猪圆环病毒2型分子生物学检测方法的研究进展

本文综述了猪圆环病毒2型分子生物学检测方法,主要包括常规PCR、套式PCR、多重PCR、PCR-RFLP、荧光定量PCR和环介导等温扩增等6种方法,对猪圆环病毒2型的监测与相关疾病的诊断有一定的参考价值。     

欧洲市场推出2型猪环状病毒新疫苗

从2007年9月至2008年1月，2型猪环状病毒新疫苗将在所有欧盟成员国推出。这是一种可以供母猪和青年母猪使用的灭活疫苗。接种这种疫苗有助于母猪与青年母猪所产的新生仔猪在第一周中免疫系统的成熟，使仔猪能够自己建立起对2型猪环状病毒的主动免疫。该疫苗经肌肉注射给予。     

猪圆环病毒2型的研究进展

1982年Tischer等首先发现猪圆环病毒(PCV),但其致病性直到1991年才被Clark报道,该年在加拿大的猪群中存在一种被称为断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的新病,给养猪业造成了巨大的经济损失;之后美国、法国等纷纷报道了该病的发生(Fenaux等,2000)。我国于2000年首次报道本病,郎洪     

猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及原核表达

采用PCR方法从已构建好的猪圆环病毒2型(PCV2)全基因重组质粒(pMD18-T-PCV2)中扩增出大小为579bp的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,经IPTG诱导,成功表达了ORF2基因编码的结构蛋白。表达的重组蛋白为融合蛋白,分子量40Ku,表达量20%左右。经Western-blot检测,重组蛋白可被PCV2阳性血清识别。     

Ⅱ型猪环状病毒是断奶后全身消耗性综合征的致病因子

Ⅱ型猪环状病毒 (PCV2 )现已被证明是断奶后全身消耗性综合征 (PMWS)的致病因子 ,这一综合征是一种可造成世界各地严重经济损失的猪病。最近的研究还证实此病毒与加拿大和欧洲猪群的繁殖障碍有关。但是 ,绝大多数PCV2感染都是亚临床性的。刺激仔猪免疫系统是感染此病毒后产生临床疾病的重要因子吗 ?     

猪圆环病毒2型研究进展

猪圆环病毒2型（PCV2）已成为家猪和野猪常见的一种病毒病,由其引起的疾病称为猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）,自猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）暴发以来,已成为近年来阻碍养猪业发展的重要传染病。为了进一步了解该病,以便更好地预防和控制该病,本文从病原学、流行病学、致病机理、临床症状、防控措施等方面进行了综述。     

河北省猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆与序列分析

根据GenBank中猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因的核苷酸序列，设计了1对特异性引物。采用此引物从PCV2疑似病料的3个样品中扩增出了0RF2片段。将扩增片段克隆入pMD18-T载体中，筛选获得了含有相应片段的阳性重组质粒pMDHB—ORF2。对质粒中的插入片段测序后，应用DNAStar序列分析软件，对所测PCV2序列与GenBank中的国内外PCV毒株进行了同源性比较。结果，3个样品间ORF2基因的核苷酸同源性为100％；它们与浙江分离株之间核苷酸序列的同源性极高，达99．5％。     

猪圆环病毒2型ORF2和猪γ干扰素基因重组腺病毒的构建及其免疫原性研究

由ORF2基因编码的猪圆环病毒2型衣壳结构蛋白是诱导广泛保护性免疫的关键。根据ORF2基因编码的衣壳结构蛋白和猪γ干扰素（IFN—γ）的构造及其特征,     

与2型猪环状病毒有关的4种疾病及控制

1　与 2型猪环状病毒有关的 4种疾病虽然断奶后多系统消耗性综合征 ( PMWS)仍然是与 2型环状病毒 ( PCV2 )有关的最重要的疾病综合征 ,但目前临床和流行病学的研究结果显示 ,此病毒也与一种称之为猪皮炎肾病综合征( PDNS)的独立病征以及间质性肺炎和繁殖障碍的病例有关。1 .1　 PMWS　 PMWS通常在 6～ 1 6周龄的猪中被诊断出。在受感染猪群中的发病率约为 2 %～2 0 % ,病猪死亡率介于 0 %～ 1 0 0 %。临床表现为病猪消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、苍白和腹泻。临床上很难将 PMWS与猪繁殖与呼吸综合征 ( PRRS)病毒和副猪嗜血杆菌感…     

猪圆环病毒2型HN0712株ORF2基因的原核表达

根据已测猪圆环病毒2型湖南分离株（HN0712）全基因序列,设计一对克隆和表达HN0712株ORF2全基因（709bp）的引物,利用原核表达载体pET-32a（＋）获得重组pET—ORF2质粒。经IPTG诱导后成功地在BL21宿主菌中表达分子质量约为48．2ku的融合蛋白。Western blot分析表明,该融合蛋白具有较好的反应原性。     

