小麦5-氨基酮戊酸脱水酶的纯化及部分性质研究

以３０％ ～６０％ 硫酸铵饱和度分级沉淀、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００、Ｐｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－４Ｂ 和羟基磷灰石层析纯化了小麦５－氨基酮戊酸脱水酶（ＡＬＡＤ）,其在ｐＨ ８．５ 时比活为３１ Ｕ·ｍ ｇ－ １蛋白;酶纯化了９１ 倍,得率５％ ,酶亚基分子质量约５２ ｋｕ,全酶分子质量约３３０ ｋｕ,表明酶由６ 个亚基组成;酶的等电点为４．８,在４００ ｎｍ有吸收峰,最适反应温度４５℃,Ｍｇ２＋ 激活酶,Ｚｎ２＋ 和磷酸吡哆醛抑制酶。纯化的ＡＬＡＤ浓缩后,－ ２０℃下在０．１ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １,ｐＨ ８．５ 的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ,内含５０％ 的甘油,５ ｍ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １的巯基乙醇和ＭｇＣｌ２ 中黑暗贮藏３０ ｄ 酶活不损失     

兔出血症病毒主要结构多肽的纯化及免疫保护性试验

人工感染ＲＨＤＶ－ＮＪ株病死兔肝经－５０℃反复冻融,氯仿处理,ＰＥＧ沉淀、差速离心,Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ柱层析得纯化病毒,纯化ＲＨＤＶ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＣｕＣｌ２负染色后,切取主要结构多肽ＶＰ１（６４．５ＫＤ）凝胶带,除去ＣｕＣｌ２和ＳＤＳ获得ＶＰ１,高效液相色谱鉴定只有一个蛋白峰,Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔｔｉｎｇ,ＨＡ和ＨＩ结果显示纯化ＶＰ１具有良好的抗原表位稳定性。无母源抗体的３月龄兔１     

等电聚焦分析兔出血症病毒多肽

人工感染ＮＪ株ＲＨＤＶ病毒死兔肝经低温反复冻融,氯仿处理,ＰＥＧ沉淀、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ柱层析得纯化病毒。纯化病毒经尿素－聚丙烯酰胺圆盘等电聚聚焦,考马斯亮蓝染色紫外扫描显示８条多肽,其等电点及相对百分含量分别为Ａ：６．３,１８,５１％;Ｂ＝６．７,１１．２２％;Ｃ：７．４％;Ｄ：７．７,８．５３％;Ｅ：８．１,７,２７％Ｆ：８．７,１２．４４％Ｇ：９．０。１６,１８％,Ｈ：９．５,２２．２     

不同组合复方BFA对雏鸡主要免疫器官发育、白细胞数及ND疫苗免疫效果的影响

选用１日龄尼克红蛋公雏８０５只（平均Ｎ Ｄ母原抗体水平为６．９１ｌｏｇ２）,随机分成７个组,在饲料中分别添加不同剂量的Ｚｎ,Ｓｅ,ＶＣ,ＶＥ,生化黄腐酸（ＢＦＡ）配合而成的复方生化黄腐酸（ＣｏＢＦＡ）,其中一组为对照。分别计数白细胞总数、嗜中性白细胞数和淋巴细胞总数,测定ＮＤ抗体效价;分离胸腺、脾脏和法氏囊,分别称重。分析比较各因素与雏鸡免疫器官（胸腺、脾脏和法氏囊）重量、血细胞数及ＮＤ疫苗免疫效果的相关性,遴选最适组合。结果表明：雏鸡胸腺、脾脏、法氏囊重、血液白细胞总数、嗜中性白细胞数、淋巴细胞总数及ＮＤ抗体水平与Ｚｎ,Ｓｅ,ＶＣ,ＶＥ,ＢＦＡ均为正相关,其中胸腺与Ｚｎ,Ｓｅ极显著相关（Ｐ＜０．０１）,脾脏与Ｚｎ,Ｓｅ显著相关（Ｐ＜０．０５）,法氏囊与Ｓｅ显著相关（Ｐ＜０．０５）,淋巴细胞与ＶＣ极显著相关（Ｐ＜０．０１）,与ＶＥ,ＢＦＡ显著相关（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ抗体水平与Ｖｃ, ＶＥ, ＢＦＡ极显著相关（Ｐ＜ ０．０１）。综合分析各试验组合的效果,认为以添加量分别为Ｚｎ １２０ｍｇ· ｋｇ－１, Ｓｅ０．３０ｍｇ·ｋｇ－１,ＶＣ１８０ｍｇ· ｋｇ－１,ＶＥ ２００ｍｇ·ｋｇ－１,ＢＦＡ ４５０ｍｇ·ｋｇ－１的饲     

