还原型谷胱甘肽对西门塔尔牛精液低温保存效果的影响

本实验旨在探究还原型谷胱甘肽（GSH）对西门塔尔牛精液低温保存（0℃）的影响。在精液稀释液中分别添加0（对照组）、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛（MDA）水平、三磷酸腺苷（ATP）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性。结果表明：在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组（P<0.05）;在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组（P<0.05）,MDA水平低于其他组（P<0.05）。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。     

鸡精液稀释配方对低温保存精子活力和输精效果的影响

为了完善中国南方地区鸡场公鸡精液的保存技术、提高精液的利用率，本试验研究了在低温（4 ℃）保存的条件下，不同的保存时间（0、4、8、24 h）、不同的稀释液配方（原精液、配方Ⅰ和配方Ⅱ）对精液的精子活力变化以及人工输精繁殖效果的影响。选用33周龄黄鸡母鸡192只、公鸡42只，192只母鸡依笼号分为12组（3种处理精液×4个保存时间），每组16只母鸡，公鸡不分组。统一采精后用两种不同稀释液稀释、低温（4 ℃）保存至0、4、8、24 h后观察精子活力，并对母鸡输精，分组收集鸡蛋，对各组受精率、出雏率、健雏率进行比较分析，以原精液低温保存作为对照。结果显示，两种稀释液组的精子低温（4 ℃）保存4、8、24 h，其精子活力极显著高于原精液组（P<0.01），配方Ⅱ组精子的活力高于配方Ⅰ组（P>0.05）；两种配方稀释液组的精液低温（4 ℃）保存4 h，输精受精率高于原精液组（P<0.05）；两种配方稀释液组的精液在低温（4 ℃）保存8 h，输精受精率极显著高于原精液组（P<0.01）。表明这两种精液稀释液更有利于精液保存，经稀释后的精液可以显著提高受精率，可为中国南方鸡场种公鸡精液保存技术的完善提供有力的数据支撑。     

不同稀释液对绵羊精液4℃保存效果的影响

本实验旨在比较研究3种不同组成成分的绵羊精液低温稀释液对绵羊精子4℃保存效果的影响,3种稀释液分别是以三羟甲基氨基甲烷（Tris）-卵黄-柠檬酸-葡萄糖为基础配方的稀释液1、以脱脂奶粉-大豆卵磷脂-果糖为基础配方的稀释液2和以Tris-卵黄–柠檬酸-果糖为基础配方的稀释液3。通过假阴道方法采集健康成年绵羊精液,用3种不同稀释液按照精液:稀释液=1:8的比例稀释后在4℃环境进行保存,分别在0、24、72、120 h和168 h后检测分析精子活力、运动参数、顶体完整性、线粒体膜完整性、精子总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和细胞丙二醛（MDA）浓度。结果表明：精液保存168 h时,稀释液3组的保存效果最好,其总运动精子比例为54.91%、前向运动精子比例为43.27%、快速运动精子比例为19.73%、线粒体完整性为68.03%,均高于稀释液1和稀释液2组（P<0.05）;稀释液3组的顶体完整率为60.55%,高于稀释液2组（P<0.05）。保存120 h时,稀释液3组T-AOC为0.76 mmol/mg prot,高于稀释液2组（P<0.05）;稀释液3...     

添加牛磺酸对兔精液液态保存质量参数的影响

为探讨牛磺酸对兔精液液态保存效果的影响进行了本试验。试验分对照组和4个牛磺酸处理组(5,10,15和20mmol/L),在精液保存24h、48h和72h后,发现10mmol/L牛磺酸处理组的精子活率、精子低渗膨胀百分率、精子顶体完整率和精子前向性均显著高于对照组(P<0.05);在精液保存48h和72h后,10mmol/L牛磺酸处理组精子直线速度和精子平均路径速度显著高于对照组(P<0.05)。结果表明添加牛磺酸对兔精液液态保存是有益的,牛磺酸的浓度为10mmol/L比较适合。     

