山西枣黑顶病的危害症状及发病规律研究

选取山西省晋中地区5个有代表性的枣园,系统调查了枣园枣黑顶病的症状、病果的分布型以及发病规律。结果显示:枣黑顶病在四卦、里美庄、王村、东崖、南流等枣区普遍发生,以四卦发病最重,主栽品种壶瓶枣发病率和发病指数分别达73.6%、63.45。发病症状为果实顶部失水萎缩,坏死,但不腐烂,果实病斑处味苦涩,病果无食用及商品价值。枣黑顶病在枣果膨大期、白熟期和成熟期均可发病,首先在果实顶部出现淡黄色的小病斑,随后斑块逐渐变大,呈黑褐色,皱缩。枣黑顶病的发病规律是树顶重于树下,外缘重于内膛;在病区内黑顶病病株呈均匀分布,不存在中心病株和中心病区;离砖厂距离近的区域发病重,远离砖厂的区域发病轻或者不发病。枣黑顶病的发病符合非侵染性病害的发病规律。     

陕北地区中阳木枣生态适应性研究

中阳木枣是陕晋黄河沿岸枣区的主栽品种.通过对中阳木枣的栽培区域,栽培区域的气候特征、土壤类型和养分状况,以及中阳木枣的品种变异性和适应性进行了研究,结果表明:(1)中阳木枣是适应气候偏凉(8.1～11.1℃)、降雨量偏少(390～570 mm)地区栽培的品种;(2)中阳木枣也是较为耐旱、耐瘠薄,并具有较好适应性和丰产性的品种;(3)中阳木枣品种的变异较大,可用于优良株系的选择利用.     

枣cDNA-AFLP技术体系建立与优化

建立了枣(Ziziphus jujuba Mill.)cDNA-AFLP分析的优化体系和反应程序。提取获得的总RNA以人工合成的Oligo(dT)18为引物,利用鼠源反转录酶(M-MLV RT)合成cDNA第1链,合成双链cDNA后用限制性内切酶EcoRⅠ(识别6个碱基位点)与MseⅠ(识别4个碱基位点)酶切,酶切连接后,使用与接头序列互补的预扩引物对cDNA片段池进行PCR扩增,扩增后的cDNA池定量至1 ng/μL,作为选择性扩增的模板,优化得到的选扩反应体系为:20μL的反应体系中含5μL模板,2μL 10×PCR buffer,2μL MgCl2(25 mmol/L),EcoRⅠ特异性引物(50 ng/μL)1μL,MseⅠ特异性引物(50 ng/μL)1μL,10 mmol/L dNTP0.4μL,5 UTaqDNAPolymer-ase 0.12μL。选扩程序:94℃预变性2 min;94℃变性30 s,65℃退火30 s(每个循环降0.7℃),72℃延伸1 min,13个循环;94℃变性30 s,56℃退火30 s,72℃延伸1 min,31个循环;72℃7 min。     

枣果实发育过程中游离单糖含量动态研究

采用HPLC方法和碘量法对冬枣和金丝小枣果实中游离单糖的动态变化进行了测定。结果表明:枣中的游离单糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖。在枣果发育的各个阶段均以果糖所占比例最大,其次是葡萄糖和半乳糖,鼠李糖和阿拉伯糖含量很低;果糖、葡萄糖和半乳糖含量在枣果发育前期逐渐增加,临近白熟期达最高值,随果实着色成熟又有所下降;枣果游离单糖中的酮糖只有果糖,醛糖主要为葡萄糖和半乳糖,各约占50%,另有少量的鼠李糖和阿拉伯糖。     

冬枣、临猗梨枣果实发育期K、Ca、Fe、Zn含量变化

对冬枣和临猗梨枣果实发育期K、Ca、Fe、Zn含量的变化规律进行研究,进一步明确矿质元素对枣果实品质的影响,旨在为枣树施肥和品质调控提供依据,结果表明:果实发育期间果实内4种矿质元素含量大小顺序为K>Ca>Fe>Zn;K在整个枣果的发育过程中维持较高水平,在开花坐果期含量最高,之后缓慢下降;Ca、Fe、Zn含量在果实发育前期较高,随果实发育呈下降的趋势。     

枣幼胚体细胞胚发生发育的组织学观察

为深入研究枣体细胞胚胎发生的形态建成过程,以小梨枣幼胚为材料,采用苏木精-伊红法染色和石蜡切片技术对体细胞胚发生、发育进行了组织学观察。结果表明：胚型愈伤组织细胞体积小,细胞核大,细胞质浓,细胞排列紧密;而非胚性愈伤组织细胞体积大,细胞核小,细胞质稀薄。体细胞胚产生于幼胚愈伤组织的表层细胞或内部细胞,且发生不同步,其发育过程与合子胚发育过程相似,即经历球形期、心形期和鱼雷期,最终形成子叶形胚。     

