应用酶标抗体染色法实验检定空肠弯曲菌

应用酶标抗体染色法检定空肠弯曲菌,具有较高的特异性及敏感性,除金黄色葡萄球菌呈现轻度着染外(可以从形态学上排除),对沙门氏菌等9种杂菌均不发生非特异性染色反应;用以检查空肠弯曲菌纯培养物,敏感性可达400万个菌/ml。对同时接种10个空肠弯曲菌和1亿个杂菌的30h选择性增菌肉汤培养物,酶染色法可准确地检出,而且不受杂菌的干扰。检查47份鸡粪便标本和38株猪源空肠弯曲菌,其结果与常规细菌分离鉴定结果相同。建立的检定空肠弯曲菌的酶标抗体染色法可在2h内完成。     

间接ELISA对鸡猪空肠弯曲菌快速检验的实验研究

以方阵滴定法确定了空肠弯曲菌抗血清、酶结合物的最佳工作浓度和孵育时间,从而立了快速检测空肠弯曲菌的间接ELISA。该试验可检出含8～10个空肠弯曲菌经24h培养的标本(含30万个菌/ml的肉汤培养物);不与沙门氏菌等15种对照菌及其混合液发生交叉反应。以鸡源和猪源空肠弯曲菌抗血清分别作为ELISA的第一抗体,对144份鸡泄殖腔粪便标本和116份猪直肠粪便标本的选择性增菌肉汤培养物进行了检测。其阳性率分别为83.3％和79.3％,可于28h内报告结果;常规法对上述标本的阳性检出率分别为85.4％和81％,但程序繁琐,需5～7d方能获得最终检查结果。两种方法对鸡、猪粪便标本检测结果的阳性符合率,分别为97.5％与97.9％。     

鸡空肠弯曲菌的分离和鉴定

空肠弯曲菌是一种人畜共患的病原菌,可引起人的肠炎和腹泻,也可引起畜禽发病。国内外许多学者认为该菌在畜禽中带菌率很高。日本猪盲肠带菌率59.9％、鸡60％我国苏州猪带菌率61.5％、鸡89.3％、鸭79.2％。我省空肠弯曲菌畜禽感染情况尚未见有报道。为防止由空肠弯曲菌所引起的各种疾病,我们首先对我省部分鸡场中某些鸡只的新鲜稀粪,进行了病原菌分离和鉴定。现将结果报告如下。     

猪空肠弯曲菌感染的防治

猪空肠弯曲菌是在养猪场中常见的一种传染性疾病,猪感染弯曲菌后以腹泻和脱水等为主要症状,发病严重的猪可以出现死亡。本病的发生给养猪场造成较为严重的影响,会导致猪场遭受严重的经济损失。本文通过对猪空肠弯曲菌的详细分析,并对其防治方法进行归纳和总结,可以为养殖场提供参考。     

猪空肠弯曲菌感染的防治

猪空肠弯曲菌是一种常见的传染性病原菌,其感染后能够引起猪的严重腹泻和脱水症状,严重时会发生病猪死亡的情况。在猪场时有发生,给养猪场造成严重的经济损失。本文介绍了猪空肠弯曲菌感染的流行病学、临床症状、病理变化和诊断方法,并针对性地提出防治措施,供养猪场参考。     

多重PCR-变性高效液相色谱检测食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌

本研究应用多重PCR反应(mPCR)结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术建立食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测方法.以编码嗜热弯曲菌属的16S rRNA基因、编码空肠弯曲菌的gyrA基因和编码结肠弯曲菌的cdt真基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化了鉴别空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的mPCR体系,扩增产物分别为287 bp、159 bp和173 bp.采用22株细菌验证了该mPCR具有特异性.mPCR检测的灵敏度在DNA水平上达到空肠弯曲菌10pg/μL、结肠弯曲菌1 pg/μL;在人工模拟污染样品起始污染浓度为1.5个/mL时,42℃微需氧条件下培养24 h即可被检出.在随机采集的172份冷冻鸡肉类样品中,检出了18份样品为空肠弯曲菌阳性,7份样品为结肠弯曲菌阳性.本研究建立的mPCR-DHPLC方法可特异、灵敏地实现对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测.     

