戊烯醇含量测定的方法及方法学进行了考察,结果表明:采用高效液相色谱,以C18为色谱柱,以异丙醇/甲醇(体积比32∶18)为流动相,在210 nm下测定聚戊烯醇具有较高的精密度(RSD为0.89%)、较好的稳定性(RSD为3.26%),平均加标回收率为97.4%(RSD为1.75%)。然后通过正己烷提取、皂化、乙醇和丙酮脱蜡,以及硅胶柱层析(V(乙醚)∶V(正己烷)=3∶97)获得纯度为98.6%的聚戊烯醇。在此基础上,对高纯度聚戊烯醇末端羟基进行亲水改性,先与邻苯二甲酰亚胺进行光延反应(mitsunobu反应),再与水合肼进行还原反应,合成了氨基聚戊烯醇,并通过红外和核磁共振氢谱对其结构进行了表征,确认了氨基聚戊烯醇的成功合成。     

银杏叶聚戊烯醇联合化疗肿瘤的药效研究

研究了银杏叶聚戊烯醇(GP)联合化疗S180肿瘤的药效作用。从银杏叶中分离纯化聚戊烯醇，分别与阿霉素注射液(ADM)、氟脲嘧啶(5-Fu)、环磷酰胺(CTX)和顺铂(PDD)等化疗药联合用药，对S180荷瘤小鼠进行抑瘤实验，并与ADM、5-Fu、CTX和PDD单独用药比较。研究表明，聚戊烯醇与CTX、PDD、5-Fu联合化疗，对S180的抑瘤率分别从59．8l％、43．06％、42．03％提高到70．56％、60．29％、63．45％；与ADM联合化疗，可使1．0mg／kg的ADM对S180的抑瘤率从50．93％提高到77．19％。研究结果表明，银杏叶聚戊烯醇具有明显的辅助化疗和减毒增效作用。     

分子短程蒸馏分离银杏叶聚戊烯醇的研究

以银杏叶为原料,采用皂化反应、溶剂萃取和冷冻制备聚戊烯醇不皂化物,皂化剂为5%NaOH-EtOH,石油醚软膏与皂化剂的比例为1∶5(g∶mL),首次采用分子短程蒸馏分离聚戊烯醇不皂化物,最佳工艺为:Ⅰ级分子蒸馏,工艺参数为冷凝温度2.5℃,循环水温度60℃,物料加热温度60℃,蒸馏温度160℃,进料速率180mL/h,刮膜转速200r/min,蒸馏真空度0.5～1.0Pa;Ⅱ级分子蒸馏,工艺参数为循环水温度80℃,物料加热温度60℃,蒸馏温度280℃,进料速率180mL/h,刮膜转速300r/min,蒸馏真空0.1～0.5Pa。结果表明:溶剂中聚戊烯醇为55.6%,银杏叶聚戊烯醇(GP)回收率为98.5%,馏余物中聚戊烯醇的含量由不皂化物中的46.2%提高到83.7%,而且无溶剂残留,是工业化制备高纯度聚戊烯醇理想的分离方法。     

银杏叶聚戊烯醇含氮和含卤素衍生物的抑菌活性研究

利用含氮和含卤素试剂对银杏叶聚戊烯醇末端羟基进行含氮和含卤素的衍生化改性,结果得到5种衍生物,分别为聚戊烯基邻苯二甲酰亚胺(GPH)、氨基聚戊烯醇(GAM)、聚戊烯基季铵盐(GAS)、聚戊烯基三氟乙酰(GTF)和聚戊烯基氯乙酰(GCH),并用~1H NMR分别表征并证实了产物结构。通过比较产物抑菌圈直径和最小抑质量浓度(MIC)来筛选出抗菌作用较强的衍生物,结果显示:GAS对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性均为最高,其抑菌圈为19.1~19.8 mm,MIC均为31.3 mg/L。同时研究了GAS在亚抑菌质量浓度下(15.6 mg/L)对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌曲线,结果显示:GAS对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在48 h内具有一定抗菌性;在前8 h内,GAS对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌作用较强,致使菌群数量迅速下降;8 h以后,两种菌群都有不同程度的再生,抑菌活性减弱。     