冬枣、临猗梨枣果实发育期K、Ca、Ee、Zn含量变化

对冬枣和临猗梨枣果实发育期K、Ca、Fe、Zn含量的变化规律进行研究，进一步明确矿质元素对枣果实品质的影响，旨在为枣树施肥和品质调控提供依据，结果表明：果实发育期间果实内4种矿质元素含量大小顺序为K〉Ca〉Fe〉Zn；K在整个枣果的发育过程中维持较高水平，在开花坐果期含量最高，之后缓慢下降；Ca、Fe、Zn含量在果实发育前期较高，随果实发育呈下降的趋势。     

枣愈伤途径诱导多倍体

以二倍体冬枣和临猗梨枣为试材,在大田条件下以茎粗3.5 cm左右的枝条为处理对象,短截后滴加浓度为4.0 mg/L的TDZ(附加2.0 mg/L硝酸银)溶液于截面形成层上,用泥+黑袋法进行覆盖,处理4~5 d后,愈伤刚刚形成时用秋水仙素处理愈伤。结果表明:临猗梨枣和冬枣分别以0.05%秋水仙素处理24 h和18 h的诱变率最高,经形态观察和细胞学检测,二者由愈伤途径分别获得了13.3%和6.7%的四倍体芽(2n=4x=48)。与二倍体相比,四倍体表现为叶片变厚、革质化加重,叶色变深,叶长、叶宽增大,叶形指数变小,叶缘锯齿增大、锯齿数目减少,叶片气孔明显变大,气孔密度减小,叶绿体数目增多,染色体数由2n=4x=24变为2n=4x=48。     

枣树枝条的抗寒性测定分析

[目的]测定环塔里木盆地绿洲的主栽品种灰枣、骏枣、砧木种酸枣及伊犁河谷抗寒品种-霍城大枣的抗寒性.[方法]以枣树一年生休眠枝条为试验材料.测定其相对电导率和K+相对渗出率,建立不同品种(或砧木)的Logistic方程.[结果](1)参试品种的相对电导率和K+相对渗出率均随着温度的降低而增加;(2)同一低温胁迫下,不同品种间相对电导率和K~+相对渗出率存在明显差异.[结论]综合分析得出不同品种间抗寒性为:霍城大枣>酸枣>骏枣>灰枣.     

基于SSR标记的255个枣品种亲缘关系和群体遗传结构分析

【目的】枣原产中国,种质资源丰富。对来自中国22个省区不同用途的255个枣品种进行SSR分析,揭示这些不同产地来源的枣种质资源之间的亲缘关系和群体遗传结构,为枣种质资源的科学管理和分子标记辅助育种提供参考。【方法】利用改良CTAB提取供试枣种质的基因组DNA,以前期枣基因组测序挖掘出的SSR引物为基础,进行高效率引物筛选,并利用SSR分子标记技术对255份枣种质资源的基因组DNA进行PCR扩增,然后利用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染后显色。根据条带有无统计数据,计算出多态性位点百分率（PIC）,用NTSYS软件进行UPGMA聚类分析;利用Structure软件分析群体遗传结构,计算出最适群体数目,构建遗传结构图。【结果】从64对SSR引物中筛选出23对高效率SSR引物,在供试材料中共检测出117个多态性位点,各引物扩增的多态性位点数为2-10条,每对引物平均扩增多态位点数为5.09个,PIC值变幅为0.359-0.727,平均为0.548,这些多态性引物可应用到其他枣种质资源的研究中;建立了只需1-2个标记就可鉴别出来的部分枣品种的SSR指纹,可用于这些品种的快速分子鉴定;255个枣品种的聚类分析将所有枣品种分为15个亚类,包括4个大类和11个小类,不同品种间的相似系数范围0.71-1.00,其中北京花生枣单独聚为一类,与其他枣品种关系较远;‘奉节鸡蛋枣’和‘溆浦鸡蛋枣’、‘陕西奶枣’和‘天津大马牙枣’的相似系数均为1.00;结合聚类图、供试品种的用途和原产地分析,不同枣品种间的亲缘关系与品种原产地有一定相关性,但和品种用途没有显著相关性。群体结构分析中,通过绘制K与ΔK的关系图,K=15时,ΔK最大,据此将255个枣品种也同样划分为15个群体,与聚类分析结果基本一致;进一步分析表明,各群体中大部分品种血缘关系比较单一,较少品种含有其他类群的遗传成分。总体看,山西或陕西的枣品种出现在绝大部分居群中,说明这两个省的资源在不同群体间的基因交流中发挥了重要作用;南方栽培区域中来自湖南的枣品种形成了相对独立的居群,可能是其起源相对单一,且在长期栽培过程中和其他产地枣品种间基因交流较少所致。上述结果表明,供试枣品种中与来源区域相关性明显的品种由相同地域内枣品种演化而来,而另一部分与来源产地相关性不明显的品种则是由不同区域间品种经过频繁的基因交流和重组选育而来,融合了不同区域品种的特点,从而没有了明显的区域特征。【结论】不同地理环境在枣品种的群体进化中发挥了较重要的作用,影响了不同产地间枣种质资源的遗传结构组成。     