猪圆环病毒2d型的分子生物学特征和流行病学研究进展

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus Type 2,PCV2)被认为是猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病原体,分为多个基因型和亚型,具有很高的突变率,给猪场的疫病防控带来了巨大的挑战。虽然PCV2不同基因型间存在一定的交叉免疫保护作用,但是,在国内外多个接种了PCV2疫苗的猪群中,报道分离得到了突变型PCV2d毒株(又称PCV2b-1C,PCV2 mutant或m PCV2b)。为更好地防控PCV2d毒株的流行,文中就PCV2d的分子生物学特征和流行病学情况分别进行了综述。     

猪圆环病毒2型在PMWS患猪体内分布的初步研究

利用建立的PCR方法对发生PMWS自然患猪的内脏组织中存在的PCV2病毒DNA进行检测,结果发现PCV2病毒主要存在于病猪的淋巴结、肾脏和脾脏中,在肝脏、肺脏中少量存在,心脏中最少。本研究对PCV2临床诊断和致病机理研究具有一定指导意义。     

猪链球菌2型和猪圆环病毒2型混合感染的检测

2006年9月,温州某猪场断奶仔猪出现消耗性综合征,剖检的仔猪主要表现为淋巴结肿大和脑膜炎等。分别设计针对猪圆环病毒2型CAP蛋白和猪链球菌2型溶血素蛋白基因的特异性引物,用PCR技术从患病仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和脑组织中扩增出了猪链球菌2型和猪圆环病毒2型特异性片段。结合本病的临床症状和病理变化,病例确诊为猪链球菌2型和猪圆环病毒2型的混合感染。     

猪圆环病毒2型GD株ORF2基因的序列分析

根据GenBank中猪圆环病毒2型（PCV2）0RF2基因序列，设计一对引物，应用PCR从本室鉴定分离的PCV2 GD株的细胞培养物中扩增出ORF2基因（702bp）。将此基因片段克隆入pMD18-T载体，筛选获得重组质粒pMD—ORF2并对其测序，结果表明所克隆的ORF2基因与其他PCV2的0RF2基因核苷酸序列同源性在92．1％～99．9％之间，推导的氨基酸序列同源性在90．2％～99．5％之间。     

猪圆环病毒2型、猪巨细胞病毒和TTV-2混合感染的流行病学调查

本研究根据猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2、猪巨细胞病毒（PCMV）gB基因和TTV2非编码区序列合成引物,利用PCR方法对2009年来自江苏、浙江、上海、广东和广西等5个省市76个患病猪群的仔猪病料进行了病原学检测。结果显示,PCV2阳性率64.5%（49/76）,TTV2阳性率47.4%（36/76）,PCMV阳...     

猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒的多重PCR诊断临床应用研究

为了研究规模猪场病毒性疾病早期、快速诊断方法,试验采用多重PCR方法对来自宁夏灵武地区某种猪场的临床血清进行了猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)的病原诊断。结果表明:在哺乳仔猪、保育猪、母猪及种公猪中均检测出PRV、PCV-2阳性个体,PCV-2的阳性率达87.5%,PRV的阳性率为12.5%,但未检测出PPV。临床样品主要为PCV-2和PRV混合感染,阳性率达45.3%,其中1头主要采精的长白种猪携带有PCV-2和PRV。因此,推断该场仔猪发病可能与种公猪的带毒有关,建议该场仔猪全群免疫,同时对感染与带毒种猪群进行净化。     

猪圆环病毒2型疫苗研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)感染后会导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)等"猪圆环病毒相关疾病"(PCVADs),给全球养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的有效手段,近年来市场上推出了PCV2灭活疫苗、嵌合疫苗和亚单位疫苗。PCV2变异较快,主要临床流行毒株从PCV2b逐渐演变为PCV2d,现有商业化疫苗免疫效果需进一步研究证实。论文就近年来国内外PCV2传统疫苗、新型基因工程疫苗、PCV2疫苗与其他疫苗联合免疫的研究进展进行综述,旨在为猪圆环病毒相关疾病的防控及疫苗的开发与利用提供参考。     

猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒多重PCR检测方法的建立

本研究根据GenBank上已发表的猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)的基因序列,设计了3对特异性引物,扩增PCV2、PRV、PPV,建立了同时检测PCV2、PRV、PPV的多重PCR方法。所扩增特异性产物片段大小分别为350、191、270 bp。该方法特异性强、敏感性高,可以用于猪圆环病、猪伪狂犬病、猪细小病的实验室诊断和流行病学调查。