亚硝态氮对草鱼离体肝细胞抗氧化体系的影响

为探究亚硝态氮对于草鱼离体肝细胞抗氧化系统的影响,将分离得到的离体草鱼肝细胞在含0（空白）,1,10和100 mg/L （浓度以氮计）的亚硝酸钠的M199生长培养基中,分别培养6、12、24、48和96 h后,检测肝细胞中超氧化物歧化酶（ SOD ）、过氧化氢酶（ CAT ）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS ）和谷胱甘肽转移酶（GST）的活性,谷胱甘肽（GSH）水平以及总抗氧化能力（TAC）。结果显示：高浓度的亚硝酸钠会引起肝细胞内的SOD、 CAT、 GST、γ-GCS活性显著升高;除100 mg/L实验组外,各实验组的 GSH水平均显著高于对照组,而TAC则随着亚硝酸钠浓度的升高,表现为先升高后下降的规律,且当亚硝酸钠浓度为10 mg/L时, TAC达最高水平。结果表明,较低剂量的亚硝态氮急性暴露可激活肝细胞抗氧化系统并促进其提高抗氧化能力,而高剂量亚硝态氮（100 mg/L）则显著降低了肝细胞的抗氧化能力。     

草鱼“新三病”的综合治疗试验

为防治草鱼“新三病”，提高草鱼成活率，在外用杀菌消毒渔药的基础上，使用黄芪多糖、维生素K，粉、恩诺沙星、板蓝根和维生素C等药物添加饲料，分别在3座水库进行投喂，开展草鱼“新三病”的初步治疗试验。结果为水库1的草鱼在用药后的第3天没有鱼发病死亡。水库2的草鱼5月25日用药，5月29日完全病愈，没有出现草鱼“新三病”复发现象。水库3的草鱼在用药后第4天完全病愈，之后没有复发。表明在草鱼饲料中添加适量的黄芪多糖、维生素K，粉、维生素C，可提高草鱼的抵抗能力，达到治疗草鱼出血病的效果。添加恩诺沙星可有效地杀灭病原菌，达到治疗草鱼烂鳃病的功效。添加适量的板蓝根对草鱼有保肝利胆作用。     

草鱼肝细胞脂变模型的建立及脂代谢基因表达分析

为了筛选草鱼肝细胞脂肪变性的最佳诱导剂及浓度,并初步分析脂肪乳剂(lipid emulsions,LE)引起草鱼肝细胞脂肪变性的作用机理,以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)正常肝细胞为研究对象,建立草鱼脂肪变性肝细胞模型,以含10%胎牛血清的基础培养液为对照组,处理组为含20%脂肪乳剂0.5~2 m L/L和含20%、50%胎牛血清的诱导培养液,孵育草鱼肝细胞48 h后,定量分析肝细胞内的甘油三酯(TG)含量,观察脂滴积聚情况及肝细胞超微结构的变化,检测细胞培养上清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的活性,q RT-PCR技术检测脂代谢关键基因(PPAR?、PPAR?、SREBP-1c、LPL、Lep和UCP2)的转录水平变化,蛋白质印迹技术检测PPAR?、SREBP-1c的蛋白水平变化。结果发现,含1~2 m L/L LE的诱导液组和含20%、50%FBS的诱导液组与对照组相比TG含量均显著上升(P0.05),且20%FBS和各浓度LE诱导组的转氨酶活性与对照组相比差异不显著(P0.05),表明含1~2 m L/L LE的诱导液和含20%FBS的诱导液均可建立草鱼营养性脂肪肝细胞模型。在肝细胞脂变模型中,PPARγ和LPL等脂代谢基因的表达量显著升高(P0.05),而Lep基因表达量显著降低(P0.05),PPARγ和SREBP-1c的蛋白水平升高。结论认为:采用1~2 m L/L LE和20%的FBS均可以在短时间内建立草鱼肝细胞脂肪变性模型,含1 m L/L LE的诱导液诱导效果最佳;肝细胞内脂质的蓄积可能与脂肪代谢关键基因PPARγ、SREBP-1c、LPL及Lep等密切相关。     