大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ的分离纯化和鉴定

依次采用ＤＥＡＥ－纤维素、肝素－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，酪蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和羟基磷灰石层析将大鼠酪蛋白激酶Ⅱ纯化了２４８６倍，回收率９．５％。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明ＣＫⅡ由三个不同亚基组成，分子量分别是３７，３５和２６ＫＤ。该激酶利用酪蛋白为底物，Ｃａ~（２＋），Ｃａ~（２＋）－磷脂酰丝氨酸和ｃＡＭＰ对ＣＫⅡ的活性无影响，而肝素对该酶的活性有抑制作用。     

大鼠肝酷蛋白激酶Ⅱ的分离纯化和鉴定

依次采用ＤＥＡＥ－纤维素、肝素－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，酷蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和羟基磷灰石层析将大鼠酷蛋白激酶Ⅱ纯化了２４８６倍，回收率９．５％。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明ＣＫⅡ由三个不同亚基组成，分子量分别是３７，３５和２６ＫＤ。该激酶利用酷蛋白为底物，Ｃａ＾２＋，Ｃａ＾２＋－磷脂酰丝氨酸的ｃＡＭＰ对ＣＫⅡ的活性无影响，而肝素对该酶的活性有抑制作用。     

铝对玉米幼苗生长和硝酸还原酶活性的影响

对于生长在Ａｌ２（ＳＯ４）３１００μｍｏｌ／Ｌ氮素营养液中的两个玉米品种（ＳＣ７０４和ＶＡ３５）的根系和叶片的ＮＡＤＨ－硝酸还原酶（ＥＣ１．６．６．１）和ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ－硝酸还原酶（ＥＣ１．６．６．２）活性测定的结果表明：铝的存在阻碍了玉米根系和叶片的生长,降低了营养液的ｐＨ值和叶片的ＮＡＤＨ－及ＮＡＤ（ｐ）Ｈ－硝酸还原酶活性（酶活性降低的程度ＳＣ８０４低于ＶＡ３５）,增加了根系的ＮＡＤＨ－和ＮＡ     

甘蔗侧芽的离体快速繁殖

１材料与方法１．１试验材料采用甘蔗（Ｓ．ｏｆｉｃｉｎａｒｕｎＬ）侧芽作为离体快速繁殖的材料。１．２培养条件培养基（１）Ｎ６＋ＮＡＡ０．６ｍｇＬ－１（单位不同）＋ＫＴ１．５,（２）ＭＳ＋６－ＢＡ２．０＋ＮＡＡ０．２,（３）ＭＳ＋６－ＢＡ１．０,（４）Ｎ...     

弓形虫诊断抗原的亲和层析纯化和分析

应用琼脂糖凝胶Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析分离弓形虫速殖子细胞质抗原和弓形虫速殖子膜抗原,分别获得亲抗体Ｐｓ和亲抗体Ｐｍ。经双多抗酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）夹心法测定,结果表明,Ｐｓ的最低检出量为１３．３μｇ／ｍｌ,亲抗体Ｐｓ为１．５μｇ／ｍｌ,Ｐｍ为４．４μｇ／ｍｌ,其中又以亲抗体Ｐｍ为最优。     

嗜水气单胞菌菌毛的提纯及特性分析

用电镜观察嗜水气单胞菌Ｊ－１株，见有两种不同的菌毛，一种为短而硬直的Ｒ菌毛，另一种为长而易弯曲的Ｗ菌毛。Ｒ菌毛数量多，周身分布；Ｗ菌毛数量少，一个菌体仅４～６根。搅拌菌体悬液可使菌毛脱落，低速离心的上清液经ＰＥＧ沉淀、硫酸铵盐析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ层析后，获得纯化的Ｒ菌毛。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，在有２－巯基乙醇存在时，Ｒ菌毛的亚单位分子量为１７０００。氨基酸组分分析表明，Ｒ菌毛含有４１％的疏水性氨基酸。用纯化的Ｒ菌毛免疫家兔获抗血清，建立菌体凝集试验和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，检测５０个待检样本的Ｒ菌毛，两法检出率均超过６０％，符合率为８８％。     

鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研制与鉴定

用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ，Ｍ４１）作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ筛选，获得了４株能分泌特异性抗ＩＢＶ单克隆抗体的细胞系，分别命名为４ＡＣ１、４ＡＦ１、６ＤＨ８及２ＤＨ１０。４株单抗的亚类都属于ＩｇＧ２ｂ，在Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验中，４ＡＦ１、６ＤＨ８２株单抗特异性地识别ＩＢＶ的核衣壳蛋白（Ｎ）；经ＥＬＩＳＡ测定，各株单抗４０ｈ培养上清效价达１０－２～１０－４，第７天腹水效价达１０－５～１０－６，４ＡＦ１、６ＤＨ８与所试７个ＩＢＶ标准株及２个ＩＢＶ分离株都发生反应     

5—Br—PADN双峰双波长法测定铁（III）

研究５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ与铁（Ⅲ）的显色反应，在ｐＨ９．０￣９．４范围内，当有１０％ＳＤＳ存在时，铁（Ⅲ）与５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ形成１：４的稳定配合物。λｍａｘ为５３４ｎｍ，ε为５．１３×１０＾４Ｌ·ｍｏｌ＾－１·ｃｍ＾－１，铁（Ⅲ）浓度在０￣１２．５×１０＾－４ｇ／Ｌ范围内符合Ｂｅｅｒ定律，用双峰双波长法测定茶叶中痕量铁（Ⅲ），结果满意。     

5－Br－PADN双峰双波长法测定铁（Ⅲ）

研究５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ与铁（Ⅲ）的显色反应，在ｐＨ９．０～９．４范围内，当有１０％ＳＤＳ存在时，铁（Ⅲ）与５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ形成１：４的稳定配合物。λ＿（ｍａｘ）为５３４ｎｍ，ε为５．１３×１０￣４Ｌ·ｍｏｌ￣（－１）·ｃｍ￣（－１），铁（Ⅲ）浓度在０～１２．５×１０￣（－４）ｇ／Ｌ范围内符合Ｂｅｅｒ定律，用双峰双波长法测定茶叶中痕量铁（Ⅲ），结果满意。     

甘蓝型油菜原生质体培养和植株再生

从甘蓝型油菜试管苗下胚轴和幼叶分离的原生质体，在含２．４－Ｄ０．８ｍｇ／１，ＮＡＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．５ｍｇ／１的改良ＢＧ培养基中浅层液体和固体平板培养６天，分裂细胞为８％－２０％，至１５天形成３２细胞的细胞团。愈伤组织在含ＮＡＡ０．２ｍｇ／１，ＩＢＡ０．１ｍｇ／１，６－ＢＡ１．０ｍｇ／１的ＭＳ分化培养基上培养基上培养３－４周，产生不定芽，并在附加ＩＢＡ０．５ｍｇ／１，６－ＢＡ０．２ｍ...     

人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因农杆菌工程菌株的构建

采用固相亚磷酸三酯法人工化学合成了人胰岛素样生长因子－Ⅰ（ｈｕＩＧＦ－Ｉ）基因的４条寡核苷酸 片段，再通过片段１、２与３、４末端互补配对和Ｋｌｅｎｏｗ酶促补平及酶切连接成为完整的ｈｕＩＧＦ－ＩＤＮＡ片段，用 ＥｃｏＲ　Ｉ／ＰｓｔＩ酶切后克隆于 ｐＧＥＭ Ｔ－Ｅａｓｙ Ｖｅｃｔｏｒ，经测序证明所得 ＤＮＡ序列与设计的序列完全一致；选用植物 偏爱密码子校正了启始密码子ＡＴＧ下游的６个密码子，并在ＡＴＧ处增加Ｋｏｚａｋ序列后，插入ｐＢＩ１２１的ＢａｍＨＩ／ ＳａｃＩ位点，构建了以 ３５Ｓ为启动子的植物表达载体；以 Ｈｉｎｄ ＩＩ／ＥｃｏＲＩ切下“３５Ｓ－Ｋｏｚａｋ－ＩＧＦ－Ｉ－ＮＯＳ（ｔｅｒ．）”插入 ｐＣＡＭＢＩＡ２３００之Ｈｉｎｄ ＩＩ／ＥｃｏＲ　Ｉ位点，构建成ｈｕＩＧＦ－Ｉ植物表达载体；通过ＣａＣｌ２直接转化法将表达载体导入农 杆菌ＥＨＡ１０５（Ｒｉｆ．ｒ），并以菌落原位杂交技术和 ＤＮＡ ｄｏｔ ｂｌｏｔ对重组农杆菌进行了筛选，所获得的重组农杆菌菌株为培育ｈｕＩＧＦ－Ｉ豆药用植物奠定了基础。     