银杏叶聚戊烯醇对小鼠免疫功能和诱导肿瘤细胞凋亡的研究

用不同剂量银杏叶聚戊烯醇(GP)给正常小鼠和荷瘤小鼠灌胃,用碳粒廓清法分析正常小鼠巨噬细胞吞噬功能;采用流式细胞术(FCM)检测S180荷瘤小鼠的凋亡细胞比率(APO)、S期细胞比率(SPF)和增殖指数(PI)的变化,分析T细胞亚群CD4/CD8比值的影响.结果表明,10和20 mg/kg的GP能提高正常小鼠巨噬细胞的吞噬功能, 对碳粒的清除作用高于环磷酰胺(CTX);高剂量组(40 mg/kg)GP与对照组比较,能增加肝癌(Heps)荷瘤小鼠胸腺指数和艾氏腹水癌(EC)荷瘤小鼠脾指数.5 mg/kg GP对S180荷瘤小鼠细胞的APO为6.35, 明显高于阴性对照组及其它给药组,使S180荷瘤小鼠CD4/CD8比值接近正常小鼠.     

银杏叶聚戊烯醇金属配合物的合成及其光控活性

以银杏叶聚戊烯醇(GBP)为原料,通过化学改性手段将其末端羟基替换成氰基,之后将氰基聚戊烯醇与钌多吡啶配合物络合,合成了聚戊烯醇-钌多吡啶配合物,并对其进行表征,考察了配合物的脂水分配系数、光致配体解离能力和光控抗肿瘤活性.核磁共振表征结果表明,氰基聚戊烯醇和聚戊烯醇-钌多吡啶配合物成功合成.合成的配合物具有较好的脂水...     

银杏叶聚戊烯醇对小麦种子萌发和幼苗生长的化感作用研究

选用小麦为供试材料,探究不同质量浓度银杏叶聚戊烯醇提取物对小麦种子萌发和幼苗生长的影响.结果表明,低质量浓度聚戊烯醇(20和50 mg/L)能够促进小麦种子的萌发和幼苗生长,发芽率为77.67％,苗高14.36 cm,根长16.40 cm,种子的淀粉酶活性增强,为14.75 mg/(g·min),根系活力增强,达到109.35μg/(g·h).而高质量浓度(100 mg/L)聚戊烯醇,对小麦种子的萌发及幼苗生长呈现出一定的抑制作用,淀粉酶活性和根系活力降低,分别为9.82 mg/(g·min)和21.12μg/(g·h).     

银杏叶聚戊烯醇对荷瘤鼠生命延长率的研究

以银杏叶为原料，采用皂化反应、溶剂冷冻和Ⅱ级分子蒸馏分离聚戊烯醇不皂化物，精制银杏叶聚戊烯醇（GP），纯度87．3％。通过建立人脑瘤SF763、人肺腺瘤A549和艾氏腹水瘤Ec移植小鼠模型，GP口服给药，研究GP对人脑瘤SF763裸鼠和艾氏腹水瘤Ec小鼠的生命延长率，观察GP对人肺腺瘤A549裸鼠的抑瘤率。结果表明：生药剂量320mg／kgGP联合2mg／kg阿霉素（ADM），其生命延长率为88％（P〈0．01），GP能明显延长荷人脑瘤SF763裸鼠生命；GP在大于40mg／kg时对人肺腺瘤A549裸鼠具有明显的抑制作用（P〈0．05），最佳剂量为GP80mg／kg，接种时间11d，抑瘤率为82．2％（P〈0．01）；GP对艾氏腹水瘤EC小鼠的生存期呈现负量效关系，GP最佳剂量范围在5-10mg／kg，最高生命延长率为32．77％（P〈0．05）。     

银杏叶聚戊烯醇对荷瘤鼠生命延长率的研究

以银杏叶为原料,采用皂化反应、溶剂冷冻和Ⅱ级分子蒸馏分离聚戊烯醇不皂化物,精制银杏叶聚戊烯醇(GP),纯度87.3%.通过建立人脑瘤SF763、人肺腺瘤A549和艾氏腹水瘤EC移植小鼠模型,GP口服给药,研究GP对人脑瘤SF763裸鼠和艾氏腹水瘤EC小鼠的生命延长率,观察GP对人肺腺瘤A549裸鼠的抑瘤率.结果表明:生药剂量320 mg/kg GP联合2 mg/kg阿霉素(ADM),其生命延长率为88%(P＜0.01),GP能明显延长荷人脑瘤SF763裸鼠生命;GP在大于40 mg/kg时对人肺腺瘤A549裸鼠具有明显的抑制作用(P＜0.05),最佳剂量为GP80 mg/kg,接种时间11 d,抑瘤率为82.2%(P＜0.01);GP对艾氏腹水瘤EC小鼠的生存期呈现负量效关系,GP最佳剂量范围在5～10 mg/kg,最高生命延长率为32.77%(P＜0.05).     