枯草芽孢杆菌对草鱼生长性能、肠道消化酶及抗氧化酶活性的影响

为研究饲料中添加枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WTC019)对草鱼生长性能、消化酶活性和抗氧化功能的影响,选取平均体重为(146.23±14.56)g的健康草鱼,对照组(A组)只投喂基础饲料,试验组(B、C、D组)分别投喂含106、107、108CFU/g B.subtilis WTC019的基础饲料,试验60 d。结果显示:试验组草鱼的增重率和特定生长率均显著高于对照组,草鱼肠道中的淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶的活性均显著高于对照组,其中D组的草鱼肠道淀粉酶和脂肪酶活性最高,C组的草鱼胰蛋白酶活性最高。添加组过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽含量均显著高于对照组,谷胱甘肽过氧化物酶的活性变化不显著。由此得出,B.subtilis WTC019可提高草鱼的消化酶的活力和抗氧化功能,进而可促进草鱼生长。     

草鱼早期生长阶段对维生素C的需要

草鱼早期生长阶段对维生素C的需要量，以肝脏中维生素C的含量随饲料中维生素C含量增加而增加，到达到饱和值并开始恒定。这时饲料中维生素C含量的临界值作为主要指标，确定为每百克基础饲料添加60mg左右维生素C，测定了几种青饲料的维生素C含量。提出颗粒饲料饲养草鱼时青饲料的搭配量。     

外源性Vc对普安银鲫仔鱼抗氧化酶活性的影响

将维生素C添加到普安银鲫的孵化水体中,维生素C浓度设置为20、25、30和35 mg/L,记录孵化率及仔鱼存活率,测定各浓度组中普安银鲫(Carassius auratus gibelio)仔鱼发育过程中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,研究维生素C(Vc)对普安银鲫仔鱼发育的影响。结果显示:SOD和CAT的活性随着普安银鲫仔鱼发育时间的延长而增加,而GSH-Px活性则随着发育时间的延长而降低;30 mg/L的Vc溶液能显著(P0.05)提高普安银鲫仔鱼SOD、CAT和GSH-Px活性,且SOD的活性在出膜72 h后开始显著降低(P0.05),而CAT和GSH-Px则无显著变化(P0.05)。结果表明:普安银鲫仔鱼中抗氧化作用以SOD和CAT为主;适宜浓度的Vc添加到普安银鲫的育苗水体中能提高仔鱼的抗氧化能力。     

普安银鲫胚胎发育中抗氧化酶活性及外源维生素C的作用

在水温24℃下测定了普安银鲫胚胎发育过程中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性。试验结果表明,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶在成熟卵中具有活性,分别为（10．213±0．458） U／mg、（8．701±0．371） U／mg和（55．485±4．896） U／mg ,属母源性抗氧化酶。对照组从成熟卵发育至出膜前期,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性逐渐升高,而过氧化氢酶的活性呈“升高-降低-升高”的趋势,在心跳期降到最低,为（6．175±0．532） U／m g ,随后其活性开始上升。30 m g／L的维生素C组,普安银鲫胚胎从受精卵至出膜前期,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性总体上高于对照组。胚胎发育过程中母源性抗氧化酶发挥重要作用;孵化水体中适宜质量浓度的维生素C提高了胚胎期的抗氧化能力。     

复方中草药制剂对草鱼肝胆综合症的防治研究

试验以患肝胆综合症的草鱼（C tenopharyngodon idellus）种苗为研究对象,选用复方中草药制剂为试验药物,设置3个质量分数分别为0.50%、0.75%和1.00%的复方中草药药饵组,1个不含该复方制剂的常规饲料组,1个青饲料组,饲喂4周;结合组织病理学方法,探讨了草鱼肝胆综合症的病理及复方中草药制剂对该病的治疗效果。结果表明,草鱼病变肝组织出现大片自溶性坏死和弥散性病变,肝细胞核偏移,发生空泡变性和水样变性;0.50%、0.75%和1.00%3个药饵试验组与青饲料和不含药物这2个非药饵对照组中,患病草鱼的成活率分别为60.0%、80.0%、96.7%、36.7%和16.7%。试验组草鱼比对照组草鱼肝胆综合症症状有明显好转,表现为鱼的体色、体表粘液和肝脏形态、色泽、质地恢复正常;背鳍、尾鳍边缘发白以及鳃部淤血、充血现象消失,鳃部粘液明显减少。1.00%试验组草鱼肝脏肝小叶分界清楚,肝细胞之间的界限清晰可见,肝细胞的核膜与核仁容易辨认,肝细胞核位移细胞中部,肝细胞逐渐恢复正常。     