人工模拟芦苇床系统处理污水的效能

设计并构建了一个小型人工芦苇床，分析生长了１８个月的芦苇床系统处理污水的效能。结果表明，芦苇床系统处理生活污水的效果，在１ｄ内的ＢＯＤ５去除率达８５％以上、ＣＯＤ达８０％以上、ＳＳ和总大肠菌群的去除率达９０％以上，该系统对ＮＨ３－Ｎ和Ｏ－０Ｏ４－Ｐ的去除效果较差，尤其是对Ｏ－ＰＯ４－Ｐ的去除率很低。去污的最佳滞留时间ＢＯＤ５和ＣＯＤ为２ｄ、ＳＳ为１．５ｄ、总大肠菌群为５ｄ、ＮＨ３－Ｎ为６ｄ、Ｏ－Ｐ     

小麦中国春遗传背景中的Llphopyrum elongatum（Host）A.Lo …

对另春为遗传背景的中国春Ｌｏ．ｅｌｏｎｇａｔｕｍ（Ｈｏｓｔ）Ａ．ＬｏｖｅＥ＾ｅ洒色体二体代换系和二体附加系的白粉病抗性进行了鉴定。在２７个供试材料中，只有一个代找系ＤＳ７Ｅ＾ｅ（７Ｄ）ＤＶ８２－２－１（１）表现为中抗，其余人武部表现为感病，尤以二个附加系ＤＡ２Ｅ Ｎｅｗ－８－９－４－３－６－（１）和ＤＡ６Ｅ＾３－２－４－１２－４－２－（５）感染特别严重，表现为高感。结果表明：（１）Ｌｏ．ｅｌｏｎｇ     

小麦胆色素原脱氨酶的电泳性质分析

经反应红１２０亲和层析纯化的小麦胆色素原脱氨酶（Ｐｏｒｐｈｏｂｉｌｉｎｏｇｅｎ ｄｅａｍｉｎａｓｅ,ＰＢＧＤ,ＥＣ．４,３,１,８）,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ－ＰＡＧＥ上均显示一条带,表明已ＰＢＧＤ纯化至均一,它的亚基分子量３６ＫＤ,ｐＩ为４．８。酶活性染色呈一条带,表明无同工酶存在。ＰＡＧＥ显示两条带,证明小麦幼苗中存在酶与底物结合的中间物。脲梯度电泳呈现之字形,在４ｍｏｌ／Ｌ的脲浓度下可使酶     

荞麦愈伤组织培养及其分化的研究

以荞麦的成熟胚，幼胚，下胚轴为外植体，在不同激素浓度配比，不同基本培养基质培养基上的组织培养研究表明：以成熟胚为外植体时，对愈伤组织诱导和生长最适培养基是２．４－Ｄ２．０，ＮＡＡ１．０，６－ＢＡ。０．５的Ｂ＿５培养基；以幼胚为外植体时，对愈伤组织的诱导和生长最适合的培养基是２．４－Ｄ２．０，ＮＡＡ１．０，６－ＢＡ０的ＭＳ培养基；以下胚轴为外植体时，Ｂ＿５和ＭＳ两种培养基均不适合愈伤组织的生长。２．４－０对荞麦愈伤组织根的分化有一定的促进作用。     

奶牛血液及乳几项生化指标与泌乳性能的关系

黑白花奶牛血糖、血清清蛋白，乳ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ、α－乳清蛋白和Ｆｅ含量与日产奶量及３０５ｄ产奶量呈正相关；而血清异柠檬酸脱氢酶（ＮＡＤＰ－ＩＣＤＨ）和乳葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤＨ）含量与日产奶量呈负相关。