谷胱甘肽对犬精液冷冻保存效果的影响

为探讨在冷冻稀释液中添加谷胱甘肽（GSH）对犬精液冷冻保存效果的影响,采用按摩法采集5只杂种土犬的精液,离心去精清后,在冷冻液中分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的GSH,制成0.25 mL的冻精进行冷冻保存,以不添加GSH的处理组作为对照组。解冻后在含有5% CO₂的空气、37 ℃、相对饱和湿度条件下孵育10 h,分别在孵育0、2、4、6、8、10 h时检查精子活力。结果显示：冻融后0 h,0.5、1.0 mmol/L GSH处理组的精子活力较高,分别为0.36和0.38,均显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组,且两者之间差异不显著（P>0.05）;1.0 mmol/L处理组的精子顶体完整率最高,为85.10%,显著（P<0.05）高于对照组,同时,其精子畸形率最低,为23.00%,显著（P<0.05）低于对照组。冻融后体外孵育2、4 h时,0.5、1.0 mmol/L处理组的精子活力均较高,其中,0.5 mmol/L处理组在体外孵育4 h时,其精子活力仍可达到0.30;孵育6 h时,1.0 mmol/L处理组精子活力最高,显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组;孵育8 h时,各GSH处理组的精子活力均显著（P<0.05）高于对照组;在孵育至10 h时,各GSH处理组的精子活力较其他孵育时间均有较大幅度的下降,未检测到对照组中有呈直线运动的精子。综上提示,在犬精液冷冻液中添加0.5~1.0 mmol/L的GSH能够显著提高冻融后的精子质量和体外存活时间。     

鸡精液稀释液的筛选

为筛选出效果较好的B系列鸡精液稀释液,以稀释后冷藏保存不同时长精子活力、受精率与孵化率为检测指标进行研究,结果表明：1）稀释冷藏30 min后,EL、EH组的精子活力显著优于B1组（P<0.05）;冷藏24 h后,EH、EL组的精子活力显著高于P组（P<0.05）;B1组和P组在各时间点均无显著性差异;2）稀释后立即输精,EL组的受精率比B1组高4.9%,但受精蛋孵化率降低5.5%,最终B1组入孵蛋孵化率比EL组高0.7%;稀释冷藏10 h后输精,EL组受精率比B1组高7%,但受精蛋孵化率比B1组低11%。B1组入孵蛋孵化率比EL组高5%,但比原精组低3%;3）稀释湘黄鸡精液冷藏运输70 km后输精,6个家系平均受精率为83.7%,受精蛋孵化率为89.8%,入孵蛋孵化率为75.2%;4）稀释液实际应用方面：B1、B2液输精效果较好,但B2液成本较低,孵化结果优于B1液与鸡场自配稀释液。综上所述,单纯降低B系列稀释液中TES含量（B1液）不利于精子生存,而等比例降低各组分,将渗透压调整为280 mOsm/kg(B2液)时,孵化效果较好。     

安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响,本实验采集3只1～2岁健康成年湖羊精液,混匀后取5份等量精液,按1:9的比例加入不同安石榴甙浓度（0、5、15、30、45μmol/L安石榴甙）的稀释液,4℃保存7 d。检测精子的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）含量、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）活性等指标。结果显示：保存4～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子活率、活力显著高于其他各组;保存2～7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子质膜完整率、顶体完整率显著高于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子的MMP显著高于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组精子ROS含量显著低于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液MDA含量显著低于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液CAT活性显著高于其他各组。本研究结果表明,在稀释液中添加30μmol/L安石榴甙可以显著提高精液保存质量。     

谷胱甘肽对猪精液常温保存效果的影响

为研究谷胱甘肽(GSH)对猪精液常温保存效果的影响,在基础稀释粉Modena中加入0、1、5、10和15 mmol/L的GSH,每隔24h观察精子活率,统计精子有效保存时间,检测精液中丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,分析GSH对猪精液常温保存效果的影响。结果表明,猪精液稀释中加入1 mmol/L和5 mmol/L GSH精子有效保存时间无明显差异(P0.05),精子有效保存时间为5 d,但是精子活率分别为0.607和0.630,且差异显著(P0.05);加入1 mmol/L的GSH能够减少精子的氧化损伤,明显降低精液中MDA、H2O2含量(P0.05),显著提高精液SOD活力(P0.05)。因此,稀释液中加入GSH可以提高猪精液常温保存品质,延长有效保存时间,GSH添加量为1 mmol/L。     