龙须菜多糖的降解及其降解产物的抗氧化活性

采用维生素C和过氧化氢体系诱导产生的自由基降解龙须菜多糖,并对龙须菜多糖及其降解产物的抗氧化活性进行分析。结果表明,在维生素C和过氧化氢反应体系中,龙须菜多糖的降解反应在2h内基本完成,降解后得到的4种产物分子量分别为21492,12864,5417和3043U,降解反应未导致龙须菜多糖去硫酸化,但3,6-内醚-半乳糖含量略有降低;在清除超氧阴离子、DPPH自由基和还原Fe3+方面,龙须菜多糖的抗氧化活性随分子量的降低而增强,而在清除羟基自由基方面,抗氧化活性却随多糖分子量的降低而减弱。     

不同来源的维生素C在草鱼饲养中的添加效果试验

维生素C是水生动物必需的维生素之一,因为它们体内缺乏合成维生素C所必须的L-古洛内酯氧化酶,所以必须不断地从外界获得维生素C。研究发现,在草鱼饲料中添加维生素C不仅可以提高草鱼的生产性能而且对机体的抗应激能力和抗感染能力有一定的作用。但维生素C极其不稳定,从而在     

Antioxidant and protective effects of a peptide (VTAL) derived from simulated gastrointestinal digestion of protein hydrolysates of Magallana gigas against acetaminophen-induced HepG2 cells

Oxidative stress is an automatic mechanism responsible for the commencement and continuance of liver injury. In this study, an antioxidative peptide Val-Thr-Ala-Leu (VTAL) was purified from simulated gastrointestinal digestion of protein hydrolysates of the triploid oyster Magallana gigas. Significant antioxidant activity was identified, as well as a protective effect against acetaminophen (APAP)-induced human liver cancer (HepG2) cells. The results suggested that the antioxidant activity improved in a dose-dependent manner. The highest cell viability (88.105?±?3.62%) was observed in 15 mM APAP-induced cells when treated with 25 μg/mL M. gigas peptide [M.g (pep)]. The peptide sequences include hydrophobic amino acids, which could be responsible for its chemoprotective and antioxidant activities. Treatment with M.g (pep) significantly promoted the proliferation of HepG2 cells, thus protecting them against APAP and imbuing them with significant antioxidant capacity. M.g (pep) could be beneficial for treating drug-induced oxidative stress and liver damage. Additionally, M.g (pep) could serve as an alternative to synthetic antioxidant drugs.

     

肠道气泡堆积对银鲳组织抗氧化能力与溶菌酶活力的影响#br#

为研究肠道气泡堆积对银鲳(Pampus argenteus)组织抗氧化能力及溶菌酶活力的影响,采集了15尾肠道气泡堆积的银鲳为病鱼组,15尾健康银鲳为对照组,分别采集各组样品的肝脏、肾脏、肌肉和鳃组织,并对这4种组织的超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力、丙二醛含量、总抗氧化能力以及两种组织(鳃和肾脏)溶菌酶活力进行测定和比较。结果显示,相比对照组,病鱼组肝脏、鳃和肾脏的总抗氧化能力都有下降,其中肝脏和肾脏显著下降(P<0.05);而肌肉中总抗氧化能力病鱼组显著高于对照组(P<0.05)。对照组肝脏和肌肉的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力显著高于病鱼组(P<0.05);丙二醛含量对照组肝脏和肌肉中显著低于病鱼组(P<0.05),但鳃和肾脏显著高于病鱼组(P<0.05);溶菌酶活力病鱼组鳃显著高于对照组(P<0.05),但肾脏与对照组间无显著性差异。结果表明,肠道气泡堆积对银鲳组织抗氧化能力及其溶菌酶活力影响较大,导致肝脏与肌肉中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活力显著降低,鳃溶菌酶活力显著升高。     

