巨龙竹cDNA文库的构建

为了分离与鉴定巨龙竹速生巨大相关基因,以巨龙竹当年所发新叶为材料,用植物叶RNA抽提试剂盒提取了总RNA;采用C reatorTMSM ARTIMcDNA L ibrary construction k it所提供的方法,合成及纯化cDNA,并将cDNA连接到质粒载体上,通过C aC l2法将重组质粒转化到DH 5a中,成功构建了巨龙竹cDNA文库。文库容量为1.04×105,PCR检测表明大多数插入片段均大于1 000 bp,表明构建的巨龙竹cDNA文库质量较高,为进一步进行EST测序和全长基因克隆打下了基础。     

小佛肚竹秆形变异规律的研究

小佛肚竹以特形秆作为观赏性状的重要观赏竹之一,但在自然选择条件下,数量少且变异不稳定.通过正交实验的设计方法,讨论了小佛肚竹在不同的密度、光照、外源激素的条件下,其秆型的变异规律.结果表明,通过人工调控可以改变秆型变异率,在30%遮阴条件下,小佛肚竹的秆形变异比例最高,达80.0%;密度模式为45 cm×45 cm时,小佛肚竹的秆形变异比例最高,达93.3%;外源激素GA3处理,小佛肚竹的秆形变异比例最高,达77.8%.     

毛竹快速拔节过程节间组织cDNA文库的构建与分析

以同一棵毛竹笋上快速伸长生长的节间组织和基本停止伸长生长的节间组织为材料,分别提取总RNA,纯化成mR-NA后合成cDNA双链;以Uni-ZAP XR vector为载体,构建了2个cDNA文库。快速伸长生长的、停止伸长生长的节间组织cDNA文库的滴度分别为9.7×109、8.4×109pfu.mL-1,含插入片段的频率均达到99%以上,插入片段的大小均在500～3000 bp。cDNA文库的成功构建为探究毛竹快速生长的分子机理奠定了基础。     

油桐种仁cDNA文库的构建及其油体蛋白oleosin基因的生物信息学分析

以木本油料植物油桐为研究对象,通过预实验选择种子成熟过程中脂肪酸转变关键时期,构建油桐种仁cDNA文库,并进行部分测序.初级文库的滴度为1×106pfu·mL-1,重组率为99.7%,插入片段大小为0.5～2.5 kb,平均约1 kb.通过测序获得的功能基因类型主要包括抗性基因、油体蛋白基因、贮藏蛋白基因及种子发育相关基因等,还有大量的未知功能基因和其他基因存在,各类基因的表达丰度不一.着重对首次分离到的油桐油体蛋白oleosin基因序列进行了同源性和蛋白结构预测分析.     

油茶种子cDNA文库的构建

以湘林1号和湘林4号油茶优良无性系近成熟种子为材料,采用裂解法和改良的CTAB法提取总RAN;用磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质料载体重组和转化大肠杆菌,成功地构建了世界上第一个油茶种子cDNA文库.经检测,文库存容量达106,重组率为88.21%.测序结果表明:克隆片段长度一般都大于600 bp,说明构建的文库质量较高,能够满足ESTs文库构建及从文库中分离筛选重要基因等研究工作的需要,为进一步研究奠定了很好的物质和技术基础.     

小佛肚竹抽枝长叶与竹叶凋落规律研究

通过对观赏竹种小佛肚竹抽枝长叶和竹叶凋落规律的观测研究,结果表明:8月中旬前出笋新竹当年完成抽枝,平均抽枝持续期25 d,以后出笋新竹至翌年4月下旬完成抽枝,抽枝持续期12~171 d。各出笋时期的新竹从竹笋出土至始抽枝的时间差异明显。8月下旬前、8月下旬~9月上旬、9月上旬后出笋新竹,抽枝持续期在时间阶段间差异显著,而时间阶段内差异不显著;8月中旬前出笋新竹当年完成长叶,其后出笋新竹至翌年5月上旬完成长叶,各时期出笋新竹长叶持续期无显著差异,平均12 d;抽枝长叶期23~182 d,总体呈迟出竹笋抽枝长叶期短的规律;不同季节间竹叶凋落量差异显著,以10~12月份最多,4~6月份最少,新叶抽发量以4~6月份最多。     

北五味子叶片EST文库的构建及主要表达基因分析研究方法

北五味子是重要的药用资源植物,该项研究可获得其具有鉴别性的特征,在分子水平上鉴别种质资源,探讨种间遗传关系,作为传统鉴定方法的补充和发展;同时为寻找、保护和利用优良的种质资源提供分子水平的依据和技术支持。介绍了北五味子叶片cDNA文库的构建方法。     

小佛肚竹和螺节竹总RNA的提取

首次提出了一种适用于小佛肚竹(Bambusa ventricosa)和螺节竹(Pleioblastus gramineus)等竹类植物总RNA提取方法.用该方法提取叶片和笋尖的总RNA具有正常的光谱吸收,OD260/OD280比值为1.96～2.0,OD260/OD230比值为2.96～4.11;琼脂糖电泳后,28 SRNA的亮度基本为18 SRNA的亮度的2倍;这说明提取的RNA很完整,未降解,质量高.同时该方法操作简便、无DNA污染,且产率高;提取的RNA可用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA文库的构建等.     