大豆异黄酮对萨能种公羊精液常温保存效果的影响

大豆异黄酮具有抑制脂质过氧化发生、提高机体抗氧化活性等生理功能,已广泛应用于畜牧业生产中。为研究大豆异黄酮对萨能种公羊精液常温保存的影响,在常温精液稀释液中添加大豆异黄酮,使其浓度分别保持在0 mmol/L、0.05 mmol/L、0.10 mmol/L,检测精液精子活率、精子结构完整性和抗氧化能力。结果发现,在精液保存的第3天,稀释液中外源添加0.10 mmol/L大豆异黄酮组的精子活率较对照组提高了2.87 个百分点（P<0.05）,质膜完整性提高了2.51 个百分点（P<0.05）。大豆异黄酮组氧化应激产物丙二醛和活性氧水平显著低于对照组（P<0.05）,其中,0.10 mmol/L大豆异黄酮组与对照组相比,精液的总抗氧化能力（T-AOC）水平提高了48.25 个百分点,氧化应激产物丙二醛（MDA）水平下降了47.93 个百分点。以上结果表明,种公羊精液常温稀释液中添加0.10 mmol/L大豆异黄酮可提高精液保存效果。     

不同常温保存稀释液对猪精液保存效果的影响

本研究利用3种不同的常温保存稀释液对猪精液进行常温保存,测定了精子活率、有效存活时间、生存指数、pH值以及总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)活性。结果表明:3号稀释液稀释后精子活率在第3天和第5天均显著高于其他2种稀释液(P<0.05);精子有效存活时间和生存指数显著高于2号稀释液(P<0.05);pH值在精液稀释后的第4天显著高于2号稀释液(P<0.05)。精子T-AOC在第3天和第4天显著高于1号稀释液(P<0.05),但与2号稀释液差异不显著(P>0.05);3种稀释液之间精子MDA变化差异不显著(P>0.05)。因此,3号稀释液对精子的保存效果最好,有利于猪精液的常温保存。     

N-乙酰半胱氨酸和L-半胱氨酸对冻融后猪精液品质的影响

分别在猪精液冷冻稀释液中添加N-乙酰半胱氨酸(NAC)和NAC+L-半胱氨酸(LC)混合物,经冷冻解冻后,对精液品质和膜脂质过氧化反应的程度进行生物学检测。结果在冷冻稀释液中添加1 mmol/L的NAC和1 mmol/L NAC+0.1 mg/mL LC能显著地提高解冻后精子的活率和顶体完整率,降低精子的低渗膨胀率(P<0.05)。NAC和LC+NAC对膜脂质过氧化反应没有影响(P>0.05)。在猪精液冷冻稀释液中添加LC+NAC比只添加NAC更为理想。     

稀释液中添加不同抗氧化剂对鸡精液保存的影响

本次试验采用维生素C、维生素C钠、褪黑素、N-乙酰半胱氨酸四种抗氧化剂对鸡精液稀释液进行保存,维生素C、维生素C钠、褪黑素、N-乙酰半胱氨酸共24组按1∶3比例稀释新鲜鸡精液并低温(2～5℃)保存。每天早中晚3次观测精子活率,分析精子存活时间和生存指数。结果表明:稀释液中添加了维生素C和维生素C钠的试验组与未添加抗氧化剂的对照组的精子存活时间、精子生存指数等没有明显差异;添加褪黑素0.003 mmol/L对精子保存时间有延长作用,浓度升高对鸡精液保存有一定抑制作用;添加0.25 mmol/L、0.5 mmol/L的N-乙酰半胱氨酸可以明显提高精子生存指数及延长精子的存活时间,同时浓度超过1 mmol/L则不利于精子生存指数和存活时间的提高。     