大叶藻黄酮对酒精性肝损伤的保护作用

为了深入挖掘大叶藻黄酮(ZF)的生物活性,提高大叶藻的利用价值,本实验研究了ZF对酒精性肝损伤的保护作用;实验采用纤维素酶-超声波辅助复合浸提法提取大叶藻中的天然活性物质黄酮类化合物,并采用聚酰胺树脂柱层析法对其进行纯化;研究ZF的体外抗氧化能力;将60只ICR小鼠随机分成6组,通过建立酒精性肝损伤模型,研究ZF对肝损伤的保护作用;结果显示,经纯化后ZF的含量达到80%。体外实验表明ZF对DPPH自由基和羟基自由基有清除能力,具有一定的抗氧化活性;体内实验表明ZF对酒精性肝损伤小鼠的抗氧化能力、脂质代谢能力以及乙醇代谢能力均有影响。ZF各剂量组与模型组相比,血清ALT、AST和γ-GT活性显著降低,肝组织MDA含量显著降低,乙醇代谢酶活性显著提高;ZF中、高剂量组小鼠肝组织GSH-Px和SOD活性显著提高,血脂浓度显著降低。长期过量饮酒可导致小鼠肝脏严重损伤,ZF可以改善小鼠肝组织损伤情况,对酒精性肝损伤起到保护作用,其机制可能与增强机体抗氧化能力、调节脂质代谢和乙醇代谢能力有关。     

急性操作胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏组织结构和氧化应激的影响

为探究急性操作胁迫对四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)幼鱼肝脏组织结构以及氧化应激的影响,该研究在离水操作胁迫后不同时间取样,观察肝脏显微结构的变化,并检测相关抗氧化酶活性。结果显示,随着离水胁迫时间的延长,肝脏组织损伤程度呈现先上升后下降的趋势,胁迫第24小时肝脏基本结构与对照组相似。超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)有相同的变化趋势,胁迫后第2小时显著增加(P0.05)并达到最高值,然后开始下降,最后其值显著低于对照组(P0.05);丙二醛(MDA)含量在胁迫第2~第12小时呈现先升高后下降的变化趋势,第12小时后又有所上升;还原型谷胱甘肽(GSH)含量胁迫2 h没有显著变化(P0.05),之后呈先下降后上升的趋势,但其含量仍显著低于对照组(P0.05);总抗氧化能力(T-AOC)胁迫第2小时显著上升(P0.05),之后下降,实验结束时显著低于对照组(P0.05)。结果表明离水操作胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏组织结构以及抗氧化酶产生一定的影响,但随着胁迫时间的延长,其组织结构以及抗氧化能力都有一定的恢复趋势。     

蓝点马鲛鱼皮抗氧化肽FractionⅡ对D-Gal诱导氧化损伤大鼠肝脏的保护作用

研究蓝点马鲛鱼皮抗氧化肽FractionⅡ(1~4 ku)对氧化损伤Wistar大鼠肝脏的保护作用。采用D-半乳糖(D-gal)建立衰老模型,实验大鼠随机分为6组:空白对照组;D-Gal模型阴性对照组;D-Gal+维生素E(VE)阳性对照组;抗氧化肽低、中、高剂量组。通过检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和单胺氧化酶(MAO)活性及肝组织匀浆液中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量和总抗氧化能力(T-AOC),并结合组织形态学来评价FractionⅡ对氧化损伤肝脏的作用效果。结果显示,与阴性对照相比,各剂量组的FractionⅡ能够显著降低大鼠血清中的AST和ALT活性,提高肝脏组织的SOD、GSH-Px、CAT活性和T-AOC能力,降低MDA和NO含量及MAO水平,并成一定的量效依赖关系。其中效果较好的高剂量(200 mg/kg)多肽处理组SOD、GSH-Px活性分别为236.27、182.23 U/mg蛋白,达到了正常对照及阳性对照组水平;AST、ALT分别降低至302.47和220.43 U/L,MDA含量降低至138.83 nmol/mg蛋白,也达到正常对照组水平。H.E.染色结果也证实,FractionⅡ在保护肝细胞完整性、维持结构清晰、抑制坏死等方面都有一定的效果。研究表明,蓝点马鲛鱼皮抗氧化肽FractionⅡ对D-Gal诱导的氧化损伤大鼠肝脏具有较好的保护作用。     

Antioxidant processes are affected in juvenile rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) exposed to ozone and oxygen-supersaturated water