银杏叶聚戊烯基磷酸酯体内外抗肿瘤的生物活性研究

研究了聚戊烯基磷酸酯(PPH)体外对肿瘤细胞和体内抗移植性肿瘤的抑制作用。从银杏叶中分离制备聚戊烯醇混合物(C75~C110),选择POC l3为磷酰化剂和三乙胺为碱性水解剂,经过磷酰化和水解二步反应,合成聚戊烯基磷酸单酯。以氟脲嘧啶(5-Fu)为对照,体外肿瘤细胞株选择SGC-7901人胃癌、LoVo人结肠腺癌和Hela人宫颈癌;体内移植性肿瘤细胞株选择肝癌实体型(Heps)、肉瘤(S180)、艾氏癌实体(EC),用不同剂量的PPH进行抗肿瘤药效实验。结果表明,银杏叶PPH在高浓度下(0.4 g/L)作用72 h,对3种体外细胞株抑瘤率达到60%~80%;对Heps、S180和EC等移植性瘤株抑瘤率达到50%~65%。这说明银杏叶PPH具有明显的抑制肿瘤的生物活性。     

利用银杏叶制备酵母饲料添加剂的优良菌筛选及其培养条件

通过比较不同酵母菌在以银杏叶为主要发酵原料中的增殖能力,获得了一株具有较强抗银杏叶抑制物的产阮假丝酵母。研究了培养条件对产阮假丝酵母增殖的影响,分析了在较佳培养条件下发酵产物中主要营养成分和活性成分的变化。结果表明,该菌株较适宜的增殖条件为,底物含水率为60%,料层厚度为2~4cm,最佳初始pH值为4.5~5.0,发酵温度为28~30℃。发酵后总黄酮含量略有下降,但每克产品中活性酵母细胞数达到40亿个,粗蛋白含量、总氨基酸、必需氨基酸分别提高了70.23%、40.77%和14.73%。     

银杏绿叶越冬技术

通过人工落叶及用植物生长物质对落叶前的盆栽银杏植株进行处理，可明显促进新芽萌动和生长，并可在温室条件下继续越冬生长而不落叶。通过改变盆栽银杏生长的光温条件，可推延或打破银杏的休眠，防止银杏冬季落叶。由于实现了绿叶越冬而使盆栽银杏进入冬季和早春花卉市场成为可能。     

银杏叶片发育过程中叶绿素快相荧光动力学的特征研究

银杏叶片的生长呈明显的“S”形曲线,4月底叶面积达到最大;新生叶刚展开时就已经合成了大量叶绿素,且随着叶片的成熟,叶绿素含量逐渐增大,并在4月下旬达到相对稳定的最大值;银杏叶片的PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、光能吸收和传递效率(ABS/CSo、TRo/CSo、ETo/CSo)、质体醌库大小(Sm)和反应中心数目(RC/CSo)等也在4月下旬逐步趋于稳定,说明叶片光合功能的在4月底已发育完善;荧光参数中性能指数PI在叶片成熟过程中变化最为灵敏,可以作为量化叶片成熟过程中光合能力的指标.     

A new polysaccharide from leaf of Ginkgo biloba L

A water-soluble polysaccharide, GPB, was obtained from leaf of Ginkgo biloba L by hot water extraction followed by precipitation with ethanol and fractionation with gel chromatography. The results of HPLC with TSK-GEL column and gel filtration chromatography with Sepharose CL-6B analysis indicated GPB was uniform in polarity and its molecular weight (MW) was about 10 kDa. The structure of GPB was analysed using chemical methods, IR spectroscopy, and NMR spectroscopy. GPB has a high branched structure with polygalactose as core part of backbone. The repeating unit of polygalactose consists of 1,6-linked Galactose (Gal) and 1,3,6-linked Gal.