枣MAPK基因片段克隆与分析

采用同源基因克隆法,首次获得了枣MAPK基因片段543 bp,经Blast比对,该序列与湖北海棠(Malus hupehensis EF427897.1)、蓖麻(Ricinus communis XM002509805.1)、西府海棠(Malus micromalus AF435805.2)和欧洲山毛榉(Fagus sylvatica AJ784997.1)的相似率分别为86%、86%、85%和84%。进一步进行系统进化分析,证明该基因属于MAPK中TEY型的B类。     

金丝小枣浆烂果病侵染循环研究

采用室内分离培养与田间调查相结合的方法,对金丝小枣浆烂果病(ZiziphusjujubaMill.cv.Jinsixiaozao)的侵染循环进行了研究,结果表明:金丝小枣浆烂果病病原菌囊孢壳菌Physalosporaobtuse(Schw.)可在金丝小枣树体及病残体和枣园周围的杨树、榆树、刺槐树、桃树、苹果、梨树上越冬。5月下旬—9月中旬分生孢子器形成并散发分生孢子,8月中、下旬子囊孢子和分生孢子同时散发。囊孢壳菌孢子随风、雨传播,通过伤口和气孔侵入。6月上旬囊孢壳菌开始侵染枣吊、果柄,7月上旬开始侵染枣果,8月下旬为囊孢壳菌对枣果的侵染高峰期。囊孢壳菌在当年发病枣果上只形成无性世代的分生孢子器,8月下旬—9月散发分生孢子,可在田间进行再侵染。     

培养环境对枣组培微嫁接的影响

[目的]建立一套高效的枣组培微嫁接体系。[方法]以感染枣疯病的婆枣组培苗(以下简称染病苗)为砧木,以冬枣组培苗茎段为接穗,研究若干环境因子对枣组培微嫁接成活率的影响。[结果]将枣组培微嫁接苗置于蔗糖浓度为50 g/LMS无激素培养基中的成活率较高。适宜的培养基pH值为6。采用不同封口材料控制培养瓶内湿度的研究表明,棉塞和单层封口膜封口可保持瓶内湿度,并有利于微嫁接苗的成活。微嫁接苗在28℃进行培养较为适宜。在适宜条件下枣组培微嫁接的成活率最高,达33.3%。[结论]培养基蔗糖浓度、pH值、培养温度和湿度均会影响枣微嫁接苗成活率。     

冬枣的组织培养技术研究

[目的]建立冬枣的离体快繁体系。[方法]分别以休眠期一年生冬枣枝条茎段、生长季新梢茎段及水培休眠期一年生枝条幼芽为材料筛选最佳外植体,并对其进行增殖及生根培养,研究不同培养基对其增殖及生根的影响。[结果]水培休眠期一年生枝条幼芽为冬枣组织培养的最佳外植体;继代培养30d后,MS＋AC 0.3g/L＋BA1.5mg/L＋KT 0.5mg/L＋CM 50ml/L增殖培养基中组培苗生长最快,苗高达到（4.55±0.40）cm,且组培苗生长健壮,叶色正常;1/2MS＋IBA1.5mg/L培养基中组培苗产生的根系数量最多,且根最长,培养21d后根系数量达（5.90＋0.73）条,培养42d后新生根长度达（4.50＋0.31）cm。[结论]冬枣外植体的最佳增殖和生根培养基分别为MS＋AC 0.3g/L＋BA 1.5＋KT 0.5＋CM 50ml/L和0.5MS＋IBA 1.5。     