Two groups of juvenile rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) were exposed for 4 h to either hyperoxic (>40 mg O₂/l) or ozonised (5.2 μg O₃/l) water containing supersaturated oxygen. Gill, liver, blood cells and plasma were taken 1, 5, 12, 24 and 48 h following the exposure periods and antioxidant responses and oxidative damage studied in terms of, respectively, antioxidant enzyme activities/glutathione status and lipid peroxidation. Observed biochemical changes were significant at p<0.05. Ozonation elevated oxidised glutathione (GSSG) levels, increased lipid peroxidation and decreased reduced glutathione (GSH) levels in gills 1 h following exposure, which indicate oxidative stress. However, the longer-term effects (48 h) following ozone exposure resulted in increased GSH levels in both gills and liver and, measured as oxidative stress index (OSI), were indicative of enhanced potential of tissues to resist oxidative stress. Ozonation also resulted in elevated activity of superoxide dismutase (SOD) at 5–12 h following exposure in gills compared to 24–48 h in liver, indicating either differential regulation and time-courses of response, or an earlier impact of ozonolysis products on gills than liver. In contrast, catalase activity was elevated in both gills and liver at 24 h by the effects of hyperoxia alone. Hyperoxia also decreased GSSG levels in both gills and liver, but had no effect on lipid peroxidation. Increases were seen in the activities of selenium-dependent glutathione peroxidase as a result of ozonation (gills; 5 and 24 h) and hyperoxia (liver; 1 h), and in total GPX (Se-dependent and independent) as a result of ozonation (both tissues; 48 h), but no effects were seen on glutathione reductase (GR) in either tissues. Levels of GSH were increased in blood cells at various times following hyperoxia. Overall, the results show (i) differential antioxidant and pro-oxidant effects of ozonation compared to hyperoxia, (ii) gills and possibly blood as the first line of impact and defence, with later effects on liver, and (iii) that even after 24–48 h following ozone exposure, all antioxidant defences had not returned to pre-exposure values.     

可溶性南极磷虾蛋白-芦丁复合物的制备及抗氧化性能分析

为了提升可溶性南极磷虾蛋白的抗氧化性能,将芦丁复合到可溶性南极磷虾蛋白(SAKP)上,成功制备了SAKP-芦丁复合物,一种新型的多酚-蛋白复合物.通过测定SAKP-芦丁复合物清除二苯基苦基苯肼自由基(DPPH?)和羟基自由基(OH?)的能力来评估其抗氧化能力.同时采用H2O2诱导HepG-2细胞氧化损伤模型评价了SAK...     

白芍提取物对罗非鱼氧化损伤的保护作用

为了解白芍提取物对罗非鱼(Oreochromis niloticus)肝损伤和炎症反应的保护作用,将罗非鱼随机分为5组,空白对照组(Ctrl组)、H2 O2组、白芍提取物组(0.5、1.0、5 g/kg),饲喂60 d后,用H2 O2处理24 h,在H2 O2处理前后,分别采集血液、肝、鳃和肌组织,并测定肝损伤指标、氧化应激参数和基因表达。结果显示:白芍提取物显著提高了血清、肝和鳃的抗氧化能力。氧化损伤实验中,白芍提取物不同程度地降低了谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和丙二醛(MDA)水平;提高了超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和总抗氧化能力(T-AOC)水平;上调了肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素IL-1β和IL-8基因表达;下调了IL-10基因表达。以上结果表明,白芍提取物可提高罗非鱼抗氧化能力,抑制氧化应激引起的肝损伤和炎症反应。     

力竭追赶训练对中华倒刺鲃自由基清除能力的影响

在(25±1)℃条件下,设置静水对照组(C组)、力竭追赶训练1次/d组(E1组)、力竭追赶训练2次/d组(E2组),研究了每日不同训练次数的力竭追赶训练对中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)(46.84 g±2.50 g,13.73cm±0.22 cm)生长和自由基代谢相关指标的影响,训练周期为21 d。结果显示,中华倒刺鲃体质量特定生长率、肥满度和肝指数均比对照组有极显著降低;中华倒刺鲃肝脏和白肌抗氧化酶对力竭训练产生了一定适应性,但超氧化歧化物酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)对力竭训练的敏感性不同;力竭训练对肝脏和白肌总抗氧化能力(T-AOC)无显著影响;在肝脏和白肌丙二醛(MDA)方面,E2组>C组>E1组;E2组血清谷丙转氨酶(ALT)活性显著高于对照组和E1组,而3组血清肌酸激酶(CK)活性差异不显著。结果表明,力竭追赶训练对生长具有明显抑制性,并且对中华倒刺鲃脂质过氧化反应有类似"毒物兴奋效应",肝脏和白肌对其表现出不同的抗氧化调节机制。