死精子对猪精液17℃液态保存的影响

为揭示17℃液态保存过程中猪精子质量和功能持续下降的机制，本试验采集9头在役的不同品种公猪（长白、大白和杜洛克）的精液48份，使用BTS溶液等体积稀释后分为3份，其中的两份分别使用反复冻融（方法 A）和低渗处理（方法 B）方法杀死精子并离心获得稀释液A和B，将另一份精液样品离心分离精浆（Seminal Plasma,SP）和精子。分别使用不同体积比例稀释液A:精子（1:1、4:1和19:1），稀释液B:精子（1:1、4:1和19:1）,SP:精子（1:1和4:1）和BTS:精子（4:1）重悬离心后的猪精子，以SP和BTS重悬的精液及原精液样品作为对照，所有精液样品于17℃下保存3 d。结果表明：随着保存时间的延长，所有稀释液和稀释倍数处理均损伤了精子活率和活力（P<0.01）及质膜完整性（P<0.05）。稀释液A比B引起的精子脂质过氧化水平更低（P<0.05）。5倍稀释精子，稀释液B的精子活力较BTS组降低（P<0.05），稀释液B引起的精子细胞内活性氧族（ROS）水平比稀释液A更高（P<0.05），而精液总抗氧化物（TAC）水平更低（P<0.05）...     

不同浓度牛磺酸对猪精液负压条件常温保存效果的影响

【目的】 探讨负压条件下向Modena稀释剂中添加不同浓度牛磺酸对长白公猪精子常温保存质量及抗氧化能力的影响,以期为猪精液保存体系的完善提供参考。【方法】 向Modena稀释剂中分别添加浓度为0（对照组）、1、5及10 mmol/L牛磺酸,各组精液在―0.04 Mpa条件下保存11 d。于第1、3、5、7、9及11天利用计算机辅助精子分析系统（CASA）检测精子活力、活率、畸形率、平均路径速度（VAP）、曲线速度（VCL）及鞭打频率（BCF）;利用试剂盒测定精液的总抗氧化能力（T-AOC）及H₂O₂含量。【结果】 在保存1~11 d期间,3个牛磺酸组猪精子的活力及活率均显著高于对照组（P<0.05）;第11天时5 mmol/L牛磺酸组猪精子畸形率显著低于其他各组（P<0.05）;自第3天开始,1、5及10 mmol/L牛磺酸组猪精子的VAP均显著高于对照组（P<0.05）,其中以5 mmol/L牛磺酸组效果最佳;第11天时,5 mmol/L牛磺酸组猪精子的VCL、BCF均显著优于其他各组（P<0.05）;牛磺酸可显著提升猪精子的T-AOC （P<0.05）,但第11天时T-AOC较弱;第1~3天时,所有试验组间猪精子H₂O₂含量无显著差异,第5~11天时,3个牛磺酸组的H₂O₂含量均显著低于对照组（P<0.05）。【结论】 在―0.04 Mpa条件下,向Modena稀释剂中添加牛磺酸可以显著改善常温保存猪精液的质量参数与抗氧化性能,其中以5 mmol/L添加量最好,保存时间在9 d以内为宜。     

附睾尾液对绵羊精液冷冻保存的影响

实验旨在研究冷冻稀释液中添加附睾尾液（Cauda Epididymal Fluid,CEF）对绵羊精液冷冻保存的影响。利用假阴道法收集4只湖羊精液并混合,以附睾尾液中总蛋白为基准,在冷冻稀释液中分别添加不同浓度CEF(0、140、280、420μg/mL)。精液经过冷冻后投入液氮保存,解冻后检测精子活力、运动参数,以及质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位、37℃精子存活时间等指标。结果表明：冷冻-解冻后280μg/mL CEF组的精子活力、前向运动、平均路径速度、直线运动速度、直线度、线性度、头部横向位移幅度均显著高于其他各组（P<0.01）,曲线运动速度高于其他各组（P<0.05）;精子质膜完整率、顶体完整率也高于其他各组（P<0.05）;JC-1染色结果显示,280μg/mL CEF组精子线粒体膜电位高于其他各组（P<0.05）;280μg/mLCEF组精子在37℃环境下可存活14h,较对照组精子能多存活4h。可见,在冷冻稀释液中添加适量CEF可以提高精液的冷冻效果。     

稀释液中添加还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响

为了研究还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响,实验通过在稀释液中分别添加不同浓度的还原型谷胱甘肽,研究了它对猪精液液态保存后的精子活力、顶体完整率、质膜完整率、DNA损伤率、体外受精卵裂率及囊胚率等影响。结果表明,向稀释液中添加1 mmol/L,5 mmol/L,10 mmol/L GSH均能显著提高精子保存质量。其中添加1 mmol/L还原型谷胱甘肽效果最好,10 mmol/L效果较差,但大部分指标仍显著高于对照组。证实了稀释液中添加还原型谷胱甘肽有助于提高液态保存猪精液的质量。     