茶壶枣离体多倍体诱导关键技术研究

目的离体多倍体育种是枣树育种的重要方法,对其关键技术的研究有利于建立和完善枣树离体多倍体育种体系,加快枣树多倍体种质的创制。方法以茶壶枣无菌叶片为材料,将预培养不同天数（7 ~ 20 d）的叶片固定后制成石蜡切片,进行细胞学观察以确定适宜的预培养时间。在此基础上,将叶片不定芽再生技术与秋水仙素染色体加倍技术相结合,在叶片预培养8、9、10、11 d后,分别用70和90 mg/L的秋水仙素处理48和72 h,并对处理后得到的不定芽进行流式细胞术倍性检测。结果通过对叶片最佳预培养时间的细胞学研究可以得出,茶壶枣无菌叶片在预培养8 ~ 9 d时,分生细胞的分裂能力最强,且未出现分化现象,在此时期用秋水仙素对叶片进行处理,可大大提高诱导率,并且可以有效避免嵌合体和混倍体的出现。染色体加倍试验发现,在预培养8 d后,用70 mg/L的秋水仙素处理72 h,其诱导率最高,达4.11%,并成功获得8株多倍体植株。通过流式细胞术确定这8株多倍体均为纯合四倍体。结论本研究探索出了将茶壶枣叶片不定芽再生体系与秋水仙素染色体加倍技术相结合,人工诱导茶壶枣多倍体的技术方法。      

辣椒枣试管苗叶片再生植株研究

以辣椒枣(Ziziphus jujuba Mill.)组培苗叶片为试材,研究了不同培养方式、接种方式以及不同生长调节剂对离体叶片诱导不定芽再生的影响。结果表明,适当的暗处理有利于辣椒枣叶片愈伤组织的形成,并能促进愈伤组织尽快形成芽点,有利于缩短叶片再生培养时间;叶片反放便于愈伤组织及芽点的观察,褐化率低,最终的不定芽再生数高于叶片正放,是辣椒枣叶片再生培养的最佳放置方式。正交试验结果表明,基本培养基,TDZ,IBA和糖4个因子对辣椒枣叶片再生影响大小排序为:基本培养基>糖>TDZ>IBA;1/2 MS(大)为最优培养基,WPM不适合作为辣椒枣的叶片再生培养基;辣椒枣组培苗叶片再生的最优培养基为1/2 MS(大)+TDZ 0.3 mg/L+IBA 0.1 mg/L+糖20 g/L,平均每叶片再生不定芽能达到5.4个。     

枣树组织培养技术应用现状及展望

概述了近年来枣树组织培养过程中基本培养基的选择及激素配比、褐化及污染、试管苗炼苗与移栽问题的产生及对策、利用组培技术脱除枣疯病病原体等研究的主要进展,提出在枣树组织培养技术的应用展望,即:应深入研究枣树细胞及原生质体培养、胚及胚乳培养、突变体的选育、种质保存和次生代谢物的研究,并尽快应用于枣树的遗传育种工作,实现枣树优质新品种的培育和遗传图谱的构建.     

冬枣花药愈伤组织的诱导及原生质体分离

[研究目的]研究冬枣花药愈伤组织的诱导,悬浮系的建立和培养及愈伤悬浮系原生质体的分离.[方法]以冬枣花药为试材,通过选择愈伤诱导培养基和原生质体分离所用酶的浓度找到最佳诱导和分离条件.[结论]使用1/2MS基本培养基附加TDZ 0.2 mg/L、NAA 0.5 mg/L和PVP 2.0 g/L,对诱导冬枣花药愈伤组织有较好效果;愈伤组织增殖采用培养基1/2MS+TDZ 0.4mg/L+NAA0.2mg/L;悬浮细胞系培养采用1/2MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA0.2 mg/L液体培养基;冬枣花药愈伤组织悬浮系原生质体分离时以0.6M甘露醇+0.1%MES+20～25 g/L纤维素酶.酶解时间为16h时得到的原生质体产量和活力较高.     

金丝小枣浆烂果病症状、危害及病原菌鉴定

金丝小枣浆烂果病严重危害我国北方枣树，并且逐年加重。本研究通过室内分离培养与田间调查，经多年多地试验，查明此病的症状、危害及病原菌。结果显示：金丝小枣浆烂果病在河北、山东、天津的产区普遍发生，以河北泊头市发病最重。该病在枣果进入白熟期(8月20日左右)开始发病，形成侵染点明显的红色近圆形软腐病斑。1998—2000年3年平均发病率和病情指数分别为36．7％和26．9。依据柯赫氏法则对金丝小枣浆烂果病病原菌进行了研究，根据病原菌形态特征，病原菌有性阶段鉴定为囊孢壳菌(Physalospora obtuse，(Schw．))，无性世代鉴定为梭壳孢菌(Fusicoccum sp．)。经黑光灯诱导后，囊孢壳菌在室内PDA培养基上可形成子座与分生孢子器。有性世代的子囊壳与子囊孢子只发现于越冬后的病枣果中。     

灵武长枣采后生理及贮藏保鲜技术研究进展

介绍了近年来灵武长枣果实采后生理与贮藏特性的研究进展,主要分析了灵武长枣的呼吸特性,阐述了目前有关灵武长枣果实采后主要的贮藏保鲜技术。