空肠弯曲菌PEB1A蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

为了建立检测血清中空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）抗体的间接ELISA方法,试验通过PCR扩增并克隆空肠弯曲菌PEB1A基因,构建原核表达载体pET32a-PEB1A,将该表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,诱导表达获得约47 ku的可溶性目的蛋白,通过Western blotting证明所表达的重组蛋白具有良好的生物学活性。以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,建立空肠弯曲菌抗体间接ELISA方法,对其特异性、敏感性、重复性进行检测。结果表明,本试验建立的空肠弯曲菌抗体间接ELISA检测方法临界值为0.3424,本方法仅与空肠弯曲菌阳性血清发生特异性反应,与其他抗血清无交叉反应,具有较强的特异性,批内、批间的重复性试验变异系数均<5%,具有较好的重复性和稳定性。该方法的建立可应用于血清中空肠弯曲菌抗体的快速检测,为进一步防制空肠弯曲菌腹泻提供依据。     

仔猪空肠弯曲菌流行病学调查

<正> 国内外许多学者已经证明多数动物的肠道可携带空肠弯曲菌,并成为人类空肠弯曲菌肠炎的重要传染源。为了探讨仔猪肠道中空肠弯曲菌的带菌情况及其与腹泻的关系,我们于1987年3月15日至6月8日对腹泻病猪及健康猪进行了调查。 1 材料和方法 1.1 标本来源:腹泻病猪标本取自太原南郊甲猪场,共30份;健康猪标本采自乙、丙二个猪场共38份。年龄1～15日左右,均用灭菌棉拭子从肛门采集,插入     

蛋鸡的弯曲杆菌感染

弯曲杆菌病已充分证明可危害肉食、海产食品和家禽产品的消费者.流行病学研究表明.空肠弯曲杆菌造成的散发感染,70％都和食用未熟透的禽肉有关。空肠弯曲杆菌可引起人类的小肠结肠炎。空肠弯曲杆菌虽然不能垂直传播,但却可通过污染的垫料而污染鸡蛋,该菌可在垫料上存活两星期之久.污染的食用蛋可能是人类感染的一个来源,对这一     

应用PCR技术检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的研究

本研究根据空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的16s rRNA基因相同保守序列来设计引物,建立了一种PCR检测方法,该方法具有较强的特异性及灵敏性,其对空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的最低检测限度为5 CFU/mL,它无需增菌培养过程可以直接对样品进行检验,在对鸡肉样品空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的检测中取得了较好的效果.     

空肠弯曲菌毒力因子研究进展

空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是世界范围内广泛流行的人畜共患病,在公共卫生学上具有重要意义。空肠弯曲菌可引发人和多种动物疾病,其抗原结构复杂,致病机理尚不清楚。作者通过对空肠弯曲菌可能的毒力因子及其在致病中的作用作一简要概述,为空肠弯曲菌的诊断防治提供依据。     

用Nested-PCR诊断鸡弯曲菌病的研究

本研究采用Nested-PCR方法,对于临床采集的感染空肠弯曲菌的病鸡组织样品进行了检测,研究结果表明,采用Nested-PCR方法检测空肠弯曲菌具有结果清晰,操作简便,快速等特点.研究还发现,空肠弯曲菌对鸡的致病性可能增强,应引起重视.     

禽源空肠弯曲杆菌的分离与双重PCR鉴定

以空肠弯曲杆菌保守基因mapA和hipO基因为靶基因,建立空肠弯曲菌的双重PCR方法,该方法只对空肠弯曲菌有特异性,对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等则不能扩增出特异性片段。利用该方法对从市场、养殖鸡和屠宰场的禽源空肠弯曲菌进行了分离和鉴定,平均分离率为35.8%,PCR鉴定结果与生化鉴定结果相一致,说明建立的双重PCR鉴定方法具有灵敏、特异的特点,可节省传统生化鉴定所耗费的时间,为空肠弯曲菌的检测提供新方法。     

鹅盲肠中空肠弯曲杆菌的分离及其鉴定

胎儿弯曲杆菌(Campylobacter fetus)空肠亚种(Sub·jejuni)通常称之为空肠弯曲杆菌。本菌可以在各种动物,如猪、犬、猫、鸡、鸭等肠道内寄生,或引起不同的疾病。近几年来,大量的事实证明,本菌是引起人类急性腹泻的重要病原菌。据报道,在英、美等国,其发病率是沙门氏菌和志贺氏菌的2倍。因此,空肠弯曲杆菌被称为新的食物感染性细菌或食物中毒性细菌。我国近年来也有一些关于人和猪、鸡、鸭的带菌及致病情况的报道。1984年我们从长春市某肉类加工厂宰杀的鹅盲肠中分离到本菌,现简述如下。     