油茶种子cDNA文库构建中的问题与对策

以湘林1号和湘林．1号油茶优良无性系近成熟种子为材料．总结了构建油茶种子cDNA文库过程中存在的一些关键问题和应采取的对策．为今后油茶和其它油料植物种子的mRNA提取、构建高质量的cDNA文库及ESTs文库等提供技术参考和理论指导。     

撑篙竹遗传变异的RAPD分析

采用随机扩增多态DNA(RAPD)方法对6个群体30丛撑篙竹个体进行了遗传变异的研究。28个随机引物共检测到173个位点,其中85个是多态位点,平均每个引物提供6．18个RAPD信息量,扩增出的DNA片段大小一般在200～2000bp范围之间;用POPGENE1．31版软件进行遗传多样性分析：平均Nei’s基因多样性为0．2114,Shannon’s信息指数为0．3277,基因分化系数0．1853,表明群体间有一定的分化;各群体平均遗传距离0．0350,表明群体亲缘关系较近;试用UPGMA方法对不同产地的撑篙竹群体作聚类分析,初步可将6个群体聚为3类。     

不同秆形好运竹植株体内源激素分布规律研究

采用酶联免疫法对不同秆形的好运竹各部位吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素核苷(ZR)、脱落酸(ABA)进行测定。结果显示:IAA在直秆竹小枝和秆中的含量较高,GA3和ZR在鼓秆竹小枝和秆中的含量较高,ABA在各秆形中含量差异不显著。各激素在植株叶部的含量较高。ZR和ABA在竹秆中分布呈向基性减少趋势,IAA和GA3在竹秆中部含量较高。     

粉单竹的地理变异研究

对8个产地粉单竹在广东茂名试验点所造试验林的主要生长性状进行调查研究,结果表明:粉单竹表型性状变异丰富,13个生长性状在产地间差异显著或极显著,其中单丛发笋量在产地间及产地内均存在显著差异;地理变异模式呈现纬度渐变趋势但未达到显著水平,多数性状与热量因子相关紧密,相关系数达到极显著、显著或0.1显著水平,仅叶厚、枝下高与湿度因子呈现显著或0.1水平相关;所调查的生长性状均受中等以上的遗传控制;聚类分析在距离阈值1.8附近可将所有产地分为3个类群;采用综合评定法,对所涉及的8个产地进行初步选择,认为广东增城、怀集为粤西南地区粉单竹造林的最佳产地来源.     

好运竹畸形秆新竹发生规律研究及其盆苗生产技术

在研究好运竹畸形秆新竹发生规律的基础上开展好运竹栽培技术研究，并总结了提高盆栽好运竹观赏价值的生产技术与栽培措施。     

粉单竹纸浆材材性的地理变异及产地选择

以广东、广西和海南3个省(区)8个产地的粉单竹群体3年生竹秆为研究材料,对其纤维形态、化学成分等纸浆材性指标进行测定,采用方差分析和相关分析方法对上述竹材性状进行遗传变异分析,以揭示粉单竹材性的地理遗传变异规律.结果表明: (1)粉单竹的纤维长度、纤维素和1%NaOH抽出物含鼍在产地间存在极显著或显著差异.纤维长度及纤维长宽比呈现纬度上从南到北(海拔上从低到高)逐渐减小的地理变异模式;(2)纤维素和纤维长度的遗传力分别为O.71和O.84;1%NaOH抽出物遗传力为0.54;木素和纤维长宽比的遗传力分别为O.38和O.13; (3)性状间相关分析表明,竹材产量与1%NaOH抽出物和苯醇抽出物呈显著负相关,与纤维素含量呈显著IE相关;纤维形态与生长、产量指标关系密切;最后,通过主成分分析进行联合选择,初步选出材性质量好、生长旺盛、竹材产量高的广东怀集、广东信宜和广西桂林3个优良纸浆材产地.     

广西粉单竹林的生长及林地土壤肥力状况调查

通过对广西3个栽培地粉单竹林的生长状况以及林地土壤的N、P、K等主要养分含量和土壤主要物理性状等指标的调查测定,从而掌握了广西丘陵山区粉单竹林林地土壤的养分状况与其粉单竹林的生长及竹产量间的关系,为指导广西的粉单竹林合理的施肥管理,提高该竹林的经营水平提供了科学依据。