不同稀释液配方对不同品种公猪精液常温保存效果的试验研究

比较了6种不同稀释液配方对不同品种公猪精液的常温保存效果。结果表明,6头种公猪精液的常温保存总时间和有效保存时间(精子活力>0.3的时间)都有差异。精液保存存活总时间长短的公猪品种依次是台湾杜洛克猪(小)(94h)、法国大白猪(72.5h)、台湾杜洛克猪(大)(66.67h)、比利时长白猪(小()46.5h)、比利时长白猪(大()45.8h)、皮特兰猪(42.33h);精液有效保存时间长短依次是台湾杜洛克猪(大)(39.33h)、皮特兰猪(34.33h)、法国大白猪(30.17h)、比利时长白猪(大()20.83h)、台湾杜洛克猪(小)(16h)、比利时长白猪(小()2.5h)。同时,6种稀释液的精液保存总时间和有效保存时间结果是:精子有效保存时间为,猪场用进口稀释液6号(36.5h)效果较好,但只与5号稀释液(12.5h)间差异显著(P<0.05),与其它4种稀释液之间的差异不显著(P>0.05);精子保存总时间为,猪场用进口稀释液6号(82.17h)与4号(59.33h)、2号(58.5h)、5号(32.33h)稀释液间差异显著(P<0.05),与1号(69.67h)、3号(64.83h)稀释液差异不显著(P>0.05)。     

鸡精液稀释液储存时间与稀释比例对孵化率影响的研究

为解决鸡精液稀释液必须现配现用且受精率不稳定等问题,试验采用前期改进的YHFB鸡精液稀释液以及配套稀释技术,选取精子活力与精液密度中上等的石门土公鸡,分精液稀释1∶1、1∶2、1∶1(稀释液保存2个月)与原精液4组,进行等温及时稀释,稀释精液与原精液等体积对石门土母鸡进行人工输精,输精后24 h收集种蛋,检测孵化指标。结果表明:13个稀释组与原精液组的受精率没有显著差异(P0.05),1∶2组最高;21∶2组的受精蛋健雏率与入孵蛋健雏率均显著高于1∶1组(P0.05),也高于原精液组,但差异不显著(P0.05);31∶1(稀释液保存2个月)组,与1∶1组、原精组的孵化效果无显著差异(P0.05)。因此,前期研制的稀释液配方、保存方法与稀释技术能解决鸡精液稀释液必须现配现用等问题。     

稀释液中添加半胱氨酸对绵羊冷冻精液品质的影响

在绵羊冷冻精液稀释液中添加0mmol／L、2．5mmol／L、5．0mmol／L、7．5mmol／L4个不同梯度的半胱氨酸，通过测定解冻后的精子活率、畸形率、顶体完整率、质膜完整率以及各项酶（SOD、GSH、GSH-PX、CAT和MDA）的活性来确定最适添加量。结果表明，添加5．0mmol／L的半胱氨酸组的精子活率和顶体完整率均极显著高于对照组和其他组（尸〈0．01），而畸形率显著低于对照组和其他试验组（P〈0．05）；各项酶指标中，5．0mmol／L半胱氨酸组SOD和GSH浓度与其余各组间差异不显著（P〉0．05），MDA浓度极显著低于对照组和7．5mmol／L试验组（P〈0．01），CAT和GSH-PX活性极显著或显著高于对照组和其他试验组（P〈0．01，P〈0．05）。说明冷冻稀释液中添加5．0mmol／L的半胱氨酸可有效保护精子免受过氧化物的损害。     

温度与稀释液pH对猪精液常温保存效果的影响

 为提高猪精液常温保存的效果,研究不同温度和稀释液pH对猪精液常温保存效果的影响。结果表明：（1）当精子活力分别为50％和30％时,配方Ⅰ与Ⅱ稀释液保存的精液,在温度为15~20 ℃条件下的精子存活时间均显著高于21~25 ℃（P<0.05）;在pH为6.5~6.9条件下的精子存活时间均显著高于6.0~6.4（P<0.05）;（2）精子顶体染色结果表明,适宜温度与pH条件下,精液保存48 h后,顶体完整率达到96%以上。研究结果表明,猪精液常温保存适宜温度为15~20 ℃,适宜PH为6.5~6.9。