基于hipO基因的环介导等温核酸扩增技术检测食源性空肠弯曲菌

空肠弯曲杆菌是人细菌性胃肠炎的常见食源性致病菌之一,严重危害人类的健康,建立快速精准检测食源性空肠弯曲杆菌的方法,对于保障人们的健康和食品安全具有重要意义。本研究建立了一种可视化、低成本基于hipO基因的环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测空肠弯曲菌的方法。该LAMP方法检测空肠弯曲菌CJFX01基因组DNA为阳性,而对肠出血性大肠杆菌O157:H7、鼠伤寒沙门菌、单增李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌等食源性致病菌和胸膜肺炎放线杆菌Aha01、副猪嗜血杆菌Ahh01、多杀性巴氏杆菌Ahm03、猪链球菌Ahs02、猪丹毒丝菌Ahe01、支气管败血波氏杆菌Ahb01等猪源致病菌基因组DNA检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性。灵敏度的检测结果表明,LAMP检测空肠弯曲杆菌的检测限为5.4×10¹ CFU/mL,而基于F3/B3引物对常规PCR的检测限为5.4×10⁶ CFU/mL,即LAMP检测空肠弯曲杆菌的灵敏度比常规PCR高100 000倍。本研究建立的LAMP检测方法具有快速、可视化、低成本、特异性好和灵敏度...     

猪源空肠弯曲杆菌的分离及鉴定

为了研究更快、更加准确分离空肠弯曲杆菌的方法,试验同时采用常规生化法对由12份猪盲肠内容物中分离的可疑菌进行检测,得到了6个阳性样品,经特异性PCR检测,2个样品可定性为空肠弯曲杆菌,检测时间为7 d;而对所得菌株直接进行PCR检测,检测结果相同,检测时间为2 d。结果表明:PCR可以快速、特异性地检测空肠弯曲杆菌,与常规生化检测法相比是一种更有效的方法。     

空肠弯曲菌病的研究进展

空肠弯曲菌(Campylobader jejuni)是近十几年受到国内外学者广泛重视的一种人兽共患病原菌.该菌自1931年首次被发现并命名为空肠弧菌后,相继又称为"相关的弧菌"、肝弧菌、空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌空肠亚种等,直到1984年才由Simbert等将其列为弯曲菌的一个独立种,称为空肠弯曲菌.早在1957年King就首次发现本菌与人类肠炎的关系,但直到1977年SKirrow和1979年Blaster分别建立了抑制肠道菌丛的培养基大大提高粪便中该菌的检出率后,世界各地关于空肠弯曲菌的报告才日益增多[1].     

部分省市鸡群空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的流行状况分析

本研究采用多重PCR方法对我国部分省市不同品种、不同类型的鸡群进行空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行病学调查。结果发现,在3132份鸡肛门棉拭样品中,检测出583份空肠弯曲菌阳性样品,平均阳性率18.61％;48份结肠弯曲菌阳性,平均阳性率1．53％。鸡饲养环境样品217份,6份空肠弯曲菌阳性,阳性率2．76％。不同鸡群感染率悬殊较大,空肠弯曲菌阳性率从0％-73．3％、结肠弯曲菌阳性率从0％-7．4％。30个鸡群中空肠弯曲菌阳性率为86.67％,结肠弯曲菌阳性率43．33％。本调查结果表明我国鸡群中空肠弯曲菌、结肠弯曲菌的流行呈现多样化。     

绵羊弯曲菌病的诊断与防治

绵羊弯曲菌又称弧菌病,是由胎儿弯曲菌和空肠弯杆菌引起的生殖道传染病。在临床上主要表现为暂时性不育、流产等症状。空肠弯曲菌不仅可引起绵羊的流产,更主要的是引起人和动物的腹泻,对养     

空肠弯曲菌荧光偏振抗体检测方法的建立

为建立血清中空肠弯曲菌抗体的荧光偏振检测(FPIA)方法,本研究对空肠弯曲菌的黏附蛋白PEB1A进行原核表达。Western blot鉴定显示该重组蛋白具有良好的抗原性;FITC标记空肠弯曲菌黏附蛋白PEB1A形成示踪物,通过确定示踪物的最佳反应浓度、反应时间及血清最佳稀释度,建立空肠弯曲菌的FPIA抗体检测方法。结果显示:本实验建立的空肠弯曲菌FPIA抗体检测方法的检测标准为FP值≥150m P为阳性,FP值150为阴性。该方法仅与空肠弯曲菌阳性血清发生特异性反应,与产肠毒素型大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌的抗血清均无交叉反应,具有较强的特异性。该方法对抗体的最低检测效价为1∶80,批内和批间的重复性试验变异系数均小于10%,具有较好的重复性。表明本研究建立的FPIA方法为血清中空肠弯曲菌抗体的快速检测提供了一种可行的方法。